CN105104197A - 一种滇桂石斛组织培养繁育方法 - Google Patents
一种滇桂石斛组织培养繁育方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105104197A CN105104197A CN201510518070.0A CN201510518070A CN105104197A CN 105104197 A CN105104197 A CN 105104197A CN 201510518070 A CN201510518070 A CN 201510518070A CN 105104197 A CN105104197 A CN 105104197A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- explant
- medium
- guangxiense
- dendrobium
- yunnan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
一种滇桂石斛组织培养繁育方法，包括如下步骤：(1)取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽。采用本发明所述的培养方法得到的滇桂石斛丛生芽增殖系数达到25-30倍，能够在短时间内提供成活率高的滇桂石斛优质种苗，有效解决滇桂石斛的规模化育苗问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种滇桂石斛组织培养繁育方法。
背景技术
滇桂石斛(DendrobiumguangxienseS.J.ChengetC.Z.Tang)，为兰科石斛属多年生植物，国家二级保护植物。生于海拔约1200米的石灰山岩石上或树干上。产于中国广西、贵州西南和云南东南部。滇桂石斛的茎紫色而柔软，是加工紫皮枫斗的主要原料之一，具有较高的药用价值，同时滇桂石斛花唇瓣上有紫红色斑块，具有很高的观赏价值。
目前滇桂石斛已经有人工栽培，主要通过分株繁育或扦插方式繁殖，但所需时间很长，繁殖倍率低，生产上难以实现大面积栽培。虽然滇桂石斛也有种子，但种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才能促进种子萌发生长，且发芽率非常低，通过种子繁育也无法满足生产需要。
发明内容
本发明的目的是提供一种滇桂石斛组织培养繁育方法，能够有效快速地提高滇桂石斛种苗的繁殖速度和质量，实现滇桂石斛优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。
本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种滇桂石斛组织培养繁育方法，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加2.0-3.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.5-4.0mg/L的萘乙酸NAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
本发明的突出优点在于：
(1)采用生物技术对滇桂石斛进行组织培养快速繁殖，通过滇桂石斛丛生芽的繁殖，能够在短时间内培育出大量适合栽培种植的滇桂石斛幼苗，保障滇桂石斛种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
(2)采用本发明所述的培养方法得到的滇桂石斛丛生芽增殖系数达到25-30倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。
实施例1
本发明所述的滇桂石斛的组织培养快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.5mg/L的萘乙酸NAA、1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为24.8。
实施例2
本发明所述的滇桂石斛的组织培养快速繁殖方法的另一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基添加含3.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、4.0mg/L的萘乙酸NAA、0.1mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为28.6。
实施例3
本发明所述的滇桂石斛的组织培养快速繁殖方法的再一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加2.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、3.0mg/L的萘乙酸NAA、0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为27.3。
实施例4
本发明所述的滇桂石斛的组织培养快速繁殖方法的又一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加3.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、3.0mg/L的萘乙酸NAA、0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为30.2。
Claims (1)
1.一种滇桂石斛组织培养繁育方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取滇桂石斛健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，剥去外层包叶后，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于解剖镜下，剥去0.2-0.3mm的茎尖分生组织，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.5-3.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、1.0-4.0mg/L的萘乙酸NAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510518070.0A CN105104197A (zh) | 2015-08-21 | 2015-08-21 | 一种滇桂石斛组织培养繁育方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510518070.0A CN105104197A (zh) | 2015-08-21 | 2015-08-21 | 一种滇桂石斛组织培养繁育方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105104197A true CN105104197A (zh) | 2015-12-02 |
Family
ID=54652543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510518070.0A Pending CN105104197A (zh) | 2015-08-21 | 2015-08-21 | 一种滇桂石斛组织培养繁育方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105104197A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105532473A (zh) * | 2016-01-28 | 2016-05-04 | 遵义医学院 | 一种金钗石斛种苗的组培方法 |
| CN105660413A (zh) * | 2016-02-29 | 2016-06-15 | 广西壮族自治区药用植物园 | 一种大苞水竹叶的组织培养快速繁殖方法 |
-
2015
- 2015-08-21 CN CN201510518070.0A patent/CN105104197A/zh active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 徐桂萍等: "黄草石斛的组培和快速繁殖", 《烟台教育学院学报》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105532473A (zh) * | 2016-01-28 | 2016-05-04 | 遵义医学院 | 一种金钗石斛种苗的组培方法 |
| CN105660413A (zh) * | 2016-02-29 | 2016-06-15 | 广西壮族自治区药用植物园 | 一种大苞水竹叶的组织培养快速繁殖方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102301951B (zh) | 一种广豆根组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103734014B (zh) | 一种地枫皮的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103202229B (zh) | 一种绿花重瓣铁线莲组织培养快繁方法 | |
| CN104106468B (zh) | 一种五指毛桃的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102613076A (zh) | 一种蝴蝶兰的无性繁殖方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN104067939A (zh) | 一种龙胆的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104126506A (zh) | 一种美国红火箭紫薇的组织培养方法 | |
| CN104472365B (zh) | 富贵榕组培快繁育苗方法 | |
| CN105028206A (zh) | 一种海南石斛组织培养繁育方法 | |
| CN104488723A (zh) | 一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法 | |
| CN106577291A (zh) | 直立百部愈伤组织高效诱导成苗的方法 | |
| CN104488722B (zh) | 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103548695B (zh) | 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104082145B (zh) | 一种翅柄铁线蕨快速繁殖的方法 | |
| CN105104200B (zh) | 一种合柱金莲木的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104488721B (zh) | 一种雪花草的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN105104197A (zh) | 一种滇桂石斛组织培养繁育方法 | |
| CN110024688A (zh) | 一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法及其培养基 | |
| CN106069774B (zh) | 一种麻竹茎端诱导愈伤组织并获得再生植株的方法 | |
| CN112616675B (zh) | 一种舞花姜组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104396756A (zh) | 一种狐尾兰芽尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN105104198A (zh) | 一种檀香石斛组织培养繁育方法 | |
| CN107568063B (zh) | 一种油料植物白檀组培快繁方法 | |
| CN103651119A (zh) | 一种江蓠愈伤组织的诱导方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20151202 |