CN105017387B - 一种制备利那洛肽的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及多肽合成领域,特别涉及一种制备利那洛肽的方法。本实验采用片段法进行利那洛肽肽链的合成,并且完全选择性的分三步形成三对二硫键,具体步骤为:a)合成片段I线性肽;b)形成第一对二硫键,得到片段I氧化肽;c)合成片段Ⅱ肽树脂;d)合成含一对二硫键的利那洛肽粗肽;e)合成第二对二硫键;f)合成第三对二硫键。本方法采用完全选择性分三步形成三对二硫键的方法制备利那洛肽,可以避免产生二硫键错配的异构体杂质,降低了纯化过程的难度,同时片段法降低了第一对二硫键形成的难度,使最终所得粗肽纯度与收率均较高,操作过程简便,适于大规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及多肽合成领域,特别涉及一种制备利那洛肽的方法。
技术背景
利那洛肽(LINZESS)是由美国Ironwood Pharmaceuticals公司研发,于2012年12月17日首次获批在美国上市的一种用于治疗胃肠道疾病的多肽类药物,并于2013年先后在丹麦、芬兰、德国、挪威、瑞典及英国等国家上市,目前暂未申报进口中国(但是已在中国做国际多中心临床Ⅲ期试验)。本品是FDA唯一批准的可用于临床的肠道局部起效的GC-C(鸟苷酸环化酶-C)激动剂类药物,也是欧洲首个获批用于治疗中重度IBS-C成人患者新型处方药物。利那洛肽胶囊(LINACLOTIDE capsules)规格为:145MCG/粒;290MCG/粒。
利那洛肽是由14个氨基酸残基组成的含有三对二硫键的多肽,其结构如下:
文献Optimized Fmoc Solid-Phase Synthesis of the Cysteine-Rich PeptideLinaclotide,Peptide Science Volume 96,Number 1,p69报道了利那洛肽的合成方法,该文献中主要介绍了以下三种利那洛肽的合成策略:(1)采用6-Trt的保护策略,通过Fmoc固相法合成利那洛肽线性粗肽后,在溶液中一步氧化形成三对二硫键,但由于选择性差,粗肽中存在多种二硫键错配异构体杂质,导致目标肽收率较低;(2)采用2Mmt+2Acm+2Trt策略,以Wang树脂为固相载体合利那洛肽全保护线性肽后,在保证Trt不被脱除的情况下,脱除Mmt,然后在树脂上氧化形成第一对二硫键,再将肽链从树脂上裂解下来,同时脱除Trt,再分步氧化形成第二对和第三对二硫键,此方法选择性强,但在树脂上形成第一对二硫键难度较大,导致粗肽纯度及收率都很低;(3)采用2StBu+4Trt保护策略,通过固相法合成利那洛肽全保护线性肽后,先选择性脱去StBu,氧化形成第一对二硫键,然后再脱除全部保护基,一步氧化形成第二对及第二对二硫,此方法中原料Fmoc-Cys(StBu)-OH价格较高,同时粗肽中也存在多种二硫键错配异构体杂质。
专利CN102875655A、CN104231051A、CN104628826A和CN201410357720.3介绍了一步氧化形成三对二硫键的方法:首先合成利那洛肽树脂,然后将利那洛肽树脂裂解脱除所有保护基和树脂固相载体得到利那洛肽线性粗肽,最后对线性肽采用GSH/GSSH氧化体系或其他氧化体系进行一步氧化反应;其中专利CN201410357720.3公开了一种先以片段法合成利那洛肽线性肽,然后再通过GSH/GSSH氧化体系一步氧化形成三对二硫键的方法。虽然一步氧化法能够通过缓冲体系使线性肽尽量向目标结构转化,但仍然无法避免二硫键错配异构体杂质的产生,收率较低。
专利CN103626849A公开了采用同一溶液体系,分步形成成三对二硫键,此法虽能够避免二硫键错配异构体杂质的产生,但同一体系反应,处理过程复杂,且原料来源较少,成本相对较高。
总之,在制备利那洛肽的过程中存在二硫键错配导致异构体杂质的产生以及第一对二硫键形成难度较大的问题,本申请的技术方案不仅能够避免二硫键错配产生的异构体杂质,降低了纯化过程的难度,而且片段法有利于第一对二硫键的形成,使最终所得粗肽纯度与收率均较高,本法操作过程简便,适于大规模生产。
发明内容
为解决合成过程中存在的以上问题,本发明提供了一种制备利那洛肽的方法,本发明提供的技术方案如下:
一种制备那洛肽的方法,包括如下步骤:
(a)固相合成片段I线性肽:以CTC树脂为固相载体,通过Fmoc固相合成法合成片段I肽树脂,经裂解反应,得到片段I线性肽,其结构如下:
Fmoc-Cys-Cys(Acm)-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Cys-OH
(b)第一对二硫键形成:将片段I线性肽溶解在溶液中氧化形成第一对二硫键,得到片段I氧化肽,其结构如下:
(c)固相合成片段Ⅱ肽树脂:以Wang脂或CTC树脂作为固相载体,通过Fmoc固相合成法合成片段Ⅱ肽树脂,其结构如下:
H-Asn(Trt)-Pro-Ala-Cys(Acm)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Resin
(d)含一对二硫键利那洛肽的合成:片段I氧化肽经缩合试剂活化后,与片段Ⅱ肽树脂偶联并脱除Fmoc保护基,经裂解反应,得到含一对二硫键的利那洛肽粗肽,其结构如下:
(e)第二对二硫键的形成:将上述粗肽溶解在溶液中,调节pH,加入氧化剂氧化形成第二对二硫键,其结构如下:
(f)第三对二硫键的形成:在上步溶液中加入AcOH,混和均匀后,再加入I2进行搅拌反应,最后加入Vc还原过量的I2,终止反应,氧化形成第三对二硫键,其结构如下:
优选的,步骤(a)中,操作过程为:第6位保护氨基酸Fmoc-Cys(Mmt)-OH与CTC树脂反应,制得Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂,然后在缩合试剂的作用下逐一偶联Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Cys(Mmt)-OH获得片段I肽树脂;将片段I肽树脂加入到裂解液中,20-25℃下反应3-5min,重复裂解3-5次;反应结束,将裂解液过滤并合并到一起;用0.1-1.0mol/L NaHCO3水溶液洗涤裂解液,直至pH为7-8;旋蒸浓缩裂解液,过滤收集析出的沉淀,真空干燥得片段I线性肽;
更为优选的,上述步骤中的裂解液为加入体积比1-10%TFA及体积比1-5%TIS的DCM溶液;
步骤(b)中,氧化形成第一对二硫键的条件为:将片段I线性肽溶解在溶剂中,形成浓度为0.5-5.0mg/mL的溶液,用氨水调节溶液pH值至7.0-8.0,以DMSO,H2O2,或空气中的任意一种为氧化剂,氧化反应10-20h,旋蒸浓缩反应液,过滤收集析出的沉淀,真空干燥得片段I氧化肽;
优选的,单独用DMSO做氧化剂时用量为溶液体积的5-30%,单独用H2O2做氧化剂时的用量为溶液体积0.05-0.5%的30%H2O2溶液,单独采用空气做氧化剂时采用通入的方式;
步骤(c)中,片段Ⅱ肽树脂的合成过程为:第14位保护氨基酸Fmoc-Tyr(tBu)-OH与载体树脂反应,制得Fmoc-Tyr(tBu)-树脂,然后在缩合试剂的作用下逐一偶联Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH,获得片段Ⅱ肽树脂;
步骤(d)中,含一对二硫键利那洛肽的合成过程为:片段I氧化肽与与片段Ⅱ肽树脂在缩合试剂的作用下,发生接肽反应,生成含一对二硫键的利那洛肽肽树脂,然后再用裂解剂进行1-3h裂解反应,最后过滤裂解液,经甲叔醚沉降洗涤,真空干燥得含一对二硫键的利那洛肽粗肽;
更为优选的,步骤(d)中的裂解液为加入体积比1-5%清除剂的TFA溶液,所述清除剂为苯甲醚、苯甲硫醚、苯酚、水和三异丙基硅烷中的一种或几种;
优选的,步骤(a)或步骤(c)或步骤(d)中,所述的CTC树脂或Wang树脂的替代度为0.5-1.0mmol/g,所述缩合剂为DIC/HOBt、DIC/HOAt、TBTU/HOBt/DIPEA、HBTU/HOBt/DIPEA、HATU/HOAtDIPEA的一种;
优选的,步骤(e)中,氧化形成第二对二硫键的条件为:将步骤(d)中所得含一对二硫键的利那洛肽粗肽溶解在溶剂中,形成浓度为0.5-5.0mg/mL的溶液,用氨水调节溶液pH值至7.0-8.0,以DMSO,H2O2,或空气中的任意一种为氧化剂,搅拌反应5-10h;
优选的,单独用DMSO做氧化剂时用量为溶液体积的5-30%,单独用H2O2做氧化剂时的用量为溶液体积0.05-0.5%的30%H2O2溶液,单独采用空气做氧化剂时采用通入的方式。
更为优选的,步骤(b)或步骤(e)中,所述溶剂为DCM,DMF,乙醇,乙腈,甲醇与水任意一种或几种混合液;
优选的,步骤(f)中,氧化形成第三对二硫键的条件为:向步骤(e)的反应液中加入溶液体积10-30%的AcOH,混合均匀后,加入10-50倍当量的I2,搅拌反应0.5-4h,反应结束,加入与I2相同当量的Vc还原过量的I2,终止反应。
更为优选的,步骤(f)中,AcOH的用量为溶液体积的10%,I2的用量为10倍当量,搅拌反应1h。
相对于现有技术,本发明的有益效果是:
本发明提供的一种片段法完全选择性形成三对二硫键利制备那洛肽的方法,可以避免二硫键错配异构体杂质的产生,降低了纯化难度,粗肽的纯度及收率均较高,原料廉价易得,工艺操作简单,适于工业大规模生产。
具体实施方式
下面用具体实施例对本发明进行详细说明,但不限定本专利;根据本发明改变原料的投料比或是反应溶剂及缩合剂等,均在本发明的保护范围内。
说明书和权利要求书中所使用的缩写含义如下:
英文缩写 | 中文含义 |
Wang树脂 | 王树脂 |
CTC树脂 | 2-氯三苯甲基氯树脂 |
Fmoc | 9-芴甲氧羰基 |
Mmt | 4-甲氧基三苯甲基 |
Trt | 三苯甲基 |
Acm | 乙酰胺基甲基 |
OtBu | 叔丁氧基 |
tBu | 叔丁基 |
HOBt | 1-羟基苯并三唑 |
HBTU | 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐 |
DIC | N,N-二异丙基碳二亚胺 |
DIEA | N,N-二异丙基乙胺 |
AcOH | 乙酸 |
DCM | 二氯甲烷 |
DMF | N,-N二甲基甲酰胺 |
DMAP | 4-二甲氨基吡啶 |
DMSO | 二甲基亚砜 |
TFA | 三氟醋酸 |
TIS | 三异丙基硅烷 |
I2 | 碘 |
Vc | 维生素C |
实施例1:Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂的制备
准确称取CTC树脂(1.0mmol/g)320g置于肽树脂合成反应器中,加入3L DCM溶胀1h。溶胀结束,以DMF洗涤3次,每次3L。称取Fmoc-Cys(Mmt)-OH 394g、HOBt 87g用2L DMF溶解后,加入110mL DIC活化,将溶液加入到反应器中,反应4h。反应结束,树脂以DMF洗涤3次,然后加入预先配制的封端试剂(2.5L DCM,0.3L甲醇,0.2L DIEA),封端反应1h。封端完成后,DMF洗涤4次,DCM洗涤2次,甲醇洗涤3次,每次3L,然后真空干燥树脂,共得Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂507g,取少量树脂,测定Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂的替代度为0.61mmol/g。经计算,合成规模为309mmol。
实施例2:片段I肽树脂的制备
称取实施例1中替代度为0.61mmol/g的Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂493g(300mmol)置于肽树脂合成反应器中,加入4L DCM溶胀2h。溶胀结束,以DMF洗涤3次,每次4L,然后加入4L20%哌啶/DMF溶液脱保护两次,分别进行10min和10min。脱保护结束,树脂以DMF洗涤6次,每次4L。称取Fmoc-Cys(Trt)-OH352g、HOBt 81g用2L DMF溶解后,加入103mL DIC活化,将溶液加入到反应器中,反应2h,Kaiser test监测反应终点。反应结束,树脂以DMF洗涤5次,然后脱保护偶联下一位保护氨基酸。重复上述步骤,依次进行Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Cys(Mmt)-OH的偶联,制备Fmoc-Cys(Mmt)-Cys(Acm)-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Cys(Mmt)-CTC树脂。制备完毕的肽树脂先以DCM洗涤3次,再用甲醇洗涤3次,每次4L,洗涤5min,真空干燥后得片段I肽树脂1046g。
实施例3:片段I线性肽的制备
称取实施例2中所得片段I肽树脂700g(200mmol)置于10L反应瓶中,加入7L裂解试剂TFA-TIS-DCM(5-5-90),室温下,反应5min。反应结束,裂解液过滤到抽滤瓶中。上述裂解反应重复进行3次,合并滤液,用相同体积的0.1mol/L的NaHCO3水溶液洗涤滤液,直至溶液pH为7-8,25℃旋蒸浓缩,过滤收集析出的沉淀,真空干燥得片段I线性肽261g,纯度82.3%,收率95%
实施例4:第一对二硫键的形成
称取实施例3中所得片段I线性肽130.5g(100mmol),溶解在50L乙腈-水(1:1)溶液中,氨水调节溶液pH至7.5,加入溶液体积比为0.1%的30%H2O2溶液,搅拌反应10h。旋蒸浓缩反应液,过滤收集析出的固体,真空干燥后得片段I氧化肽135g,HPLC分析纯度为80.5%。
实施例5:Fmoc-Tyr(tBu)-Wang树脂的制备
称取载体Wang树脂110g(1.0mmol/g)置于合成柱中,用1L DMF洗涤两次,加入1LDCM溶胀30min;抽掉DCM后,加入Fmoc-Tyr(tBu)-OH/DIC/HOBt的混合溶液[称取152g(330mmol)Fmoc-Tyr(tBu)-OH和45g(330mmol)HOBT置于反应瓶中,加入0.5L体积比例为1∶1的DMF和DCM混合溶液搅拌溶解,低温(0℃)下加入51mL(360mmol)DIC,活化5min],反应10min后加入4.0g(33mmol)DMAP;反应4h,抽掉反应液,用1L DMF洗涤两次,加入封端试剂1.2L(240ml乙酸酐和204ml吡啶溶解于756mL DMF中)反应2h,抽滤掉反应液,分别用DMF、DCM、甲醇洗涤3次,真空干燥后得Fmoc-Tyr(tBu)-Wang树脂156g,取少量树脂,测定Fmoc-Tyr(tBu)-Wang树脂的替代度为0.67mmol/g。经计算,合成规模为105mmol。
实施例6:含一对二硫键的利那洛肽肽树脂的制备
称取实施例5中替代度为0.67mmol/g的Fmoc-Tyr(tBu)-Wang树脂75g(50mmol)置于肽树脂合成反应器中,加入700mLDCM溶胀2h。溶胀结束,以DMF洗涤3次,每次600mL,然后加入600mL 20%哌啶/DMF溶液脱保护两次,分别进行10min和10min。脱保护结束,树脂以DMF洗涤6次,每次600mL。称取Fmoc-Cys(Trt)-OH 59g、HOBt 13.5g用300mL DMF溶解后,加入17mLDIC活化,将溶液加入到反应器中,反应2h,Kaiser test监测反应终点。反应结束,树脂以DMF洗涤5次,然后脱保护偶联下一位保护氨基酸。重复上述步骤,依次进行Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH的偶联,制备H-Asn(Trt)-Pro-Ala-Cys(Acm)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Wang树脂。
称取HOBt 13.5g(100mmol)与实施例4中所得片段I氧化肽135g(100mmol)用300mLDMF溶解后,加入17ml DIC活化,将溶液加入到反应器中,反应4h,Kaiser test监测反应终点。反应结束,加入600mL 20%哌啶/DMF溶液脱保护两次,分别进行10min和10min。脱保护结束,树脂先以DMF洗涤3次,DCM洗涤2次,再用甲醇洗涤3次,每次600mL,洗涤5min,真空干燥后得含一对二硫键的利那洛肽肽树脂145g
实施例7:含一对二硫键的利那洛肽粗肽的制备
称取实施例6所得含一对二硫键的利那洛肽肽树脂145g(50mmol)置于2L圆底烧瓶中,冰浴下加入1.5L裂解试剂TFA-TIS-H2O(90-5-5),反应2h后,抽滤,树脂用TFA洗涤3次,每次20ml,合并滤液和洗液,倾倒入15L预冷的甲基叔丁基醚中,冰柜内静止1h,抽滤得固体,沉淀以常温甲基叔丁基醚洗涤5次后真空干燥得粗肽80.4g,纯度76.5%,收率105%。
实施例8:第二对二硫键的形成
称取实施例7中所得粗肽40.2g(25mmol),溶解在40L乙腈-水(1:1)溶液中,氨水调节溶液pH至7.5,加入溶液体积0.05%的30%H2O2溶液,搅拌反应10h。
实施例9:第三对二硫键的形成
向实施例8中的反应液中加入8L AcOH,混匀后加入63.4g I2,搅拌反应0.5h,然后加入44g Vc还原过量的I2,终止反应。HPLC分析粗肽纯度72.3%。
实施例10:利那洛肽精肽的制备
将实施例9中氧化反应液用0.45μm微孔滤膜过滤后,选用内径为100mm C18制备柱,经纯化、转盐,冻干后得利那洛肽精肽22.5g,纯度大于99.8%,收率59%。
Claims (7)
1.一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)固相合成片段I:以CTC树脂为固相载体,通过Fmoc固相合成法合成片段I肽树脂,经裂解反应,得到片段I线性肽,其结构如下:
Fmoc-Cys-Cys(Acm)-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Cys-OH
(b)第一对二硫键形成:将片段I线性肽溶解在溶剂中氧化形成第一对二硫键,得到片段I氧化肽,其结构如下:
(c)固相合成片段II肽树脂:以Wang脂或CTC树脂作为固相载体,通过Fmoc固相合成法合成片段II肽树脂,其结构如下:
H-Asn(Trt)-Pro-Ala-Cys(Acm)-Thr(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-Resin
(d)含一对二硫键利那洛肽的合成:片段I氧化肽经缩合试剂活化后,与片段II肽树脂偶联并脱除Fmoc保护基,经裂解反应,得到含一对二硫键的利那洛肽粗肽,其结构如下:
(e)第二对二硫键的形成:将上述粗肽溶解在溶剂中,调节pH,加入氧化剂氧化形成第二对二硫键,其结构如下:
(f)第三对二硫键的形成:在上步溶液中加入AcOH,混和均匀后,再加入I2进行搅拌反应,最后加入Vc还原过量的I2,终止反应,氧化形成第三对二硫键,其结构如下:
所述步骤(b)中,氧化形成第一对二硫键的条件为:将片段I线性肽溶解在溶剂中,形成浓度为0.5-5.0mg/mL的溶液,用氨水调节溶液pH值至7.0-8.0,以DMSO,H2O2,或空气中的任意一种为氧化剂,氧化反应10-20h,旋蒸浓缩反应液,过滤收集析出的沉淀,真空干燥得片段I氧化肽;用DMSO做氧化剂时用量为溶液体积的5-30%,用H2O2做氧化剂时的用量为溶液体积0.05-0.5%的30%H2O2溶液,用空气做氧化剂时采用通入空气的方式;
所述步骤(e)中,氧化形成第二对二硫键的条件为:将步骤(d)中所得含一对二硫键的利那洛肽粗肽溶解在溶剂中,形成浓度为0.5-5.0mg/mL的溶液,用氨水调节溶液pH值至7.0-8.0,以DMSO,H2O2,或空气中的任意一种为氧化剂,搅拌反应5-10h;用DMSO做氧化剂时用量为溶液体积的5-30%,用H2O2做氧化剂时的用量为溶液体积0.05-0.5%的30%H2O2溶液,用空气做氧化剂时采用通入空气的方式;
所述步骤(f)中,氧化形成第三对二硫键的条件为:向上述步骤(e)的反应液中加入溶液体积10-30%的AcOH,然后加入10-50倍当量的I2,搅拌反应0.5-4h,反应结束,加入与I2相同当量的Vc还原过量的I2,终止反应。
2.根据权利要求1所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述步骤(a)中,操作过程为:第6位保护氨基酸Fmoc-Cys(Mmt)-OH与CTC树脂反应,制得Fmoc-Cys(Mmt)-CTC树脂,然后在缩合试剂的作用下逐一偶联,Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Cys(Mmt)-OH获得片段I肽树脂;将片段I肽树脂加入到裂解液中,20-25℃下反应3-5min,重复裂解3-5次;反应结束,将裂解液过滤并合并到一起;用0.1-1.0mol/L NaHCO3水溶液洗涤裂解液,直至pH为7-8;旋蒸浓缩裂解液,过滤收集析出的沉淀,真空干燥得片段I线性肽;所述裂解液为加入体积比1-10%TFA及体积比1-5%TIS的DCM溶液。
3.根据权利要求1所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述步骤(c)中,片段Ⅱ肽树脂的合成过程为:第14位保护氨基酸Fmoc-Tyr(tBu)-OH与Wang树脂反应,制得Fmoc-Tyr(tBu)-树脂,然后在缩合试剂的作用下逐一偶联Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH,获得片段Ⅱ肽树脂。
4.根据权利要求1所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述步骤(d)中,含一对二硫键利那洛肽的合成过程为:片段I氧化肽与片段Ⅱ肽树脂在缩合试剂的作用下,发生接肽反应,生成含一对二硫键的利那洛肽肽树脂,然后再用裂解剂进行1-3h裂解反应,最后过滤裂解液,经甲叔醚沉降洗涤,真空干燥得含一对二硫键的利那洛肽粗肽。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述的CTC树脂或Wang树脂的替代度为0.5-1.0mmol/g,所述缩合剂为DIC/HOBT、DIC/HOAT、TBTU/HOBT/DIPEA、HBTU/HOBT/DIPEA、HATU/HOAT/DIPEA的一种。
6.根据权利要求1或4所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述步骤(d)中的裂解液为加入体积比1-5%清除剂的TFA溶液,所述清除剂为苯甲醚、苯甲硫醚、苯酚、水和三异丙基硅烷中的一种或几种。
7.根据权利要求1所述的一种制备利那洛肽的方法,其特征在于,所述溶剂为DCM,DMF,乙醇,乙腈,甲醇与水任意一种或几种混合液。
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