苦参提取物或苦参超微粉在制备改善罗非鱼肝功能的饲料中的应用
技术领域
本发明涉及植物提取物的应用,具体涉及苦参提取物或苦参超微粉作为饲料添加剂中应用。
背景技术
近年来,罗非鱼养殖规模不断扩大,高密度、集约化养殖模式以及高营养配合饲料的广泛使用,导致养殖水体环境恶化,给罗非鱼疾病防控带来了新的课题,出现了以肝胆病患为主要特征的新的疾病类型,即罗非鱼肝胆综合症,给罗非鱼养殖产业的课持续发展带来较大的风险。
罗非鱼肝胆综合症发病初期,病鱼行动迟缓,对外界刺激的敏感性降低,反应迟钝,摄食量明显下降;肝脏略显肿大,轻微贫血,色略淡;胆囊色较暗,略显绿色。随着病情发展,肝脏明显肿大,肝色逐渐变淡发白或呈土黄色泽,少数病鱼呈斑块状黄红白色相间,形成明显的“花肝”症状,与肠粘膜及脂肪粘连在一起,充塞于胸腔;有的肝脏轻触易碎,胆囊明显肿大,有时导致胆汁溢出或胆囊破裂,胆汁颜色有变白或变墨绿色现象;大部分病鱼腹腔内有腹水,肠道无食,偶有出血症状,无弹性,用手轻轻拉扯极易扯断。由于主要脏器出现严重病变、受损,机体的抗病能力下降,因此常继发感染其他细菌性疾病,从而直接影响养殖效益。
已有的研究表明,引发罗非鱼肝胆综合症的病因很复杂,主要是高密度养殖、养殖环境恶化,为预防疾病滥用药物或者是饵料营养成分失衡等各种不利因素综合所致。
对于罗非鱼肝胆综合症应坚持以防为主、防重于治的理念。苦参是传统的中药,目前还尚未见有将苦参作为单一组分或与其他成分配伍作为饲料添加剂在制备改善罗非鱼肝功能的饲料中的应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供苦参提取物或苦参超微粉在制备改善罗非鱼肝功能的饲料中。
具体地,本发明提供苦参提取物或苦参超微粉在制备改善罗非鱼肝功能的饲料中的应用,其中,所述的苦参提取物为苦参的乙醇提取物。
进一步地,本发明提供苦参提取物或苦参超微粉作为饲料添加剂在制备改善罗非鱼肝功能的饲料中的应用。
本发明所述技术方案中,所述的苦参超微粉为对苦参进行超微粉碎所得的细粉,通常是超微粉碎至颗粒粒度为1~75μm,优选为10~50μm。
本发明所述技术方案中,所述的苦参提取物优选采用下述方法制备:取苦参,加入体积浓度为80~100%的乙醇进行提取,提取液浓缩后用乙酸乙酯或乙醚萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,即得。优选是将苦参进行粉碎后再进行提取。在提取时,优选采用回流提取,提取的次数通常为1~3次,每次提取1~3h,每次提取时溶媒的加入量与现有技术相同,通常为原料重量的3~10倍。所得提取液通常是浓缩除去溶媒加入量的80~90%时,进行下一步的萃取操作。
本发明还提供一种改善罗非鱼肝功能的饲料,它含有占饲料总重量0.02%以上的苦参提取物或苦参超微粉,其中,所述苦参提取物按下述方法制备:取苦参,加入体积浓度为80~100%的乙醇进行提取,提取液浓缩后用乙酸乙酯或乙醚萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,即得。该技术方案中所述苦参提取物的制备方法中涉及的提取方式等与前述相同。
优选地,上述提改善罗非鱼肝功能的饲料中,苦参提取物或苦参超微粉占饲料总重量0.04~0.3%,进一步优选占饲料总重量0.04~0.16%;更优选地,当苦参提取物或苦参超微粉占饲料总重量0.04~0.08%时即可以具有较高的饲料转化率和增重率。
申请人通过实验发现,苦参提取物或苦参超微粉作为饲料添加剂与常规饲料配合一起投喂罗非鱼时,对鱼类的尿素氮、胆固醇、碱性磷酸酶等肝功能指标和血液指标都有明显的改善,明显修复人工饲料对水生动物的肝功能的影响,此外,苦参还可以改变鱼类肠道的菌落多样性,抑制有害菌的繁殖,促进益生菌在肠道粘附,有效提高饲料转化率和增重率。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述,以更好地理解本发明的内容,但本发明并不限于以下实施例。
以下各实施例中所述的乙醇的浓度均为体积百分比浓度。
实施例1:苦参提取物的制备
取苦参,粉碎,过100目筛,以95%乙醇为溶媒回流提取3次,溶媒量分别为药材重量的5倍、3倍、3倍,提取时间分别为3h、3h、3h。合并提取液,浓缩(回收的乙醇占乙醇加入量的90%),然后过滤,滤液用乙酸乙酯萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,得到深褐色的浸膏,即为苦参提取物。
实施例2:苦参提取物的制备
取苦参,粉碎,过150目筛,以90%乙醇为溶媒回流提取2次,溶媒量分别为药材重量的8倍、5倍,提取时间分别为3h、1h。合并提取液,浓缩(回收的乙醇占乙醇加入量的90%),然后过滤,滤液用乙醚萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,得到深褐色的浸膏,即为苦参提取物。
实施例3:苦参提取物的制备
取苦参,粉碎,过100目筛,以100%乙醇为溶媒回流提取3次,溶媒量分别为药材重量的6倍、5倍、3倍,提取时间分别为2h、3h、1h。合并提取液,浓缩(回收的乙醇占乙醇加入量的85%),然后过滤,滤液用乙醚萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,得到深褐色的浸膏,即为苦参提取物。
实施例4:苦参提取物的制备
取苦参,进行超微粉碎,得到平均粒径为15μm的苦参超微粉。
实施例5:苦参提取物的制备
取苦参,粉碎,过100目筛,以80%乙醇为溶媒回流提取2次,溶媒量分别为药材重量的5倍、5倍,提取时间分别为3h、2h。合并提取液,浓缩(回收的乙醇占乙醇加入量的80%),然后过滤,滤液用乙酸乙酯萃取,收集萃取相,浓缩至无溶剂,得到深褐色的浸膏,即为苦参提取物。
实施例6:改善罗非鱼肝功能的饲料
(1)、改善罗非鱼肝功能的饲料,它的组成为:
实施例1制备的苦参提取物0.2Kg;
市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料999.8Kg。
(2)、制备及使用方法
取0.4Kg实施例1制得的苦参提取物用适量乙醇溶解,与999.6Kg市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料混合均匀,然后摊开饲料,待乙醇全部挥发,即可直接用于投喂。
实施例7:改善罗非鱼肝功能的饲料
(1)、改善罗非鱼肝功能的饲料,它的组成为:
实施例1制备的苦参提取物0.4Kg;
市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料999.6Kg。
(2)、制备及使用方法
取0.4Kg实施例1制得的苦参提取物用适量乙醇溶解,与999.6Kg市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料混合均匀,然后摊开饲料,待乙醇全部挥发,即可直接用于投喂。
实施例8:改善罗非鱼肝功能的饲料
(1)、改善罗非鱼肝功能的饲料,它的组成为:
实施例1制备的苦参提取物0.8Kg;
市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料999.2Kg。
(2)、制备及使用方法
与实施例6相同。
实施例9:改善罗非鱼肝功能的饲料
(1)、改善罗非鱼肝功能的饲料,它的组成为:
实施例1制备的苦参提取物1.6Kg;
市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料998.4Kg。
(2)、制备及使用方法
与实施例6相同。
实施例10:改善罗非鱼肝功能的饲料
(1)、改善罗非鱼肝功能的饲料,它的组成为:
实施例1制备及使用的苦参提取物3Kg;
市售的广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料997Kg。
(2)、制备方法
与实施例6相同。
实验例:含苦参提取物的饲料对奥尼罗非鱼的肝功能改善实验
实验方法:奥尼罗非鱼饲养在室外水塘的1m3网箱中(规格1.0m×1.0m×1.0m),模拟人工养殖环境进行饲养,池塘水深1.5~2m,日投料为罗非鱼体重的2~3%,每天8:00~9:00和16:00~17:00各投喂1次。
实验罗非鱼的平均体重45~50g,分成一批,一批为对照,投喂广州海维饲料有限公司8992罗非鱼膨化饲料;另一批进行增重实验,分别投喂上述实施例6、7、8、9和10制备的含0.02、0.04%、0.08%、0.16%和0.3%苦参提取物的饲料,每个浓度下3个平行组,每组20尾,投喂56天后,统计各组血浆参数(血清葡萄糖、碱性磷酸酶、谷氨酸丙氨酸氨基转移酶、血尿素氮和总胆固醇),结果如下述表1所示;统计各组免疫学指标(血红蛋白、红细胞、白细胞、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量和平均红细胞血红蛋白浓度),结果如表2所示。
表1:
注:不同标的字母表示组间差异显著。
表2:
注:不同标的字母表示组间差异显著。
由上述表中数据可知,含有苦参提取物的饲料,可以提高罗非鱼的白细胞、红细胞的水平和溶菌酶活力,与对照组比较,罗非鱼肝功能指标的血糖、碱性磷酸酶,谷丙转氨酶、尿素氮和胆固醇都有了很明显的改善,说明苦参提取物可以稳定和保持罗非鱼的肝细胞的完整,在一定程度上改善由人工配合饲料带来的肝功能的影响。