CN104770222A - 一种食用菌原种的接种方法 - Google Patents

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CN104770222A CN201510227044.2A CN201510227044A CN104770222A CN 104770222 A CN104770222 A CN 104770222A CN 201510227044 A CN201510227044 A CN 201510227044A CN 104770222 A CN104770222 A CN 104770222A
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Abstract

本发明涉及一种食用菌原种的接种方法,它包括以下步骤:制作母种培养料;接种;培养;配料;装料;灭菌;接种;培养;制作无菌水;粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与50-100g长满菌丝的培养料;将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释80-100倍,用于生产接种。通过将含有原种的培养料进行粉碎,将菌丝进行分段,极大的扩大了食用菌的生长点,使得扩繁倍数大大增加,降低生产成本。在粉碎时加入无菌水,使得粉碎更加彻底,进一步增加食用菌的生长点;无菌水可以作为食用菌原种的良好载体,保证其在栽培前的生理活性,提高栽培种的出菇率。

Description

一种食用菌原种的接种方法
技术领域
本发明涉及食用菌生产领域,具体的说是一种食用菌原种的接种方法。
背景技术
食用菌含有丰富的蛋白质和氨基酸,其含量是一般蔬菜和水果的几倍到几十倍。如鲜蘑菇含蛋白质为1.5-3.5%,是大白菜的3倍,萝卜的6倍,苹果的17倍。1公斤干蘑菇所含蛋白质相当于2公斤瘦肉,3公斤鸡蛋或12公斤牛奶的蛋白量。食用菌中赖氨酸含很丰富,含有组成蛋白质的18种氨基酸,和人体所必需的8种微量元素。谷物食品中含量少的赖氨酸,食用菌中含量也相当丰富。食用菌脂肪含量很低,约占干品重量的0.2-3.6%,而其中74-83%是人体健康有益的不饱和脂肪酸。食用菌还含有维生素,食用菌富含的VB1、V12,都高于肉类,草菇VC含量为辣椒的1.2-2.8倍,是柚、橙的2-5倍,香菇的17倍。香菇VD原含量高达128国际单位,是紫菜的8倍,甘薯的7倍,大豆的21倍。VD原经紫外线照射可转化为VD,促进对钙的吸收。食用菌还富含多种矿质元素:磷、钾、钠、钙、铁、锌、镁、锰、等及其他一些微量元素。
食用菌的药用保健价值丰富:①抗癌作用:食用菌的多糖体,能刺激抗体的形成,提高并调整机体内部的防御能力。能降低某些物质诱发肿瘤的发生率,并对多种化疗药物有增效作用。此外栗蘑中富含的有机硒,可作补硒食品,若长期食用,几乎可以防止一切癌变。②抗菌、抗病毒作用。③降血压、降血脂、抗血栓、抗心律失常、强心等。④健胃、助消化作用。⑤止咳平喘、祛痰作用。⑥利胆、保肝、解毒。⑦降血糖。⑧通便利尿。⑨免疫调节。
食用菌不仅味美,营养丰富,而且药用价值极高,因此对于食用菌食用或者深度加工的需求量极大,也就对食用菌的栽培带来一定的压力。
食用菌的栽培一般通过菌种进行繁殖。食用菌菌种分为母种、原种和栽培种,其中原种是通过接入母种制作而成的,栽培种则通过接入原种培养而成,一般一瓶/袋原种可以接20-25瓶/袋栽培种。因此传统食用菌的扩繁倍数小,大面积种植需要原种较多,成本较高,效率低。
发明内容
根据上述不足之处,本发明的目的是提供一种扩繁倍数大,生产成本低的一种原种接种方法。
为实现上述目的,本发明的技术方案在于:一种食用菌原种的接种方法,它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于22-25℃下静置培养10-15天,即可长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下2-3cm,中央打一个直径1-1.5cm,距瓶底2-4cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种2-6瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为20-28℃,避光培养,培养湿度为55-70%,培养30-50天,原种菌种瓶中长满菌丝即可;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为30-40min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与50-100g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释80-100倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
优选的是:所述配料步骤中,其培养料为:阔叶锯末65-75%,麸皮15-20%,米糠5-10%,玉米面5%,轻质碳酸钙1%,石膏1%,石灰0.5%,所述培养料的含水率为60%。
优选的是:所述配料步骤中,其培养料为:小麦粒或玉米粒或谷粒97%,碳酸钙3%,所述培养料的含水率为60%。
优选的是:所述配料步骤中,其培养料为:杂木屑38%、棉籽壳40%、麸皮20%、碳酸钙2%,所述培养料的含水率为60%。
优选的是:所述配料步骤中,其培养料为:阔叶树木屑78%、玉米粉10%、麸皮10%、蔗糖1%、石膏1%,所述培养料的含水率为60%。
本发明的有益效果在于:通过将含有原种的培养料进行粉碎,将菌丝进行分段,极大的扩大了食用菌的生长点,使得扩繁倍数大大增加,降低生产成本。另一方面,在粉碎时加入无菌水,使得粉碎更加彻底,进一步增加食用菌的生长点;同时,无菌水可以作为食用菌原种的良好载体,保证其在栽培前的生理活性,提高栽培种的出菇率。通过菌液的过滤,除去杂质,提高栽培种的纯度,减少杂质对于出菇的影响,提高出菇率。通过本方法,可以大大的提高食用菌的扩繁倍数,并且通过实际应用发现还可以有效缩短发菌时间。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种食用菌原种的接种方法,它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于22℃下静置培养15天,长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;采用培养料为:阔叶锯末67.5%,麸皮17%,米糠8%,玉米面5%,轻质碳酸钙1%,石膏1%,石灰0.5%,培养料的含水率为60%,用于培养平菇菌种。
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下2cm,中央打一个直径1cm,距瓶底2cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种2瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为20℃,避光培养,培养湿度为55%,培养50天,原种菌种瓶中长满菌丝;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为30min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与50g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释80倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
在青岛华盛绿能农业科技有限公司采用传统的和本发明原种接种方法进行对比:利用1瓶原种接种2000袋平菇栽培袋,利用传统接种方式使用100袋平菇原种接种2000袋平菇进行对照。平菇菌袋为聚乙烯22×35cm,栽培料填装高度为25cm左右,装满栽培料后在中央打一个2×2.5cm的孔洞,扎口,进行常压灭菌。在菌包工厂智能化养菌房内培养,在公司光伏大棚阴阳棚内进行出菇,具体参数如下:
菌种栽培参数 传统原种接种方式 新原种接种方式
接种数量(包) 2000 2000
灭菌温度(℃) 100 100
灭菌时间(h) 14 14
冷却时间(h) 24 24
接种量 30-40g 30ml
原种使用数量(瓶) 100 1
菌丝培养温度(℃) 22-25 22-25
菌丝培养湿度(%) 60-70 60-70
菌丝培养时间 35 25
污染率(%) 1 0.5
出菇温度(%) 15-18 15-18
培养湿度(%) 85-95 85-95
光照(lux) 300-500 300-500
出菇期(天) 20 20
生物转化率(%) 150 180
经过实验,采用新的原种接种方式的平菇比传统方式接种的平菇其生物转化率提高30%,每瓶原种的成本为4元,2000袋即可节约成本380-390元。
实施例2
一种食用菌原种的接种方法,它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于25℃下静置培养10天,菌丝长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;采用的培养料为:小麦粒97%,碳酸钙3%,培养料的含水率为60%,用于猴头菇栽培。
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下3cm,中央打一个直径1.5cm,距瓶底4cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种6瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为28℃,避光培养,培养湿度为70%,培养30天,原种菌种瓶中长满菌丝;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为40min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与100g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释100倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
在青岛华盛绿能农业科技有限公司采用新的原种接种方法和传统原种接种方法各制作猴头菇菌袋2000袋,菌袋为聚丙烯材料,规格为17×33cm,,栽培料高度为20cm左右,装满栽培料后在中央插入16cm的打孔棒,用三件套封口,进行高压灭菌,灭菌温度为121℃,灭菌时间为3h。在智能化养菌房进行养菌管理培养,在光伏单栋大棚进行出菇实验,具体参数如下:
菌种栽培参数 传统原种接种方式 新原种接种方式
接种数量(包) 1000 1000
灭菌温度(℃) 121 121
灭菌时间(h) 3 3
冷却时间(h) 24 24
原种使用数量(瓶) 100 1
接种量 30-40g 30ml
菌丝培养温度(℃) 22-25 22-25
菌丝培养湿度(%) 60-70 60-70
菌丝培养时间 30 20
污染率(%) 0.3 0.1
出菇温度(%) 16-20 16-20
培养湿度(%) 85-95 85-95
光照(lux) 300-500 300-500
出菇期(天) 20 20
生物转化率(%) 100 120
经实验,发菌时间提前10天即可长满菌袋,生物转化率提高了10-20%,污染率控制在0.1%以内,大大降低了污染率。而且2000袋猴头菇仅需要1瓶原种,大大降低了生产成本。
实施例3
一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于24℃下静置培养12天,即可长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;采用的培养料为:杂木屑38%、棉籽壳40%、麸皮20%、碳酸钙2%,所述培养料的含水率为60%,用于秀珍菇菌栽培。
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下2.5cm,中央打一个直径15cm,距瓶底3cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种4瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为24℃,避光培养,培养湿度为60%,培养45天,原种菌种瓶中长满菌丝;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为35min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与70g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释90倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
在青岛华盛绿能农业科技有限公司采用本发明原种接种方法和传统原种接种方法各制作秀珍菇菌包2000包,秀珍菇菌袋为聚丙烯塑料袋22×35cm,栽培料填装高度为25cm左右,装满栽培料后在中央打一个2cm×2.5cm的孔洞,扎口,进行高压灭菌,121℃灭菌3h。灭菌完毕冷却至室温,在菌包工厂智能化养菌房内培养,在公司光伏大棚阴阳棚内进行出菇,具体参数如下:
菌种栽培参数 传统原种接种方式 新原种接种方式
接种数量(包) 2000 2000
灭菌温度(℃) 100 100
灭菌时间(h) 14 14
冷却时间(h) 24 24
接种量 30-40g 30ml
原种使用数量(瓶) 100 1
菌丝培养温度(℃) 22-25 22-25
菌丝培养湿度(%) 60-70 60-70
菌丝培养时间 30 25
污染率(%) 1 0.5
出菇温度(%) 15-18 15-18
培养湿度(%) 85-95 85-95
光照(lux) 300-500 300-500
出菇期(天) 20 20
生物转化率(%) 120 130
经试验,发菌时间提前5天即可长满菌袋,生物转化率提高了10%,污染率控制在0.5%以内,大大降低了污染率。而且2000袋秀珍菇仅需要1瓶原种,大大降低了生产成本。
实施例4
一种食用菌原种的接种方法,它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于23℃下静置培养14天,菌丝长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;采用的培养料为:阔叶树木屑78%、玉米粉10%、麸皮10%、蔗糖1%、石膏1%,所述培养料的含水率为60%,用于杏鲍菇的栽培;
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下3cm,中央打一个直径1cm,距瓶底2cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种5瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为27℃,避光培养,培养湿度为65%,培养45天,原种菌种瓶中长满菌丝;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为38min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与80g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释95倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
在青岛华盛绿能农业科技有限公司采用本发明原种接种方法和传统原种接种方法各制作杏鲍菇菌包2000包,杏鲍菇菌包袋为聚丙烯塑料袋22×35cm,栽培料填装高度为25cm左右,装满栽培料后在中央打一个2cm×2.5cm的孔洞,扎口,进行高压灭菌,121℃灭菌3h。灭菌完毕冷却至室温,在菌包工厂智能化养菌房内培养,在公司光伏大棚阴阳棚内进行出菇,具体参数如下:
菌种栽培参数 传统原种接种方式 新原种接种方式
接种数量(包) 2000 2000
灭菌温度(℃) 100 100
灭菌时间(h) 14 14
冷却时间(h) 24 24
接种量 30-40g 30ml
原种使用数量(瓶) 100 1
菌丝培养温度(℃) 22-25 22-25
菌丝培养湿度(%) 60-70 60-70
菌丝培养时间 30 22
污染率(%) 0.6 0.2
出菇温度(%) 16-20 16-20
培养湿度(%) 85-95 85-95
光照(lux) 300-500 300-500
出菇期(天) 20 16
生物转化率(%) 120 130
经试验,发菌时间提前8天即可长满菌袋,生物转化率提高了10%,污染率控制在0.5%以内,大大降低了污染率。而且2000袋秀珍菇仅需要1瓶原种,大大降低了生产成本。

Claims (5)

1.一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:它包括以下步骤,
一、制作母种:
(1)制作母种培养料:1L母种培养料的原料为土豆200g,麸皮20g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,将培养料煮好后分装到18×20cm试管中,每支试管装试管体积的1/5的培养基,于121℃条件下灭菌30min;
(2)接种:试管趁热摆成斜面,待温度降至室温后开始接种,接种前超净工作台紫外灯消毒20min,于超净工作台中接种,每支试管接种面积为3mm×3mm的菌种块;
(3)培养:接种好的试管放于恒温振荡器中于22-25℃下静置培养10-15天,即可长满试管,用于制作原种;
二、原种培养:
(1)配料:根据不同品种的食用菌进行配料;
(2)装料:采用500ml透明玻璃菌种瓶,将上述配好的料装入菌种瓶中,装料高度为瓶口以下2-3cm,中央打一个直径1-1.5cm,距瓶底2-4cm的孔洞,采用透气瓶盖盖住菌种瓶;
(3)灭菌:将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中,于121℃条件下灭菌90min;
(4)接种:待菌种瓶及瓶中的培养料降至室温以后进行接种,采用灭菌后的接种环挑取培养好的母种,接种至培养料的表面,1支试管的母种接种2-6瓶原种菌种瓶;
(5)培养:菌种瓶接种好以后放于恒温室中进行培养,培养温度为20-28℃,避光培养,培养湿度为55-70%,培养30-50天,原种菌种瓶中长满菌丝即可;
三、原种接种:
(1)制作无菌水,灭菌温度为121℃,灭菌时间为30-40min;
(2)粉碎机在121℃下灭菌30min,保证无菌且降至室温后,取出原种菌种瓶中长满原种的培养料,与无菌水混合,在粉碎机中粉碎,混合比例为1L无菌水与50-100g长满菌丝的培养料;
(3)将粉碎好的菌种过滤,取过滤好的菌液稀释80-100倍,将稀释后的菌液接种至制作好的发酵罐无菌水中,直接用于生产接种。
2.根据权利要求1所述的一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:所述配料步骤中,其培养料为:阔叶锯末65-75%,麸皮15-20%,米糠5-10%,玉米面5%,轻质碳酸钙1%,石膏1%,石灰0.5%,所述培养料的含水率为60%。
3.根据权利要求1所述的一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:所述配料步骤中,其培养料为:小麦粒或玉米粒或谷粒97%,碳酸钙3%,所述培养料的含水率为60%。
4.根据权利要求1所述的一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:所述配料步骤中,其培养料为:杂木屑38%、棉籽壳40%、麸皮20%、碳酸钙2%,所述培养料的含水率为60%。
5.根据权利要求1所述的一种食用菌原种的接种方法,其特征在于:所述配料步骤中,其培养料为:阔叶树木屑78%、玉米粉10%、麸皮10%、蔗糖1%、石膏1%,所述培养料的含水率为60%。
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