CN105727088A - 一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用 - Google Patents

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陆玉姬
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陈斌
杨海玲
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Abstract

本发明公开了一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用，所述的药物组合物包括原料药重量份桑叶8~12份、杏仁5~7份、沙参10~14份、麦冬8~12份、浙贝母8~12份、芦根10~20份、苡仁10~20份、冬瓜仁10~20份、陈皮2~4份、茯苓8~12份、京半夏8~12份、炒谷芽10~20份和炒麦芽10~20份，经前处理、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。所述的制备方法包括前处理、干燥、粉碎过筛步骤；所述的制剂为所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂或蜜丸剂。本发明的应用为所述药物组合物在制备清热润燥止咳药物中的应用。本发明全方诸药合用，共凑清热养阴，润燥止咳之功。

Description

一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用
技术领域
本发明属于中药制备技术领域，具体涉及一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用。
背景技术
昆明一年四季中，虽然年温差小，但温度的日变化却较大，日温差大，气温一日之内的剧烈变化，使人体难以在较短时间内适应，抵抗力相对差，很容易患感冒病。加之地处高原，气候干燥，空气湿度小，蒸发量大，干燥少雨，风高，居民又素来喜食辛辣香燥，这些使得昆明人四季感冒后咳嗽都有着基本相似的特点，咳嗽剧烈，痰少，色淡黄，粘而难咯，伴咽干、咽痒，口干、口苦，大便干结难解，再往前发展则以干咳、无痰或少痰为主，持续时间较长，病情反复，迁延不愈，久而可导致慢性咽炎、慢性支气管炎的发生则更难治疗。目前，虽然临床用于治疗咳嗽病的西药及中成药较多，但尚无有效针对昆明地域咳嗽特点的中成药。因此，开发一种能解决上述问题的中药是非常必要的。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种药物组合物；第二目的在于提供所述药物组合物的制备方法；第三目的在于提供所述药物组合物的制剂；第四目的在于提供所述药物组合物的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，包括原料药重量份桑叶8~12份、杏仁5~7份、沙参10~14份、麦冬8~12份、浙贝母8~12份、芦根10~20份、苡仁10~20份、冬瓜仁10~20份、陈皮2~4份、茯苓8~12份、京半夏8~12份、炒谷芽10~20份和炒麦芽10~20份，经前处理、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。
本发明的第二目的是这样实现的，包括前处理、干燥、粉碎过筛步骤，具体包括：
A、前处理：按原料药组成配比分别进行称量，混合以后通过提取、过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏备用；
B、干燥：将前处理后的浸膏干燥至含水率为6~8%得到目标物初品；
C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过80~100目筛得到目标物。
本发明的第三目的是这样实现的，在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂或蜜丸剂。
本发明的第四目的是这样实现的，所述药物组合物在制备清热润燥药物中的应用。
本发明药物组合物包括桑叶、杏仁、沙参、麦冬、浙贝母、芦根、苡仁、冬瓜仁、陈皮、茯苓、京半夏、炒谷芽、炒麦芽。方中桑叶味甘、苦，性寒，归肺、肝经，具有散风寒，镇咳祛痰的功效。杏仁味辛、苦，性微温，能止咳平喘，润肠通便的功效。两药和用，清热化痰，润肺止咳，为君药。沙参味甘，性凉，归肺、胃经，具有养阴清热、润肺止咳的功效。麦冬味甘、微苦，性微寒，归心、肺、胃经，具有滋阴清热、润肺止咳、除烦止渴的功效。芦根味甘，性寒，归肺、胃经，具有清热生津、止呕除烦、消痈解毒、利尿的功效，三药清热生津、养阴润燥，以增强君药润肺止咳，养阴生津的功效，以治其本，为臣药。浙贝母味苦，性寒，归肺、心经，具有清火散结、止咳化痰的功效。苡仁味甘、淡，性微寒，归脾、胃、肺、大肠经，具有健脾补肺、利尿除湿的功效。冬瓜仁味甘，性寒，归肺、胃、膀胱经，具有化痰利水，润肺消痈的功效。陈皮味苦，性平，归肺、脾经，具有行气健脾、化痰止咳的功效。茯苓味甘、淡，性平，归心、肺、脾、膀胱经，具有利水渗湿，健脾补中，宁心安神的功效。京半夏辛、温，有毒，归脾、胃、肺经，具有燥湿化痰、降逆止呕、散结消肿的功效。炒谷芽味甘，性温，归脾、胃经，具有健脾消食，养胃的功效。炒麦芽味甘，性微温，归脾、胃经，具有消食和中的功效。脾为生痰之源，八药取其健脾行气，燥湿化痰的功效，以配土生金，共为佐使药。全方诸药合用，共凑清热养阴，润燥止咳之功。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的药物组合物，包括原料药重量份桑叶8~12份、杏仁5~7份、沙参10~14份、麦冬8~12份、浙贝母8~12份、芦根10~20份、苡仁10~20份、冬瓜仁10~20份、陈皮2~4份、茯苓8~12份、京半夏8~12份、炒谷芽10~20份和炒麦芽10~20份，经前处理、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。
所述的原料药包括重量份桑叶10份、杏仁6份、沙参12份、麦冬10份、浙贝母10份、芦根15份、苡仁15份、冬瓜仁15份、陈皮3份、茯苓10份、京半夏10份、炒谷芽15份和炒麦芽15份。
本发明所述的药物组合物的制备方法，包括前处理、干燥、粉碎过筛步骤，具体包括：
A、前处理：按原料药组成配比分别进行称量，混合以后通过提取、过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏备用；
B、干燥：将前处理后的浸膏干燥至含水率为6~8%得到目标物初品；
C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过80~100目筛得到目标物。
A步骤所述的提取为煎煮法、浸渍法、渗漉法中的一种。
所述的提取为煎煮法。
所述的煎煮法为煎煮提取2次，第一次加入原料药重量8~10倍的水于80~100℃下煎煮提取1~2h，第二次加入原料药重量7~9倍的水于80~100℃下煎煮提取0.5~1.5h。
本发明所述的药物组合物的制剂是在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂或蜜丸剂。
本发明所述药物组合物的应用为所述药物组合物在制备清热润燥止咳药物中的应用。
云南省荣誉名中医陆家龙主任医师认为本病总的病因病机为素体阴虚燥热，外邪入侵，广谱抗生菌素及随处可得的清热中成药的广泛应用，使得邪气未除，又气阴两伤，而导致正虚邪实胶着难解，成为本病困扰医者的一个难题。积多年的临床经验，陆家龙主任医师开发，一种使用方便、可及时服用，口感舒适且费用低廉的纯中药制剂，即本发明所述的药物组合物。
下面以具体实施案例对本发明做进一步说明：
实施例1
准备桑叶10g、杏仁6g、沙参12g、麦冬10g、浙贝母10g、芦根15g、苡仁15g、冬瓜仁15g、陈皮3g、茯苓10g、京半夏10g、炒谷芽15g和炒麦芽15g，置入提取罐提取2次，第一次加入重量8倍的水于80℃下煎煮提取1.5h；第二次加入重量7倍的水于100℃下煎煮提取1.0h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.2的浸膏；干燥至含水率为6%，进行粉碎过80目筛即得目标药物组合物。
实施例2
准备桑叶8g、杏仁5g、沙参10g、麦冬8g、浙贝母8g、芦根10g、苡仁10g、冬瓜仁10g、陈皮2g、茯苓8g、京半夏8g、炒谷芽10g和炒麦芽10g，置入提取罐提取2次，第一次加入重量9倍的水于90℃下煎煮提取1.5h；第二次加入重量8倍的水于100℃下煎煮提取1.0h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.3的浸膏；干燥至含水率为7%，进行粉碎过80目筛即得目标药物组合物。
实施例3
准备桑叶12g、杏仁7g、沙参14g、麦冬12g、浙贝母12g、芦根20g、苡仁20g、冬瓜仁20g、陈皮4g、茯苓12g、京半夏12g、炒谷芽20g和炒麦芽20g，置入提取罐加入重量比8倍的水于100℃下煎煮提取2次，每次1.5h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.2的浸膏；干燥至含水率为8%，进行粉碎过100目筛即得目标药物组合物。
实施例4
准备桑叶16g、杏仁10g、沙参20g、麦冬16g、浙贝母16g、芦根20g、苡仁20g、冬瓜仁20g、陈皮4g、茯苓16g、京半夏16g、炒谷芽20g和炒麦芽20g，置入提取罐加入重量比10倍的水于100℃下煎煮提取2次，每次1.5h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.2的浸膏；干燥至含水率为8%，进行粉碎过100目筛即得目标药物组合物。
实施例5
准备桑叶24g、杏仁14g、沙参28g、麦冬24g、浙贝母24g、芦根40g、苡仁40g、冬瓜仁40g、陈皮8g、茯苓24g、京半夏24g、炒谷芽40g和炒麦芽40g，置入提取罐提取2次，第一次加入重量8倍的水于90℃下煎煮提取1.5h；第二次加入重量9倍的水于100℃下煎煮提取1.0h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.1的浸膏；干燥至含水率为7%，进行粉碎过80目筛即得目标药物组合物。
实施例6
准备桑叶48g、杏仁28g、沙参56g、麦冬48g、浙贝母48g、芦根80g、苡仁80g、冬瓜仁80g、陈皮16g、茯苓48g、京半夏48g、炒谷芽80g和炒麦芽80g，置入提取罐提取2次，第一次加入重量10倍的水于90℃下煎煮提取2h；第二次加入重量9倍的水于100℃下煎煮提取1.5h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.2的浸膏；干燥至含水率为8%，进行粉碎过100目筛即得目标药物组合物。
实施例7
取实施例1制备的药物组合物装袋成为散剂。
实施例8
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成片剂。
实施例9
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。
实施例10
取实施例4制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。
实施例11
取实施例5制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。
实施例12
取实施例5制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂。
实施例13
取实施例6制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成口服液。
试验例1
以实施例1的药物组合物进行试验，其结果如下：
一、毒性试验
方法：按小鼠最大给药量、最大体积的药量1日1次或一日分为2-3次进行灌胃给药，给药后立刻观察动物反应，并连续观察14d，测小鼠的最大耐受量（MTD）。
供试品：实施例1制备得到的药物组合物。
溶剂对照：生理盐水
受试动物：清洁级KM小鼠由昆明医科大学实验动物学部提供，动物许可证号：SCXK（滇）2011-0004。实验前在动物实验室适应性观察饲养一周。本动物观察室温度20～23℃，相对湿度50～60%。
主要仪器设备：YP2001电子天平（上海精密仪器表有限公司）。
预试验：
在进行正式实验之前，首先进行预试验，以便为正式试验提供依据。将12只KM小鼠随机分为两组，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水12h。给药组：以成人每日用量的150倍作为给药剂量，对小鼠1次或一日分为2-3次进行灌胃给药。给药后常规饲养，观察3d。空白组灌胃等量生理盐水，方法同给药组。结果小鼠全部存活，因此，无法测出该制剂的LD50。提示该制剂的药物毒性很小，是较安全的。故得出本实验可以采用最大浓度（2.94g原生药/ml）及小鼠灌胃可承受的最大体积（每10g体重0.4ml）进行最大耐受量倍数的测定。
最大耐受量倍数
取KM小鼠40只，雌雄各半，按随机数字表把小鼠随机分为2组，即正常对照组，共20只，清热润燥口服液组，共20只。给药前均禁食12h。实验时清热润燥口服液组每只小鼠按最大给药容积40ml/kg的剂量下，24h内1次或一日分为2-3次灌胃2.94g/ml浓度的清热润燥口服液。正常对照组灌胃给予等量生理盐水。给药后，观察饲养14d，并观察动物反应。最大耐受量倍数计算方法：小鼠最大耐受量倍数=（每只小鼠的耐受量/小鼠平均体重20g）×(成人平均体重70kg/成人每日用量)倍。
观察指标：
小鼠一般情况和体重的变化：记录小鼠的外观、行为、饮食、活动、分泌物、排泄物、死亡等情况；实验前后各称每只小鼠体重1次。
小鼠主要脏器和组织的变化：于14d后颈椎脱臼法处死小鼠，解剖并观察其心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等主要脏器和组织的变化。
统计学方法：
数据以平均值±标准差（±s）表示，统计分析使用SPSS17.0统计分析软件，采用单因素方差分析进行分析统计，P＜0.05为有统计学差异。
试验结果：
对小鼠一般情况和体重的影响
在整个观察期间，正常对照组和清热润燥口服液组的小鼠皮毛光滑，其外观、行为、饮食、活动、分泌物、排泄物等情况均未见异常，无一只死亡；给药前后两组小鼠体重增重差异极显著（P＜0.01），给药后两组体重增重比较未见显著性差异。结果见表1。
表1清热润燥口服液对小鼠口服最大给药量的测定
组 别 n 死亡（n） 一般情况 给药前体重（g） 给药后体重（g）
正常对照组 20 0 未见异常 19.95±1.23 26.70±1.31*
清热润燥口服液组 20 0 未见异常 19.84±1.15 26.82±1.39*
注：*表示给药前、后比较体重增重差异极显著（P﹤0.01）
对小鼠主要脏器和组织的影响
14d后处死的小鼠，正常对照组和清热润燥口服液组解剖小鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等主要脏器和组织未见任何不良病变，两组相比无明显差异。
小鼠口服给药的最大耐受量倍数
按小鼠灌胃可承受的最大体积（每10g体重0.4ml）对小鼠口服给药，计算得清热润燥口服液最大耐受量是生药量为117.6g原生药/kg/d，相当于临床人用量的187倍。（成人每日口服生药量为15ml×2.94（g）=44g，成人体重按70kg计，原生药0.63g/kg）。
以小鼠最大浓度（2.94g原生药/ml）及小鼠灌胃可承受的最大体积（每10g体重0.4ml），一日1次或一日分为2-3次进行灌胃给药，连续观察动物反应14d后，动物未发生死亡，体重均有所增长，观察未见异常反应。
小鼠口服给药的最大耐受量是生药量为117.6g生药/kg/d，相当于临床人用量的187倍。
结果：连续观察14d后，未发生动物死亡，体重均有所增长，观察未见异常反应，小鼠口服给药的最大耐受量是生药量为117.6g生药/kg/d，相当于临床人用量的187倍。
结论：实施例1制备得到的药物组合物拟用日剂量在临床应用上是安全的。
二、效果试验：
（一）止咳效果试验：
1、实验材料
1.1供试品
实施例1制备得到的药物组合物。
1.2溶剂对照：生理盐水
1.3试剂
磷酸可待因片（CodeinephosphateTablets），（青海制药有限公司）国药准字H630200SS，批号：20100315；
氨水（AmmoniaSolution）25%～28%（西陇化工股份有限公司），执行标准：GB/T631-2007，批号：1105081。
1.4受试动物
ICR小鼠50只（雌雄各半），体重(20±2)g，SPF级，昆明医科大学实验动物学部，[生产许可证号：SCXK(滇)2011-00014]。实验动物饲养于洁净级动物房。自由饮水和进食。本动物观察室温度20～23℃，相对湿度50～60%。
1.5主要仪器设备
超声波雾化器（型号：CC2170A，中外合资成都维信电子科大新技术有限公司，生产许可证号：川药管械生产许（2000）第0003号；
YP2001电子天平（上海精密仪器表有限公司）。
2.实验方法
2.1给药剂量的确定
根据标准动物的等效剂量折算系数法（Bios氏原法），来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。
2.2实施例1制备得到的药物组合物对浓氨水诱导小鼠咳嗽模型的影响
取健康ICR小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，即正常对照组（生理盐水）、阳性对照组（0.03g/kg磷酸可待因）、实施例1制备得到的药物组合物高剂量组（57.3g/kg）、实施例1制备得到的药物组合物中剂量组（28.7g/kg）和实施例1制备得到的药物组合物低剂量组（11.5g/kg），每组10只。实验前各组小鼠禁食不禁水12h，然后各组小鼠按每次0.1ml/10g体重灌胃给药，一日内分次给足所要求的剂量，连续6d。末次给药1h后，将小鼠逐只放入500ml玻璃钟罩内，通过空气压缩机连接玻璃喷雾头，以400mmHg恒压将氨水（25～28%氢氧化铵）均匀地喷入罩内，喷入浓氨水气雾5s，观察小鼠咳嗽潜伏期（小鼠放入钟罩至发生咳嗽所经时间为咳嗽潜伏期）及2min内咳嗽次数。以此评价药物的止咳效果。
2.3统计学方法
数据以平均值±标准差（±s）表示，统计分析使用SPSS17.0统计分析软件，采用单因素方差分析进行分析统计，P＜0.05为有统计学差异。
3.试验结果
3.1实施例1制备得到的药物组合物抑制浓氨水诱导小鼠咳嗽反应
实施例1制备得到的药物组合物（57.3g/kg）能延长小鼠咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数，与正常对照组（生理盐水）比较，有显著性差异（P＜0.05和P＜0.01）。结果见表2。
表2实施例1制备得到的药物组合物对浓氨水致咳小鼠的影响（±s）
组别 n 咳嗽潜伏期 2min内咳嗽次数
正常对照组 10 22.6±17.58 10.80±5.16
阳性对照组 10 67.7±48.94* 4.6±3.56*
低剂量组 10 41.1±34.86 9.70±8.93#
中剂量组 10 50.46±42.54 6.15±5.78#
高剂量组 10 67.28±56.42* 1.28±1.13**
与正常对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01；低剂量、中剂量组与高剂量组相比#P＜0.05。
实施例1制备得到的药物组合物以高剂量组（57.3g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对浓氨水导致小鼠的咳嗽有明显的抑制作用。
实施例1制备得到的药物组合物以中剂量组（28.7g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对浓氨水导致小鼠的咳嗽观察到的一定的抑制作用。
实施例1制备得到的药物组合物以低剂量组（11.5g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对浓氨水导致小鼠的咳嗽没有观察到明显影响。
结论：在该试验的小鼠动物模型中，实施例1制备得到的药物组合物（2.94g原生药/ml，口服或灌胃），具有明显的止咳作用。
（二）平喘效果试验
1.实验材料
1.1供试品
实施例1制备得到的药物组合物
1.2溶剂对照：生理盐水
1.3实验试剂
2%氯化乙酰胆碱：北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，纯度99%，LOT：14K10140；0.1%组胺磷酸盐：国药集团化学试剂有限公司，批号：F20100319；氨茶碱片：昆明制药集团股份有限公司，产品批号：110103-03，批准文号：国药准字H53021194
1.4受试动物
受试动物：普通级豚鼠体重220g±50g，59只：空白组10只，阳性组11只，低剂量组11只，中剂量组13只，高剂量组14只豚鼠由昆明医科大学实验动物学部提供，动物许可证号：SCXK（滇）2011-0004。本动物观察室温度20～23℃，相对湿度50～60%。
1.5主要仪器设备
超声波雾化器（型号：CC2170A，中外合资成都维信电子科大新技术有限公司，生产许可证号：川药管械生产许（2000）第0003号）；YP2001电子天平（上海精密仪器表有限公司）。
2.实验方法
2.1给药剂量的确定
根据标准动物的等效剂量折算系数法（Bios氏原法），来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。
2.2实施例1制备得到的药物组合物对胆碱组胺混合“喷雾法”诱导豚鼠哮喘模型的影响
先用80只豚鼠做筛选，单只放入4L玻璃钟罩中，超声波雾化器喷入2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组胺等容积混合液15s，观察豚鼠的引喘潜伏期（即从喷雾开始到哮喘发作、呼吸困难，直至抽搐跌倒的时间），一般不超过120s，如超过者则作为不敏感，不选用。
选出59只豚鼠供实验用。将选用的豚鼠分对照组10只，阳性对照组11只，实施例5制备得到的药物组合物高剂量组14只、中剂量组13只、低剂量组11只，即正常对照组（生理盐水）、阳性对照组（按125mg/kg给予浓度为12.5%的氨茶碱）、实施例1制备得到的药物组合物高剂量组（13.75ml/kg,即40.4g/kg）、实施例1制备得到的药物组合物中剂量组（6.875ml/kg,即20.2g/kg）和实施例1制备得到的药物组合物低剂量组（2.73ml/kg,即8g/kg）。实验前各组豚鼠禁食不禁水12h，然后各组豚鼠按0.2ml/10g体重灌胃给药，一日内1次或2-3次给足所要求的剂量，连续灌胃给药7d。末次给药1h后，将豚鼠放入玻璃钟罩内，以400mmHg的压力喷入2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组胺等容积混合液15s，观察豚鼠的引喘潜伏期。以此评价药物的平喘效果。
2.3.统计学方法
数据以平均值士标准差（±s）表示，统计分析使用SPSS17.0统计分析软件，采用单因素方差分析进行分析统计，P＜0.05为有统计学差异。
3.试验结果
3.1实施例1制备得到的药物组合物对胆碱组胺混合“喷雾法”诱导豚鼠哮喘的影响
实施例1制备得到的药物组合物高剂量（40.4g/kg）组豚鼠引喘出现潜伏期明显长于同期正常对照组（生理盐水）（P＜0.05）,中剂量（20.2g/kg）组和低剂量（8g/kg）组引喘出现潜伏期与正常对照组（生理盐水）比较有一定延长趋势,但统计学未见显著性差异。与阳性对照组（按125mg/kg给予浓度为12.5%的氨茶碱）比较,实施例1制备得到的药物组合物的平喘作用明显弱于氨茶碱。结果见表3。
表3实施例1制备得到的药物组合物对豚鼠平喘作用的观察（±s）
组别 n 引喘潜伏期 豚鼠灌胃呛死数量
正常对照组 10 45.70±16.63 0
阳性对照组 10 116.52±27.47** 1
高剂量组 10 76.49±19.76* 1
中剂量组 10 62.86±21.31 3
低剂量组 10 50.43±18.62 4
与正常对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
实施例1制备得到的药物组合物高剂量组以（40.4g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对胆碱组胺混合“喷雾法”导致豚鼠的哮喘有明显的抑制作用。
实施例1制备得到的药物组合物中剂量组以（20.2g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对胆碱组胺混合“喷雾法”导致豚鼠的哮喘没有观察到明显影响。
实施例1制备得到的药物组合物低剂量组（8g/kg）的剂量连续灌胃给药6天，对胆碱组胺混合“喷雾法”导致豚鼠的哮喘没有表现出明显的抑制作用。
4.结论
在该试验的豚鼠动物模型中，实施例1制备得到的药物组合物（2.94g原生药/ml，口服或灌胃），具有一定的平喘作用。
（三）抗炎效果试验：
1.实验材料
1.1供试品
实施例1制备得到的药物组合物
1.2溶剂对照：生理盐水
1.3试剂
琼脂糖：赛百盛纯度：99%
地塞米松磷酸钠注射液：天津金耀药业有限公司国药准字：H12020514
生理盐水：昆明南疆制药有限公司国药准字H33020484
1.4受试动物
健康KM小鼠50只(雌雄各半)，体重20.0土2.0g，SPF级，由昆明医科大学实验动物学部提供，[实验动物合格证:0021916]。实验动物饲养于SPF实验动物观察实验室。自由饮水和进食，饲养温度20-23℃，相对湿度50-60%
1.5主要仪器设备
分析天平，Sartorius，德国
2.实验方法
2.1给药剂量的确定
根据标准动物的等效剂量折算系数法(Bios氏原法)，来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。实验中采用的剂量为实施例1制备得到的药物组合物低剂量组8g/kg/天、中剂量组20.2g/kg/天、高剂量组40.4g/kg/天，地塞米松组1.00mg/kg/天。
2.2抗炎作用实验---小鼠背部琼脂肉芽肿试验
取KM小鼠50只,每只背部一次性皮下注射2%的琼脂糖溶液0.1ml后，建立小鼠异物性炎症模型，随机分为5组：阴性对照组、实施例1制备得到的药物组合物低、中、高3个剂量组和地塞米松组，每组10只。注射当天开始灌胃给药，阴性对照组按0.1ml/10g体重灌胃生理盐水，其他各实验组灌胃对应药物，连续10天，每天1次。以上各组均于末次给药1h后，脱颈处死，自皮下将琼脂连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，用分析天平称质量，并记录肉芽的质量。将称得的质量减去琼脂质量即得肉芽肿的质量，比较各组的肉芽重,肉芽抑制率。肉芽抑制率（%）=（（阴性对照组肉芽质量-用药组肉芽质量）/阴性对照组肉芽质量）×100。
2.3统计学方法
各实验组数据采用“均值±标准差（X±s）”表示，使用SPSS软件进行统计分析。多组多重比较使用One-wayANOVA单因素方差分析，以P<0.05各组间差异具有统计学意义；两组间比较采用独立样本t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
3.试验结果
实施例1制备得到的药物组合物8、20.2和40.4g/kg三个剂量组均能明显抑制炎性肉芽肿的形成，与生理盐水组比较差异均具有统计学意义，P<0.05。但抑制率均不如地塞米松组高，以上三个剂量组的清热润燥口服液对肉芽肿形成的抑制与地塞米松组比较均具有统计差异，P<0.05，结果见表4。
表4实施例1制备得到的药物组合物对小鼠异物性肉芽肿形成的影响（n=10,±s）
注：与生理盐水组比较差异有统计学意义，*P<0.05；与地塞米松组比较差异有统计学意义，**P<0.05。
炎性肉芽肿的形成是机体炎症反应的结果之一，通过药物对异物性炎性肉芽肿形成的抑制作用，可以反映该药物对机体炎症反应的抑制强弱。实验中在KM小鼠背部皮下注射2%的琼脂0.1ml复制小鼠异物性炎症模型，通过灌胃给予3.90、9.75和19.50三个剂量的清热润燥口服液以及1.00mg/kg地塞米松，观察各药物对KM小鼠的抗炎作用。实验结果表明，在KM小鼠异物性炎症中，3.90、9.75和19.50ml/kg三个剂量的清热润燥口服液均具有明显的抗炎作用，但对炎症的抑制率均不如地塞米松高。
4.结论
在以KM小鼠为实验动物复制的异物性肉芽肿模型试验中，3.90、9.75和19.50ml/kg三个剂量的清热润燥口服液对KM小鼠异物性炎症均具有明显的抗炎作用，但炎症抑制率均比1.00mg/kg的地塞米松低。
（四）祛痰效果试验：
1.实验材料
1.1供试品
实施例5制备得到的药物组合物
1.2溶剂对照生理盐水
1.3试剂
氯化铵（天津市化学试剂三厂）
苯酚红：上海三爱思试剂有限公司
氢氧化钠：西陇化工股份有限公司，许可证号：XK13-201-00153
生理盐水：昆明南疆制药有限公司国药准字H33020484
1.4受试动物
健康KM小鼠50只(雌雄各半)，体重20.0土2.0g，SPF级，由昆明医科大学实验动物学部提供，[实验动物合格证:0021916]。实验动物饲养于SPF实验动物观察实验室。自由饮水和进食，饲养温度20-23℃，相对湿度50-60%。
1.5主要仪器设备
酶标仪,Thermo,美国。
2.实验方法
2.1给药剂量的确定
根据标准动物的等效剂量折算系数法(Bios氏原法)，来进行不同动物间的剂量换算，进而得出治疗剂量。低剂量为治疗剂量的2倍，中剂量为治疗剂量的5倍，高剂量为治疗剂量的10倍。实验中采用的剂量为实施例5制备得到的药物组合物低剂量组8g/kg/天、中剂量组20.2g/kg/天、高剂量组40.4g/kg/天，氯化铵1.00g/kg/天。
2.2实施例1制备得到的药物组合物对小鼠的祛痰作用
取KM小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，即空白对照组、阳性对照组（药物浓度为：1.0g/kg氯化铵）、实施例5制备得到的药物组合物高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组10只。实验前各组昆明小鼠禁食不禁水12小时，然后空白对照组小鼠按0.1ml/10g体重灌胃生理盐水，其余各组按剂量给药，连续8天，1次/天。末次给药30min后，分别腹腔注射0.05%酚红溶液10ml/kg，注射苯酚红溶液30min后脱颈椎处死小鼠，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，放入盛有2ml生理盐水的试管中，再加4%NaOH0.1ml，用酶标仪，波长546nm测OD值，用酚红做一标准曲线，根据曲线计算各组酚红含量（ug/ml）。
2.3统计学方法
各实验组数据采用“均值±标准差（X±s）”表示，使用SPSS软件进行统计分析。多组多重比较使用One-wayANOVA单因素方差分析，以P<0.05各组间差异具有统计学意义；两组间比较采用独立样本t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
3.试验结果
实施例1制备得到的药物组合物20.2和40.4g/kg二个剂量组和1.00mg/kg的氨化铵能明显增强气管对酚红的分泌能力，与生理盐水组比较差异具有统计学意义，P<0.05，但两个剂量组的清热润燥口服液的气管分泌酚红量都不如氯化铵的多；3.90ml/kg清热润燥口服液组能增加气管对酚红的分泌量，当与生理盐水组比较，差异不具有统计学意义人，P>0.05.结果见表5。
表5实施例1制备得到的药物组合物对小鼠气管分泌酚红的影响（n=10,±s）
注：与生理盐水组比较差异有统计学意义，*P<0.05；
气管对酚红分泌量的多少，间接反映了机体祛痰能力的强弱。实验采用不同剂量的实施例1制备得到的药物组合物对小鼠气管分泌酚红能力的影响，并以氯化铵作为阳性对照，观察实施例1制备得到的药物组合物对小鼠祛痰能力的影响。实验结果表明，20.2和40.4g/kg两个剂量组的实施例1制备得到的药物组合物能明显改善KM小鼠的祛痰能力，但改善作用不如氯化铵强；8g/kg的清热润燥口服液的祛痰作用不明显。
4.结论
在应用KM小鼠作为实验动物的模型中，清热润燥口服液9.75和19.50ml/kg两个剂量能明显改善小鼠的祛痰能力，3.90ml/kg剂量作用不明显。
试验例2
分别以实施例2、实施例3、实施例4、实施例5和实施例6制备的药物组合物进行试验，方法同试验例1，结果均表明，本发明所述的药物组合物具有较好的清热润燥止咳效果。

Claims (8)

1.一种药物组合物，其特征在于包括原料药重量份桑叶8~12份、杏仁5~7份、沙参10~14份、麦冬8~12份、浙贝母8~12份、芦根10~20份、苡仁10~20份、冬瓜仁10~20份、陈皮2~4份、茯苓8~12份、京半夏8~12份、炒谷芽10~20份和炒麦芽10~20份，经前处理、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的原料药包括重量份桑叶10份、杏仁6份、沙参12份、麦冬10份、浙贝母10份、芦根15份、苡仁15份、冬瓜仁15份、陈皮3份、茯苓10份、京半夏10份、炒谷芽15份和炒麦芽15份。
3.一种权利要求1或2所述的药物组合物的制备方法，其特征在于包括前处理、干燥、粉碎过筛步骤，具体包括：
A、前处理：按原料药组成配比分别进行称量，粉碎过筛混合以后通过提取、过滤、浓缩得到相对密度为1.0~1.2的浸膏备用；
B、干燥：将前处理后的浸膏干燥至含水率为6~8%得到目标物初品；
C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过80~100目筛得到目标物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于A步骤所述的提取为煎煮法、浸渍法、渗漉法中的一种。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于所述的提取为煎煮法。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述的煎煮法为煎煮提取2次，第一次加入原料药重量8~10倍的水于80~100℃下煎煮提取1~2h，第二次加入原料药重量7~9倍的水于80~100℃下煎煮提取0.5~1.5h。
7.一种权利要求1或2所述的药物组合物的制剂，其特征在于在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂或蜜丸剂。
8.一种权利要求1所述药物组合物的应用，其特征在于所述药物组合物在制备清热润燥止咳药物中的应用。
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