CN107929209A - 一种泥鳅面膜用的精华液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开的一种泥鳅面膜用的精华液,涉及食品加工技术领域,是由下列重量份的原料制备而成:水85‑90、水解蚕丝蛋白0.5‑1.5、丙二醇8‑12、甘草酸二钾0.08‑0.12、生育酚0.1‑0.3、羟乙基纤维素0.1‑0.3、黄原胶0.1‑0.3、三乙醇胺0.08‑0.12、卡波姆0.08‑0.12、透明质酸钠(HA)0.08‑0.12、羟苯甲酯0.1‑0.3、PEG‑40氢化蓖麻油0.3‑0.7、泥鳅多糖0.08‑0.12。具有补水、保湿、抗菌消炎、祛斑、祛皱、滋养、修护、抗衰等功效,应用本发明的泥鳅面膜用的精华液制作的泥鳅面膜,适合于各个年龄层次的人群使用。
Description
技术领域
本发明涉及护肤技术领域,特别是一种泥鳅面膜用的精华液。
背景技术
面膜用的精华液是护肤品中之极品,成分精致、功效强大、效果显著,它的作用有防衰老、抗皱、保湿、美白、去斑等等。
中国专利(专利申请号为201410628550.8)公开的“一种含有泥鳅滑液的面膜制备方法”,包括下列步骤,(1)、选择鲜活的泥鳅10~20只,放置清水中饥饿1~2天,将经过饥饿后的泥鳅洗净放置在干净的水盆中,放入白砂糖10~20g,充分搅拌,待泥鳅死亡后放入20~30ml白醋,将泥鳅吐出的泥鳅滑液去除并收集泥鳅滑液;(2)、向泥鳅滑液中添加牛奶10~20ml、柠檬汁10~20ml,并充分均匀搅拌得到混合液;(3)、用干净的棉片或者棉布片浸泡在步骤(2)得到的混合液中10~15分钟,取出棉片或者棉布片即为制作好的面膜。该发明制备的面膜美容效果好,具有抗晒,防衰老,祛痘,去死皮使得皮肤细嫩光滑,无色斑。
另一中国专利(专利申请号为201610495475.1)公开的“一种祛痘面膜”,按重量份,包括以下原料:泥鳅滑液4~6、中药提取物1~2、甘油3~5、橄榄油0.3~0.5、月见草油1~1.5、透明质酸钠6~8、黄原胶1.5~2.5、水20~25;所述中药提取物是以金银花、菊花、蒲公英、白芍和甘草为原料,经水提、浓缩处理所得。本发明以泥鳅滑液为主要原料,并配以金银花、菊花、蒲公英等中草药,制成一款具有免洗祛痘面膜,其具有清热解毒、散风清热、消肿散结、养血调经等功效,对面部痤疮具有非常好的治疗效果,该发明对痤疮的疗效显著,治愈率可达73%,总有效率在98%以上。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有补水、保湿、抗菌消炎、祛斑、祛皱、滋养、修护、抗衰等功效的面膜用的精华液。
本发明所采取的技术方案是发明一种泥鳅面膜用的精华液,是由下列重量份的原料制备而成:
其优化的技术方案一是由下列重量份的原料制备而成:
其优化的技术方案二是由下列重量份的原料制备而成:
其优化的技术方案三是由下列重量份的原料制备而成:
本发明的泥鳅面膜用的精华液,制备方法是:将上述原料混合均匀,即成为泥鳅面膜用的精华液。
所述的泥鳅多糖是市售的,也可以是由以下步骤制备而成:
⑴、清肠:
用水和郁李仁按4-6:1的重量比例熬水,先猛火后文火熬至液体体积降为50%时取滤液,再按1kg滤液加入8000毫克维生素C,配置成清肠原液;再将水与清肠原液按40-60:1的重量比例配制成清肠液,然后,将清肠液加入到泥鳅暂养清洗池中,经过2-5h的清肠,捞出经过清肠的泥鳅;
⑵、粘液收集:
把经过清肠的泥鳅倒入筛筐中,筛筐下放置收集液体的容器,泥鳅相叠厚度为25-35㎝,用喷雾器将体积浓度为20-40%的酒精按0.3-0.7ml/min·㎝2的比例喷洒于筐中泥鳅体上,间隔8-12min喷相等量的水;每30min重复一次,持续120min;收集容器中的粘液溶液;
⑶、粘液浓缩:
将收集到的粘液溶液用滤布过滤,去掉杂质,再用80℃以下蒸馏浓缩手段,去掉60%的水分,得粘液浓缩液;
⑷、提纯:将粘液浓缩液按1:4的重量比例加入无水乙醇,摇均后静置4小时,再用高速离心机离心,倒出上清液,得沉淀一;再将上清液用无水乙醇处理2次,抽滤,得沉淀二;将沉淀一和沉淀二合并,用无水乙醇洗两次,得醇洗沉淀;再将醇洗沉淀用氯仿萃取2次,得滤渣,然后,将滤渣在60℃下真空干燥,即得泥鳅多糖。
所述的透明质酸钠(HA)是市售的,也可以是由以下步骤制备而成:
⑴、培养基制备:
将泥鳅清洗干净,加热到80-85℃,保温30-40min取出,再用蒸馏水洗净并处理成泥鳅碎料;再将泥鳅碎料与蒸馏水按1g:2.2-2.8ml的比例混合成泥鳅混合碎料,然后将泥鳅混合碎料置于水浴中,加温到40-50℃,保温2h;接着冷却到38-40℃,再用1mol/L的盐酸调节pH值至2.0-2.1,再按25-35g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温反应2h;再加热到42-48℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按2.5-3.5g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2-2.5h;然后加热到60℃,保持8-12min,然后降温至45℃以下,滤除残渣,收集滤液;再向滤液中加入占其重量0.1%的葡萄糖,用lmol/L的盐酸调节pH值至7.0,即为培养基;
⑵、菌体培养:
将兽疫链球菌菌种2环装入50ml三角瓶中,摇均,在36℃恒温条件下培养15-20h,然后,接入装有培养基的玻璃缸中,接种量为8-12%,摇均,在36℃恒温条件下培养18-22h;再用15瓦的紫外线灯、照射距离30厘米,放入磁力自动搅拌棒,边搅拌边照射30min,得菌体液;再将由1mg亚硝基胍(NTG)加入到0.1mol/L、pH值6.0的磷酸缓冲液1ml中配成的溶液:4ml菌体液的比例混合在一起,充分摇均,立即置于37℃水浴震荡处理30min,然后离心,去掉上清液,收集菌体,再用蒸馏水洗涤菌体3次,得菌体;再将菌体:重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液按1g:1000ml的比例稀释,然后,接种到装有培养基的发酵罐中,接种量为0.5-1.5%,控制pH值为6.8,发酵时间为30-40h,供氧分段控制,0~24h供氧为0.3-0.7L/min,24h后供氧为1.2-1.8L/min,温度控制在36℃;同时,每隔8h向发酵罐内添加占发酵罐内液体总重量的1%、重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液;发酵完成后,即为发酵液;
⑶、透明质酸钠(HA)提取:
①、分解蛋白与杀菌:
向发酵液中加入1mol/L的盐酸调节pH值至2.0-2.1,再按25-35g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温36℃反应2h;再加热到42-48℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按2.5-3.5g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2-2.5h,得杀菌分解蛋白发酵液;
②、一次沉淀和解离:
按照8000mL/kg的比例向杀菌分解蛋白发酵液中加入蒸馏水,再加入2%(w/v)硅藻土过滤,取澄清滤液;再按15g/kg的比例向澄清滤液中加入氯代十六烷基吡啶(CPC),搅拌30min以上,静置、沉淀,用绢丝收集沉淀;再向沉淀中按照5000-10000ml/kg的比例加入解离液,搅拌至完全解离,得沉淀解离液;再向沉淀解离液中加入2%(W/v)硅藻土,过滤,取澄清的一次沉淀解离液;
③、二次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向一次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得二次沉淀;再按照4000mL/kg的比例向二次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得二次沉淀解离液;
④、三次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向二次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得三次沉淀;再按照3000mL/kg的比例向三次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得三次沉淀解离液;
⑤、提取:
向三次沉淀解离液中加2倍体积、体积浓度为95%的乙醇,边加边搅拌30min,静置,收集白色沉淀,再用无水乙醇脱水3次,干燥,即得透明质酸钠(HA)。
泥鳅粘液在《本草纲目》中称为泥鳅滑液,具有利尿通淋;解毒消肿功效。主治小便不通、热淋、痈疽、丹毒、疔肿、腮腺炎、中耳炎、烧伤、漆疮等。其中痈疽、丹毒、疔肿、烧伤、漆疮皆为皮肤创伤性伤病,说明泥鳅粘液对皮肤具有非常好的保护和促进再生修复作用,因而,其在护肤品开发上具有极高的利用价值。
由于泥鳅粘液的稀缺和加工难度及加工中会产生活性成分破坏流失的特殊性,直接收集用于护肤化妆品市场的可行性不高,但通过对其成分的分析研究,提取有效成份,再结合仿生泥鳅粘液功能和加入其他功能性成分,即可制成对皮肤有保护作用的泥鳅面膜用的精华液。
泥鳅粘液成分分析:泥鳅(体表)粘液为无色透明溶胶状物质,pH值为6.0,呈弱酸性,主要成分是水(>99%),泥鳅粘液中的非水主要成分是占比0.53%的干物质,其中脂肪和氨基酸大约各占20%,蛋白质约占50%,而多糖约占10%。泥鳅粘液中的脂肪多为极性较大的磷脂,类似于表面活性剂。卵磷脂的临界胶束浓度约为0.0325%,泥鳅粘液中的脂肪含量已远超该值。因卵磷脂胶束表面不带电荷,胶束之间易发生聚集而呈白色乳液状。而泥鳅粘液呈无色透明的溶液,这可能是由于泥鳅粘液中的脂肪类物质与水溶性好的多糖发生了相互作用甚至结合。泥鳅多糖(Misgurnusanguillicaudatuspolysaccharides,MAP)是从泥鳅粘液中提取的游离中性多糖。从泥鳅粘液中分离提取的中性粗多糖,用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪上分离和测定,结果表明该多糖由1个高聚糖(MAP,19.1%)和1个寡糖(MAO,80.9%)组成。相关文献初步证明泥鳅多糖具有一定的生物活性,如抗氧化、免疫调节、清除氧自由基等,在抗癌防衰、抗炎护肝、降糖除脂、防治心脑血管疾病方面将会发挥积极的作用。交叉吸附实验表明泥鳅粘液提取物中还含有非血型专一性的凝集素,其他成分还有泥鳅素,是一种具有5个精氨酸残基和4个赖氨酸残基的强碱性多肽,对广谱微生物表现出很强的抗菌活性。以及还有超氧化物歧化酶、牛磺酸、透明质酸等重要成分。
基于上述分析,本发明的泥鳅面膜用的精华液,通过提取泥鳅粘液的有效成份,再结合仿生泥鳅粘液功能和加入其他功能性成分,从而制成对皮肤有保护作用的泥鳅面膜用的精华液。本发明的泥鳅面膜用的精华液,所采用的主要原料包括:水(纯净水或蒸馏水或去离子水)、水解蚕丝蛋白、丙二醇、甘草酸二钾、生育酚、羟乙基纤维素、黄原胶、三乙醇胺、卡波姆、透明质酸钠(HA)、羟苯甲酯、PEG-40氢化蓖麻油和泥鳅多糖。
水解蚕丝蛋白:可以保护肌肤免于失水干燥,并且可赋予肌肤柔滑感,仿生泥鳅粘液中的蛋白质成分,能疾速渗透肌肤真皮层;同时可有效抑止黑色素生成,淡化色素,促进胶原蛋白合成,活化细胞,提高细胞的免疫力,促进肌肤的新陈代谢率,达到提亮美白肌肤的作用。
丙二醇:仿生泥鳅粘液中脂肪的功能。丙二醇在室温下是一种透明、无色、完全溶解于水的多元醇类,具有黏性及吸湿性的直链脂肪醇液体,主要做为溶剂、吸水保湿剂、防腐剂、助渗剂及角质软化溶解剂的作用。
甘草酸二钾:仿生泥鳅素的抑菌消炎作用。是从甘草里面提取物来的,是一种衍生物。甘草酸二钾是一种白色或类白色细粉末,纯度达98%,有特殊甜味,水溶好、口感纯。甘草酸二钾具有抑菌、消炎、解毒、抗敏、除臭等多种功效。在医药、化妆品日化、食品等行业有广泛的应用。
生育酚[即:维生素E(VitaminE)]:仿生泥鳅粘液中的超氧化物歧化酶。是一种脂溶性维生素,又称生育酚,是最主要的抗氧化剂之一,具有抗氧化,延缓衰老,提高生育能力的功效。我们选用的天然维生素E生物活性是合成维生素E的数十倍,极易被人体吸收,进入人体后发挥作用快;抗氧化能力强于合成品百倍;安全性高,无任何毒副作用。维生素E在人体内不能自我合成,但又参与人体的正常代谢,所以必须进行体外补充。在西方国家,服用天然VE已成为习惯,被称为“第四餐”。
羟乙基纤维素:仿生泥鳅粘液细胞间质成分。羟乙基纤维素(HEC)是一种白色或淡黄色,无味、无毒的纤维状或粉末状固体,属非离子型可溶纤维素醚类。具有良好的增稠、悬浮、分散、乳化、粘合、成膜、保护水分和提供保护胶体等特性,是泥鳅面膜精华液保持性状稳定的重要物质。
黄原胶:仿生和增强泥鳅粘液多糖功能。黄原胶又称黄胶、汉生胶,黄单胞多糖,是一种由假黄单胞菌属发酵产生的单孢多糖,由于它的大分子特殊结构和胶体特性,而具有多种功能,广泛应用于国民经济各领域。黄原胶被誉为“工业味精”,是目前世界上生产规模最大且用途极为广泛的微生物多糖。
三乙醇胺:仿生泥鳅粘液中部分促进反应的矿物质成分。三乙醇胺是一种水溶性有机碱性物质,具有防腐性,也具有一定表面活性,改性后作为具有缓蚀作用的表面活性剂等。
卡波姆:仿生泥鳅粘液多糖中增加粘性的支链成分。卡波姆在很低的用量下就能产生高效的增稠作用,从而制备出很宽粘度范围和不同流变性的乳液、膏霜、凝胶和透皮制剂。
透明质酸钠(HA):以泥鳅酶解液为基质,通过兽疫链球菌发酵制得,为白色或类白色颗粒或粉末,无臭味,干燥时,氮含量为2.8%-4.0%,葡糖醛酸含量为37.0%-51.0%。分子质量为(1~2)×10的6次方。
羟苯甲酯:仿生泥鳅粘液中凝集素成分。又称对羟基苯甲酸甲酯。Methylparaben。羟苯甲酯,白色结晶粉末或无色结晶,易溶于醇,醚和丙酮,极微溶于水,沸点270-280℃。分子式C8H8O3。分子量152.15。主要用作有机合成、食品、化妆品、医药的杀菌防腐剂,是泥鳅面膜保质期安全的保护物质。
PEG-40氢化蓖麻油:仿生泥鳅粘液中的其他脂类和荃类物质。是一种香精油,活性成份及其他疏水物质的增溶剂。
泥鳅多糖:从泥鳅粘液及泥鳅体中提取的泥鳅多糖成分,可直接添加到泥鳅面膜精华液中,阻止细胞氧化衰老,清除细胞内的自由基,可更好给皮肤提供滋养呵护的作用。研究表面,泥鳅多糖具有很好的抑制和诱导肿瘤细胞死亡,以及促进健康细胞增殖的作用,经常使用可预防和淡化面部异常肉质色斑和色素痣的生成生长。
因而,由上述诸多原料制备的泥鳅面膜用的精华液具有非常优越的补水、保湿、抗菌消炎、祛斑、祛皱、滋养、修护、抗衰等功效。
同时,通过提取泥鳅粘液的有效成份,再结合仿生泥鳅粘液功能和加入其他功能性成分,可制成对皮肤有不同保护作用的各种泥鳅面膜用的精华液。
具体实施方式
以下结合实施例,对本发明作进一步的说明。下面的说明是采用例举的方式,但本发明的保护范围不应局限于此。
实施例一:
本实施例的泥鳅面膜用的精华液,其制备过程如下:
一、备料:
⑴、原料制备:
①、泥鳅多糖制备:
A、清肠:
用水和郁李仁按5:1的重量比例熬水,先猛火后文火熬至液体体积降为50%时取滤液,再按1kg滤液加入8000毫克维生素C,配置成清肠原液;再将水与清肠原液按50:1的重量比例配制成清肠液,然后,将清肠液加入到泥鳅暂养清洗池中,经过4h的清肠(通过润滑性缓泻作用,达到快速清空消化道又可避免泥鳅体质受到伤害的目的),捞出经过清肠的泥鳅;
B、粘液收集:
把经过清肠的泥鳅倒入筛筐中,筛筐下放置收集液体的容器,泥鳅相叠厚度为30㎝,用喷雾器将体积浓度为30%的酒精按0.5ml/min·㎝2的比例喷洒于筐中泥鳅体上,间隔10min喷相等量的水;每30min重复一次,持续120min;收集容器中的粘液溶液;
C、粘液浓缩:
将收集到的粘液溶液用滤布过滤,去掉杂质,再用80℃以下蒸馏浓缩手段,去掉60%的水分,得粘液浓缩液;
D、提纯:将粘液浓缩液按1:4的重量比例加入无水乙醇,摇均后静置4小时,再用高速离心机离心,倒出上清液,得沉淀一;再将上清液用无水乙醇处理2次,抽滤,得沉淀二;将沉淀一和沉淀二合并,用无水乙醇洗两次,得醇洗沉淀;再将醇洗沉淀用氯仿萃取2次,得滤渣,然后,将滤渣在60℃下真空干燥,即得泥鳅多糖。
②、透明质酸钠(HA)制备:
A、培养基制备:
将泥鳅清洗干净,加热到82℃,保温35min取出,再用蒸馏水洗净并处理成泥鳅碎料;再将泥鳅碎料与蒸馏水按1g:2.5ml的比例混合成泥鳅混合碎料,然后将泥鳅混合碎料置于水浴中,加温到45℃,保温2h;接着冷却到39℃,再用1mol/L的盐酸调节pH值至2.0,再按30g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温反应2h;再加热到45℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按3.0g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2.2h;然后加热到60℃,保持10min,然后降温至45℃以下,滤除残渣,收集滤液;再向滤液中加入占其重量0.1%的葡萄糖,用lmol/L的盐酸调节pH值至7.0,即为培养基;
B、菌体培养:
将兽疫链球菌菌种2环装入50ml三角瓶中,摇均,在36℃恒温条件下培养18h,然后,接入装有培养基的玻璃缸中,接种量为10%,摇均,在36℃恒温条件下培养20h;再用15瓦的紫外线灯、照射距离30厘米,放入磁力自动搅拌棒,边搅拌边照射30min,得菌体液;再将由1mg亚硝基胍(NTG)加入到0.1mol/L、pH值6.0的磷酸缓冲液1ml中配成的溶液:4ml菌体液的比例混合在一起,充分摇均,立即置于37℃水浴震荡处理30min,然后离心,去掉上清液,收集菌体,再用蒸馏水洗涤菌体3次,得菌体;再将菌体:重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液按1g:1000ml的比例稀释,然后,接种到装有培养基的发酵罐中,接种量为0.5-1.5%,控制pH值为6.8,发酵时间为30-40h,供氧分段控制,0~24h供氧为0.3-0.7L/min,24h后供氧为1.2-1.8L/min,温度控制在36℃;同时,每隔8h向发酵罐内添加占发酵罐内液体总重量的1%、重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液;发酵完成后,即为发酵液;
C、透明质酸钠(HA)提取:
①、分解蛋白与杀菌:
向发酵液中加入1mol/L的盐酸调节pH值至2.0-2.1,再按25-35g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温36℃反应2h;再加热到42-48℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按2.5-3.5g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2-2.5h,得杀菌分解蛋白发酵液(通过调节pH值达到分解蛋白质和杀菌的目的);
b、一次沉淀和解离:
按照8000mL/kg的比例向杀菌分解蛋白发酵液中加入蒸馏水,再加入2%(w/v)硅藻土过滤,取澄清滤液;再按15g/kg的比例向澄清滤液中加入氯代十六烷基吡啶(CPC),搅拌30min以上,静置、沉淀,用绢丝收集沉淀;再向沉淀中按照8000ml/kg的比例加入解离液,搅拌至完全解离,得沉淀解离液;再向沉淀解离液中加入2%(W/v)硅藻土,过滤,取澄清的一次沉淀解离液;
c、二次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向一次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得二次沉淀;再按照4000mL/kg的比例向二次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得二次沉淀解离液;
d、三次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向二次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得三次沉淀;再按照3000mL/kg的比例向三次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得三次沉淀解离液;
e、提取:
向三次沉淀解离液中加2倍体积、体积浓度为95%的乙醇,边加边搅拌30min,静置,收集白色沉淀,再用无水乙醇脱水3次,干燥,即得透明质酸钠(HA)。
⑵、配料:
按重量份分别取纯净水85份、水解蚕丝蛋白1.5份、丙二醇12份、甘草酸二钾0.12份、生育酚0.1份、羟乙基纤维素0.3份、黄原胶0.3份、三乙醇胺0.08份、卡波姆0.08份、透明质酸钠(HA)0.12份、羟苯甲酯0.3份、PEG-40氢化蓖麻油0.7份、泥鳅多糖0.08份,备用;
二、制备:
将上述原料混合均匀,即成为泥鳅面膜用的精华液。
实施例二:
本实施例的泥鳅面膜用的精华液,其制备过程如下:
一、备料:
⑴、原料制备:与实施例一相同。
⑵、配料:
按重量份分别取纯净水90份、水解蚕丝蛋白0.5份、丙二醇8份、甘草酸二钾0.08份、生育酚0.3份、羟乙基纤维素0.1份、黄原胶0.1份、三乙醇胺0.12份、卡波姆0.12份、透明质酸钠(HA)0.08份、羟苯甲酯0.1份、PEG-40氢化蓖麻油0.3份、泥鳅多糖0.12份,备用;
其它步骤与实施例一相同。
实施例三:
本实施例的泥鳅面膜用的精华液,其制备过程如下:
一、备料:
⑴、原料制备:与实施例一相同。
⑵、配料:
按重量份分别取纯净水87.2份、水解蚕丝蛋白1份、丙二醇10份、甘草酸二钾0.1份、生育酚0.2份、羟乙基纤维素0.2份、黄原胶0.2份、三乙醇胺0.1份、卡波姆0.1份、透明质酸钠(HA)0.1份、羟苯甲酯0.2份、PEG-40氢化蓖麻油0.5份、泥鳅多糖0.1份,备用;
其它步骤与实施例一相同。
应用本发明的泥鳅面膜用的精华液制作的泥鳅面膜,适合于各个年龄层次的人群使用。
Claims (6)
1.一种泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,是由下列重量份的原料制备而成:
2.根据权利要求1所述的泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,是由下列重量份的原料制备而成:
3.根据权利要求1所述的泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,是由下列重量份的原料制备而成:
4.根据权利要求1所述的泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,是由下列重量份的原料制备而成:
5.根据权利要求1-4中任一项所述的泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,所述的泥鳅多糖是由以下步骤制备而成:
⑴、清肠:
用水和郁李仁按4-6:1的重量比例熬水,先猛火后文火熬至液体体积降为50%时取滤液,再按1kg滤液加入8000毫克维生素C,配置成清肠原液;再将水与清肠原液按40-60:1的重量比例配制成清肠液,然后,将清肠液加入到泥鳅暂养清洗池中,经过2-5h的清肠,捞出经过清肠的泥鳅;
⑵、粘液收集:
把经过清肠的泥鳅倒入筛筐中,筛筐下放置收集液体的容器,泥鳅相叠厚度为25-35㎝,用喷雾器将体积浓度为20-40%的酒精按0.3-0.7ml/min·㎝2的比例喷洒于筐中泥鳅体上,间隔8-12min喷相等量的水;每30min重复一次,持续120min;收集容器中的粘液溶液;
⑶、粘液浓缩:
将收集到的粘液溶液用滤布过滤,去掉杂质,再用80℃以下蒸馏浓缩手段,去掉60%的水分,得粘液浓缩液;
⑷、提纯:将粘液浓缩液按1:4的重量比例加入无水乙醇,摇均后静置4小时,再用高速离心机离心,倒出上清液,得沉淀一;再将上清液用无水乙醇处理2次,抽滤,得沉淀二;将沉淀一和沉淀二合并,用无水乙醇洗两次,得醇洗沉淀;再将醇洗沉淀用氯仿萃取2次,得滤渣,然后,将滤渣在60℃下真空干燥,即得泥鳅多糖。
6.根据权利要求5所述的泥鳅面膜用的精华液,其特征在于,所述的透明质酸钠(HA)是由以下步骤制备而成:
⑴、培养基制备:
将泥鳅清洗干净,加热到80-85℃,保温30-40min取出,再用蒸馏水洗净并处理成泥鳅碎料;再将泥鳅碎料与蒸馏水按1g:2.2-2.8ml的比例混合成泥鳅混合碎料,然后将泥鳅混合碎料置于水浴中,加温到40-50℃,保温2h;接着冷却到38-40℃,再用1mol/L的盐酸调节pH值至2.0-2.1,再按25-35g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温反应2h;再加热到42-48℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按2.5-3.5g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2-2.5h;然后加热到60℃,保持8-12min,然后降温至45℃以下,滤除残渣,收集滤液;再向滤液中加入占其重量0.1%的葡萄糖,用lmol/L的盐酸调节pH值至7.0,即为培养基;
⑵、菌体培养:
将兽疫链球菌菌种2环装入50ml三角瓶中,摇均,在36℃恒温条件下培养15-20h,然后,接入装有培养基的玻璃缸中,接种量为8-12%,摇均,在36℃恒温条件下培养18-22h;再用15瓦的紫外线灯、照射距离30厘米,放入磁力自动搅拌棒,边搅拌边照射30min,得菌体液;再将由1mg亚硝基胍(NTG)加入到0.1mol/L、pH值6.0的磷酸缓冲液1ml中配成的溶液:4ml菌体液的比例混合在一起,充分摇均,立即置于37℃水浴震荡处理30min,然后离心,去掉上清液,收集菌体,再用蒸馏水洗涤菌体3次,得菌体;再将菌体:重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液按1g:1000ml的比例稀释,然后,接种到装有培养基的发酵罐中,接种量为0.5-1.5%,控制pH值为6.8,发酵时间为30-40h,供氧分段控制,0~24h供氧为0.3-0.7L/min,24h后供氧为1.2-1.8L/min,温度控制在36℃;同时,每隔8h向发酵罐内添加占发酵罐内液体总重量的1%、重量浓度为0.1%的葡萄糖溶液;发酵完成后,即为发酵液;
⑶、透明质酸钠(HA)提取:
①、分解蛋白与杀菌:
向发酵液中加入1mol/L的盐酸调节pH值至2.0-2.1,再按25-35g/kg的比例加入胃蛋白酶,保温36℃反应2h;再加热到42-48℃,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至8.5,然后,按2.5-3.5g/kg的比例加入胰蛋白酶,保温反应2-2.5h,得杀菌分解蛋白发酵液;
②、一次沉淀和解离:
按照8000mL/kg的比例向杀菌分解蛋白发酵液中加入蒸馏水,再加入2%(w/v)硅藻土过滤,取澄清滤液;再按15g/kg的比例向澄清滤液中加入氯代十六烷基吡啶(CPC),搅拌30min以上,静置、沉淀,用绢丝收集沉淀;再向沉淀中按照5000-10000ml/kg的比例加入解离液,搅拌至完全解离,得沉淀解离液;再向沉淀解离液中加入2%(W/v)硅藻土,过滤,取澄清的一次沉淀解离液;
③、二次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向一次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得二次沉淀;再按照4000mL/kg的比例向二次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得二次沉淀解离液;
④、三次沉淀和解离:
按照10g/kg的比例向二次沉淀解离液中搅拌加入CPC,再加2倍量无热原蒸馏水,搅拌30min以上,放置、沉淀,得三次沉淀;再按照3000mL/kg的比例向三次沉淀中加入解离液,搅拌至完全解离,得三次沉淀解离液;
⑤、提取:
向三次沉淀解离液中加2倍体积、体积浓度为95%的乙醇,边加边搅拌30min,静置,收集白色沉淀,再用无水乙醇脱水3次,干燥,即得透明质酸钠(HA)。
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