CN105343143A - 一种人参皂苷提取物及其制备方法 - Google Patents

一种人参皂苷提取物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105343143A
CN105343143A CN201510749152.6A CN201510749152A CN105343143A CN 105343143 A CN105343143 A CN 105343143A CN 201510749152 A CN201510749152 A CN 201510749152A CN 105343143 A CN105343143 A CN 105343143A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ginsenoside
extract
preparation
ginseng
ginsenoside extract
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510749152.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105343143B (zh
Inventor
尹成日
陈贺
吴昊
金英今
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yanbian University
Original Assignee
Yanbian University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yanbian University filed Critical Yanbian University
Priority to CN201510749152.6A priority Critical patent/CN105343143B/zh
Publication of CN105343143A publication Critical patent/CN105343143A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105343143B publication Critical patent/CN105343143B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/258—Panax (ginseng)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种人参皂苷提取物及其制备方法。提取物中含有Rb1、Rb2、Rc、Rd人参主皂苷和转化得到的抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。其制备方法采用冻融法提取人参皂苷，该方法包括以下步骤：a、取鲜人参，去除异物后切成片；b、放入超低温冰箱中冷冻，然后解冻，反复冻融；c、粉碎后加入80%甲醇水溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩；d、加入去离子水溶解后，用乙醚、饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。本发明方法操作简单，与传统的有机溶剂法相比提取收率高、成本低，并且能够得到抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。

Description

一种人参皂苷提取物及其制备方法
技术领域
本发明属于天然产物分离提取领域，具体涉及一种人参皂苷提取物及其制备方法。
背景技术
人参(PanaxginsengC.AMeyer)为五加科人参属多年生宿根草本植物，主产于吉林、辽宁、黑龙江、河北、山西等地，是我国名贵的中药材，具有主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、生津止渴、安神益智、益寿延年之功效，是滋补的佳品，有“百草之王”的美誉。人参皂苷是人参的主要成分之一，约占人参总质量的4%。人参皂苷是一种固醇类化合物，属三萜类皂苷，由苷元和糖连接而成，具有相似的基本结构，根据糖苷基结构的不同分为3类：齐墩果酸型(如Ro)、人参二醇型(如Rb1、Rb2、Rg3、Rd、Rh2、PPD)、人参三醇型(Re、Rg1、Rh1、PPT)，其中F2、Rg3、Rh2等存在于野山参和红参中并且含量极低，称为稀有人参皂苷。目前从人参中分离得到150余种人参皂苷单体，其具有改善微循环、保护心功能、提高组织抗缺氧能力、抗癌、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗辐射、抗疲劳等多种生物活性。
目前，提取人参皂苷的方法有以下几种，煎煮法、温浸法、乙醇回流提取法、微波提取法、超声波提取法、索氏提取法、柱层析法、超临界萃取法、酶提取法等。其中，乙醇回流提取法提取效率高，但是醇对于叶绿素的溶解性较大，不易去除，从而影响提取物质量；超声波提取法应用于许多植物的有效成分的提取，操作简单，提取时间短，得率高，但是提取效果受人参含水量的影响，同时存在噪音大，影响人体健康，难以实现规模化生产的不足。
发明内容
本发明的目的是提供一种人参皂苷提取物，以及通过冻融法提取人参皂苷的制备方法，该方法操作简单、提取率高、成本低，最重要的是在冻融过程中实现人参皂苷的转化，使得人参皂苷提取物中含有抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。
本发明的目的通过采用以下技术方案实现：
一种人参皂苷提取物，由以下冻融法提取制备：
a、取鲜人参，去除异物后切成小片；
b、放入超低温冰箱中冷冻，然后解冻，反复冻融；
c、粉碎后加入80%甲醇水溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩；
d、加入去离子水溶解后，用乙醚、饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物，所得到的人参皂苷提取物中含有Rb1、Rb2、Rc、Rd人参主皂苷和转化得到的抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。
一种人参皂苷提取物的制备方法，包括以下步骤：
a、取鲜人参，去除异物后切成片；
b、放入超低温冰箱中冷冻，然后解冻；
c、粉碎后加入80%甲醇水溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩；
d、加入去离子水溶解后，用乙醚、饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。
进一步地，所述的b步骤中冷冻温度为-30℃至-80℃，冷冻时间为5-25h；在18℃至25℃下自然解冻5-25h；重复冻融b步骤1-6次。
进一步地，所述的c步骤加入80%甲醇水溶液50-200mL，在50℃超声提取10-50min。
进一步地，所述的d步骤中，将c步骤得到的粗提物用40-60mL去离子水溶解，用等体积的乙醚萃取三次，保留下层，用40-60mL饱和正丁醇溶液提取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。
进一步地，所述的d步骤所得到的人参皂苷提取物中含有Rb1，Rb2，Rc，Rd人参主皂苷和转化得到的抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。
冻融法是一种广泛用于动植物、微生物和病理医学实验的方法，是指反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶，使剩余液体中盐浓度增高，导致膜组织结构不同的程度改变的一种方法。表现为细胞器膜脂质双分子层变化，横向的脂质分离成单个结构域，以及膜通透性的变化，从而有利于胞内物质流出。有报道冻融法被用于农杆菌、根瘤菌的转化研究，以及被用于植物血清素、叶绿素糖、动物血纤维蛋白原的提取和基因工程受体细胞破碎等诸多领域。
本发明的有益效果在于：
(1)采用冻融技术提取人参有效成分人参皂苷，该方法中人参经过反复冻融导致细胞膜和组织结构的机械损伤，增强膜的通透性，促进植物细胞代谢产物的释放，从而提高有效成分的提取率。
(2)冻融法提取人参皂苷过程中，实现人参皂苷的转化，即多糖链人参皂苷（如Rb1等）转化为生物活性更强的低糖链人参皂苷（F2等）或无糖链的原人参二醇（PPD）；提取物中生成有抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD），这是在冻融法应用于人参皂苷提取中从未有报道的。
附图说明
图1为本发明实验人参皂苷提取物中稀有人参皂苷PPD标准曲线。
具体实施方式
为了更清楚地理解本发明，下面通过具体的实施例进一步做详细描述。这些实施例仅用于对本发明进一步说明，而不用于限制本发明的范围。
实施例1
准确称取一定量人参（鲜参），去除异物后切成小片；-30℃冷冻12h，室温20℃下解冻5h，反复冻融3次；粉碎后加入80%甲醇水溶液，50℃超声提取20min，过滤，滤液减压浓缩；加入去离子水溶解后，用饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。经HPLC测试，得到人参皂苷Rb1含量为8.06mg/g、Rc含量为4.79mg/g、Rb2含量为5.30mg/g、Rd含量为1.95mg/g。
实施例2
准确称取一定量人参（鲜参），去除异物后切成小片；-70℃冷冻12h，室温18℃至25℃下解冻10h，反复冻融4次；粉碎后加入80%甲醇水溶液50-200mL，50℃超声10-50mi，过滤，滤液减压浓缩，得粗提物；为粗提物中加入40-60mL去离子水溶解后，用等体积的乙醚萃取三次，保留下层，用40-60mL饱和正丁醇溶液提取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。经HPLC测试，得到人参皂苷Rb1含量为7.53mg/g，Rc含量为4.84mg/g，Rb2含量为5.40mg/g，Rd含量为1.64mg/g。
实施例3
准确称取一定量人参（鲜参），去除异物后切成小片；-80℃冷冻10h，室温18℃至25℃下解冻5-25h，反复冻融5次；粉碎后加入80%甲醇水溶液，50℃超声提取30min，过滤，滤液减压浓缩，得粗提物；在粗提物中加入去离子水溶解后，，用等体积的乙醚萃取三次，保留下层，用40-60mL饱和正丁醇溶液提取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。经HPLC测试，得到人参皂苷Rb1含量为6.35mg/g，Rc含量为3.22mg/g，Rb2含量为4.07mg/g，Rd含量为1.09mg/g。
在实施例1、2、3的实施过程中，调节冻融条件可得到不同比例的人参皂苷提取物，并且在冻融过程中实现人参皂苷的转化，得到抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD），其含量达到0.11mg/g。人参皂苷提取物中稀有人参皂苷PPD标准曲线如图1。
测试实施例
准确称取一定量人参，分别按照实施例1-3提供的方法提取人参皂苷，同时将未经冻融的人参作为对照组提取人参皂苷，利用高效液相色谱（HPLC）测定人参皂苷含量。
高效液相色谱法测定人参皂苷的具体步骤为：
a、精密准确称取人参皂苷标准品，色谱级甲醇溶解，利用峰面积绘制标准曲线，如图1所示，x：峰面积；y：浓度(mg/mL)；
b、色谱条件为：流动相：水(A)-乙腈(B)，洗脱梯度如表1所示；流速：1mL/min；检测波长：203nm；柱温：30℃；进样体积：10μL。
表1为高效液相色谱流动相梯度表
。

Claims (6)

1.一种人参皂苷提取物，由以下冻融法提取制备：
a、取鲜人参，去除异物后切成小片；
b、放入超低温冰箱中冷冻，然后解冻，反复冻融；
c、粉碎后加入80%甲醇水溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩；
d、加入去离子水溶解后，用乙醚、饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物，所得到的人参皂苷提取物中含有Rb1、Rb2、Rc、Rd人参主皂苷和转化得到的抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。
2.一种人参皂苷提取物的制备方法，包括以下步骤：
a、取鲜人参，去除异物后切成片；
b、放入超低温冰箱中冷冻，然后解冻，反复冻融；
c、粉碎后加入80%甲醇水溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩；
d、加入去离子水溶解后，用乙醚、饱和正丁醇溶液萃取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。
3.根据权利要求2所述的一种人参皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述的b步骤中冷冻温度为-30℃至-80℃，冷冻时间为5-25h；在18℃至25℃下自然解冻5-25h；重复冻融b步骤1-6次。
4.根据权利要求2所述的一种人参皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述的c步骤加入80%甲醇水溶液50-200mL，在50℃超声提取10-50min。
5.根据权利要求2所述的一种人参皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述的d步骤中，将c步骤得到的粗提物用40-60mL去离子水溶解，用等体积的乙醚萃取三次，保留下层，用40-60mL饱和正丁醇溶液提取，减压浓缩，得到人参皂苷提取物。
6.根据权利要求2所述的一种人参皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述的d步骤所得到的人参皂苷提取物中含有Rb1，Rb2，Rc，Rd人参主皂苷和转化得到的抗肿瘤活性物质原人参二醇（PPD）。
CN201510749152.6A 2015-11-06 2015-11-06 一种人参皂苷提取物及其制备方法 Active CN105343143B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510749152.6A CN105343143B (zh) 2015-11-06 2015-11-06 一种人参皂苷提取物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510749152.6A CN105343143B (zh) 2015-11-06 2015-11-06 一种人参皂苷提取物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105343143A true CN105343143A (zh) 2016-02-24
CN105343143B CN105343143B (zh) 2020-09-22

Family

ID=55319303

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510749152.6A Active CN105343143B (zh) 2015-11-06 2015-11-06 一种人参皂苷提取物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105343143B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106086146A (zh) * 2016-06-30 2016-11-09 江苏省中国科学院植物研究所 一种精制珍贵稀有人参皂苷的制备方法及用途
CN108753900A (zh) * 2018-06-13 2018-11-06 延边大学 一种人参内生菌发酵制备稀有人参皂苷的方法

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
姚红娥等: "人参须根中皂苷类成分提取工艺的研究", 《中药与临床》 *
宋艳: "人参（根）生物转化研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
张宪臣等: "人参总皂苷超声提取工艺的研究", 《现代中药研究与实践》 *
张晓旭等: "超高效液相色谱法检测6种人参皂苷含量", 《中国食品学报》 *
柳滢春: "冻融_超声联合细胞破碎法提取菊花黄色素工艺优化", 《江苏农业科学》 *
窦德强: "《中药化学》", 30 April 2012, 湖南科学技术出版社 *
罗永明: "《天然药物化学》", 31 July 2015, 第四军医大学出版社 *
胡晓琴等: "原人参二醇的制备与结构改造研究进展", 《安徽农业科学》 *
魏文志等: "基于冻融辅助超声波法的小球藻多糖提取工艺优化", 《农业工程学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106086146A (zh) * 2016-06-30 2016-11-09 江苏省中国科学院植物研究所 一种精制珍贵稀有人参皂苷的制备方法及用途
CN108753900A (zh) * 2018-06-13 2018-11-06 延边大学 一种人参内生菌发酵制备稀有人参皂苷的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105343143B (zh) 2020-09-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Efficient extraction of flavonoids from Flos Sophorae Immaturus by tailored and sustainable deep eutectic solvent as green extraction media
Kaoui et al. Deep eutectic solvents as sustainable extraction media for plants and food samples: A review
CN105168285A (zh) 一种人参皂苷提取液及其提取方法
CN105255984A (zh) 一种利用植物复合酶转化人参皂苷的方法
CN101085728A (zh) 一种从丹皮中获得丹皮酚和芍药苷的制备方法
CN104098641B (zh) 一种从罗汉果中提取罗汉果甙v的方法
CN106236808A (zh) 一种甜叶菊酚类提取物及其在抗炎制品中的应用
CN105343143A (zh) 一种人参皂苷提取物及其制备方法
Peng et al. Changes in levels of phenylethanoid glycosides, antioxidant activity, and other quality traits in Cistanche deserticola slices by steam processing
CN101955500A (zh) 一种从石榴皮中安石榴苷的提取方法
CN102961414A (zh) 中草药原浆及其应用
CN103156920B (zh) 一种五味子提取物的干燥方法
CN105949340A (zh) 一种玉竹多糖和平菇多糖的同步提取方法
CN109336988A (zh) 一种铁皮石斛的提取方法
CN102217755B (zh) 罗汉松实提取物制品的生产方法
CN103933209A (zh) 一种从锦灯笼茎和宿萼中提取甾体皂苷的方法
CN102100737A (zh) 包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物及其制备方法
CN1943647B (zh) 一种枇杷叶三萜酸提取物的制备方法
KR20140003705A (ko) 기능성분강화 홍삼추출액 제조방법 및 그 조성물
CN105030914B (zh) 粗壮女贞苦丁茶提取物在α-葡萄糖苷酶抑制剂的应用
CN104435658A (zh) 一种用于缺血性脑中风预防和治疗的药物及其制备方法
CN104189088A (zh) 一种桑葚提取物在制备降糖药物中的应用
CN109619554A (zh) 一种鲜人参粉的制备方法及生产工艺
CN102793647A (zh) 一种文冠果黄酮物质提取方法及其在抗衰老行业的应用
CN107802665A (zh) 一种连续式低温高压破碎提取金银花中酚酸类成分的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant