CN105794496A - 一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法 - Google Patents

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CN105794496A CN201610164418.5A CN201610164418A CN105794496A CN 105794496 A CN105794496 A CN 105794496A CN 201610164418 A CN201610164418 A CN 201610164418A CN 105794496 A CN105794496 A CN 105794496A
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纪光燕
周茂
高云霞
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Abstract

本发明提供了一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，包括依次进行的接种培养步骤、覆土步骤和生育步骤，其中，接种培养步骤为：将黑牛肝菌菌种接种到已灭菌的瓶装的培养基中，进行菌丝培养，至菌丝长满所述培养基；覆土步骤为：在已长满菌丝的所述培养基的表面覆盖覆土材料，形成覆土层，所述覆土材料的含水量为40％‑45％，随后在所述覆土层的表面覆盖一层保护层，然后给所述保护层表面补水，使所述覆土材料的含水量保持在50％‑60％，培养覆土层菌丝生长。这一方法的覆土效率高、补水均匀、保持覆土材料的含水量，覆土层透气性好、菌丝生长健旺、出菇整齐，采收期短，且设施配套简单、工厂化程度高、可操作性强、可大面积进行推广。

Description

一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法
技术领域
本发明涉及的黑牛肝菌的人工培育技术领域，具体而言，涉及一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法。
背景技术
黑牛肝菌(Phlebopusportentosus)是一种珍贵的热带食用菌，主要分布于斯里兰卡、越南、印度尼西亚、泰国、巴西、墨西哥、澳大利亚和新西兰及我国云南、广西和海南等地。黑牛肝菌品质鲜嫩、味道鲜美、营养价值丰富、高蛋白、低脂肪，富含17种人体必需氨基酸及丰富的磷、钾、钙、镁、铁和锌等人体必须的矿质元素，是较好的健康食品并具有很好的药用价值，深受消费者喜爱。
一般认为牛肝菌均为菌根食用菌，不能离开宿主树进入温室栽培。目前人类认识的有少数种类的牛肝菌可进行半人工模拟栽培及人工模拟栽培处于实验室研究状态。如褐环粘盖牛肝菌(Suillusluteus)，用合成的菌根苗密植于经过消毒的围地实现人工栽培,菌根苗栽植至褐环粘盖牛肝菌子实体生长需12个月时间。但黑牛肝菌(Phlebopusportentosus)是我们认识的牛肝菌类食用菌中极少数发生进化菌种，可以离开宿主树进行营腐生生活，用栽培腐生菌的方法在菇房内进行栽培，且获得一定产量的牛肝菌种类。国内Kai-PingJi等(2011)已报道将黑牛肝菌固体菌种接种土壤基质和菌棒覆土人工栽培黑牛肝菌。
目前，在黑牛肝菌工厂化瓶栽的过程中存在如下问题：由于养菌期瓶口生长了大量的爬壁菌丝，覆土后瓶口的爬壁菌丝先于正常菌丝形成大量菇蕾，在覆土层菌丝未长满或刚长至覆土层时先行出菇，消耗了大量营养且导致出菇不整齐，增加了后期生育管理的难度。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，这种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法能够更好的实现机械化覆土，无需人工抹除瓶口爬壁菌丝。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，包括依次进行的接种培养步骤、覆土步骤和生育步骤，其中，
接种培养步骤为：将黑牛肝菌菌种接种到已灭菌的瓶装的培养基中，进行菌丝培养，至菌丝长满培养基；
覆土步骤为：在已长满菌丝的培养基的表面覆盖覆土材料，形成覆土层，覆土材料的含水量为40％-45％，随后在覆土层的表面覆盖一层保护层，然后给保护层表面补水，使覆土材料的含水量保持在50％-60％，培养覆土层菌丝生长。
为了解决黑牛肝菌培养中出菇不整齐的问题，目前通常会用人工方法抹除瓶口生长的爬壁菌丝，然后人工覆土。人工覆土缺点在于覆土效率低、人工成本高、黑牛肝菌产量底且自动化程度低。而由于黑牛肝菌覆土材料的特殊性，当覆土材料的含水量达到黑牛肝菌生长最适宜值(50％-60％)，用传统机械覆土方法进行覆土时，覆土材料容易结块，使得覆土后覆土材料表面不平整、覆土板结。且覆土机在运行过程中，容易受到覆土材料结块的阻碍而运行不畅。由于覆土材料板结、结块，使得覆土后覆土层通气不良，进而影响菌丝生长，致使出菇不良。
本发明提供的黑牛肝菌工厂化栽培方法，由于机械覆土时覆土材料的含水量在40％-45％之间，覆土材料不易结块，机械覆土可以正常运行，覆土后覆土材料表面平整，覆土层疏松。随后通过给覆土层表面喷水，补充覆土材料在培养过程中散失的水份，使菌丝在含水量最适宜的覆土材料中生长。这种黑牛肝菌工厂化的瓶栽方法，覆土效率高、覆土层透气性好、补水均匀、菌丝生长健旺、出菇整齐，且设施配套简单、工厂化程度高、可操作性强、可大面积进行推广。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，包括依次进行的接种培养步骤、覆土步骤和生育步骤，其中，
接种培养步骤为：将黑牛肝菌菌种接种到已灭菌的瓶装的培养基中，进行菌丝培养，至菌丝长满培养基；
覆土步骤为：在已长满菌丝的培养基的表面覆盖覆土材料，形成覆土层，覆土材料的含水量为40％-45％，随后在覆土层的表面覆盖一层保护层，然后给保护层表面补水，使覆土材料的含水量保持在50％-60％，培养覆土层菌丝生长。
覆土时控制覆土材料的含水量在40％-45％之间，保持覆土材料松散，呈团粒状分布，覆土时不易结块便于机械操作。覆土完成后，需要给覆土层表面覆盖保湿、透气性能好的保护层，在保护层的表面喷水，补足原先覆土材料中不足的水分，同时保持土壤疏松透气使菌丝旺盛生长。这一方法解决了黑牛肝菌工厂化栽培机械覆土的问题，覆土效率高、覆土层透气性好、补水均匀、菌丝生长健旺、出菇整齐，采收期短，从而彻底解决了黑牛菌工厂化栽培机械覆土中覆土材料补水难、覆土养菌期早出菇、出菇不整齐问题，且设施配套简单、工厂化程度高、可操作性强、可大面积进行推广。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，上述保护层由无纺布制成。无纺布能够避免补水时破坏覆土层的表面，此外无纺布的保湿、透气性能好，喷洒在无纺布表面的水份可以缓慢渗透至覆土层且保持其水份不被蒸发，保持覆土层含水量在50％-60％之间，确保覆土层中缺失的水分及时得到补充。更进一步的，在本发明较佳的实施例中，无纺布可以由亲水性材料制成，也可以由疏水性材料制成。当无纺布为亲水性材料时，无纺布的保湿、透气和渗水性能好，给无纺布表面补水后，可使覆土材料的含水量保持在55％-60％。当无纺布为疏水性材料时，给无纺布表面补水后，可使覆土材料的含水量保持在50％-55％。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，上述覆土层的厚度为3cm-5cm，在覆土层的表面覆盖无纺布后，既能抑制瓶口生长的爬壁菌丝形成原基提前出菇，又可保持覆土层透气性好、补水均匀、提高含水量、菌丝生长健旺、促进子实体原基的形成、使出菇整齐并提高黑牛肝菌的质量。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，上述生育步骤为：在环境中CO2浓度为800ppm-1500ppm、温度为27℃-29℃且空气湿度为85％-95％的条件下培养，待子实体成熟后采收。在这种环境中，子实体生长快速，且生长状况良好。上述生育步骤中，采收的子实体的菌盖平展，盖缘伸展或稍卷，菌管橄榄褐色，成熟度达75％-80％。此时子实体肉质紧实、弹性好、柄硬，子实体平均重80-110g，从出菇至采收完毕只需9-11天，培养周期短。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，还包括覆土层菌丝培养步骤，覆土层菌丝培养步骤为：控制覆土材料的含水量为50％-60％，在环境温度为25℃-30℃、CO2浓度为1000ppm-4000ppm的条件下培养8d-10d，至菌丝长满覆土层。定期补水使覆土层的含水量保持在50％-60％，满足出菇、子实体生长至采收的水份要求。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，上述覆土层培养步骤之后且在生育步骤之前，还包括催蕾步骤，催蕾步骤为：控制培养环境的CO2浓度为1000ppm-2000ppm、温度为26℃-29℃、空气湿度为90％-98％、光照度为200LX-500LX，培养4d-5d，形成菇蕾。
这种催蕾方法是通过调节菌丝的生长环境来实现催蕾的。覆土层长满菌丝的培养瓶在这种环境中培养3天即可形成大量子实体原基，继续培养1d-2d便可形成菇蕾。这一方法的好处在于，各种参数的可控性强，子实体原基分化量及菇蕾形成量多，出菇整齐，采收期短。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，上述催蕾步骤之后且在生育步骤之前，还包括疏蕾步骤，疏蕾步骤为：在菇蕾生长至子实体的菌盖直径为2cm-3cm、柄粗1cm-2cm时疏蕾。疏蕾时，除留1-2个生长健壮的幼蕾外，其余的全部疏除。疏蕾时尽量少带的培养基养料，减少菌丝损伤。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，覆土时覆土材料的含水量为45.0％，随后覆土材料的含水量保持在45％。当覆土材料的含水量为45％时，覆土层整齐，覆土材料疏松，覆土效率高。而随后覆土材料的含水量保持在55％，有利于覆土层中的菌丝生长旺盛。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，以重量份数计，培养基的配方为：木屑及木片30份-50份、红壤10份-20份、小麦粒5份-10份、谷子5份-10份、米糠4份-8份、玉米粉5份-10份、石膏粉1份-2份、MgSO40.1份-0.2份，KH2PO40.1份-0.2份、ZnSO41份-2份。这种配方的培养基，为菌种的生长提供能量，有利于菌种的快速生长。
实施例1
1.黑牛肝菌菌种接种培养
(1)配制培养基：将橡胶木或其他杂木木屑淋水预湿后自然堆制发酵3个月，使木屑木片腐熟，质地变软。按下列组分配置培养基(以重量份数计)：木屑及木片30份、红壤10份、小麦粒5份、谷子5份、米糠4份、玉米粉5份、石膏粉1份、MgSO40.1份，KH2PO40.1份、ZnSO41份。
配制时，将小麦粒、谷子浸泡8小时后滤干备用，米糠、玉米粉在使用前的8小时加水预湿。将预先准备好的木屑及木片、红壤、小麦粒、谷子、米糠、玉米粉及MgSO4、KH2PO4和ZnSO4加入料斗中，加水搅拌20分钟后，使培养基的含水量为60％，调节pH至4.0，即得。
(2)装瓶、灭菌：用装瓶机将上述配制好的培养基装入培养瓶中，培养基装至培养瓶的瓶肩位置，在培养基上打1个至培养瓶底的孔。该装瓶机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化装瓶，每次装16瓶，每小时装2500瓶。在装瓶完成后30分钟内将培养瓶置于灭菌器内灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为60分钟，灭菌后冷却。
(3)接种、养菌：用接种机将处于旺盛生长期的液体菌种接入培养基中。接种机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化接种，接种速度为2500瓶/小时。
将接种后的培养瓶移入养菌房，在培养的前10天，控制养菌房内的温度为28℃、CO2浓度为1000ppm；在培养的中后期，控制养菌房内的温度为24℃，CO2浓度为2500ppm。因刚开始培养时，培养基自身温度低，升高环境温度可使菌丝加快萌发。而培养的中后期，因培养基自身发热，降低栽培瓶内培养基温度，增加CO2浓度，能使菌丝生长旺盛。
2.覆土步骤：
(1)将去除沙石的果园土加水至土壤水分含量达50％，堆放10d后，加入含水量为30％的草炭土，混匀即得。
(2)采用覆土机在培养瓶内培养基的表面覆盖3cm厚的覆土材料。覆土材料的含水量40％，采用含水量为40％的覆土材料的好处在于，覆土时覆土材料不易结块，覆土后料面平整，覆土层疏松，透气性良好。覆土机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械覆土，每小时覆土2500瓶。
(3)在覆土后的覆土层表面覆盖由疏水性材料制成的无纺布，这种无纺布的规格为20g/m2。每天在无纺布表面喷水1次，无纺布表面的水份渗入至覆土材料中，补充覆土材料拌料时不足的水分。同时增加覆土材料表面的CO2浓度，改善覆土材料表面的微环境，使菌丝生长旺盛。经8次适量均匀的补水后，覆土材料含水量达50％，满足了黑牛肝菌出菇、子实体生长至采收的水份要求，提高黑牛肝菌的产量。
3.覆土层菌丝培养步骤
控制覆土材料的含水量为50％，控制环境温度为25℃、CO2浓度为1000ppm继续培养10天，使菌丝长满覆土层。
4.催蕾步骤
当菌丝长满覆土层后，在无纺布表面继续适量喷水，保持覆土材料的含水量为95％，在CO2浓度为1000ppm、温度为26℃、空气湿度为90％和光照度为200LX的条件下培养3d，待菌丝扭结形成大量原基后继续培养2d形成菇蕾，然后经过3d后子实体达采收标准。此崔蕾方法的好处是原基分化多、菇蕾形成整齐，因此出菇整齐，采收期短。
5.疏蕾步骤
在菇蕾生长至子实体的菌盖直径为2cm、柄粗1cm时疏蕾。保留1个生长健壮的幼蕾，其余的全部疏除。疏蕾时尽量避免带动培养基养料，减少菌丝损伤。
6.生育步骤
随子实体不断地长大，呼吸作用增强，将CO2的浓度降低至800ppm，温度降至26℃，控制空气湿度为80％，同时增加通风换气量，使子实体生长健壮。
当子实体菌盖平展，盖缘伸展或稍卷，菌管橄榄褐色，成熟度达75％时及时采收，整株连柄基拔下。
实施例2
1.黑牛肝菌菌种接种培养
(1)配制培养基：将橡胶木或其他杂木木屑淋水预湿后自然堆制发酵3个月，使木屑木片腐熟，质地变软。按下列组分配置培养基(以重量份数计)：木屑及木片50份、红壤20份、小麦粒10份、谷子10份、米糠8份、玉米粉10份、石膏粉2份、MgSO40.2份，KH2PO40.2份、ZnSO42份。
配制时，将小麦粒、谷子浸泡10小时后滤干备用，米糠、玉米粉在使用前的10小时加水预湿。将预先准备好的木屑及木片、红壤、小麦粒、谷子、米糠、玉米粉及MgSO4、KH2PO4和ZnSO4加入料斗中，加水搅拌60分钟后，使培养基的含水量为60％，调节pH至6.0，即得。
(2)装瓶、灭菌：用装瓶机将上述配制好的培养基装入培养瓶中，培养基装至培养瓶的瓶肩位置，在培养基上打1个至培养瓶底的孔。该装瓶机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化装瓶，每次装16瓶，每小时装2500瓶。在装瓶完成后180分钟内将培养瓶置于灭菌器内灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为100分钟，灭菌后冷却。
(3)接种、养菌：用接种机将处于旺盛生长期的液体菌种接入培养基中。接种机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化接种，接种速度为2500瓶/小时。
将接种后的培养瓶移入养菌房，在培养的前10天，控制养菌房内的温度为30℃、CO2浓度为2000ppm；在培养的中后期，控制养菌房内的温度为27℃，CO2浓度为3000ppm。因刚开始培养时，培养基自身温度低，升高环境温度可使菌丝加快萌发。而培养的中后期，因培养基自身发热，降低栽培瓶内培养基温度，增加CO2浓度，能使菌丝生长旺盛。
2.覆土步骤
(1)将去除沙石的橡胶园土，加水至土壤水分含量达50％，堆放10d后，加入含水量为30％的草炭土，混匀即得。
(2)采用覆土机在培养瓶内培养基的表面覆盖5cm厚的覆土材料。覆土材料的含水量45％，采用含水量为45％的覆土材料的好处在于，覆土时覆土材料不易结块，覆土后料面平整，覆土层疏松，透气性良好。覆土机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械覆土，每小时覆土2500瓶。
(3)在覆土后的覆土层表面覆盖由亲水性材料制成的无纺布，这种无纺布的规格为20g/m2。每天在无纺布表面喷水1次，无纺布表面的水份渗入至覆土材料中，补充覆土材料拌料时不足的水分。同时增加覆土材料表面的CO2浓度，改善覆土材料表面的微环境，使菌丝生长旺盛。经8次适量均匀的补水后，覆土材料含水量达60％，满足了黑牛肝菌出菇、子实体生长至采收的水份要求，提高黑牛肝菌的产量。
3.覆土层菌丝培养步骤
控制覆土材料的含水量为55％，控制环境温度为30℃、CO2浓度为4000ppm继续培养8天，使菌丝长满覆土层。
4.催蕾步骤
当菌丝长满覆土层后，在无纺布表面继续适量喷水，保持覆土材料的含水量为55％，在CO2浓度为2000ppm、温度为29℃、空气湿度为98％和光照度为500LX的条件下培养3d，待菌丝扭结形成大量原基后继续培养2d形成菇蕾，然后经过3d后子实体达采收标准。此崔蕾方法的好处是原基分化多、菇蕾形成整齐，因此出菇整齐，采收期短。
5.疏蕾步骤
在菇蕾生长至子实体的菌盖直径为3cm、柄粗2cm时疏蕾。保留1个生长健壮的幼蕾，其余的全部疏除。疏蕾时尽量避免带动培养基养料，减少菌丝损伤。
6.生育步骤
随子实体不断地长大，呼吸作用增强，将CO2的浓度降低至2000ppm，温度降至29℃，控制空气湿度为95％，同时增加通风换气量，使子实体生长健壮。
当子实体菌盖平展，盖缘伸展或稍卷，菌管橄榄褐色，成熟度达80％时及时采收，整株连柄基拔下。
实施例3
1.黑牛肝菌菌种接种培养
(1)配制培养基：将橡胶木或其他杂木木屑淋水预湿后自然堆制发酵3个月，使木屑木片腐熟，质地变软。按下列组分配置培养基(以重量份数计)：木屑及木片40份、红壤15份、小麦粒7.5份、谷子7.5份、米糠6.5份、玉米粉7.5份、石膏粉1.5份、MgSO40.15份，KH2PO40.15份、ZnSO41.5份。
配制时，将小麦粒、谷子浸泡9小时后滤干备用，米糠、玉米粉在使用前的9小时加水预湿。将预先准备好的木屑及木片、红壤、小麦粒、谷子、米糠、玉米粉及MgSO4、KH2PO4和ZnSO4加入料斗中，加水搅拌60分钟后，使培养基的含水量为60％，调节pH至5.0，即得。
(2)装瓶、灭菌：用装瓶机将上述配制好的培养基装入培养瓶中，培养基装至培养瓶的瓶肩位置，在培养基上打1个至培养瓶底的孔。该装瓶机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化装瓶，每次装16瓶，每小时装2500瓶。在装瓶完成后100分钟内将培养瓶置于灭菌器内灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为100分钟，灭菌后冷却。
(3)接种、养菌：用接种机将处于旺盛生长期的液体菌种接入培养基中。接种机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械化接种，接种速度为2500瓶/小时。
将接种后的培养瓶移入养菌房，在培养的前10天，控制养菌房内的温度为28℃、CO2浓度为2000ppm；在培养的中后期，控制养菌房内的温度为26℃，CO2浓度为2750ppm。因刚开始培养时，培养基自身温度低，升高环境温度可使菌丝加快萌发。而培养的中后期，因培养基自身发热，降低栽培瓶内培养基温度，增加CO2浓度，能使菌丝生长旺盛。
2.覆土步骤
(1)取红壤土，加水至土壤水分含量达50％，堆放10d后，加入含水量为30％的草炭土，混匀即得。
(2)采用覆土机在培养瓶内培养基的表面覆盖3.5cm厚的覆土材料。覆土材料的含水量45％，采用含水量为45％的覆土材料的好处在于，覆土时覆土材料不易结块，覆土后料面平整，覆土层疏松，透气性良好。覆土机能够对容量为1600ml的塑料瓶进行机械覆土，每小时覆土2500瓶。
(3)在覆土后的覆土层表面覆盖由亲水性材料制成的无纺布，这种无纺布的规格为20g/m2。每天在无纺布表面喷水1次，无纺布表面的水份渗入至覆土材料中，补充覆土材料拌料时不足的水分。同时增加覆土材料表面的CO2浓度，改善覆土材料表面的微环境，使菌丝生长旺盛。经8次适量均匀的补水后，覆土材料含水量达55％，满足了黑牛肝菌出菇、子实体生长至采收的水份要求，提高黑牛肝菌的产量。
3.覆土层菌丝培养步骤
控制覆土材料的含水量为55％，控制环境温度为27.5℃、CO2浓度为2500ppm继续培养，使菌丝长满覆土层。
4.催蕾步骤
当菌丝长满覆土层后，在无纺布表面继续适量喷水，保持覆土材料的含水量为55％，在CO2浓度为2000ppm、温度为27.5℃、空气湿度为95％和光照度为300LX的条件下培养3d，待菌丝扭结形成大量原基后继续培养1d形成菇蕾，然后经过3d后子实体达采收标准。此崔蕾方法的好处是原基分化多、菇蕾形成整齐，因此出菇整齐，采收期短。
5.疏蕾步骤
在菇蕾生长至子实体的菌盖直径为2.5cm、柄粗1.5cm时疏蕾。保留2个生长健壮的幼蕾，其余的全部疏除。疏蕾时尽量避免带动培养基养料，减少菌丝损伤。
6.生育步骤
随子实体不断地长大，呼吸作用增强，将CO2的浓度降低至1200ppm，温度保持在28℃，控制空气湿度为90％，同时增加通风换气量，使子实体生长健壮。
当子实体菌盖平展，盖缘伸展或稍卷，菌管橄榄褐色，成熟度达78％时及时采收，整株连柄基拔下。
对照例1
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：覆土步骤中采用含水量为50％的覆土材料覆盖在培养基的表面并形成3.5cm厚的覆土层。
对照例2
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：覆土步骤中采用含水量为45％的覆土材料覆盖在培养基的表面并形成3.5cm厚的覆土层；在覆土层表面覆盖无纺布，随后不给无纺布表面喷水，即覆土步骤和覆土培养步骤中均没有补充覆土材料的水分。
对照例3
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：覆土层的厚度为5cm。
对照例4
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：覆土步骤中没有在覆土材料表面覆盖无纺布。
对照例5
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：在覆土层培养步骤中，控制覆土材料的含水量为45％，在环境温度为32℃、CO2浓度1000ppm。
对照例6
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于：在催蕾步骤中，控制培养环境的CO2浓度为1500ppm、温度为28℃、空气湿度为95％、光照度为100LX。
对照例7
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于，缺少了催蕾步骤。
对照例8
本对照例提供的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其实现步骤以及具体参数和实施例3基本一致，不同之处在于，生育步骤中，控制环境CO2浓度为600ppm，温度为30℃且空气湿度为80％。
按照实施例1-3(实验组)和对照例1-8(对照组)中记载的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法来培养黑牛肝菌。通过观察和数据计算，比较实验组与对照组在养菌期时间、覆土层培养状况、出菇的整齐度、诱导出菇时间、出菇率、子实体肉质、平均子实体重、成熟率、生物学效率(是指食用菌鲜重与所用的培养基干重之比，常用百分数表示)参数的差异，结果见表1所示。
表1实验组和对照组的栽培性状比较
从表1可以看出：
1.相比于对照组1中用传统机械法进行覆土，用本发明提供的机械覆土方法覆土后，覆土材料含水量可保持在50％-60％，覆土材料疏松，透气性良好，且覆土层表面良好，使得菌丝长满覆土层的时间短，出菇的整齐度高。
2.通过对照组2与实验组3相比，在机械覆土后，及时补充覆土材料中的水分，有利于提高覆土层中菌丝的生长能力，缩短菌丝长满覆土层的时间，进一步提高子实体的重量和品质。
3.通过对照组3与实验组3相比，覆土层的厚度会影响菌丝长满覆土层时间，进一步会对子实体的成熟率以及生物学效率产生影响。
4.通过对照组4与实验组3相比，在覆土材料表面加盖一层无纺布，会使覆土层表面平整，进一步使的出菇整齐，有利于后期培养步骤的顺利实施。
5.通过对照组5与实验组1-3相比，在覆土培养步骤中，控制环境中的温度超出25℃-30℃范围、CO2浓度超出1500ppm-4000ppm时，覆土层内菌丝的生长状态会受到影响，进一步使得覆土出菇率、平均子实体重和生物学效率降低。
6.通过对照组6与实验组3相比可知，在催蕾步骤中，有效控制环境中CO2浓度、温度为和空气湿度以及光照度，能够诱导出菇的时间，提高覆土出菇率。
7.通过对照组7与实验组3相比，在黑牛肝菌的培养过程中，适当的对菇蕾进行疏蕾，减小菇蕾的密度，有利于增加子实体的重量，进一步提高黑牛肝菌的生物学效率。
8.通过对照组8与实验组3相比，控制黑牛肝菌生育步骤中的CO2浓度对子实体的重量、成熟率和生物学效率至关重要。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims (10)

1.一种黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，包括依次进行的接种培养步骤、覆土步骤和生育步骤，其特征在于，
所述接种培养步骤为：将黑牛肝菌菌种接种到已灭菌的瓶装的培养基中，进行菌丝培养，至菌丝长满所述培养基；
所述覆土步骤为：在已长满菌丝的所述培养基的表面覆盖覆土材料，形成覆土层，所述覆土材料的含水量为40％-45％，随后在所述覆土层的表面覆盖一层保护层，然后给所述保护层表面补水，使所述覆土材料的含水量保持在50％-60％，培养覆土层菌丝生长。
2.根据权利要求1所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述覆土层的厚度为3cm-5cm。
3.根据权利要求1所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述保护层由无纺布制成。
4.根据权利要求3所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述无纺布由亲水性材料制成，在所述覆土步骤中，给所述无纺布表面补水后，所述覆土材料的含水量保持在55％-60％。
5.根据权利要求3所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述无纺布由疏水性材料制成，在所述覆土步骤中，给所述无纺布表面补水后，所述覆土材料的含水量保持在50％-55％。
6.根据权利要求1所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，在所述覆土步骤之后且在所述生育步骤之前，还包括覆土层菌丝培养步骤，所述覆土层菌丝培养步骤为：保持所述覆土材料的含水量为50％-60％，在环境温度为25℃-30℃、CO2浓度为1000ppm-4000ppm的条件下培养8-10d，至所述菌丝长满所述覆土层。
7.根据权利要求4所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述覆土层菌丝培养步骤之后且在所述生育步骤之前，还包括催蕾步骤，所述催蕾步骤为：控制培养环境的CO2浓度为1000ppm-2000ppm、温度为26℃-29℃、空气湿度为90％-98％、光照度为200LX-500LX，培养4d-5d，形成菇蕾。
8.根据权利要求7所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述催蕾步骤之后，还包括疏蕾步骤，所述疏蕾步骤为：在菇蕾生长至子实体的菌盖直径为2cm-3cm、柄粗1cm-2cm时疏蕾。
9.根据权利要求8所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述生育步骤为：在环境中CO2浓度为800ppm-2000ppm、温度为26℃-29℃且空气湿度为80％-95％的条件下培养，待所述子实体成熟后采收。
10.根据权利要求7所述的黑牛肝菌工厂化瓶栽方法，其特征在于，所述生育步骤中，采收的所述子实体的菌盖平展，盖缘伸展或稍卷，菌管橄榄褐色，成熟度达75％-80％。
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