CN105165392A

CN105165392A - 雷丸的人工栽培方法

Info

Publication number: CN105165392A
Application number: CN201510524202.0A
Authority: CN
Inventors: 李娜; 赵银瓶; 肖波; 韦中强; 秦静; 韩量; 韩如刚; 杨毅; 张万超
Original assignee: CHONGQING INSTITUTE OF PHARMACEUTICAL PLANT
Current assignee: CHONGQING INSTITUTE OF PHARMACEUTICAL PLANT
Priority date: 2015-08-24
Filing date: 2015-08-24
Publication date: 2015-12-23
Anticipated expiration: 2035-08-24
Also published as: CN105165392B

Abstract

本发明公开了一种雷丸的人工栽培方法，具体包括原种制备、栽培种制备以及室内或室外覆土栽培步骤，该方法具有下述优点：采用玉米为主要原料制备雷丸原种，解决原种培养过程中菌丝生长缓慢的问题；以柞木屑为主料，豆粕、麦麸、玉米粉为辅料，KH₂PO₄、石膏等为矿质元素的栽培能够使雷丸菌丝生长速度加快，大大缩短了生产周期；室内外栽培采用玉米秆和芭茅杆，廉价、易得，成本低，减少了对木质原料的需求，对生态环境具有保护作用；覆土栽培技术获得雷丸菌核，操作简便易行，产量高，降低了劳动成本，提高雷丸生产的经济效益。

Description

雷丸的人工栽培方法

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种雷丸的人工栽培方法。

背景技术

雷丸是白蘑科真菌雷丸(OmphalialapidescensSchroet.)的干燥菌核，与茯苓、猪苓并列为“三苓”。雷丸又称竹苓、雷实、雷矢、竹林子、朱铃芝、木莲子等，春、秋、冬皆可采收，但以秋季为多，选择枝叶枯黄的病竹，挖取根部菌核。其子实体的寿命很短，常见者为菌核。雷丸历来为野生，系统的人工栽培研究罕见报道，并且基于以下几点原因，导致雷丸人工栽培的现有技术不足以指导生产，①原种的制作使用大米作为培养基质，菌丝生长缓慢，且不容易观察菌丝生长情况及污染情况；②栽培种采用椴木屑与麦麸的比例为3：1，菌丝最高生长速度仅为1.8mm/d，生长速度过慢；③直接使用栽培种诱导形成菌核较慢，产量极低；④雷丸种源稀少，使用新鲜的小雷丸作为种源进行栽培，不利于扩大规模，且对木质原料需求量大，影响生态环境。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种雷丸的人工栽培方法，本发明所述方法解决了原种培养过程中菌丝生长缓慢的问题，提高了雷丸人工种植产量，降低了生产成本，有利于雷丸人工栽培的推广。

本发明采取的技术方案具体如下：

1、雷丸的人工栽培方法，包括如下步骤：

(1)原种制备

a.原种基质制备：将玉米粒水煮，过滤，按玉米粒的质量百分比计，加入1～3％的石膏，0.05～0.2％的MgSO₄和0.1～0.3％的KH₂PO₄，搅拌混匀，装入原种瓶中于121～126℃，103～115kPa灭菌1.5h，冷却；

b.接种：从母种试管中挑取雷丸菌种接入原种瓶内；

c.培养：将接种后的原种瓶于22～25℃条件下避光培养至雷丸菌丝长满原种瓶；

(2)栽培种制备

a.培养料制备：取柞木屑，按柞木屑重量百分比计，加入2～10％的麦麸、2～10％的玉米粉、0.5～2％的豆粕，1％的石膏，0.2％的KH₂PO₄和0.1％的MgSO₄，混匀后加水至培养料中含水质量分数达60～80％，拌匀；

b.装袋：按300g/袋计，将拌匀后的培养料装入料袋中；

c.灭菌：将料袋置于103-115kPa下121～126℃灭菌1.5h，或常压下100～105℃灭菌10～12h；

d.接种：从原种瓶中取2g雷丸菌种转入料袋内；

e.培养：将接种后的料袋于22～25℃条件下避光培养至雷丸菌丝长满料袋；

(3)室内或室外覆土栽培

室内覆土栽培步骤为：对培养室消毒后，地上铺以5～6cm厚砂土，然后铺盖玉米秆或芭茅杆，将培养好的栽培种保持原样取出，每平方米均匀排放8包栽培种，再将玉米杆或芭茅杆盖于其上，最后覆盖5～7cm厚的砂土，浇水，培养；

室外覆土栽培步骤为：首先进行消毒，然后铺盖玉米秆或者芭茅杆，将培养好的栽培种保持原样取出，每平方米均匀排放8包栽培种，然后将玉米杆或芭茅杆盖于其上，最后覆盖5～7cm厚的砂土，浇水，培养。

优选的，所述步骤(1)中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入1.5～2.5％的石膏，0.1～0.15％的MgSO₄和0.2～0.25％的KH₂PO₄。

优选的，所述步骤(1)中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入2％的石膏，0.1％的MgSO₄和0.2％的KH₂PO₄。

优选的，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木屑重量百分比计，加入4～8％的麦麸、2～5％的玉米粉、1～1.5％的豆粕、1％的石膏、0.2％的KH₂PO₄和0.1％的MgSO₄。

优选的，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木屑重量百分比计，加入6％的麦麸、5％的玉米粉、1％的豆粕、1％的石膏，0.2％的KH₂PO₄和0.1％的MgSO₄。

优选的，所述步骤(2)培养料制备中培养料含水量为68～72％。

优选的，所述步骤(3)中室内栽培时土壤使用含水量40～60％的粗颗粒河沙，室外培养时选择山坡下背阴且疏松透气的土壤作为栽培地。

优选的，所述步骤(3)中铺盖的玉米秆或芭茅杆长度为7-8cm。

优选的，所述步骤(3)中培养时通过浇水保持玉米杆或芭茅杆和砂土湿度在40～60％之间，温度在24～26℃之间。

本发明所用母种通过采集野生雷丸菌核经常规菌种培养方法获得。

本发明优选在每年3月份种植，7月份和11月份收获两次。

本发明的有益效果在于：(1)本发明采用玉米为主要原料制备雷丸原种，解决原种培养过程中菌丝生长缓慢的问题，且不易污染，易观察菌丝生长情况。(2)本发明以柞木屑为主料，豆粕、麦麸、玉米粉为辅料，KH₂PO₄、石膏等为矿质元素作为栽培种，使雷丸菌丝生长速度加快，大大缩短了生产周期，降低了生产成本。(3)本发明所用的栽培材料为玉米秆和芭茅杆，均廉价、易得，成本低，减少了对木质原料的需求，对森林和生态环境不会产生破坏作用，对生态环境保护具有一定意义。(4)本发明采用雷丸袋料菌种作为人工种植的菌种源，使用覆土栽培的方式获得雷丸菌核，操作简便易行，且产量高，大大降低了劳动力成本，提高雷丸生产的经济效益。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图：

图1大米原种培养基和玉米原种培养基培养效果对比图，其中A图为大米原种培养基培养，B图为玉米原种培养基培养；

图2栽培种培养基雷丸菌种培养效果，其中A图为实施例1中雷丸栽培种的培养，B图为实施例2中雷丸栽培种的培养；

图3室内覆土栽培图片；

图4用芭茅秆生产的雷丸图片；

图5收获的雷丸图片。

具体实施方式

下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

(一)原种制备

a.原种基质制备

选择无霉烂无虫蛀的玉米粒加水煮至胚乳存一线白心，过滤，按玉米粒的质量百分比计，加入2％的石膏，0.1％的MgSO₄，0.2％的KH₂PO₄，搅拌混匀，装入650mL原种瓶中，121℃、103-115kPa下灭菌1.5h，冷却至室温即得。

b.接种

接种需在洁净台上操作。接种前，接种室应进行紫外灯灭菌，先用75％酒精对双手及接种针消毒，接种针、试管口及棉塞都需用酒精灯火焰进行灭菌。选择生长旺盛、菌龄较短、菌丝层尚未出现色素分泌物的菌种进行接种，用接种针在母种试管中勾取1cm²大小的菌块转入原种瓶内。

c.培养

将接种后的原种瓶转移到避光的培养室于22～25℃温度条件下培养至雷丸菌丝长满原种瓶后即可。

(二)栽培种制备

a.称料：称取主料柞木屑，然后按柞木屑重量百分比计称取下列辅料：8％的麦麸，5％的玉米粉，1％的豆粕，1％的石膏，0.2％的KH₂PO₄，0.1％的MgSO₄。

b.拌料：将各料混匀后加入水至培养料中含水量达60％，拌匀。

c.装袋：将拌匀后的培养料按300g/袋装入12cm×25cm的聚丙烯折角袋中，边装边压，至紧实，松紧需均匀，最后在菌袋口部套上套环支撑，并盖上无棉盖。

d.灭菌：将料袋置于103-115kPa、121-126℃灭菌1.5小时，灭菌后自然冷却至室温。

e.接种：于超净工作台或经杀菌后的接种箱内接种，接种前用75％消毒酒精擦拭手、枪镊，再将枪镊置于酒精灯火焰上灼烧，冷却后从原种瓶里取雷丸菌种2g转入料袋内。

f.培养：将接种后的料袋转移到避光的培养室于22～25℃温度条件下培养至雷丸菌丝长满料袋后即可，结果见图2中A图。

(三)室内覆土栽培

室内栽培地如图3所示，将室内墙角、周边撒石灰消毒，以砂土铺地至砂土厚度5-6cm，铺盖玉米秆，将培养好的栽培种保持原样整体从菌种袋中取出，每平方米均匀排放8包栽培种，然后将玉米秆盖在上面，最后覆盖5-7cm厚的砂土，浇水培养，将土壤湿度控制在40％-60％，温度控制在24～26℃。

结果描述：原种32天即长满650mL菌种瓶，且菌丝洁白、浓密；栽培种接种3天左右可见新生菌丝从原种块长出，吃料快，气生菌丝浓密，菌丝日生长量达到7.44±0.42mm/d，37天长满整个料袋；室内栽种3个月每平方米即可收获1523g(干重)，收获的雷丸如图4所示，雷丸粒径可达4.5cm。

如果原种培养基采用大米制备，其结果见图1中A图，可见，与原种培养基采用玉米制备的B图结果相比，菌丝纤细、生长缓慢、分枝少，不易观察。

实施例2

(一)原种制备

a.原种基质制备

选择无霉烂无虫蛀的玉米粒加水煮至胚乳存一线白心，过滤，按玉米粒的质量百分比计加入1％的石膏，0.15％的MgSO₄，0.3％的KH₂PO₄，搅拌混匀，装入650mL原种瓶中，121℃、103-115kPa灭菌1.5h过滤，冷却至室温。

b.接种

接种需在洁净台上操作。接种前，接种室应进行紫外灯灭菌，先用75％酒精对双手及接种针消毒，接种针、试管口及棉塞都需用酒精灯火焰进行灭菌。选择生长旺盛、菌龄较短、菌丝层尚未出现色素分泌物的菌种进行接种，用接种针从母种试管中勾取1cm²大小的菌块转入原种瓶内。

c.培养：将接种后的原种瓶转移到避光的培养室于22～25℃温度条件下培养至雷丸菌丝长满原种瓶后即可。

(二)栽培种制备

a.称料：称取主料柞木屑，按柞木屑重量百分比称取以下辅料：麦麸6％、玉米粉5％、豆粕1％、石膏2％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.1％。

b.拌料：先将组分中的玉米粉、石膏、豆粕、MgSO₄、KH₂PO₄充分混匀，再转入麦麸中，充分混拌至匀，最后转至木屑中，混匀后加入水至培养料中含水量达68％，拌匀。

c.装袋：将拌匀后的培养料按300g/袋装入12cm×25cm聚乙烯或聚丙烯的折角袋中，边装边压，至紧实，松紧需均匀，最后在菌袋口部套上套环支撑，并盖上无棉盖。

e.接种：于超净工作台或经杀菌后的接种箱内接种，接种前用75％消毒酒精擦拭手、枪镊，再将枪镊置于酒精灯火焰上灼烧，冷却后从原种瓶里夹取雷丸菌种2g转入料袋内。

f.培养：将接种后的料袋转移到避光的培养室于22～25℃条件下培养至雷丸菌丝长满料袋后即可，结果见图2中B图。

(三)室外覆土栽培

整地，周边撒石灰，铺盖芭茅杆，将培养好的栽培种保持原样整体从菌种袋中取出，每平方米均匀排放8包栽培种，然后将芭茅杆盖在上面，最后在上面覆盖5-7cm厚的砂土，浇水培养，控制砂土湿度40％-60％，温度24～26℃。

结果描述：原种34天长满菌种瓶(650mL)，菌丝洁白、浓密；栽培种接种2天后，新生雷丸菌丝长入培养料内，长至料内后迅速多级分叉，致密，色白，36天左右菌丝即长满料袋。室外栽种3个月每平方米可收获1217g(干重)，图5为利用芭茅杆栽种获得的雷丸。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims

1.雷丸的人工栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)原种制备

b.接种：从母种试管中挑取雷丸菌种接入原种瓶内；

(2)栽培种制备

b.装袋：按300g/袋计，将拌匀后的培养料装入料袋中；

d.接种：从原种瓶中取2g雷丸菌种转入料袋内；

(3)室内或室外覆土栽培

2.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(1)中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入1.5～2.5％的石膏，0.1～0.15％的MgSO₄和0.2～0.25％的KH₂PO₄。

3.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(1)中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入2％的石膏，0.1％的MgSO₄和0.2％的KH₂PO₄。

4.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木屑重量百分比计，加入4～8％的麦麸、2～5％的玉米粉、1～1.5％的豆粕、1％的石膏、0.2％的KH₂PO₄和0.1％的MgSO₄。

5.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木屑重量百分比计，加入6％的麦麸、5％的玉米粉、1％的豆粕、1％的石膏，0.2％的KH₂PO₄和0.1％的MgSO₄。

6.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(2)培养料制备中培养料含水量为68～72％。

7.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中室内栽培时土壤使用含水量40～60％的粗颗粒河沙，室外培养时选择山坡下背阴且疏松透气的土壤作为栽培地。

8.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中铺盖的玉米秆或芭茅杆长度为7-8cm。

9.根据权利要求1所述雷丸的人工栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中培养时通过浇水保持玉米杆或芭茅杆和砂土湿度在40～60％之间，温度在24～26℃之间。