CN105085699A - 一种泥鳅分泌多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种泥鳅分泌多糖的提取方法,包括以下步骤:分泌液收集浓缩;醇沉;酶解;萃取;透析;冻干。本发明方法提取的泥鳅多糖,在抗肿瘤、防衰老、抗炎症、降血脂等方面发挥作用,可广泛应用于食品、医药、保健品等领域,应用前景广阔。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体是一种泥鳅分泌多糖的提取方法。
背景技术
泥鳅具有很高的营养价值。泥鳅的可食部含水分83%,蛋白质9.6%,脂肪3.7%,碳水化合物2.5%,灰分1.2%;又含钙280mg/kg,磷720mg/kg,铁9mg/kg。肉的脂肪中,含不饱和的二十二碳六烯脂肪酸1.3-2.5%,显著量的十八碳三烯脂肪酸和二十二碳五烯脂肪酸等。全体100克中含维生素A70IU,维生素A原90IU,维生素B30ug,维生素B2440μg,尼克酸4.0mg。
泥鳅的药用价值也很高。泥鳅全体或皮肤分泌的滑液入药,甘、平、无毒。其主要功效为补中益气、醒酒止渴、健脾和胃、清热解毒、祛湿邪,治消渴、水肿黄疽、痔疾、阳痰等症。民间常用其粘液治痈肿、中耳炎,用活泥鳅捣碎外敷治疗乳癌、骨髓炎等,疗效显著,近代用于治疗传染性肝炎和消渴病。泥鳅的营养价值很高,对许多疾病确有疗效,但目前关于泥鳅药用的有效成分(或部位)以及用现代方法对泥鳅进行炮制加工和药理观察的探讨较少。
泥鳅多糖具有很好的抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、抗病毒,降血糖、降血脂等功效,其提取方法报道较少。
发明内容
本发明的目的是,从传统中医药角度出发,采用现代提取工艺技术,提取泥鳅的分泌多糖。
本发明所采用的技术方案是:
本发明所提供的一种泥鳅分泌多糖的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将鲜活泥鳅用蒸馏水浸养,每隔24h过滤一次,收集滤液,将滤液真空浓缩至原体积的1/4后,加入4倍无水乙醇,至终浓度为60%,静置过夜;
(2)将沉淀用用无水乙醇洗涤2-3次,用少量蒸馏水将沉淀溶解,至沉淀浓度为4%,加入6%复合酶水解蛋白等杂质成分,40℃温浴1h,在沸水浴中保温20min,进行酶灭活;
(3)加入savge溶液,在温度为5℃,转速为10000r/min的条件下,离心5min,去除沉淀,收集上清,加萃取剂萃取,去除游离蛋白质后,取水相;
(4)水相装入截留分子量为8000-10000的透析袋中,流水透析2~3天。将透析后透析袋内的溶液经冷冻干燥得白色絮状粉末,即为提取得到的泥鳅分泌多糖。
上述的一种泥鳅分泌多糖的提取方法步骤(2)中复合酶由木瓜蛋白酶:中性蛋白酶=1:1配制而成;步骤(3)中萃取剂由氯仿-正丁醇=1∶4配制而成。
本发明方法提取的泥鳅多糖,可广泛应用于食品、医药、保健品等领域。
具体实施方式:
实施例l:
(1)称取新鲜活泥鳅500克,用蒸馏水浸养,每隔24h过滤一次,收集滤液,将滤液真空浓缩至原体积的1/4后,加入4倍无水乙醇,至终浓度为60%,静置过夜;
(2)将沉淀用用无水乙醇洗涤2-3次,用少量蒸馏水将沉淀溶解,至沉淀浓度为4%,加入6%复合酶(木瓜蛋白酶:中性蛋白酶=1:1),40℃温浴1h,在沸水浴中保温20min,进行酶灭活;
(3)加入savge溶液,在温度为5℃,转速为10000r/min的条件下,离心5min,去除沉淀,收集上清,加萃取剂(氯仿-正丁醇=1∶4)萃取,去除游离蛋白质后,取水相;
(4)水相装入截留分子量为8000-10000的透析袋中,流水透析2~3天。将透析后透析袋内的溶液经冷冻干燥得白色絮状粉末464mg,即为提取得到的泥鳅分泌多糖。
样品均在199nm处出现多糖特征吸收峰,在260nm处无蛋白吸收峰。说明提取得到的泥鳅多糖中无蛋白质和核酸等杂质成分。
实施例2:
(1)称取新鲜活泥鳅1000克,用蒸馏水浸养,每隔24h过滤一次,收集滤液,将滤液真空浓缩至原体积的1/4后,加入4倍无水乙醇,至终浓度为60%,静置过夜;
(2)将沉淀用用无水乙醇洗涤2-3次,用少量蒸馏水将沉淀溶解,至沉淀浓度为4%,加入6%复合酶(木瓜蛋白酶:中性蛋白酶=1:1),40℃温浴1h,在沸水浴中保温20min,进行酶灭活;
(3)加入savge溶液,在温度为5℃,转速为10000r/min的条件下,离心5min,去除沉淀,收集上清,加萃取剂(氯仿-正丁醇=1∶4)萃取,去除游离蛋白质后,取水相;
(4)水相装入截留分子量为8000-10000的透析袋中,流水透析2~3天。将透析后透析袋内的溶液经冷冻干燥得白色絮状粉末939mg,即为提取得到的泥鳅分泌多糖。
样品均在199nm处出现多糖特征吸收峰,在260nm处无蛋白吸收峰。说明提取得到的泥鳅多糖中无蛋白质和核酸等杂质成分。
Claims (6)
1.一种泥鳅分泌多糖的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将鲜活泥鳅用蒸馏水浸养,每隔24h过滤一次,收集滤液,将滤液真空浓缩至原体积的1/4后,加入4倍无水乙醇,至终浓度为60%,静置过夜;
(2)将沉淀用用无水乙醇洗涤2-3次,用少量蒸馏水将沉淀溶解,至沉淀浓度为4%,加入6%复合酶水解蛋白等杂质成分,40℃温浴1h,在沸水浴中保温20min,进行酶灭活;
(3)加入savge溶液,在温度为5℃,转速为10000r/min的条件下,离心5min,去除沉淀,收集上清,加萃取剂萃取,去除游离蛋白质后,取水相;
(4)水相装入截留分子量为8000-10000的透析袋中,流水透析2~3天。
2.将透析后透析袋内的溶液经冷冻干燥得白色絮状粉末,即为提取得到的泥鳅分泌多糖。
3.如权利要求1所述的一种泥鳅分泌多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中复合酶是:由木瓜蛋白酶:中性蛋白酶=1:1配制而成。
4.如权利要求1所述的一种泥鳅分泌多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤(5)中萃取剂是:由氯仿-正丁醇=1∶4配制而成。
5.如权利要求1~3任一项所述的一种泥鳅分泌多糖的提取方法得到的泥鳅多糖。
6.一种如权利要求4所述的泥鳅多糖的用途,其特征在于,可广泛应用于食品、医药、保健品等领域。
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CN107929209A (zh) * | 2017-12-23 | 2018-04-20 | 卞国民 | 一种泥鳅面膜用的精华液 |
CN109045062A (zh) * | 2018-10-18 | 2018-12-21 | 深圳市生命谷生命科技研究院 | 泥鳅多糖作为药物治疗或预防乙肝的用途 |
CN109223821A (zh) * | 2018-10-18 | 2019-01-18 | 深圳市生命谷生命科技研究院 | 泥鳅多糖作为治疗免疫缺陷的药物或保健食品的用途 |
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