CN104829750A - 肝素锂的精制工艺 - Google Patents

肝素锂的精制工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN104829750A
CN104829750A CN201510270912.5A CN201510270912A CN104829750A CN 104829750 A CN104829750 A CN 104829750A CN 201510270912 A CN201510270912 A CN 201510270912A CN 104829750 A CN104829750 A CN 104829750A
Authority
CN
China
Prior art keywords
add
lithium
weight
refining
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510270912.5A
Other languages
English (en)
Inventor
王芃
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SUZHOU WISMED PHARMACEUTICAL CO Ltd
Original Assignee
SUZHOU WISMED PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SUZHOU WISMED PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical SUZHOU WISMED PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201510270912.5A priority Critical patent/CN104829750A/zh
Publication of CN104829750A publication Critical patent/CN104829750A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了肝素锂的精制工艺。工艺包括以下几个步骤：（1）预处理；（2）酶解；（3）一次氧化；（4）二次氧化；（5）沉淀。本发明的精制工艺，步骤简单，以粗品肝素钠为原料，通过与氯化锂进行离子交换获得肝素锂，通过酶解和加入蛋白质絮凝剂去除蛋白质，通过两次氧化脱色，最后通过无水乙醇沉淀获得精制肝素锂。酶解和加入蛋白质絮凝剂保证蛋白质去除完全，分两次氧化，可减短氧化反应的时间，从而减少过氧化氢对肝素锂活性的影响。

Description

肝素锂的精制工艺
技术领域：
本发明涉及一种肝素锂的精制工艺，属于生化技术领域。
背景技术：
肝素主要从牛肺或猪小肠黏膜提取，是一种由葡萄糖胺、L- 艾杜糖醛苷、N- 乙酰葡萄糖胺和 D- 葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂。肝素通过与抗凝血酶 III 结合使其暴露精氨酸反应中心，与活化的凝血因子结合使其灭活，主要灭活 Xa 和 IIa 因子。肝素主要用于预防和治疗血栓栓塞性疾病，如心肌梗塞、肺栓塞、脑血管栓塞、外周静脉血栓等，可防止血栓的形成和扩大。还可用于 DIC 的早期及其它体内外的抗凝。
肝素锂在临床检验中有独特的价值，广泛用于急诊生化检查、血流变检查的血液标本的采集和抗凝。由于血液从人体抽出到凝固析出血清一般需要一小时以上的时间，严重影响急诊结果报告时间，因此临床急诊常用肝素抗凝血浆进行生化检查。当检验血标本中的钠离子时，为避免影响检测结果，常用肝素锂代替。此外，肝素锂还是红细胞渗透性试验的理想的抗凝剂。
目前，肝素锂的制备以肝素钠为原料、通过钠离子与锂离子的交换进行制备，该法需要选用精品肝素钠为原料，原料成本高造成肝素锂的价格昂贵。
发明内容：
本发明目的是，用来弥补现有技术的不足，而提供一种肝素锂的精制工艺。
为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：
肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤：
（1）预处理：将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30-50min，得到反应液；
（2）酶解：向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60℃条件下酶解3-4h；加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
（3）一次氧化：向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应1-2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
（4）二次氧化：将步骤（3）中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-1h，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
（5）沉淀：向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
所述的肝素锂的精制工艺，步骤（1）中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。
所述的肝素锂的精制工艺，第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50%；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。
所述的肝素锂的精制工艺，步骤（2）中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。
所述的肝素锂的精制工艺，所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。
所述的肝素锂的精制工艺，步骤（3）中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3%；步骤（4）中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
本发明的有益效果如下：
本发明的精制工艺，步骤简单，以粗品肝素钠为原料，通过与氯化锂进行离子交换获得肝素锂，通过酶解和加入蛋白质絮凝剂去除蛋白质，通过两次氧化脱色，最后通过无水乙醇沉淀获得精制肝素锂。酶解和加入蛋白质絮凝剂保证蛋白质去除完全，分两次氧化，可减短氧化反应的时间，从而减少过氧化氢对肝素锂活性的影响。本发明工艺得到的肝素锂单位效价为 180-200U/mg，产品回收率为95-97%。
具体实施方式：
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤：
（1）预处理：将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30-50min，得到反应液；
（2）酶解：向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60℃条件下酶解3-4h；加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
（3）一次氧化：向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应1-2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
（4）二次氧化：将步骤（3）中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-1h，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
（5）沉淀：向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
其中，步骤（1）中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50%；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤（2）中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤（3）中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3%；步骤（4）中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
实施例2
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤：
（1）预处理：将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30-50min，得到反应液；
（2）酶解：向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60℃条件下酶解3-4h；加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
（3）一次氧化：向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应1-2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
（4）二次氧化：将步骤（3）中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-1h，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
（5）沉淀：向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
其中，步骤（1）中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50%；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤（2）中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤（3）中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3%；步骤（4）中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
实施例3
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤：
（1）预处理：将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30-50min，得到反应液；
（2）酶解：向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60℃条件下酶解3-4h；加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
（3）一次氧化：向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应1-2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
（4）二次氧化：将步骤（3）中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-1h，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
（5）沉淀：向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
其中，步骤（1）中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50%；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤（2）中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤（3）中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3%；步骤（4）中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。

Claims (6)

1.肝素锂的精制工艺，其特征在于，包括以下几个步骤：
（1）预处理：将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30-50min，得到反应液；
（2）酶解：向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60℃条件下酶解3-4h；加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
（3）一次氧化：向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应1-2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
（4）二次氧化：将步骤（3）中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-1h，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
（5）沉淀：向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
2.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤（1）中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。
3.根据权利要求1或2所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50%；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。
4.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤（2）中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。
5.根据权利要求1或4所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。
6.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤（3）中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3%；步骤（4）中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
CN201510270912.5A 2015-05-26 2015-05-26 肝素锂的精制工艺 Pending CN104829750A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510270912.5A CN104829750A (zh) 2015-05-26 2015-05-26 肝素锂的精制工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510270912.5A CN104829750A (zh) 2015-05-26 2015-05-26 肝素锂的精制工艺

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104829750A true CN104829750A (zh) 2015-08-12

Family

ID=53807975

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510270912.5A Pending CN104829750A (zh) 2015-05-26 2015-05-26 肝素锂的精制工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104829750A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105565539A (zh) * 2015-12-14 2016-05-11 济南自然力生物技术有限公司 一种利用肝素废水制备营养诱食剂的方法
CN109776696A (zh) * 2019-01-15 2019-05-21 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 一种高纯度肝素钠的制备工艺
CN110878129A (zh) * 2019-12-06 2020-03-13 中国科学院烟台海岸带研究所 一种氨基葡萄糖肝素盐及其应用
CN111560087A (zh) * 2020-06-28 2020-08-21 揭阳市润达肠衣有限公司 一种高品质肝素钠的纯化方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1760215A (zh) * 2005-11-21 2006-04-19 武汉理工大学 离子平衡交换法制备肝素锂
CN102617756A (zh) * 2012-03-23 2012-08-01 武汉博锐通科技有限公司 肝素锂制备方法
CN103601820A (zh) * 2013-10-31 2014-02-26 安徽工贸职业技术学院 一种肝素锂的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1760215A (zh) * 2005-11-21 2006-04-19 武汉理工大学 离子平衡交换法制备肝素锂
CN102617756A (zh) * 2012-03-23 2012-08-01 武汉博锐通科技有限公司 肝素锂制备方法
CN103601820A (zh) * 2013-10-31 2014-02-26 安徽工贸职业技术学院 一种肝素锂的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
李红心: "肝素钠的精制及效价分析", 《山西大学学报(自然科学版)》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105565539A (zh) * 2015-12-14 2016-05-11 济南自然力生物技术有限公司 一种利用肝素废水制备营养诱食剂的方法
CN105565539B (zh) * 2015-12-14 2018-10-26 济南自然力生物技术有限公司 一种利用肝素废水制备营养诱食剂的方法
CN109776696A (zh) * 2019-01-15 2019-05-21 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 一种高纯度肝素钠的制备工艺
CN110878129A (zh) * 2019-12-06 2020-03-13 中国科学院烟台海岸带研究所 一种氨基葡萄糖肝素盐及其应用
CN110878129B (zh) * 2019-12-06 2022-02-01 中国科学院烟台海岸带研究所 一种氨基葡萄糖肝素盐及其应用
CN111560087A (zh) * 2020-06-28 2020-08-21 揭阳市润达肠衣有限公司 一种高品质肝素钠的纯化方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104829750A (zh) 肝素锂的精制工艺
CN107698689B (zh) 一种从鱼腥草中提取多糖的方法
CN101787084A (zh) 一种刺参糖胺聚糖的制备方法
CN103044578A (zh) 一种高效精制粗品肝素钠的方法
CN103285031B (zh) 解聚海参糖胺聚糖在制备防治血栓栓塞疾病药物中的应用
CN106589167B (zh) 高效价粗品肝素钠的制备方法及其生产装置
CN102952203A (zh) 一种离子树脂交换法制备肝素锂的方法
AU2017416080B2 (en) Method for preparing betanin
CN103610081B (zh) 一种苹果膳食纤维的改性方法
CN112940150A (zh) 一种由肝素钠制备肝素钙的方法
CN104163878B (zh) 一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法
CN103588902A (zh) 精品肝素钠的分离纯化方法
CN104448043A (zh) 一种依诺肝素钠的生产及纯化方法
CN106883321A (zh) 一种从肝素钠副产物中提取舒洛地特原料药的方法
CN104341539A (zh) 一种酶法结合膜技术一步制备精品肝素钠的方法
CN109251255B (zh) 一种岩藻糖化硫酸软骨素FCShm及其制备方法和应用
CN105440163A (zh) 一种制备及纯化依诺肝素钠的方法
CN104829752A (zh) 高纯度低分子量肝素钠的制备方法
CN105418791B (zh) 剑麻果胶的制备方法
CN114316077A (zh) 一种海参多糖的制备方法与应用
CN105399864A (zh) 高纯度低分子量硫酸软骨素钠的制备工艺
CN103450370B (zh) 酶解法分离高分子量肝素钠的方法
CN102585034B (zh) 果胶磺化的方法
CN104086672A (zh) 一种粗品肝素钠的生产方法
RU2244008C1 (ru) Усовершенствованный способ получения нуклеината натрия

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
EXSB Decision made by sipo to initiate substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20150812