CN104738743A - 一种降尿酸肽饮料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种降尿酸肽饮料及其制备方法，该饮料包含以下成分：秋刀鱼降尿酸肽干粉、果汁、蔗糖、柠檬酸和稳定剂；所述的秋刀鱼降尿酸肽干粉由以下步骤制得：将秋刀鱼绞碎后加水、加热升温，加入蛋白酶水解，然后灭酶，离心，去除上层鱼油和下层沉淀物，取中间清液喷雾干燥后即为秋刀鱼降尿酸肽干粉。本发明采用现代生物酶解技术，将秋刀鱼蛋白中的降尿酸成分释放出来，然后通过添加食品辅料将其制成方便携带和饮用的降尿酸饮料产品。本发明工艺操作简单、生产成本低、没有任何污染，所得降尿酸肽饮料产品不仅降尿酸功效强，而且饮用方便。

Description

一种降尿酸肽饮料及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种降尿酸肽饮料及其制备方法。

背景技术

人体内的细胞每天都在发生新陈代谢，体内的核酸会被破坏生成嘌呤，而这些体内产生的嘌呤以及从体外食品中摄入的嘌呤会在体内黄嘌呤氧化酶及腺苷脱氨酶的作用下分解，最终形成尿酸。

正常状态下，健康人群的血尿酸含量均值在200-410μmol/L之间。但如果人体内代谢发生紊乱，或者食用过多的富含嘌呤食物，使得体内嘌呤沉积过多的话，将有可能使得体内血液中尿酸达到饱和值(416μmol/L)，从而出现高尿酸血症。而长期的高血尿酸水平会对血管、心脏、肾脏均会产生一系列不良后果，增加了癌症、高血压、糖尿病及心脑血管疾病等患病风险，且以极大的机率使得体内尿酸盐沉积，引发痛风，令人苦不堪言。由于饮食结构和生活方式的改变，高尿酸血症及痛风患者也随之增加，已成为现代社会常见的一种系统性风湿性疾病。

能快速降低血尿酸水平的药物以西药为主，如别嘌呤醇是一种通过抑制黄嘌呤氧化酶活性而减少尿酸生成、降低血尿酸浓度的药物；苯溴马隆、丙磺舒等药物主要是通过促进肾脏对尿酸的排泄来达到降低体内尿酸含量的目的。虽然这些药物作用明确，见效快，但都具有不同程度的毒副作用，如在别嘌呤醇服用初期会诱发痛风，且可能会出现皮疹、肝脏及肾脏毒性；而苯溴马隆、丙磺舒可能会对肝脏功能有一定的损坏。中药相比别嘌呤醇等具副作用的西药虽然起效慢，但是毒副作用极小，是中国民间治疗高尿酸血症、抗痛风的首选。但是中药成分复杂，作用靶点不明确，而且往往要经历较长的熬药过程，服用极其不方便。

生物活性肽是由氨基酸通过酰胺键连接而成的聚合物，由于其食源性及较好的生理活性，近年来成为保健品和药品行业的新星。目前发现了具有不同生理活性的蛋白肽，如抗氧化肽、降血压肽、抗癌肽等。而且，随着科技的发展，越来越多的生物活性肽被发现。生物活性肽除了具有各种有优秀的生理活性外，更是具有较蛋白质和氨基酸更容易被人体吸收、良好的加工性能等优点。

由于海洋环境与陆地环境有极大的不同，生活在海洋的生物体蕴藏着许多功能特异、结构新颖的生理活性物质。秋刀鱼属于海洋鱼类，其蛋白质含量高，氨基酸组成均衡，但由于脂肪含量极高(20％左右)，限制了它的应用领域，目前仅部分作为食用，大部分被浪费掉。

如果能从低值的秋刀鱼中制备具有降尿酸作用的活性物质，并将其制备成饮料产品，既提高了秋刀鱼的附加值，丰富了饮料的品种，又能起到预防和治疗高尿酸血症的作用，且还极大方便了降尿酸的方式，在生活娱乐的同时达到降尿酸的目的。因此，以秋刀鱼为原料制备降尿酸肽饮料，具有较大的经济和社会意义。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种降尿酸肽饮料，该饮料中的降尿酸肽是促使秋刀鱼蛋白中具有降尿酸作用的蛋白肽片段释放后得到的。

本发明的另一目的在于提供上述的降尿酸肽饮料的制备方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种降尿酸肽饮料，包含以下成分：秋刀鱼降尿酸肽干粉、果汁、蔗糖、柠檬酸和稳定剂；

其中，秋刀鱼降尿酸肽干粉的用量占饮料质量的5.0～10.0％；果汁用量占饮料质量的5.0～10.0％；蔗糖用量占饮料质量的5～8％；稳定剂用量占饮料质量的0.06～0.15％；柠檬酸用量根据饮料最终pH值为3.8～4.2进行添加；余量为水；

所述的秋刀鱼降尿酸肽干粉，其制备方法包含以下步骤：

秋刀鱼去头去内脏，过绞肉机绞碎，加入秋刀鱼碎肉质量1～2倍水，温度升至50～55℃，加入蛋白酶在50～55℃下保温水解6～9小时，灭酶，离心，去除上层鱼油和下层沉淀物，取中间的清液，得到秋刀鱼肽液；将秋刀鱼肽液真空浓缩至30％以上，进行喷雾干燥，收集干粉，得到秋刀鱼降尿酸肽干粉；

所述的蛋白酶是商业用的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，优选诺维信公司的碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和风味蛋白酶(Flavourzyme 500MG)；碱性蛋白酶的加入量为秋刀鱼碎肉质量0.4～1.0％，风味蛋白酶的加入量为秋刀鱼碎肉质量的0.8～1.5％；

所述的果汁优选浓缩橙汁；

所述的稳定剂为黄原胶、结冷胶或海藻酸钠中的一种以上。

上述的降尿酸肽饮料的制备方法，包含以下步骤：

将稳定剂、蔗糖与秋刀鱼降尿酸肽干粉混合，再加入到果汁中进行混合搅拌均匀，然后用柠檬酸调节混合物的pH值至3.8～4.2，最后用水定容；进行均质、罐装、灭菌，得到降尿酸肽饮料；

所述均质是在20～50MPa下均质1～2次；

所述灭菌是115～121℃灭菌4～6s。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

(1)本发明采用现代生物酶解技术，将秋刀鱼蛋白中的降尿酸成分释放出来，然后通过添加食品辅料将其制成方便携带和饮用的降尿酸饮料产品。

(2)本发明工艺操作简单、生产成本低、没有任何污染，所得降尿酸肽饮料产品不仅降尿酸功效强，而且饮用方便。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

以下各实施例中所涉及的实验指标其试验方法如下：

1、秋刀鱼降尿酸肽的黄嘌呤氧化酶的抑制率实验

(1)溶液的配置

0.2mol/L(pH 7.5)磷酸缓冲液(PBS)：准确称取30.0838g Na₂HPO₄·12H₂O和2.4962g NaH₂PO₄·2H₂O，用去离子水溶解，定容至500ml。

黄嘌呤溶液：准确称取6.4mg黄嘌呤，先用1ml 1M NaOH将其溶解，再加入100ml PBS，以1M HCl调节pH值至7.5。

黄嘌呤氧化酶：取120μl酶液，以PBS稀释至8ml。

尿酸标曲：准确称取10mg尿酸，加入10ml水，再稀释至0.1～0.9mg/ml。

醋酸胺-冰醋酸：准确称取醋酸胺3.85g定容至1000ml，然后加入4ml冰醋酸。

(2)样品预处理：

将样品稀释至40mg/ml，在96孔酶标板中依次加入50μl样品与50μl黄嘌呤，每个样品做3个平行，37℃保温10min后加入150μl黄嘌呤氧化酶，37℃继续保温20min后加入80μl 1M HCl终止反应，过0.25μm水性膜，待测。

色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C18柱(5μm，4.6×250mm,安捷伦),

液相条件：洗脱液为10％甲醇+90％醋酸胺-冰醋酸溶液，进样体积为20μL，流速1ml/min，检测波长为290nm，运行时间10min。

(3)计算公式

式中：

A₀——未添加肽样品进行高效液相色谱分析，尿酸峰的峰面积

A——添加肽样品进行高效液相色谱分析，尿酸峰的峰面积

2、离心沉淀率的测定

在称量之前，首先轻轻地将降尿酸肽饮料摇匀，在容量为10ml的离心管中准确称取10g降尿酸肽饮料，然后于3800r/min的转速下离心30min。离心结束后，除去上层清液，称量底部沉淀和离心管的质量，每个样品进行3次重复实验，通过下面的公式计算乳状液的离心沉淀率：

其中，M1为离心管的净质量，M2为底部沉淀和离心管的质量。

实施例1

一种降尿酸肽饮料的制备方法，包括以下步骤：

(1)降尿酸肽的制备：秋刀鱼去头去内脏，过绞肉机绞碎，加入秋刀鱼碎肉质量1倍水，温度升至55℃，加入秋刀鱼碎肉质量0.4％的诺维信公司的Alcalase 2.4L和1.5％的诺维信公司的风味蛋白酶，在55℃下保温水解6小时，95℃加热30min灭酶，在5000r/min下离心20min，去除上层鱼油和沉淀物，取中间的清液，得到秋刀鱼肽液；然后将秋刀鱼肽液真空浓缩至30％以上，进行喷雾干燥，收集干粉，得到降尿酸肽A。

(2)降尿酸肽饮料的制备：首先将稳定剂、蔗糖和降尿酸肽A混合，然后加入到浓缩橙汁中，采用10％浓度的柠檬酸溶液将体系pH调至3.8，最后用水定容；先在金属罐中搅拌10min，接着在20MPa下均质2次，121℃下灭菌4～6s，最后进行罐装。得到降尿酸肽饮料产品A。

其中降尿酸肽含量为降尿酸肽饮料质量的5％、浓缩橙汁含量为降尿酸肽饮料质量的8％，蔗糖在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比7％、稳定剂(黄原胶和海藻酸钠质量比3:1配比混合得到)在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比0.08％。

降尿酸肽A的黄嘌呤氧化酶抑制率结果如表1。

降尿酸肽饮料A的沉淀率结果如表2。

实施例2

一种降尿酸肽饮料的制备方法，包括以下步骤：

(1)降尿酸肽的制备：秋刀鱼去头去内脏，过绞肉机绞碎，加入秋刀鱼碎肉质量2倍水，温度升至50℃，加入秋刀鱼碎肉质量1.0％的诺维信公司的Alcalase 2.4L和0.8％的诺维信公司的风味蛋白酶，在50℃下保温水解9小时，95℃加热30min灭酶，在5000r/min下离心20min，去除上层鱼油和沉淀物，取中间的清液，得到秋刀鱼肽液；然后将秋刀鱼肽液真空浓缩至30％以上，进行喷雾干燥，收集干粉，得到降尿酸肽B。

(2)降尿酸肽饮料的制备：首先将稳定剂、蔗糖和降尿酸肽A混合，然后加入到浓缩橙汁中，采用10％浓度的柠檬酸溶液将体系pH调至4.2，最后用水定容；先在金属罐中搅拌10min，接着在50MPa下均质1次，在118℃下灭菌4～6s，最后进行罐装。得到降尿酸肽饮料产品B。

其中降尿酸肽含量为降尿酸肽饮料质量的10％、浓缩橙汁含量为降尿酸肽饮料质量的10％，蔗糖在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比5％、稳定剂(海藻酸钠和结冷胶质量比2:1混合得到)在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比0.15％。

降尿酸肽B的黄嘌呤氧化酶抑制率结果如表1。

降尿酸肽饮料B的沉淀率结果如表2。

实施例3

一种降尿酸肽饮料的制备方法，包括以下步骤：

(1)降尿酸肽的制备：秋刀鱼去头去内脏，过绞肉机绞碎，加入秋刀鱼碎肉质量1.5倍水，温度升至53℃，加入秋刀鱼碎肉质量0.7％的诺维信公司的Alcalase 2.4L和1.0％的诺维信公司的风味蛋白酶，在53℃下保温水解7小时，95℃加热30min灭酶，在5000r/min下离心20min，去除上层鱼油和沉淀物，取中间的清液，得到秋刀鱼肽液；然后将秋刀鱼肽液真空浓缩至30％以上，进行喷雾干燥，收集干粉，得到降尿酸肽C。

(2)降尿酸肽饮料的制备：首先将稳定剂、蔗糖和降尿酸肽A混合，然后加入到浓缩橙汁中，采用10％浓度的柠檬酸溶液将体系pH调至4.0，最后用水定容；先在金属罐中搅拌10min，接着在30MPa下均质2次，115℃下灭菌4～6s，最后进行罐装。得到降尿酸肽饮料产品C。

其中降尿酸肽含量为降尿酸肽饮料质量的5％、浓缩橙汁含量为降尿酸肽饮料质量的5％，蔗糖在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比6％、稳定剂(黄原胶和结冷胶质量比5:1配比混合得到)在降尿酸肽饮料中的浓度为质量百分比0.1％。

降尿酸肽C的黄嘌呤氧化酶抑制率结果如表1。

降尿酸肽饮料C的沉淀率结果如表2。

表1降尿酸肽的黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制率

样品	XOD抑制率(40mg/ml)/％
		降尿酸肽A	12.26
降尿酸肽B	13.89
		降尿酸肽C	13.77

表2降尿酸肽饮料的离心沉淀率

样品	沉淀率/％
		降尿酸肽饮料A	1.43
降尿酸肽饮料B	1.55
		降尿酸肽饮料C	1.44

在人体新陈代谢的过程中，由人体自身核酸和ATP降解产生及从食物中摄取的嘌呤类物质经过腺苷转氨酶(ADA)作用生成次黄嘌呤，而次黄嘌呤经过黄嘌呤氧化酶(XOD)转化成黄嘌呤并最终生成尿酸，因此，黄嘌呤氧化酶是调节人体尿酸水平的关键性酶，其酶活的高低从一定程度上决定了人体血尿酸水平的高低，要实现降低人体尿酸水平除了促进尿酸的排泄外，抑制黄嘌呤氧化酶的活性也是手段之一。

本发明采用高效液相色谱法测定降尿酸肽的体外黄嘌呤氧化酶抑制率，表1表明采用本发明方法获得的秋刀鱼降尿酸肽均具有明显的抑制黄嘌呤氧化酶的活性，在40mg/ml浓度下，体外黄嘌呤氧化酶的抑制率达到12％以上。

本发明以秋刀鱼降尿酸肽为主要原料，通过添加果汁、酸味剂和稳定剂制备饮料，由于所采用的秋刀鱼降尿酸肽具有明显降尿酸作用，而在降尿酸肽饮料的制备过程中，由于添加的辅料和工艺并没有引入或生成对降尿酸功效有影响的物质，因此，采用本发明方法制备的降尿酸肽饮料也应该具有降尿酸作用。

此外，由于饮料产品要在市面上流通，必须要有较好的外观，也就是具有较好的保存稳定性。本专利通过添加稳定剂来达到饮料产品可长期保存稳定的目的。本实验主要是外加离心力加速饮料的不稳定来预测饮料产品的保藏稳定性，表2表明通过离心后，降尿酸肽饮料的沉淀率较低，仅为1.5％左右，说明采用本发明专利制备的降尿酸肽饮料具有较好的稳定性。因此，采用本发明方法制备的降尿酸肽饮料具有较好的应用前景。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种降尿酸肽饮料，其特征在于包含以下成分：秋刀鱼降尿酸肽干粉、果汁、蔗糖、柠檬酸和稳定剂；

所述的秋刀鱼降尿酸肽干粉，其制备方法包含以下步骤：

秋刀鱼去头去内脏，过绞肉机绞碎，加入秋刀鱼碎肉质量1～2倍水，温度升至50～55℃，加入蛋白酶在50～55℃下保温水解6～9小时，灭酶，离心，去除上层鱼油和下层沉淀物，取中间的清液，得到秋刀鱼肽液；将秋刀鱼肽液真空浓缩至30％以上，进行喷雾干燥，收集干粉，得到秋刀鱼降尿酸肽干粉。

2.根据权利要求1所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：秋刀鱼降尿酸肽干粉的用量占饮料质量的5.0～10.0％；果汁用量占饮料质量的5.0～10.0％；蔗糖用量占饮料质量的5～8％；稳定剂用量占饮料质量的0.06～0.15％；柠檬酸用量根据饮料最终pH值为3.8-4.2进行添加；余量为水。

3.根据权利要求1所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：所述的蛋白酶为碱性蛋白酶和风味蛋白酶。

4.根据权利要求3所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：碱性蛋白酶的加入量为秋刀鱼碎肉质量0.4～1.0％，风味蛋白酶的加入量为秋刀鱼碎肉质量的0.8～1.5％。

5.根据权利要求3所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：碱性蛋白酶为诺维信公司的Alcalase 2.4L，风味蛋白酶为诺维信公司的Flavourzyme 500MG。

6.根据权利要求1所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：所述的果汁为浓缩橙汁。

7.根据权利要求1所述的降尿酸肽饮料，其特征在于：所述的稳定剂为黄原胶、结冷胶或海藻酸钠中的一种以上。

8.权利要求1-7任一项所述的降尿酸肽饮料的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

将稳定剂、蔗糖与秋刀鱼降尿酸肽干粉混合，再加入到果汁中进行混合搅拌均匀，然后用柠檬酸调节混合物的pH值至3.8～4.2，最后用水定容；进行均质、罐装、灭菌，得到降尿酸肽饮料。