CN105055248A - 远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品 - Google Patents

远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品 Download PDF

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Abstract

本发明涉及远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品。一种抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,其按重量份计由以下原料组分制成:0.15-2.4份远志总皂苷,3-30份去离子水,65-90份植物油,4-6份的乳化剂,总计100份。其制备方法为:将远志总皂苷用水配置成远志总皂苷溶液,然后将植物油加入乳化剂预热12-15min使之溶化后加入远志皂苷溶液,65-85℃乳化15-30min得到。本发明通过远志总皂苷、水、植物油和乳化剂按配方进行优选复配得到的日化产品可达到修复紫外损伤引起的细纹,色斑产生,协同减少对皮肤的损害,抗皮肤老化,延缓衰老的目的。

Description

远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品
技术领域
本发明涉及远志总皂苷的新用途,特别涉及远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品,属于日用化工品领域。
背景技术
远志来源于远志科植物远志PolygalatenuifoliaWilld.和卵叶远志P.sibiricaL.的干燥根。是一种具有安神,益智,祛痰,止咳功效的传统中药,临床常用于失眠,健忘,多痰,惊悸等证。现在研究者发现其有祛痰,抗痴呆作用,抗氧化,抗炎等作用。远志中的主要药效成分为远志总皂苷,是一系列三萜皂苷,即以远志皂苷元为母核,在C3,C28位链接长度不同的糖基。其中远志皂苷B(OnjisaponinB,OJB)含量较高,结构特征表现为,C3,C28位链接有大量的糖,水溶性好,起泡性强。在提取过程中,C28位的糖基链接容易断裂,而产生较多的细叶远志皂苷(Tenuifolin,TEN),即仅C3位链接糖基。在炮制、酸或碱的作用下,皂苷的C3,C28位链接糖基水解生成远志皂苷元(Senegenin,SNG)。
皮肤衰老主要是由于氧自由基对其的攻击。氧自由基包括超氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢、单线态氧及其衍生物。氧自由基的化学活性特别强,极不稳定,易发生失去或得到电子,使自身稳定,而使其他分子变成活跃游离基,传递增强自由基。皮肤中氧自由基产生有两个方面:一是外界高温、辐射及光照等导致共价键均裂产生的外源性自由基;二是体内各种代谢过程中不断产生的内源性氧自由基,如慢性疾病、情绪压抑紧张、营养失衡、劳累、内分泌失调等。另外彩妆残留促成皮肤毛孔粗大、毛囊炎等,也是促进炎症导致氧自由基产生的一大因素。正常体内氧自由基的氧化能力与抗氧化能力处于动态平衡,随着年龄的增加或体质的改变,氧自由基产生过多,从而使皮肤组织结构改变,功能受损。
氧自由基对皮肤损害的机制有:可使脂质过氧化产生丙二醛,使细胞膜流动性降低,引起膜通透性和硬度增加;脂质过氧化产物烯醛也可使蛋白质氨基(-NH2)反应使蛋白质分子交联,引起蛋白质积聚、沉积,功能蛋白失活;还可使表皮变薄,角质形成细胞变大,表皮黑色素细胞减少,皮肤对紫外线的防护功能减低;真皮纤维细胞在氧自由基攻击下,失去羟化功能,导致胶原纤维交联。氧自由基的以上作用均使皮肤松驰,粗糙,变硬,产生皱纹而老化。阻止氧自由基对皮肤抗氧化体系的攻击,可以成为阻止皮肤衰老的主要手段。
发明内容:
本发明所要解决的技术问题是提供一种远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
提供远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用。
提供一种抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,其按重量份计由以下原料组分制成:0.15-2.4份远志总皂苷,3-30份去离子水,65-90份植物油,4-6份的乳化剂,共计100份。
按上述方案,所述的远志总皂苷用量为1.2份,去离子水23.8份,植物油69.5,乳化剂5.5份。
按上述方案,所述的远志总皂苷用量为1.2份,去离子水3.8份,植物油89.5,乳化剂5.5份。
按上述方案,所述远志总皂苷为将中药远志用水或亲水溶剂提取,通过大孔树脂分离纯化获得。
按上述方案,所述的远志总皂苷是将中药远志用水或亲水溶剂煎煮,合并水提取液加热浓缩至0.5-2g/ml,然后装填入D101大孔吸附树脂柱,依此用蒸馏水,乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩并干燥洗脱液,得到远志总皂苷(PTS)。
按上述方案,所述的乙醇洗脱为依此用30wt%乙醇和70wt%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱液。
按上述方案,所述亲水溶剂为乙醇、甲醇、丙酮、丁二醇、丙二醇或乙酸乙酯。
按上述方案,所述的植物油可以是茶油、橄榄油、甜杏仁油或荷荷巴油等;乳化剂可以是PEG-8蜂蜡、EmuliumKappa2(法国嘉法狮公司生产)、或硬脂酸甘油酯等。
按上述方案,所述的抗皮肤衰老日化产品还可根据需要添加防腐剂、营养因子中的一种或两种。所述的防腐剂可选香精。
上述抗皮肤衰老日化产品的制备方法,其特征在于:将远志总皂苷用水配置成远志总皂苷溶液,然后将植物油加入乳化剂预热12-15min使之溶化后加入远志皂苷溶液,65-85℃乳化15-30min得到。
本发明的有益效果:本发明通过远志总皂苷、水、植物油和乳化剂按配方进行优选复配得到的日化产品可基于远志总皂苷的抗氧化作用、皂苷气泡性的洁面作用及植物油的滋润作用等各组分之间的协同作用,达到修复紫外损伤引起的细纹,色斑产生,协同减少对皮肤的损害,抗皮肤老化,延缓衰老的目的。
附图说明
图1为远志总皂苷溶液全波长扫描图。
具体实施方式
下面结合具体实施实例来进一步描述本发明。这些实例只是范例性,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
本发明以小鼠胃肠氧化指标及DPPH自由基清除率为研究对象;观察远志总皂苷抗衰老、抗氧化的作用;通过正交实验,探索远志总皂苷最佳生产工艺。旨在开发具有知识产权的皮肤抗衰老日化用品添加剂,提供全面的实验数据及相关理论依据,这将具有重要的科学价值和广阔的应用前景。
实施例1远志总皂苷对小鼠胃肠SOD活力与MDA、GSH、LDH含量的影响
1.药物
远志购于湖北中医药大学国医堂。将远志用水煎煮三次,合并水提取液加热浓缩至1g/ml,然后装填入D101大孔吸附树脂柱,用蒸馏水,30%乙醇和70%乙醇分三次洗脱,收集70%乙醇洗脱液,浓缩并干燥洗脱液,得到远志总皂苷(PTS)。
2胃肠组织中抗氧化指标的检测
将KM小鼠置于室温,自由摄水饮食,适应性饲养7天后按体重随机分为2组,即空白对照组,远志总皂苷组。每组8只。远志总皂苷组给药400mg/kg,正常组给予生理盐水灌胃。灌胃体积均为20ml/kg。给药1h后脱颈椎处死小鼠,取小鼠胃肠组织制成10%组织匀浆,以2500r/min离心10min后取上清液,-80℃冻存,待测SOD,MDA,LDH,GSH。取各组小鼠胃肠匀浆,按Elisa试剂盒方法分别测定并计算胃肠组织中SOD活力,MDA含量,GSH含量和LDH含量。
3结果
远志总皂苷对小鼠的胃肠匀浆中SOD,MDA,LDH,GSH水平的影响
注:a,P<0.05;3a,P<0.001
与空白对照组相比,给予远志总皂苷400mg/kg,对小鼠胃肠组织中LDH含量、MDA含量的影响均不显著。但能显著提高SOD、GSH含量,P<0.001。该实验说明了远志总皂苷具有非常显著的抗氧化活性,可考虑针对其活性予以开发用途。
实施例2远志总皂苷体外清除DPPH自由基的作用
1材料
精密称取远志总皂苷配成3,6mg/g的溶液。精密称取DPPH0.0050g样品,置于50ml容量瓶中,无水乙醇充分溶解,定容,摇匀,即得0.1mg/mlDPPH溶液。精密称取抗坏血酸0.0246g,置于25ml容量瓶中,用蒸馏水充分溶解,定容至刻度,摇匀,即得为0.984mg/ml的抗坏血酸贮备液,使用时稀释至0.123mg/ml。
2方法
将供试品溶液分别取20μl加样在96孔板中,每组设计3个复孔,再在每个孔板中平行加入180μlDPPH溶液(样品组)。同时设立对照组(10μl乙醇加入180μlDPPH溶液)、空白组(10μl样品加入180μl乙醇),轻轻振荡,使充分混匀,将96孔板放置在避光环境下反应30min,药物与自由基反应完全,在波长515nm处测定,记录最终吸光度(A)值。
自由基清除率=[1-(A样品-)/A对照]×100%
式中A样品为加入测试样品后反应液的吸光度;A对照为对照组未加药的吸光度;A空白为空白组的吸光度。每样品设3复孔(结果见表2)。
3结果
表2远志总皂苷清除DPPH氧自由基作用
注:3a,P<0.001。
与空白对照组相比,远志总皂苷在3,6mg/ml浓度,显著清除了DPPH自由基,P<0.001。体外实验证明了,远志总皂苷具有显著的抗体外氧自由基的能力,适合进行皮肤抗老化日化产品的开发。
实施例3远志总皂苷对几种自由基清除的量效关系研究
1材料
精密称取远志总皂苷,配成1.5,3,6,12,24mg/g浓度。精密称取抗坏血酸0.0246g,置于25ml容量瓶中,用蒸馏水充分溶解,定容至刻度,摇匀,即得为0.984mg/ml的抗坏血酸(VC)贮备液,使用时稀释至0.123mg/ml。
2方法
2.1清除羟基自由基实验
取0.50mmol/L邻二氮菲无水乙醇溶液0.50ml,加入0.075mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)1.67ml,充分混匀后加入0.75mmol/L硫酸亚铁0.33ml混匀。加入供试品1.00ml,然后加入0.1%双氧水0.33ml,在37℃反应1h,取各样品200ul到96孔板于酶标仪板,510nm处测定吸光度A1。在上法操作中用等体积双蒸水代替供试品,获得吸光度记为A2。以等体积水代替供试品,以等体积双蒸水代替0.1%双氧水,获得吸光度记为A3。用等体积双蒸水代替硫酸亚铁,获得吸光度记为A2’。
羟基自由基清除率=[(A1–A2’)/(A3–A2)]×100%
2.2清除超氧自由基试验
取pH为8.2的0.075mol/L磷酸缓冲溶液1.00ml,加入供试品0.10ml,25℃水浴20min。加入已预热4.50mmol/L邻苯三酚0.10ml,混匀后于25℃水浴中反应4min,加入2滴8.00mol/LHCl终止反应。用双蒸水调零,取各样品200ul到96孔板于酶标仪板,在420nm处测定吸光值,读数为Aa。按照上述操作,以离子水取代邻苯三酚,获得吸光值记为Ab。以离子水取代样品,获得吸光值标记为Ac。
超氧自由基清除率=[Ac–(Aa–Ab)]/Ac×100%.
2.3清除DPPH自由基试验
分别将供试品溶液取40μl加入1.5mlEP管中,同时加入360μlDPPH溶液(精密称取DPPH0.0050g样品,置于50ml容量瓶中,无水乙醇充分溶解,定容,摇匀,即得0.1mg/mlDPPH溶液。)。设立对照组(40μl乙醇加入360μlDPPH溶液)、空白组(40μl供试品加入360μl乙醇)。每组样品设6复孔,振荡混匀,避光环境下反应30min,然后将每组反应液取200μl于96孔板中,在波长515nm处测定,记录最终吸光度(A)值。
自由基清除率=[1-(A样品-A空白)/A对照]×100%
式中A样品为加入测试样品后反应液的吸光度;A对照为对照组未加药的吸光度;A空白为空白组的吸光度(结果见表3)。
3结果
表3:远志总皂苷对几种自由基清除的量效关系研究
注:a,P<0.05;2a,P<0.01;3a,P<0.001.
由表3可见,远志总皂苷溶液在6.0、12.0mg/gl浓度时具有显著的清除羟基自由基作用,与空白组相比,P<0.05;在24.0mg/g浓度时,具有显著的清除超氧自由基作用,与空白组相比,P<0.05;在6、12和24mg/g浓度时,具有显著的清除DPPH自由基的作用,显著性差异P<0.001。由此可知,远志总皂苷在体外的抗氧化活性具有显著的量效关系。在1.5mg/g浓度及以上,远志总皂苷就具有了抗自由基的活性。这一结果为我们抗皮肤老化日化产品中,远志总皂苷的添入量提供了依据。
实施实例4远志总皂苷对紫外吸收波长的测定
取远志总皂苷溶液在紫外全波长扫描仪中进行全波长扫描,波长范围200-800nm。结果见图1。由图1可见,远志总皂苷在紫外线全波长扫描下,分别在波长230.50、312.50nm达到吸收峰,在270-350nm波长范围有很好的吸收。而250~350nm波长范围紫外线为对皮肤危害最大。远志总皂苷溶液对这一特定波长的紫外线具有吸收作用,表明其制备成预防光损伤,配合防晒霜使用的日化产品成为可能。
实施实例5远志总皂苷及皂苷化合物在制备抗皮肤衰老日化产品中的应用
(一)抗皮肤衰老日化产品-乳液中各条件的确定:
(1)植物油的筛选
通过预设乳化剂的适当用量,在一定乳化温度的条件下,设定选取不同的选用常用于化妆品中的植物油,观察由其配制的乳液对皮肤和眼部刺激性,具体如下:
依次精密量取86份植物油、乳化剂4份混匀,在水浴锅中80℃恒温10min,缓慢的加入10份的0.2g/g的远志总皂苷溶液,在漩涡混合仪上充分振荡混匀20min。观察并记录乳液的皮肤、眼睛的感觉,结果见表4。
表4:远志总皂苷乳液中植物油的筛选结果
注:“—”表示无刺激
由表4可知,茶油的感觉和刺激性最小,橄榄油对眼部有刺激,玉米油、大豆油有油腻感不适合用于该配方,茶油,甜杏仁油,荷荷巴油最适合作为该日化产品的基础油脂,其次是橄榄油。
(2)乳化剂的选择
通过预设乳化剂的适当用量及茶油的适当用量,乳化温度的条件下,设定选取不同的乳化剂,观察由其配制的乳液均一性,具体如下:
依次精密量取86份茶油、不同的乳化剂4份混匀,在水浴锅中80℃恒温10min,缓慢的加入10份的0.20g/g的远志总皂苷溶液(2份远志皂苷加入到8份去离子水中),在漩涡混合仪上充分振荡混匀20min。观察并记录乳液的均一性,结果见表5。
表5:远志总皂苷乳液中乳化剂的筛选结果
注:“+”表示有混悬物存在;“—”表示均一性好。Montanov68:鲸蜡硬脂醇(和)鲸蜡硬脂基葡糖苷,MontanovL:C14-22烷基醇(和)C14-22烷基葡萄苷。
(3)远志总皂苷乳液中远志总皂苷添加量的筛选
按照终浓度为1、2、4、8、16、32mg/g远志总皂苷的添加量,通过复配水(远志总皂苷溶于去离子水(25份),植物油(69.5份),乳化剂(5.5份),分别制备远志总皂苷乳液,观察乳液的均一性,结果见表9。
表9远志皂苷乳液中远志皂苷母液添加量的筛选
注:“+”,有混悬物存在;“-”,均一性好。
由表9可知,远志总皂苷乳液中远志总皂苷添加量到16mg/g,乳液均一性均较好,而在较高浓度时候出现水油分离。故总皂苷的终浓度最好优选为16mg/g及以下。
实施实例6
依次精密量取89.5份茶油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中70℃恒温10min,缓慢的加入5份的120mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品1号配方。
实施例7
依次精密量取89.5份茶油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中70℃恒温10min,缓慢的加入5份的240mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品2号配方。
实施例8
依次精密量取70.5份茶油、乳化剂PEG-8蜂蜡4.5份混匀,在乳化锅中75℃恒温10min,缓慢的加入25份的24mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品3号配方。
实施例9
依次精密量取69.5份茶油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中80℃恒温10min,缓慢的加入25份的48mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品4号配方。
实施例10
依次精密量取89.5份荷荷巴油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中75℃恒温10min,缓慢的加入5份的120mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品5号配方。
实施例11
依次精密量取89.5份橄榄油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份份混匀,在乳化锅中70℃恒温10min,缓慢的加入5份的240mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品6号配方。
实施例12
依次精密量取69.5份橄榄油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中80℃恒温10min,缓慢的加入25份的48mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品7号配方。
实施例13
依次精密量取69.5份甜杏仁油、乳化剂PEG-8蜂蜡5.5份混匀,在乳化锅中70℃恒温10min,缓慢的加入25份的48mg/g远志总皂苷水溶液,乳化时间20min。获得抗皮肤衰老日化产品4号配方。
实施实例14
家兔皮肤刺激实验
实验样品:实施例6、7、8、9获得的抗皮肤衰老日化产品
试验方法:参照《化妆品卫生规范》(2007版)
试验动物:家兔
试验结果:7天皮肤刺激试验,未见刺激反应。
实施实例15
远志总皂苷抗皮肤衰老日化产品稳定性试验
高温低温贮存稳定性试验:将实施例6、7、8、9、14的抗皮肤衰老日化产品,1)在40-50℃电热恒温培养箱放置30天,恢复室温后观察;2)24h内在0℃-50℃之间来回频繁变化,反复操作15d,恢复室温观察。3)在-5℃存放1周,恢复室温后观察。观察产品外观变化(色调,退变色,颜色不均匀,混入异物,伤痕,浮游物,分离,沉淀,白粉,浮起,麻点,疏松,龟裂,狡猾,透明性,结块,色泽,塌陷,裂缝,气孔,气泡混入,真菌生长等)。气味变化。
试验结果表面:产品外观没有明显变化,无异味,稳定性均良好。
实施例13临床资料
1现在符合皮肤衰老标准的女性50例,其年龄35-45岁。随机分配为实验组40例,对照组10例。
2皮肤衰老标准:
皮肤衰老主要表现为:干燥,粗糙脱屑,细纹,面色萎黄,不规则色素改变,皮肤敏感性增加,弹性下降。排除面部溃疡、水泡,破损及敏感皮肤,长期化妆品接触史及长期皮肤过敏及色素沉着的药物应用史。
3方法:
实验组:早晚洁面后,将上述实施例6、7、8、9制得的抗皮肤衰老日化产品分别均匀涂抹在面部,并按摩适当时间。疗程1个月。
对照组:仅早晚洁面,不做任何处理。
治疗前后对症状进行评分。
评分标准:a粗糙,干燥:以面部嘴角出现皮肤触之不光滑为1分,以面部额部、口角有2处不光滑为2分;以面部、额部、口角均不光滑伴脱屑,记3分。
b细皱纹:眼角有浅鱼尾纹,额部略有皱纹,计分1分;眼角处、额部、面颊有粗纹,计分2分;眼角处、额部、面颊明显有粗纹,计分3分。
C不规则色素改变:面颊为主,不超过30%面部,计分1分;面颊、额部有黄褐色斑,不超过50%面部,计分2分;面颊、额部、鼻唇有散在色斑,不超过70%面部,计分3分。
d面色萎黄:面色萎黄有光泽计分1分;面色萎黄无光泽计分2分;面色萎黄晦暗无光泽,计分3分。
e皮肤弹性:按压后立刻回弹但周围产生较大皱纹计分1分;按压后1-2S恢复计分2分;按压超过2S恢复计分3分。
症状积分分分值改善率=(治疗前症状积分-治疗后症状积分)/治疗前分值*100%。
显效:症状积分分值减少≥70%;有效:症状积分分值减少≥50%;无效:症状未见明显改善或反见恶化,症状积分分值减少≤50%。两组治疗效果见表10。
3结果
表10:远志总皂苷抗衰老日化产品治疗前后临床疗效比较
注:与对照组相比,a,P<0.05;2a,P<0.01。
对照组在1个月后,仍有皮肤粗糙,面部细纹,色素不匀,面色萎黄,皮肤欠弹性表现;使用本发明组合产品后,皮肤的滋润度增强,细纹减少,色素均匀。其中,实施例7使皮肤滋润度改变最大,有效率与空白组相比,P<0.01,以上说明本发明日化产品,可以减少色素不匀,细纹减少,具有显著的抗皮肤衰老效果。

Claims (10)

1.远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用。
2.一种抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,其按重量份计由以下原料组分制成:0.15-2.4份远志总皂苷,3-30份去离子水,65-90份植物油,4-6份的乳化剂,总计100份。
3.根据权利要求2所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述的远志总皂苷用量为1.2份,去离子水23.8份,植物油69.5,乳化剂5.5份。
4.根据权利要求2所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述的远志总皂苷用量为1.2份,去离子水3.8份,植物油89.5,乳化剂5.5份。
5.根据权利要求2所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述远志总皂苷为将中药远志用水或亲水溶剂提取,通过大孔树脂分离纯化获得。
6.根据权利要求2所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述的远志总皂苷是将中药远志用水或亲水溶剂煎煮,合并水提取液加热浓缩至0.5-2g/ml,然后装填入D101大孔吸附树脂柱,依此用蒸馏水,乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩并干燥洗脱液,得到远志总皂苷。
7.根据权利要求6所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述的抗皮肤衰老日化产品还可根据需要添加防腐剂、营养因子中的一种或两种。
8.根据权利要求5或6所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述亲水溶剂为乙醇、甲醇、丙酮、丁二醇、丙二醇或乙酸乙酯。
9.根据权利要求2所述的抗皮肤衰老日化产品,其特征在于,所述的植物油可以是茶油、橄榄油、甜杏仁油或荷荷巴油;乳化剂可以是PEG-8蜂蜡、EmuliumKappa2或硬脂酸甘油酯。
10.权利要求1所述的抗皮肤衰老日化产品的制备方法,其特征在于:将远志总皂苷用水配置成远志总皂苷溶液,然后将植物油加入乳化剂预热12-15min使之溶化后加入远志皂苷溶液,65-85℃乳化15-30min得到。
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