CN105527349A - 二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法，所述方法是利用结合紫外检测器的高效液相色谱进行的，其中，采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相由流动相A和流动相B组成；采用缓冲盐溶液作为所述流动相A，所述缓冲盐溶液为磷酸盐溶液或醋酸盐溶液；采用有机溶剂作为所述流动相B，所述有机溶剂为选自甲醇、乙腈、乙醇中的至少一种；洗脱方式为线性梯度洗脱。利用本发明的该方法可以很好的分离二对甲苯磺酸拉帕替尼与其合成过程中引入的杂质和降解杂质，且灵敏度高，专属性强。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，具体地，涉及二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法。
背景技术
二对甲苯磺酸拉帕替尼是一种能够同时靶向人表皮生长因子受体(EGFR)和人表皮生长因子受体-2(HER2)的小分子激酶抑制剂，由英国葛兰素史克公司开发，于2007年3月获得美国FDA批准，用于联合用药：合用卡培他滨治疗过度表达HER2的晚期或转移性乳腺癌，合用来曲唑治疗过度表达HER2、激素受体阳性的转移性乳腺癌绝经期妇女。
然而，目前二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质(或者说是有关物质)的分析检测方法仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种灵敏度高、专属性强的针对二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法。
本发明的目的是根据现有技术的不足，提供一种二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法。采用本发明的方法，可以很好地分离二对甲苯磺酸拉帕替尼与其合成过程引入的杂质和降解杂质，灵敏度高，专属性强。
根据本发明的实施例，所述二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法是利用结合紫外检测器的高效液相色谱法进行的，其中，采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相由流动相A和流动相B组成；采用缓冲盐溶液作为所述流动相A，所述缓冲盐溶液为用冰醋酸调节pH的磷酸盐溶液或醋酸盐溶液；采用有机溶剂作为所述流动相B，所述有机溶剂为选自甲醇、乙腈、乙醇中的至少一种；洗脱方式为线性梯度洗脱。发明人发现，利用本发明的该方法可以很好的分离二对甲苯磺酸拉帕替尼与其合成过程中引入的杂质和降解杂质，且灵敏度高，专属性强。
根据本发明的实施例，所述紫外检测器的检测波长为262±2nm。由此，二对甲苯磺酸拉帕替尼在波长为262nm处具有最大吸收。
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱法的柱温为25～35摄氏度。由此，有利于二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质进行分离，如果温度过高或过低，分离效果均不理想。
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱法的流速为0.8～1.2ml/min。由此，有利于二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质进行分离，如果流速过快或过慢，分离效果均不理想。
根据本发明的实施例，所述缓冲盐溶液为磷酸盐或醋酸盐溶液，优选所述缓冲盐为醋酸铵溶液。由此，二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质进行分离的效果理想。
根据本发明的实施例，所述用冰醋酸调节pH的磷酸盐或醋酸盐缓冲溶液的pH为4.0-5.0，优选pH为4.3-4.8，更优选pH为4.4～4.6。由此，有利于二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质进行分离，如果pH过高或过低，分离效果均不理想。
根据本发明的实施例，优选所述有机溶剂为乙腈。由此，分离二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质的效果好。
根据本发明的实施例，本发明所述线性梯度洗脱的条件，包括流动相A和B的比例、洗脱时间如下：
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 55～75 | 25～45 |
| 13 | 55～75 | 25～45 |
| 33 | 35～50 | 50～65 |
| 43 | 5～15 | 85～95 |
| 48 | 5～15 | 85～95 |
| 50 | 55～75 | 25～45 |
| 60 | 55～75 | 25～45 |
由此，能够获得较理想的分离效果。
根据本发明的实施例，本发明可以通过如下技术方案实现：利用结合紫外检测器的高效液相色谱(HPLC)分析检测二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中的杂质，其中所述高效液相色谱的所采用的色谱柱为十八烷基键合硅胶柱，柱温：25-35℃，流速：0.8-1.2ml/min；紫外检测器的检测波长262±2nm，流动相为缓冲盐溶液和有机溶剂的混合液，所述缓冲盐溶液为磷酸盐溶液或醋酸盐溶液，所述缓冲盐溶液的pH为4.0-5.0，所述有机溶剂为甲醇、乙腈、乙醇中的一种或几种的混合溶液，优选乙腈。洗脱方式为线性梯度洗脱。利用该分析检测方法，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
根据本发明的实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法包括以下步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药，用体积比为：1的乙腈-水混合溶剂超声溶解，配制成每1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液(即：二对甲苯磺酸拉帕替尼供试品溶液的浓度为0.8mg/ml)；
(2)色谱条件：仪器采用高效液相色谱仪配备紫外检测器；采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，以用冰醋酸调节pH至4.5的浓度为50mmol/L的缓冲盐溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262±2nm，流速为0.8-1.2ml/min，柱温为25-35摄氏度，按下表所示条件进行线性梯度洗脱，流动相A和B的比例、洗脱时间如下：
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 55～75 | 25～45 |
| 13 | 55～75 | 25～45 |
| 33 | 35～50 | 50～65 |
| 43 | 5～15 | 85～95 |
| 48 | 5～15 | 85～95 |
| 50 | 55～75 | 25～45 |
| 60 | 55～75 | 25～45 |
(3)取所述供试品溶液15μl，按照上述色谱条件，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。由此，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
本发明的目的是提供二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药杂质的高效液相色谱(HPLC)分析方法。所采用的色谱柱为十八烷基键合硅胶柱，柱温：25-35℃，流速：0.8-1.2ml/min；检测波长为262±2nm；流动相：醋酸盐缓冲液-乙腈混合溶液，醋酸盐缓冲液的pH为4.0～5.0。洗脱方式为采用线性梯度洗脱。由此，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
根据本发明的一个具体示例，所述色谱条件为：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.0的浓度为50mmol/L的醋酸铵缓冲溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为0.8ml/min，柱温为25摄氏度。由此，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
根据本发明的实施例，流动性A的配制，是通过将3.85g醋酸铵溶于990ml水中，并用冰醋酸调节pH至4.0，然后用水稀释至1000ml而获得的醋酸铵缓冲溶液。
根据本发明的一个具体示例，所述色谱条件为：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.5的浓度为50mmol/L的醋酸铵缓冲溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.0ml/min，柱温为30摄氏度。由此，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
根据本发明的实施例，流动相A的配制，是通过将3.85g醋酸铵溶于990ml水中，并用冰醋酸调节pH至4.5，然后用水稀释至1000ml而获得的醋酸铵缓冲溶液。
根据本发明的一个具体示例，所述色谱条件为：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至5.0的浓度为50mmol/L的醋酸铵缓冲溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.2ml/min，柱温为35摄氏度。由此，能够快速有效地将二对甲苯磺酸拉帕替尼和杂质分离，且分离度高、专属性强。
根据本发明的实施例，流动性A的配制，是通过将3.85g醋酸铵溶于990ml水中，并用冰醋酸调节pH至5.0，然后用水稀释至1000ml而获得的醋酸铵缓冲溶液。
本发明的检测二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药杂质的方法可以很好地分离二对甲苯磺酸拉帕替尼与其合成过程引入的杂质和降解杂质，分离度好，灵敏度高，专属性强。
附图说明
图1显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼的紫外扫描图；
图2显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼中有关物质色谱图；
图3显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼供试品溶液的色谱图；
图4显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼供试品溶液的色谱图；
图5显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中可能存在的杂质与二对甲苯磺酸拉帕替尼在同一色谱条件下的分离色谱图；
图6显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药氧化破坏图谱；
图7显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药热破坏图谱；
图8显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药酸破坏图谱；
图9显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药碱破坏图谱；以及
图10显示了根据本发明的一个实施例，二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药光照破坏图谱。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1:检测波长的确定
取适量二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药，采用乙腈-水(体积比4:1)混合溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含20μg原料药的溶液，在紫外-可见分光光度计于190nm～400nm进行全扫描，紫外扫描图见图1。由图1可知，二对甲苯磺酸拉帕替尼的最大吸收波长为262nm，故选择262±2nm作为检测波长。
实施例2
色谱条件：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.5，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温为40摄氏度，流速为10ml/min，进样5μl，线性梯度洗脱梯度条件如下所示。
| 时间(min) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 60 | 40 |
| 8 | 42 | 58 |
| 19 | 10 | 90 |
| 35 | 10 | 90 |
| 35.1 | 60 | 40 |
| 42 | 60 | 40 |
实验步骤：
1.取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
2.取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，二对甲苯磺酸拉帕替尼中有关物质色谱图见图2。
由图2的结果可知，该色谱图中杂质检测限度不高，且在4min左右有两个杂质分离不好，二对甲苯磺酸拉帕替尼主峰后也有杂质未分离。
实施例3
为提高杂质检测限，以及杂质间分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.5，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温40摄氏度，流速为1.0ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0 | 65 | 35 |
| 13 | 65 | 35 |
| 33 | 42 | 58 |
| 43 | 10 | 90 |
| 48 | 10 | 90 |
| 50 | 65 | 35 |
| 60 | 65 | 35 |
实验步骤：
1.取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
2.取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，二对甲苯磺酸拉帕替尼色谱图见图3。
图3结果显示，该色谱图中主峰与主峰后杂质分离度不好。
实施例4
为提高主峰与主峰后杂质分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.5，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温30摄氏度，流速为1.0ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 65 | 35 |
| 13 | 65 | 35 |
| 33 | 42 | 58 |
| 43 | 10 | 90 |
| 48 | 10 | 90 |
| 50 | 65 | 35 |
| 60 | 65 | 35 |
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，二对甲苯磺酸拉帕替尼色谱图见图4。
图4的结果显示，该色谱图中各杂质分离较好，主峰与主峰后杂质的分离效果理想。
实施例5
为提高主峰与主峰后杂质分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.0，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温25摄氏度，流速为0.8ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 65 | 35 |
| 13 | 65 | 35 |
| 33 | 42 | 58 |
| 43 | 10 | 90 |
| 48 | 10 | 90 |
| 50 | 65 | 35 |
| 60 | 65 | 35 |
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示，该色谱图中各杂质分离较好，主峰与主峰后杂质的分离效果理想。
实施例6
为提高主峰与主峰后杂质分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至5.0，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm,柱温35摄氏度，流速为1.2ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 65 | 35 |
| 13 | 65 | 35 |
| 33 | 42 | 58 |
| 43 | 10 | 90 |
| 48 | 10 | 90 |
| 50 | 65 | 35 |
| 60 | 65 | 35 |
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示，该色谱图中各杂质分离较好，主峰与主峰后杂质的分离效果理想。
实施例7
为提高主峰与主峰后杂质分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.5，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温30摄氏度，流速为1.0ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 75 | 25 |
| 13 | 75 | 25 |
| 33 | 35 | 65 |
| 43 | 5 | 95 |
| 48 | 5 | 95 |
| 50 | 75 | 25 |
| 60 | 75 | 25 |
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示，该色谱图中各杂质分离较好，主峰与主峰后杂质的分离效果理想。
实施例8
为提高主峰与主峰后杂质分离度，色谱条件如下：
采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以50mmol/L醋酸铵缓冲溶液(取3.85g醋酸铵，溶于990ml水中，用冰醋酸调节pH至4.5，用水稀释至1000ml)为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长262nm，柱温30摄氏度，流速为1.0ml/min，进样15μl，线性梯度洗脱梯度条件如下表所示。
| 时间(分钟) | 流动相A(％V/V) | 流动相B(％V/V) |
| 0 | 55 | 45 |
| 13 | 55 | 45 |
| 33 | 50 | 50 |
| 43 | 15 | 85 |
| 48 | 15 | 85 |
| 50 | 55 | 45 |
| 60 | 55 | 45 |
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)取供试品溶液及空白溶剂按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示，该色谱图中各杂质分离较好，主峰与主峰后杂质的分离效果理想。
实施例9
色谱条件同实施例4。
实验步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼适量，用乙腈-水(体积比4：1)混合液溶解并用乙腈-水(体积比4：1)混合液定量稀释制成1ml含二对甲苯磺酸拉帕替尼0.8mg的供试品溶液。空白溶剂为乙腈-水(体积比4：1)混合液。
(2)分别取已知杂质对照品适量溶于乙腈-水(体积比4：1)混合液中配制成杂质混合溶液。
(3)将供试品溶液与杂质混合溶液按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液与杂质混合溶液的典型图谱见图5。
在图5所述的HPLC图谱中，6为原料药二对甲苯磺酸拉帕替尼的峰，余下的均为二对甲苯磺酸拉帕替尼中可能存在的杂质(即：在二对甲苯磺酸拉帕替尼合成过程中引入的杂质、以及降解杂质)，各对应的杂质为：1.对甲苯磺酸；2.起始原料；3.杂质A；4.杂质B；5.杂质C；9.杂质E；11.中间体；12.杂质D；
结论：其中杂质A为降解杂质，杂质B,D,E为工艺杂质，杂质C为原料带来杂质。
由图5中可以看出，中间体，原料以及各杂质与主峰分离较好，适合作为有关物质分析方法。
实施例10
色谱条件同实施例4。
实验步骤：
(1)氧化降解样品检测
精密称取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药20mg，至25ml容量瓶中，然后移取3.0ml的30％双氧水(根据供试品破坏难易程度选择)至上述容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，放置45h后摇匀即得，然后按照实施例4中的色谱条件进行色谱检测，典型图谱见图6。
(2)热降解样品检测
精密称取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药20mg，至20ml顶空瓶中，用10ml稀释剂溶解，在水浴(90℃)下加热15h，冷却，转移至25ml容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得热降解溶液。然后按照实施例4中的色谱条件进行色谱检测，典型图谱见图7。
(3)酸水降解样品检测
精密称取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药20mg，至25ml容量瓶中，加入10ml稀释剂溶解，移取2.0ml的2.0mol/l盐酸溶液，必要时在烘箱中60℃破坏适量时间，然后用2.0ml的2.0mol/l氢氧化钠溶液中和至中性(pH试纸测试)，冷却后用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得，然后按照实施例4中的色谱条件进行色谱检测，典型图谱见图8。
(4)碱水降解样品检测
精密称取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药20mg，至25ml容量瓶中，加入10ml稀释剂溶解，移取2.0ml的2.0mol/l氢氧化钠溶液，必要时在烘箱中60℃破坏适量时间，然后用2.0ml的2.0mol/l盐酸溶液中和至中性(pH试纸测试)，冷却后用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得，然后按照实施例4中的色谱条件进行色谱检测，典型图谱见图9。
(5)光降解样品检测
精密称取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药20mg，至25ml的容量瓶中，用适量稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，在强光4500LUX下照射48h，作为强光降解溶液，然后按照实施例4中的色谱条件进行色谱检测，典型图谱见图10。
强制降解试验中，可以发现，原料药溶液在酸碱以及光照条件下比较稳定，在氧化以及高温条件下均有较大程度的降解。并且各个降解杂质与主峰之间均得到很好的分离，该有关物质分析方法可用于检测降解杂质。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药中杂质的分析检测方法，其特征在于，所述方法利用结合紫外检测器的高效液相色谱法进行的，其中，
采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；
流动相由流动相A和流动相B组成；
采用缓冲盐溶液作为所述流动相A，所述缓冲盐溶液为用冰醋酸调节pH的磷酸盐溶液或醋酸盐溶液；
采用有机溶剂作为所述流动相B，所述有机溶剂为选自甲醇、乙腈、乙醇中的至少一种；
洗脱方式为线性梯度洗脱。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述紫外检测器的检测波长为262±2nm。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的柱温为25～35摄氏度。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的流速为0.8～1.2ml/min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲盐溶液为醋酸盐溶液，优选所述缓冲盐溶液为醋酸铵溶液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用冰醋酸调节pH的磷酸盐或醋酸盐缓冲溶液的pH为4.0-5.0，优选pH为4.3-4.8，更优选pH为4.4～4.6。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙腈。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述线性梯度洗脱的条件为：
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取二对甲苯磺酸拉帕替尼原料药，用体积比为4：1的乙腈-水混合溶剂超声溶解，配制成0.8mg/ml的二对甲苯磺酸拉帕替尼供试品溶液；
(2)色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，以用冰醋酸调节pH至4.0～5.0的浓度为50mmol/L的缓冲盐溶液为所述流动相A，以乙腈为所述流动相B，检测波长为262±2nm，流速为0.8-1.2ml/min，柱温为25-35摄氏度，按下表所示条件进行所述线性梯度洗脱，
(3)取所述供试品溶液15μl，按照上述色谱条件，注入配备紫外检测器的高效液相色谱仪，记录色谱图。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法包括下列至少之一：
所述色谱条件为：采用100×4.6mm、3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.0的浓度为50mmol/L的醋酸铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为0.8ml/min，柱温为25摄氏度，所述线性梯度洗脱条件为：
所述色谱条件为：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.5的浓度为50mmol/L的醋酸铵缓冲溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.0ml/min，柱温为30摄氏度，所述线性梯度洗脱条件为：
所述色谱条件为采用100×4.6mm、3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至5.0的浓度为50mmol/L的醋酸铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.2ml/min，柱温为35摄氏度，所述线性梯度洗脱条件为：
所述色谱条件为：采用100mm×4.6mm，3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.5的浓度为50mmol/L的醋酸铵缓冲溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.0ml/min，柱温为30摄氏度，所述线性梯度洗脱条件为：
所述色谱条件为采用100×4.6mm、3μm的PhenmonexLunaC18柱，以用冰醋酸调节pH至4.5的浓度为50mmol/L的醋酸铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为262nm，流速为1.0ml/min，柱温为30摄氏度，所述线性梯度洗脱条件为：
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107490631A (zh) * | 2016-06-10 | 2017-12-19 | 山东新时代药业有限公司 | 一种阿法替尼中间体的分析检测方法 |
| CN108226314A (zh) * | 2016-12-15 | 2018-06-29 | 湖北生物医药产业技术研究院有限公司 | 乙磺酸尼达尼布原料药有关物质的分析检测方法 |
| CN111796031A (zh) * | 2019-04-08 | 2020-10-20 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 二甲磺酸赖右苯丙胺及其中间体杂质的高效液相分析方法 |
| CN115236255A (zh) * | 2022-08-04 | 2022-10-25 | 迪沙药业集团有限公司 | 一种洛索洛芬钠有关物质检测方法 |
| CN115453000A (zh) * | 2022-09-30 | 2022-12-09 | 广州艾格生物科技有限公司 | 替尼类药物中间体中毒性杂质的检测方法与应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102675297A (zh) * | 2012-04-17 | 2012-09-19 | 武汉人福医药集团股份有限公司 | 拉帕替尼的制备方法 |
| CN103159747A (zh) * | 2013-02-26 | 2013-06-19 | 常州鸿创高分子科技有限公司 | 一种二对甲苯磺酸拉帕替尼的合成方法 |
| CN103483324A (zh) * | 2012-06-12 | 2014-01-01 | 武汉人福医药集团股份有限公司 | 拉帕替尼的新制备方法 |
-
2014
- 2014-09-29 CN CN201410522627.3A patent/CN105527349A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102675297A (zh) * | 2012-04-17 | 2012-09-19 | 武汉人福医药集团股份有限公司 | 拉帕替尼的制备方法 |
| CN103483324A (zh) * | 2012-06-12 | 2014-01-01 | 武汉人福医药集团股份有限公司 | 拉帕替尼的新制备方法 |
| CN103159747A (zh) * | 2013-02-26 | 2013-06-19 | 常州鸿创高分子科技有限公司 | 一种二对甲苯磺酸拉帕替尼的合成方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 仲艳 等: "HPLC法测定二甲苯磺酸拉帕替尼含量及其有关物质", 《中国药师》 * |
| 刘俊华 等: "高效液相色谱法测定二甲苯磺酸拉帕替尼片有关物质", 《中国药学杂志》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107490631A (zh) * | 2016-06-10 | 2017-12-19 | 山东新时代药业有限公司 | 一种阿法替尼中间体的分析检测方法 |
| CN108226314A (zh) * | 2016-12-15 | 2018-06-29 | 湖北生物医药产业技术研究院有限公司 | 乙磺酸尼达尼布原料药有关物质的分析检测方法 |
| CN111796031A (zh) * | 2019-04-08 | 2020-10-20 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 二甲磺酸赖右苯丙胺及其中间体杂质的高效液相分析方法 |
| CN115236255A (zh) * | 2022-08-04 | 2022-10-25 | 迪沙药业集团有限公司 | 一种洛索洛芬钠有关物质检测方法 |
| CN115236255B (zh) * | 2022-08-04 | 2023-08-25 | 迪沙药业集团有限公司 | 一种洛索洛芬钠有关物质检测方法 |
| CN115453000A (zh) * | 2022-09-30 | 2022-12-09 | 广州艾格生物科技有限公司 | 替尼类药物中间体中毒性杂质的检测方法与应用 |
| CN115453000B (zh) * | 2022-09-30 | 2023-10-27 | 广州艾格生物科技有限公司 | 替尼类药物中间体中毒性杂质的检测方法与应用 |
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