CN105125635A - 一种能增强免疫力的中药组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种能增强免疫力的中药组合物，它包含下列重量份成分：人参3份、丹参1份、西洋参5份。本发明还涉及所述中药组合物的医药用途。

Description

一种能增强免疫力的中药组合物及其用途

技术领域

本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种能增强免疫力的中药组合物及其用途。

背景技术

免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)，处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。人体内执行这一功能的系统是免疫系统。

免疫力低下的身体易于被感染或罹患癌症。免疫力超常也会产生对身体有害的结果，如引发过敏反应、自身免疫疾病等。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种能增强免疫力的中药组合物。

本发明的第一方面是提供了一种能增强免疫力的中药组合物，它包含下列重量份成分：人参3份、丹参1份、西洋参5份。

本发明的第二方面是提供了一种能增强免疫力的中药组合物，它包含下列重量份成分：人参提取物5份，丹参提取物4份，西洋参20份；

所述人参提取物可由如下方法制得：取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08(80℃)的清膏，干燥，粉碎；

所述丹参提取物可由如下方法制得：取丹参，粉碎成粗粉，加乙醇加热回流提取三次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.30～1.35(60℃)稠膏，用热水洗至洗液无色，干燥，粉碎。

在另一优选例中，所述中药组合物含有1.5％(重量)人参总皂苷(以人参皂苷Re计)和0.15％(重量)人参皂苷Rg₁。

本发明还提供了上述中药组合物在制备能增强免疫力的药物或保健品中的应用。

本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。

具体实施方式

本发明的问世部分是基于上海中医药大学刘平教授的处方：由人参(人参提取物)、丹参(丹参提取物)、西洋参三种成分制成的特定配方的复方中药组合物，可显著提高小鼠体内多种免疫细胞的活性。因此，本发明的中药组合物可用于制备提高人体免疫力的药物或保健品。

进而，本发明的第一方面是提供了一种能增强免疫力的中药组合物，它包含下列重量份成分：人参3份、丹参1份、西洋参5份。

本发明的第二方面是提供了一种能增强免疫力的中药组合物，它包含下列重量份成分：人参提取物5份，丹参提取物4份，西洋参20份；

所述人参提取物可由如下方法制得：取人参，切片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08(80℃)的清膏，干燥，粉碎；

所述丹参提取物可由如下方法制得：取丹参，粉碎，加乙醇加热回流提取三次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.30～1.35(60℃)稠膏，用热水洗至洗液无色，干燥，粉碎。

较优选地，所述中药组合物含有1.5％(重量)人参总皂苷(以人参皂苷Re计)和0.15％(重量)人参皂苷Rg₁。

本发明还提供了上述中药组合物在制备能增强免疫力的药物或保健品中的应用。

如本发明所用，亦如本领域的普通技术人员所公知：

西洋参：补气养阴，清热生津。既益气又养阴为君。

【性味与归经】甘、微苦，凉。归心、肺、肾经。

【功能与主治】补气养阴，清热生津。用于气虚阴亏，虚热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干。

人参：大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智。与西洋参协同作用而为臣。

【性味与归经】甘、微苦，微温。归脾、肺、心、肾经。

【功能与主治】大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智。用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，气血亏虚，久病虚赢，惊悸失眠，阳痿宫冷。

丹参：活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。为佐使。

【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。

【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛，脘腹胁痛，瘕瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛。

本发明的中药组合物可用本领域的常规方法制备获得，如将西洋参、人参、丹参等打粉及水煎浓缩，与适量的聚维酮K30、硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠等药用辅料一起粉碎、过筛、混合制得。上述三种中药材均可通过商业途径购买获得。

如本发明所用，本发明的中药组合物中使用的人参提取物和丹参提取物等亦均可分别通过本领域的常规方法制备获得，如取人参，切片，水煎，过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，再用乙醇洗脱，洗脱液浓缩成浸膏，干燥，粉碎；取丹参，粉碎，加乙醇加热回流提取，滤液减压浓缩成浸膏，干燥，粉碎。进而，再将处方量的西洋参打粉，将西洋参粉与处方量的人参提取物、丹参提取物混合，制得本发明的中药组合物。本发明所用的上述人参提取物和丹参提取物均符合《中华人民共和国药典》(2010年版)一部标准。其亦可通过商业途径从吉林省宏久生物科技股份有限公司、陕西天行健生物化工技术有限公司等处购买获得。

本发明的中药组合物可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本发明的中药组合物及可药用载体。较佳地，其含有0.1-99.9％重量百分比的作为活性成分的本发明的中药组合物。“可药用载体”不会破坏本发明的中药组合物的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。

所述可药用载体包括但不限于：软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸部分甘油酯混合物等。

其他常用的药物辅料如粘合剂(如微晶纤维素)、填充剂(如淀粉、葡萄糖、无水乳糖和乳糖珠粒)、崩解剂(如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁)以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释剂、润湿剂等。

本发明的中药组合物以及其药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服(肠道)制剂包括片剂、颗粒剂、口服液、胶囊、丸剂等，非肠道给药制剂包括注射液等。局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。

本发明的中药组合物及其药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道、阴道等。

本发明的中药组合物及其药物组合物的用量可根据给药途径、患者的年龄和体重、病症严重程度的不同而不同，其日剂量可以是0.001～100mg/kg，可以一次或多次给药。

除了制成药剂之外，亦可在本发明的中药组合物中加入抗氧化剂、色素、酶制剂等各种食品添加剂，按本领域的常规方法制成保健食品。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

实施例1

将西洋参500克、人参150克粉碎过80目筛，备用；另取人参150克、丹参100克，加10倍量水煮沸1小时，药液滤过，减压浓缩至相对密度1.10-1.15浸膏备用。将西洋参粉、人参粉加入到浸膏中，搅拌，加入适量的聚维酮K30、硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠等药用辅料按照本领域的常规方法混合、制粒、压片。共制得三参片800克，每片重0.95克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

实施例2

西洋参1500克、人参900克和丹参300克，按照实施例1所述的方法制得三参片2500克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

实施例3

西洋参2500克、人参1500克和丹参500克，按照实施例1所述的方法制得三参片4000克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

实施例4三参片增强免疫力功能试验。

一、材料与方法

1、三参片(按实施例1制备)：成人体重按照60kg计，每天推荐用量为3克。试验用量以临床剂量的5倍、10倍、30倍分别设为低剂量、中剂量和高剂量。

2、动物：清洁级ICR雌性小鼠。上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

3、实验数据统计方法：实验数据以SOSS软件进行但因素方差分析，经方差齐性经验，方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析，方差不齐的实验数据采用Tambane法进行统计分析。

4、实验方法：

动物按体重分为12组，每小组10只，以三参片为受试物，设高、中、低三个剂量组和蒸馏水对照组。小鼠每天按照20ml/kgBW连续灌胃30天后，分别进行以下试验：

4.1迟发型变态反应检测：小鼠腹部皮肤用电动剃毛刀进行脱毛处理，范围约3cmx3cm，后用DNFB溶液50ul均匀涂抹致敏，5天后，再用DNFB溶液10ul均匀涂抹于小鼠右耳两面进行攻击。24小时后颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右两耳，用打孔器取下直径8mm的耳片称重，计算左右耳的重量差异。结果见表一。

表一DTH测定结果(x±s)

注：*与对照组相比，P<0.05

4.2抗体生成细胞和血清溶血素测定

每鼠腹腔注射2％(V/V)SRBC悬液0.2ml进行免疫。5天后，摘除眼球采血做血清溶血素检测，并将动物颈椎脱臼处死，取脾脏进行抗体生成细胞检测。结果见表二、表三。

表二血清溶血素试验((x±s))

表三抗体生成细胞检测试验((x±s))

注：*与对照组相比，P<0.05

4.3ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性检测：

颈椎脱臼法处死小鼠，无菌取脾,于无菌Hanks液中制成细胞悬液，200目筛网过滤，制成单细胞悬液并分成两部分，分别用于ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性测定。

小鼠淋巴细胞转化实验。用Hanks液洗涤细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，人后将细胞悬液悬浮于1ml的完全培养液中，每孔1ml，一孔加75ulConA液，另一孔为对照，置培养箱中培养72h，培养结束前4h，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT50ul/孔，继续培养4h，培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙酮，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，人后分装到96孔培养板，每孔做3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。结果见表四。

表四三参片对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响((x±s))

注：*与对照组相比，P<0.05

小鼠NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法)。试验前24h将靶细胞传代培养，用前以Hanks液洗3次,用RPMI1640培养液调整细胞浓度为4x10⁵个/ml，用Hanks液洗涤脾细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，弃上清液将细胞浆弹起，加入0.5ml灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5ml2倍Hanks液及8mlHanks液，离心10min(1000r/min)，用1ml完全培养液重悬，用1％冰醋酸稀释后计数，台酚兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，调整细胞浓度为2x10⁷个/ml，取靶细胞和效应细胞各100ul(效靶比为50:1)，加入96孔培养板中；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100u、靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100ul，上述各项均设三个平行孔，于37度、5％CO2培养箱中培养4h，人后将培养板离心5min(1500r/min),每孔吸取上清液100ul置于96孔培养板中，同时加入LDH基质液100ul，反应3min，每孔加入1moL/L的HCL30ul，在酶标仪490nm处测定光密度值(OD)，计算NK细胞活性。结果见表五。

表五NK细胞活性测定((x±s))

注：*与对照组相比，P<0.05

5、实验结论：

5.1、样品高剂量组明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力和DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应；

5.2、样品高剂量明显升高小鼠抗体生成能力；

5.3、样品高剂量明显增强小鼠NK细胞活性。

实验结果证实：本发明的三参片具有增强免疫力的功能。

实施例5三参片拆方免疫功能实验研究

一、材料与方法

1、三参片：成人体重按照60kg计，每天推荐用量为3克。按照处方比例，分别形成以下药对：西洋参和人参组(三参片I)，西洋参和丹参组(三参片II)，人参和丹参组(三参片III)，阳性对照组三参片，阴性对照组蒸馏水。三参片以及三参片I、II、III组按照实施例1的方法制成，均以临床剂量的10倍量为受试剂量。

2、动物：清洁级ICR雌性小鼠。上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

3、统计方法：实验数据以SOSS软件进行但因素方差分析，经方差齐性经验，方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析，方差不齐的实验数据采用Tambane法进行统计分析。

4、实验方法：

动物按体重分为五组，每小组10只，以三参片拆分的三个组别为受试物，设三参片为阳性对照组和蒸馏水为阴性对照组。小鼠每天按照20ml/kgBW连续灌胃30天后，分别进行以下试验：

4.1、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验：

颈椎脱臼法处死小鼠，无菌取脾,于无菌Hanks液中制成细胞悬液,200目筛网过滤，制成单细胞悬液。用Hanks液洗涤细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，人后将细胞悬液悬浮于1ml的完全培养液中，每孔1ml，一孔加75ulConA液，另一孔为对照，置培养箱中培养72h，培养结束前4h，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT50ul/孔，继续培养4h，培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙酮，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，人后分装到96孔培养板，每孔做3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。结果见表一。

表一三参片拆方对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响((x±s))

注：**，与阴性对照组相比，P<0.01；*，与阴性对照组相比，P<0.05

4.2、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验和脏器/体重比值

小鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，吸出腹腔液制片，放置孵箱内37"C孵育30min.孵育结束后迅速用生理盐水将未贴壁细胞冲掉后晾干，用1:1丙酮甲醇溶液固定，Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，用蒸馏水冲洗干净，晾干，在油镜下阅片计数，计算吞噬率和吞噬指数。并解剖动物取出脾脏及胸腺，用滤纸吸干血迹后称重，计算胸腺指数和脾指数。

表二三参片拆方对小鼠胸腺指数、脾指数的影响

注：**，与阴性对照组相比，P<0.01；*，与阴性对照组相比，P<0.05

表三三参片拆方对巨噬细胞吞噬试验的影响

5、结论：

5.1、三参片组明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力，效果优于西洋参和人参组。人参和丹参组、西洋参和丹参组效果不明显。

5.2、三参片组明显增强小鼠胸腺和脾脏指数，效果优于西洋参和人参组。人参和丹参组、西洋参和丹参组效果不明显。

5.3、三参片组及各拆方组对巨噬细胞吞噬试验效果不明显。

实验结果证明：本发明的三参片三药合用，其增强免疫力功能优于各拆方组。

实施例6

西洋参100克打粉，过80目筛，备用；将西洋参粉与人参提取物25克(从吉林省宏久生物科技股份有限公司购买)、丹参提取物20克(从陕西天行健生物化工技术有限公司购买)混合，再加入适量的聚维酮K30、硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠等药用辅料按照本领域的常规方法混合、制粒、压片。共制得三参片800克，每片重0.95克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

实施例7

西洋参200克、人参提取物50克和丹参提取物40克，按照实施例1所述的方法制得三参片300克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

实施例8

西洋参300克、人参提取物75克和丹参提取物60克，按照实施例1所述的方法制得三参片450克。经检测，其中含人参总皂苷(以人参皂苷Re计)1.5％(重量)和人参皂苷Rg₁0.15％(重量)。

Claims (5)

1.一种能增强免疫力的中药组合物，其特征在于，它包含下列重量份成分：人参3份、丹参1份、西洋参5份。

2.一种能增强免疫力的中药组合物，其特征在于，它包含下列重量份成分：人参提取物5份，丹参提取物4份，西洋参20份；

所述人参提取物可由如下方法制得：取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08的清膏，干燥，粉碎；

所述丹参提取物可由如下方法制得：取丹参，粉碎成粗粉，加乙醇加热回流提取三次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.30～1.35稠膏，用热水洗至洗液无色，干燥，粉碎。

3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物含有1.5％(重量)人参总皂苷和0.15％(重量)人参皂苷Rg₁。

4.如权利要求1或2所述的中药组合物在制备能增强免疫力的药物或保健品中的应用。

5.如权利要求3所述的中药组合物在制备能增强免疫力的药物或保健品中的应用。