具体实施方式
下面结合附图和具体实施对本发明作进一步说明,以方便技术人员理解。
一种三七药物晚霜包括三七皂苷、丹参提取物、当归提取物、丙三醇、平平加、羊毛脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂、苦杏仁皂苷、泥泊金甲酯和水;各组分的质量百分比为:三七皂苷10-35份,丹参提取物5-25份、当归提取物5-25份、丙三醇1-10份、平平加1-5份、羊毛脂0.5-5份、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂0.5-4份、苦杏仁皂苷0.1-0.5份、泥泊金甲酯0.1-0.4份,余量为水。
所述的三七皂苷、丹参提取物、当归提取物、黄芩提取物、丙三醇、平平加、羊毛脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂、苦杏仁皂苷、泥泊金甲酯为市售的普通药品。
皮肤衰老是人体机体的自然发展规律。随着对皮肤衰老机理的深入研究,人们不断的研究和总结预防和延缓皮肤衰老的有效途径和方法。中草药因其独特机理和美容效果已被广泛应用于护肤类化妆品中。
三七皂苷具有抗氧化、清除自由基的功能。三七提取物能有效抑制脂质过氧化以及丙二醛的产生。提取物中的类黄酮可以提高细胞中抗氧化酶的生物活性,可以促进SOD 和GSH-PX 酶的合成,从而减少脂质过氧化,降低机体的耗氧量,提高机体对缺氧的耐受力。
丹参提取物丹参提取物具有活血化瘀、消炎排脓的作用,外用敷脸可改善黑斑及皮肤暗沉,对青春痘、疤痕组织也有作用。
苦杏仁皂苷所含的脂肪油可使皮肤角质层软化,润燥护肤,有保护神经末梢血管和组织器官的作用,并可抑杀细菌。此外,被酶水解所生成的HCN能够抑制体内的活性酪氨酸酶,消除色素沉着、雀斑、黑斑等,从而达到美容的效果。
当归50%醇提取液自由基清除率最高达到80.2%,铁离子络合率最高达到41.4%,酪氨酸酶抑制率最高达到25.1%。结论当归提取物具有较好的抗皮肤老化和美白双重功效,可用作美白和抗衰老化妆品的天然原料。当归提取物能扩张皮肤毛细血管,加快血液循环,同时,当归含丰富的微量元素,能营养皮肤,防止粗糙。可用于粉刺、褐斑、雀斑及脱发。
黄芩提取物具有广谱抗菌作用,适用于各种皮肤炎、粉刺痤疮、湿疹、面疱等,将这些药物与其他原料进行合理配比,能促进营养物质的吸收、有效治疗各种皮肤炎、粉刺痤疮、湿疹、面疱,使肌肤白里透红、娇艳怡人。
在所述的三七药物晚霜中三七皂苷、丹参提取物、当归提取物,彼此配合,联合作用,实现抗皮肤老化、提高肌肤美白能力,尤其是黄芩提取物的添加更增加了三七药物晚霜的抗菌效果,进一步扩大了三七药物晚霜的使用人群,提高了三七药物晚霜的实用性。
本研究主要通过体外实验,从自由基捕捉效应、络合亚铁离子能力及酪氨酸酶活性抑制三方面对三七药物晚霜抗皮肤老化与美白能力进行评估,并对体内实验结果进行检验和佐证。
(1)抗老化能力的测定
DPPH自由基清除能力测定DPPH为含有奇数电子的稳定自由基,本方法的原理是利用其甲醇溶液在517 nm可见光下具有极强的吸光度,但当其与任一自由基结合或被抗氧化剂还原时,其吸光度会下降;吸光度越低,表示样品清除DPPH的能力越强。
取0.2 ml萃取物、3.8 ml甲醇溶液与1 ml(DPPH)radical甲醇溶液(2×10-4mol/L),充分混和均匀,静置30 min后,以分光光度计测517 nm处吸光度,并以公式计算其自由基清除率。
自由基清除率(%)=[(Ac-As/Ac)]×100%
As:含有待测物的样品在517 nm处的吸光度;
Ac:不含待测物的样品在517 nm处的吸光度。
清除自由基效果自由基是生命活动过程中生物化学反应的中间产物。在正常情况下,机体内自由基的产生和清除处于动态平衡之中,但它若在体内产生过多或清除过慢,就会在分子水平、细胞水平以及器官水平给机体造成损伤,并可加快机体的衰老过程。与生命老化有关的生物自由基主要是一些含氧的自由基,如活性氧自由基(O2-·)、过氧化氢自由基(HO2·)、羟基自由基(·OH)等。抗氧化剂可提供质子给过氧化物自由基,因而能够抑制脂质自氧化的连锁反应。(DPPH·+AH(抗氧化剂)→DPPH+HA·)通常使用DPPH·(C18H12N6O5)来检验抗氧化剂提供质子的能力。DPPH·是一种很稳定的自由基,其甲醇溶液在517nm处有极强的吸光度,但当被氧化剂(AH)或自由基(R·)还原时,其吸光度会降低或消失。由此,可利用三七药物晚霜在517nm处的吸光度来判定样品是否有清除自由基的能力。
如图1所示:本实验利用不同浓度的乙醇萃取三七药物晚霜的有效成分,以Vit E做参照,利用在517nm处的吸光度来判定样品是否有清除自由基的能力。
由实验结果可知,三七药物晚霜的有效成分具有较高的清除自由基的能力,避免了自由基在体内产生过多或清除过慢,引起分子水平、细胞水平以及器官水平给机体造成损伤,从而延缓了机体的衰老过程。
(2)络合亚铁离子能力Fe2+通常为较好的促氧化剂,可以促使脂质氧化作用的进行。本方法利用Fe2+与Ferrozine(菲咯嗪)的复合物在562nm处有呈色反应,可测得样品对Fe2+的络合能力。当样品络合Fe2+会造成吸光度降低,吸光度越高表示络合能力越好。
取不同浓度的萃取液加入0.1 ml的FeCl2·4H2O(2mmol/L)30 s后再加入0.2 ml Ferrozine(5mmol/L),反应10min后,使用分光光度计检测吸光度,空白试验(Blank)以样品溶剂取代样品。
金属离子在自由基连锁反应中具有促进脂质氧化的作用,通常与Fenton 反应及Harber-Weiss 反应有关。络合剂没有抗氧化能力,但有一对未共用电子对,可与过渡金属(Fe2+,Cu2+)结合,因而能够减少氧化反应进行。萃取物中含有络合亚铁离子的成分,就可减少紫外线照射皮肤所引起的自由基生成反应。
如图2所示:本实验以纯水、50%乙醇、95%乙醇萃取三七药物晚霜的有效成分,以EDTA做参照,比较不同浓度的提取液络合亚铁离子的能力。见图2,三七药物晚霜的有效成分具有络合亚铁离子的能力;可减少紫外线照射皮肤所引起的自由基生成。
(3)美白有效性试验—三七药物晚霜对酪氨酸酶活性抑制的影响
三七药物晚霜有效成分的萃取物对抑制酪氨酸酶形成Dopaquinone的能力,并以维生素E(VitE)作对照组。取1 ml的中药萃取液,加入0.9 ml pH 6.8的缓冲液及1 ml 0.03%的酪氨酸溶液于试管中混和,并置于37℃的恒温槽中10 min,再加入0.1ml的酪氨酸酶(350units/ml)水溶液,将溶液混和均匀,置于恒温槽中反应25 min后,以紫外分光光度计测定475 nm时的吸光度。
由于酪氨酸酶分别作用于酪氨酸转化为DoPa和Dopaquinone两个过程,目前的皮肤美白剂就是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径,从而减少黑色素的生成达到美白皮肤的效果。
本实验以50%乙醇、95%乙醇萃取当归,以熊果苷做参照,在37℃、pH6.8的条件下反应30min比较不同浓度的提取液抑制酪氨酸酶活性能力。
如图3所示,三七药物晚霜的有效成分通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径,从而减少黑色素的生成达到美白皮肤的效果。
同时,苦杏仁皂苷的加入可使皮肤角质层软化,润燥护肤,加快了三七药物晚霜的有效成分的吸收和利用,黄芩提取物的添加更增加了三七药物晚霜的抗菌效果,进一步扩大了三七药物晚霜的使用人群,提高了三七药物晚霜的实用性。
鉴于上述分析,可以配制下列配方:
配方1:
一种三七药物晚霜包括三七皂苷、丹参提取物、当归提取物、丙三醇、平平加、羊毛脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂、苦杏仁皂苷、泥泊金甲酯和水;各组分的质量百分比为:三七皂苷35份,丹参提取物25份、当归提取物5份、丙三醇1份、平平加1份、羊毛脂0.5份、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂0.5份、苦杏仁皂苷0.1份、泥泊金甲酯0.1份,余量为水。
配方2:
一种三七药物晚霜包括三七皂苷、丹参提取物、当归提取物、丙三醇、平平加、羊毛脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂、苦杏仁皂苷、泥泊金甲酯和水;各组分的质量百分比为:三七皂苷10份,丹参提取物5份、当归提取物25份、丙三醇10份、平平加5份、羊毛脂5份、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂4份、苦杏仁皂苷0.5份、泥泊金甲酯0.4份,余量为水。
作为最佳配方一,所述的三七药物晚霜包括三七皂苷、丹参提取物、当归提取物、丙三醇、平平加、羊毛脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂、苦杏仁皂苷、泥泊金甲酯和水;各组分的质量百分比为:三七皂苷24份,丹参提取物15份、当归提取物15份、丙三醇7份、平平加5份、羊毛脂3份、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂3份、苦杏仁皂苷2份、泥泊金甲酯0.2份,余量为水。
作为最佳配方二,在三七药物晚霜中加入黄芩提取物,其中,各组分的质量百分比为:三七皂苷24份,丹参提取物10份、黄芩提取物10份、当归提取物10份、丙三醇7份、平平加5份、羊毛脂3份、聚氧乙烯山梨糖醇酐油酸脂3份、苦杏仁皂苷2份、泥泊金甲酯0.2份,余量为水。
其中,利用三七提取三七皂苷,可以采用超声波提取、乙醇回流法提取、纤维素酶酶解法提取、果胶酶酶解法提取、α-淀粉酶酶解法提取、复合酶酶解法提取和半仿生-α-淀粉酶酶解提取法。
利用丹参提取丹参提取物,首先将丹参粉碎成粗粉,加乙醇加热回流提取三次,滤过,合并滤液,减压回收乙醇并在60°C温度下,浓缩成相对密度为1.30-1.35稠膏,用热水洗至洗液无色,在80°C温度下进行干燥,粉碎成细粉,制成丹参提取物备用。
利用当归提取当归提取物,采用水提法,将当归100 g破碎,在80℃的温度下进行烘干,然后粉碎,过40目筛子;再用双蒸水分3次进行浸提,3次加水量分别是当归重的10,6,4倍;每次浸提温度为100℃,时间30 min;合并3次浸提液,采用1 500 r/min离心机进行离心处理30 min,然后进行滤液处理,再次采用10 000 r/min离心机进行离心处理15 min,再次进行滤液处理,最后经过旋转蒸发获得当归提取物浓缩液。
利用杏仁提取苦杏仁皂苷,首先,将苦杏仁进行干燥,使所述苦杏仁的水分活度为0.10-0.70;然后,粉碎至10目-120目;在保持水分活度不变的条件下,提取苦杏仁油;用质量百分浓度为50%-95%的乙醇水溶液对苦杏仁粕进行分离提取,得到苦杏仁皂苷和苦杏仁蛋白。
在最佳配方中,利用黄芩提取黄芩提取物可以采用传统的水提酸沉法和醇提酸沉法,作为最佳方法采用超声提取法。
本发明以珍贵药材三七为主要原料,提取三七中的三七皂苷成分,加入丹参提取物、苦杏仁皂苷、当归提取物;其中,三七皂苷可以降低机体的耗氧量,提高机体对缺氧的耐受力;丹参提取物具有活血化瘀、消炎排脓的作用,外用敷脸可改善黑斑及皮肤暗沉,对青春痘、疤痕组织也有作用;苦杏仁皂苷所含的脂肪油可使皮肤角质层软化,润燥护肤,有保护神经末梢血管和组织器官的作用,并可抑杀细菌。此外,被酶水解所生成的HCN能够抑制体内的活性酪氨酸酶,消除色素沉着、雀斑、黑斑等,从而达到美容的效果;当归提取物能扩张皮肤毛细血管,加快血液循环,同时,当归含丰富的微量元素,能营养皮肤,防止粗糙。可用于粉刺、褐斑、雀斑及脱发;尤其是,黄芩提取物具有广谱抗菌作用,适用于各种皮肤炎、粉刺痤疮、湿疹、面疱等,将这些药物与其他原料进行合理配比,能促进营养物质的吸收、有效治疗各种皮肤炎、粉刺痤疮、湿疹、面疱,使肌肤白里透红、娇艳怡人。
本发明通过实施例进行说明的内容,在不脱离本发明范围的情况下,还可以对本发明专利进行各种变换及等同代替,因此,本发明专利不局限于所公开的具体实施过程,而应当包括落入本发明专利权利要求范围内的全部实施方案。