CN105548410A - 一种葡萄中赤霉素残留的检测方法 - Google Patents

一种葡萄中赤霉素残留的检测方法 Download PDF

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李明强
程杨
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Abstract

一种葡萄中赤霉素残留的检测方法，包括以下步骤：(1)样品前处理：将待测样品经缩分后，将其切碎充分混匀，再粉碎制成待测样，然后加入乙腈-1.5％醋酸提取液，无水硫酸镁，高速匀浆、高速离心，静置，接着取上清液加入C18、PSA和无水硫酸镁，漩涡混匀，静置，过有机微孔滤膜，待测；(2)基质标准溶液的配制；(3)液相色谱-质谱/质谱测定。本发明不仅可除去提取液中的干扰物，而且有助于去除对色谱柱性能有影响的杂质，延长色谱柱使用寿命；同时大大简化了样品前处理步骤，节约了时间，检测结果准确可靠，灵敏度高。

Description

一种葡萄中赤霉素残留的检测方法
技术领域
本发明涉及一种葡萄中植物生长调节剂残留的检测方法，具体涉及一种葡萄中赤霉素残留的检测方法。
背景技术
赤霉素具有能加速植物的生长发育，促进细胞、茎伸长，扩大叶片；促进单性结实，使果实提早成熟，增加产量；打破种子休眠，促进发芽；改变雌雄花比率，影响开花时间，减少花、果脱落等特点，是农业生产中用途广泛，用量最大的一种植物生长调节剂。近年来一些种植者盲目追求高产，存在过度施用赤霉素现象，已知的赤霉素种类至少有38种，作为大环内酯抗生素农药时，其主要成分是GA3，也就是赤霉酸，我国制订了《出口水果中赤霉素残留量的测定液相色谱质谱/质谱法》(SN/T0350-2012)国家标准检测方法，但在《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB2763-2014)未规定其限量值，而美国、日本等国规定蔬菜、水果中赤霉素最高残留限量为0.2mg/kg。
目前，赤霉素残留分析一般采用荧光检测技术，其样品前处理常用液液萃取、薄层分离、柱层层析法，这些方法操作繁琐，且需使用大量有机溶剂。再则，现有技术中赤霉素的提取剂一般为丙酮，甲醇，在样品绞碎后呈浆状，粘度大影响过滤的速度，回收率偏低。因此，建立一种高回收率、简便、快速、准确地测定葡萄中赤霉素残留的方法，对于促进食品的安全性有着重要的指导意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种高回收率、简便、快速、准确地检测葡萄中赤霉素残留的方法。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种葡萄中赤霉素残留的检测方法，包括以下步骤：
(1)样品前处理：将待测样品经缩分后，将其切碎充分混匀，再粉碎制成待测样，然后加入乙腈-1.5％醋酸提取液，无水硫酸镁，高速匀浆、高速离心，静置，接着取上清液加入C18、PSA和无水硫酸镁，漩涡混匀，静置，过有机微孔滤膜，待测；
(2)基质标准溶液的配制：将空白样品按照样品预处理，用所得的样品溶液将赤霉素标准液逐级稀释得到的浓度为5、10、20、50、100μg/L的标准工作液。
(3)液相色谱-质谱/质谱测定：将标准溶液按浓度由低到高注入配有液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，以定量离子峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程；然后在相同条件下将前处理的样品液注入液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，采用外标法计算待测赤霉素残留量的测定值。
进一步，步骤(1)中，将待测样品经缩分后，将其切碎充分混匀，再粉碎制成待测样，然后称取10.00～10.05g待测样加入10mL乙腈-1.5％醋酸提取液，无水硫酸镁4g，高速匀浆1min后，于10000r/min下离心5min，静置片刻，吸取1mL上清液，加入25mgC18、25mgPSA和150mg无水硫酸镁后，漩涡混匀1min，静置，过0.22μm有机微孔滤膜，待测。
进一步，步骤(3)中，所述液相色谱-质谱/质谱分析条件为：色谱条件色谱柱：HSST3柱100mm×2.1mm，1.8μm，；柱温：40℃；流动相：乙腈与水的体积比为35/65，流速：0.4mL/min；进样量：5μL；
质谱条件：电喷雾离子源；扫描方式：负离子模式；检测方式：多反应监测；离子源温度：150℃；去溶剂气温度：350℃；去溶剂气和锥孔气均为高纯氮气，流速分别为650L/h和50L/h；碰撞气：高纯氩气，流速0.14mL/min。
基质效应主要由基质成分和目标化合物在电喷雾离子源进行离子化时相互竞争造成，包括基质增强效应和基质抑制效应。在液相色谱-质谱的定性定量分析中，基质效应影响仪器的灵敏度和重复性，是影响准确定性及定量的重要因素。因此，在建立检测方法时应考虑基质效应的影响并采取措施进行消除。本发明采用同一来源的空白样品配制标准样品，以抵消基质效应对方法精密度及结果准确度造成的影响。
本发明采用QuEChERS前处理方法结合液相色谱-质谱/质谱法建立了葡萄中赤霉素残留的快速检测，采用乙腈为提取剂，PSA吸附剂和ODS吸附剂与无水硫酸镁组合的提取、净化方法，不仅可除去提取液中水分、色素、蛋白质、脂肪、腊质等干扰物，而且有助于去除对色谱柱性能有影响的杂质，延长色谱柱使用寿命。提取液净化后不需浓缩处理，过滤膜后直接进样检测，操作简便、快速，大大简化了样品前处理步骤，节约了时间。采用液相色谱质谱/质谱检测结果准确可靠，灵敏度高，方法的准确度和精密度均符合残留分析的要求。
实验证明，本发明回收率均达90％以上，相对标准偏差RSD％低于10％，在5～100μg/L范围内线性良好，相关系数达到0.99，方法最低检出限0.004μg/kg，完全满足农药残留的检测要求。
附图说明
图1为赤霉素的线性范围。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步说明。
1、仪器与试剂
UPLC-MS/MSXEVOTQ超高效液相色谱-串联质谱仪(美国Waters公司)；立式大容量高速离心机(日本Hitachi公司)；Milli-Q全自动超纯水制水机(美国Millipore公司)、天平、漩涡混匀器。乙腈(HPLC级，美国FisherScientific公司)；乙酸(HPLC级，美国J.T.Baker公司)；C18吸附剂(30～40μm，天津博纳艾杰尔有限公司)；PSA(粒径范围40～60μm，天津博纳艾杰尔有限公司)；无水硫酸镁、氯化钠(优级纯，天津市科密欧化学试剂有限公司；氯化钠140℃烘4～5h；实验用水为超纯水(经Milli-Q超纯水机制备)。赤霉素标样为Sigma公司产品，根据需要用甲醇配成合适的标准储备溶液，于-20℃冰箱中保存。
实施例1：葡萄中赤霉素残留的检测
1、样品预处理
取代表性的待测样品，经缩分后，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，均匀分散，制成待测样，备用。称取10g(精确至0.01g)试样于50mL具塞塑料离心管中，加入10mL乙腈-1.5％醋酸提取液，加入无水硫酸镁4g，高速匀浆1min后，于10000r/min下离心5min。静置片刻，吸取1mL上清液，于10mL具塞塑料离心管中，加入25mgC18、25mgPSA和150mg无水硫酸镁后，漩涡混匀1min后，静置，过0.22μm有机微孔滤膜，待测。
2、基质标准溶液的配制：将空白样品按照样品预处理，用所得的样品溶液将赤霉素标准储备液逐级稀释得到的浓度为5、10、20、50、100μg/L的标准工作液。
3、液相色谱-质谱/质谱测定：将标准溶液按浓度由低到高注入配有液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，以定量离子峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程；然后在相同条件下将前处理的样品液注入液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，采用外标法计算待测赤霉素残留量的测定值。
其中，UPLC-MS/MS条件
(1)色谱条件色谱柱：HSST3柱(100mm×2.1mm，1.8μm，美国Waters公司)；柱温：40℃；流动相：乙腈-水(35/65，体积比)，流速：0.4mL/min；进样量：5μL。
(2)质谱条件电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：负离子模式；检测方式：MRM(多反应监测)；离子源温度：150℃；去溶剂气温度：350℃；去溶剂气和锥孔气均为高纯氮气，流速分别为650L/h和50L/h；碰撞气：高纯氩气，流速0.14mL/min，优化的质谱参数见表1。
表1-赤霉素农药的质谱条件参数
4、实验结果
(1)样品的提取
综合考虑提取效率、选择性、样品混合性、溶剂化作用及渗透能力等因素，本实施例采用乙腈作为GA3残留量的提取剂，用旋涡混匀提取、高速离心替代传统的振荡、抽滤的步骤，简化了操作步骤，节约了时间，提高了前处理效率。
(2)方法的线性关系
赤霉素的线性范围，见图1。由图1可知，在5μg/L～100μg/L范围内，赤霉素呈良好线性关系，相关系数达到0.99；以10μg/kg标准溶液的定量离子对应色谱信号的3倍信噪比(S/N)确定方法的检出限为0.004μg/kg，满足农药残留的检测要求。
(3)方法的精密度和准确度
方法的精密度以相对标准偏差RSD判断，方法的准确度以添加回收率判断。按上述方法在空白葡萄样品中准确加入10、20、50μg/L浓度水平的赤霉素，每水平重复6次，计算回收率和相对标准偏差。结果见表2。
由表2可知，赤霉素在10、20、50μg/L浓度水平的添加回收率分别为98.6％，95.8％和100.1％；相对标准偏差分别为5.7％，6.7％和4.3％，实验结果满足回收率在70％～130％，变异系数小于20％的农药残留分析要求。
表2赤霉素的添加回收及相对标准偏差(n＝6)
添加浓度(μg/L) 平均回收率％ 相对标准偏差％
10 98.6 5.7
20 95.8 6.7
50 100.1 4.3

Claims (3)

1.一种葡萄中赤霉素残留的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)样品前处理：将待测样品经缩分后，将其切碎充分混匀，再粉碎制成待测样，然后加入乙腈-1.5％醋酸提取液，无水硫酸镁，高速匀浆、高速离心，静置，接着取上清液加入C18、PSA和无水硫酸镁，漩涡混匀，静置，过有机微孔滤膜，待测；
(2)基质标准溶液的配制：将空白样品按照样品预处理，用所得的样品溶液将赤霉素标准液逐级稀释得到的浓度为5、10、20、50、100μg/L的标准工作液。
(3)液相色谱-质谱/质谱测定：将标准溶液按浓度由低到高注入配有液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，以定量离子峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程；然后在相同条件下将前处理的样品液注入液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，采用外标法计算待测赤霉素残留量的测定值。
2.根据权利要求1所述的葡萄中赤霉素残留的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，将待测样品经缩分后，将其切碎充分混匀，再粉碎制成待测样，然后称取10.00g待测样加入10mL乙腈-1.5％醋酸提取液，无水硫酸镁4g，高速匀浆1min后，于10000r/min下离心5min，静置片刻，吸取1mL上清液，加入25mgC18、25mgPSA和150mg无水硫酸镁后，漩涡混匀1min，静置，过0.22μm有机微孔滤膜，待测。
3.根据权利要求1或2所述的葡萄中赤霉素残留的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述液相色谱-质谱/质谱分析条件为：
色谱条件：色谱柱：HSST3柱100mm×2.1mm，1.8μm；柱温：40℃；流动相：乙腈与水的体积比为35/65，流速：0.4mL/min；进样量：5μL；
质谱条件：电喷雾离子源；扫描方式：负离子模式；检测方式：多反应监测；离子源温度：150℃；去溶剂气温度：350℃；去溶剂气和锥孔气均为高纯氮气，流速分别为650L/h和50L/h；碰撞气：高纯氩气，流速0.14mL/min。
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105974015A (zh) * 2016-05-07 2016-09-28 中国热带农业科学院农产品加工研究所 一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法
CN106404507A (zh) * 2016-08-31 2017-02-15 广东省农业科学院农产品公共监测中心 一种叶菜赤霉素残留检测样品前处理方法及检测方法
CN106442792A (zh) * 2016-10-14 2017-02-22 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所（中国农业科学院甘蔗研究中心） 一种甘蔗叶片中赤霉素含量的hplc检测方法
CN109239226A (zh) * 2018-10-22 2019-01-18 嘉兴迈维代谢生物科技有限公司 一种提高同时检测10种赤霉素检测稳定性的方法
CN109917054A (zh) * 2019-02-22 2019-06-21 嘉兴迈维代谢生物科技有限公司 一种提高农作物样本中赤霉素检测灵敏度的方法
CN113075317A (zh) * 2021-03-24 2021-07-06 日照市市场监管检验检测中心 一种茶叶中赤霉素含量的检测方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003046798A1 (en) * 2001-11-21 2003-06-05 Paradigm Genetics, Inc. Methods and systems for analyzing complex biological systems

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003046798A1 (en) * 2001-11-21 2003-06-05 Paradigm Genetics, Inc. Methods and systems for analyzing complex biological systems

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RENATO ZANELLA ET AL.: "《Application Note》", 2 February 2015 *
李海飞 等: "基质固相分散萃取-高效液相色谱法测定葡萄中赤霉素GA3残留量", 《中国果树》 *
闫震 等: "超高效液相色谱-串联质谱法检测水果中6种植物生长调节剂", 《园艺学报》 *
黄何何 等: "ＱｕＥＣｈＥＲＳ-高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中２１种植物生长调节剂的残留量", 《色谱》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105974015A (zh) * 2016-05-07 2016-09-28 中国热带农业科学院农产品加工研究所 一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法
CN105974015B (zh) * 2016-05-07 2018-05-25 中国热带农业科学院农产品加工研究所 一种蔬果中烯酰吗啉与赤霉素残留量测定的方法
CN106404507A (zh) * 2016-08-31 2017-02-15 广东省农业科学院农产品公共监测中心 一种叶菜赤霉素残留检测样品前处理方法及检测方法
CN106442792A (zh) * 2016-10-14 2017-02-22 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所（中国农业科学院甘蔗研究中心） 一种甘蔗叶片中赤霉素含量的hplc检测方法
CN106442792B (zh) * 2016-10-14 2019-04-26 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所（中国农业科学院甘蔗研究中心） 一种甘蔗叶片中赤霉素含量的hplc检测方法
CN109239226A (zh) * 2018-10-22 2019-01-18 嘉兴迈维代谢生物科技有限公司 一种提高同时检测10种赤霉素检测稳定性的方法
CN109239226B (zh) * 2018-10-22 2019-05-24 嘉兴迈维代谢生物科技有限公司 一种提高同时检测10种赤霉素检测稳定性的方法
CN109917054A (zh) * 2019-02-22 2019-06-21 嘉兴迈维代谢生物科技有限公司 一种提高农作物样本中赤霉素检测灵敏度的方法
CN113075317A (zh) * 2021-03-24 2021-07-06 日照市市场监管检验检测中心 一种茶叶中赤霉素含量的检测方法

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