KR100879816B1 - 꽁치류의 가수분해물을 포함하는 허혈성 뇌혈관질환 예방또는 개선용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌혈관질환 예방 또는 방지용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 뇌허혈에 민감하다고 알려져 있는 뇌 해마조직 CA1 영역의 신경세포 손상을 효과적으로 예방할 뿐만 아니라, 인체에 무해한 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌혈관질환 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.

꽁치, 허혈성 뇌혈관질환, 치매, 알츠하이머

Description

꽁치류의 가수분해물을 포함하는 허혈성 뇌혈관질환 예방 또는 개선용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING OR IMPROVING THE ISCHEMIA DAMAGE CONTAINING HYDROLYSATES OF MACKEREL PIKE}

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 꽁치 가수분해물을 수득하는 과정을 나타내는 개략도이다.

도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 꽁치 가수분해물의 신경세포 사멸 예방효과를 알아보기 위하여, 꽁치 가수분해물의 투여량에 따른 PC12 배양세포의 저산소환경 하에서의 락테이트 디하이드로게나제 분비량을 측정한 그래프이다.

도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 꽁치 가수분해물의 신경세포 사멸 예방효과를 알아보기 위하여, 꽁치 가수분해물의 투여량에 따른 PC12 배양세포의 저산소환경 하에서의 상대적인 생존 세포수를 측정한 그래프이다.

도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 꽁치 가수분해물의 신경세포 사멸 예방효과를 알아보기 위하여, 뇌허혈 유발 후 4일이 경과된 실험동물의 해마조직을 크레실 바이올렛(cresyl violet)으로 염색한 사진이다.

도 5는 본 발명의 일실시예에 따른 꽁치 가수분해물의 신경세포 사멸 예방효과를 알아보기 위하여, 신경세포의 생존율을 뇌허혈 유발 4일 후에 생존해 있는 신경세포의 세포수를 측정한 그래프이다.

[산업상 이용분야]

본 발명은 신경세포 보호 효능을 갖는 꽁치 가수분해물을 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 꽁치 가수분해물을 포함하는 뇌허혈성 질환의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다.

[종래기술]

최근 통계청이 발표한 2005년 총인구 중에서 65세 이상 노령인구의 비율은 9.1%를 차지하고 있고, 14세 이하 유년인구의 비중은 점차 줄어들고 있으며, 65세 이상 인구의 비중은 지난 2000년에 7.2%를 기록하여 우리 사회는 이미 고령화 사회로 진입한 것으로 평가된다. 또한, 2003년 기준으로 우리나라 국민의 평균수명은 77.5세로 노령인구가 급격하게 증가되고 있는 추세이다. 한편, 통계청이 발표한 우리나라 1인당 GNI는 2004년 14,162달러였으며, 매년 10% 이상 증가하고 있어 삶의 질은 점차 나아지고 있다고 할 수 있다. 이러한 사회적 조건의 변화에 의해, 과거 주요한 사망원인인 전염성 질병에 의한 사망자 수는 급격하게 줄어들고 있는 반면에 암, 뇌혈관질환, 당뇨병 등의 퇴행성 질환에 의한 사망자 수는 꾸준히 증가하고 있다.

우리나라 사망 원인에 2위를 차지하는 질환인 뇌혈관 질환이란 흔히 뇌졸중이라고도 하며, 뇌에 있는 혈관이 막히거나 터져서 발생하는 병으로, 크게 뇌경색 과 뇌출혈의 두 가지 유형으로 나눌 수 있다.

상기한 뇌경색은 허혈성 뇌혈관 질환이라고도 하며, 뇌혈관이 막혀서 뇌가 혈액과 산소공급을 받지 못해서 뇌세포가 죽게 되어 발생하는 질환을 말하며, 뇌출혈은 출혈성 뇌혈관 질환이라고도 하며, 뇌혈관이 터져 피가 흐르고 고여서 뇌 손상이 오는 경우이다. 상기의 뇌경색이나 뇌출혈로 인해 뇌의 기능을 잃게 되면 외견상 반신마비, 언어장애 및 의식장애 등의 신체증상이 나타나기도 하며, 심한 경우에는 사망을 할 수도 있다.

이 중 허혈성 뇌혈관 질환은 뇌의 혈류가 감소되어 산소와 포도당의 공급이 이루어지지 않아, 해마 CA1 영역에 지연성 신경세포사(delayed neuronal death)가 유발되어 발생되는 질환이다(Kirino, Brain Res., 239, pp57-69, 1982; Petito et al., Neurology, 37, pp1281-1286, 1987; Pulsinelli et al., Ann. Neurol., 11, pp491-498, 1982). 또한, 상기 허혈성 뇌질환은 뇌졸중이나 심장마비와 같은 병리학적 상황에서 뇌에 혈액이 공급되지 않음으로써 유발되는 것으로 알려져 있다(Nedergaard, Acta. Neurol. Scand., 77, pp81-101, 1988; White et al., Neurology, 43, pp1656-1665, 1993).

일시적인 뇌허혈 및 재관류(reperfusion)에 의해 발생되는 해마 CA1영역에서의 지연성 신경세포사의 원인은 세포 내로 칼슘의 과다유입(Hara et al., Brain Res. Bull., 29, pp659-665, 1992; Nedergaard, Acta Neurol. Scand., 77, pp81-101, 1988), 프리 라디칼(free radical) 관련 신경세포 손상 및 글루타메이트-수용체 매개 신경세포 손상이라고 알려져 있다(Won et al., Neurosci. Lett., 301, pp139-142, 2001). 즉, 뇌허혈이 발생되면 신경세포의 탈분극이 일어나고, 시냅스의 글루타메이트(glutamate)가 유리되어 세포 외 글루타메이트의 농도가 증가한다.

또한, ATP(Adenosine Triphosphate)의 감소로 인해 발생하는 능동수송의 역전은 세포 외 글루타메이트의 축적을 가속시킨다. 세포 외 글루타메이트의 축적은 NMDA(N-methyl-D-aspartic Acid), AMPA(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4 -isoxazole-propionic acid) 및 메타보트로픽 글루타메이트 수용체(metabotropic glutamate receptor)의 연속적인 활성을 유도하여, 칼슘의 세포 내 과다 유입을 초래한다(Olney et al., Science, 244, pp1360-1362, 1989). 칼슘의 세포 내 유입은 특히 칼슘 의존성 프로테아제, 리파제 및 모듈레이터의 활동을 촉발시키고, 결국 프리 라디칼을 포함하는 세포 독성분자가 생성되어 DNA 및 세포막 등의 세포 구조물을 파괴하여 신경세포사가 유발하는 것으로 알려져 있다.

뇌졸중 치료에는 급성기 치료와 재발 방지를 위한 예방 치료가 있으며,뇌졸중이 발생한 3시간 이내에 병원에 가서 급성 뇌졸중 치료를 받아야 치료 효과를 볼 수 있으며, 이보다 늦어지면 치료 효과를 보기 힘든 것으로 알려져 있다. 즉, 일단 뇌혈관질환에 이환되면 비가역적인 신경세포 손상으로 인해, 운동능력 저하, 성적능력 저하, 기억력 감퇴 등을 유발하는 것으로 알려져 있다.

뿐만 아니라, 최근 뇌신경세포의 재생이 가능하다는 것이 보고 되기는 하였으나, 이러한 뇌신경세포의 재생은 그 조직학적 특성을 고려하건데 용이하지 아니하다.

이러한 뇌혈관진환의 특성을 고려할 때, 뇌혈관질환은 치료보다는 그에 대한 예방이 강조되고 있는 경향이며, 뇌신경세포를 보호할 수 있는 물질을 지속적으로 섭취하여 이러한 뇌혈관질환을 예방하는 것의 필요성이 새롭게 인식되고 있다.

이러한 필요성에 따라, 뇌신경세포 보호에 효능이 있는 해양 천연물 유래의 물질로부터 활성 성분을 찾으려는 노력이 진행 중에 있다.

본 발명은 뇌허혈에 의한 신경세포의 손상을 효과적으로 예방하고, 뇌허혈에 의한 신경세포사를 억제할 뿐만 아니라 인체에도 무해한 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 조성물 및 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌혈관질환의 예방 또는 개선을 위한 식품조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하고 신경세포 보호 효능을 갖는 허혈성 뇌혈관질환 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.

또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하고 신경세포 보호 효능을 갖는 허혈성 뇌혈관질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 식품 조성물의 예로는 식품, 식품첨가제 또는 음료를 들 수 있다.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명자들은 인체 안전성이 확보된 뇌혈관질환 예방 및 방지용 조성물을 천연물 유래의 물질로부터 연구하던 중, 꽁치 가수분해물이 뇌허혈에 민감하다고 알려져 있는 뇌 해마조직 CA1 영역의 신경세포의 손상을 효과적으로 예방할 수 있음을 확인하였으며, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명은 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌혈관질환의 예방 또는 개선을 위한 조성물에 관한 것이다.

꽁치(Coloabis saira)는 동갈치목 꽁치과의 바닷물고기로, 공어(貢魚), 청갈지, 삼마, Pacific saury 또는 Mackerel Pike라고도 불리우며, 한국의 동해와 남해 및 북태평양 해역에 분포하고 주요 서식장소는 수심 0 m 내지 230 m 정도의 바다 속이다. 몸이 기다랗고 주둥이가 뾰족한 것이 큰 특징이고, 등쪽에는 12개 내지 15개, 배쪽에는 18개 내지 21개 정도의 뼈로 투명한 지느러미가 있고, 가슴에는 12개 내지 14개의 지느러미가 있다.

보통 근해에서 무리를 지어 생활하며, 일본의 남부 해역에서 겨울을 보내고, 봄과 여름 사이에 북쪽으로 이동하여 동해안 부근에서 알을 낳는 습성이 있다. 알에서 깨어나면 바다에 떠다니는 해조류에 붙어서 동물성 플랑크톤을 먹으며 자라고 점차 몸집이 커지면 작은 갑각류나 다른 물고기의 알과 어린 새끼를 잡아먹으며 자라며, 최대 2년 정도 살 수 있는 것으로 보고 되고 있다.

꽁치는 단백질과 지방 및 비타민 B가 풍부하고 다른 등푸른 생선들과 마찬가지로 DHA 및 EPA와 같은 오메가-3 지방산이 풍부하여 예로부터 식용으로 널리 이용되어 왔다.

본 발명의 꽁치 가수분해물은 어류 가수분해물 제조를 위한 통상의 제조방법 에 따라 제조된 것일 수 있으며, 바람직하게는 효소를 이용한 가수분해에 의해 제조된 것일 수 있다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 꽁치 가수분해물은 내장을 제거한 꽁치에 물, 바람직하게는 증류수를 첨가하고 완전분쇄한 후에, 단백질 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키고, 상기 반응이 끝나면 효소를 불활성화 시킨 후에 불용물을 제거하며, 상기 불용물을 제거한 혼합액을 원심분리하여 기름층을 제거한 후에, 기름층층을 제거한 상기 혼합액, 바람직하게는 물층을 농축하거나 건조하여 수득할 수 있다. 상기 건조는 일 예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.

이 때, 상기 가수량은 바람직하게는 꽁치 1 kg에 300 ml 내지 1500 ml, 더욱 바람직하게는 700 ml 내지 1000 ml를 첨가할 수 있고, 상기 꽁치의 분쇄과정은 통상의 분쇄기를 사용하여 수행할 수 있고 예를 들어 믹서기를 이용하여 3 분간 2회 믹서하여 수행할 수 있으며, 상기 단백질 가수분해 효소는 바람직하게는 알카라제, 프레보라임, 프로텍스, 파라타제 및 뉴트라제로 이루어진 군중에서 선택된 하나 이상의 단백질 가수분해 효소, 더욱 바람직하게는 알카라제 효소(Alcalase enzyme, 2 %)일 수 있으며, 상기 알카라제 효소는 상기 분쇄하기 전 꽁치 1 kg 당 바람직하게는 0.1 g 내지 2 g, 더욱 바람직하게는 1 g 내지 1.4 g을 첨가할 수 있고, 상기 효소 반응은 효소의 종류에 따라 적절하게 수행되어 질 수 있으며, 바람직하게는 50 ℃ 내지 70 ℃ 더욱 바람직하게는 57 ℃ 내지 63 ℃의 교반 배양기(shaking incubator)에서 1 시간 내지 3 시간, 바람직하게는 1 시간 30 분 내지 2 시간 30 분, 가장 바람직하게는 2 시간 반응을 시킬 수 있고, 상기 효소의 불활성화는 효소의 종류에 따라 적절하게 선택된 통상의 방법으로 수행되어 질 수 있으며, 83 ℃ 내지 97 ℃, 바람직하게는 87 ℃ 내지 93 ℃, 가장 바람직하게는 90 ℃에서 3 분 내지 25 분, 바람직하게는 7 분 내지 15 분, 가장 바람직하게는 10 분간 가열처리하여 수행할 수 있으며, 상기 불용물의 제거는 6000 rpm 내지 8000 rpm, 바람직하게는 6500 rpm 내지 7700 rpm, 더욱 바람직하게는 7000 rpm 내지 7300 rpm으로 원심분리하여 뼈 등의 불용물을 제거하는 방법으로 수행할 수 있고, 상기 기름층의 제거는 83 ℃ 내지 97 ℃, 바람직하게는 87 ℃ 내지 93 ℃, 가장 바람직하게는 90 ℃에서 10 분 내지 30 분, 바람직하게는 15 분 내지 25 분, 가장 바람직하게는 17 분 내지 23 분간 가열처리한 다음, 7500 rpm 내지 9300 rpm, 바람직하게는 8000 rpm 내지 8800 rpm, 더욱 바람직하게는 8400 rpm 내지 8600 rpm으로 원심분리하여 위의 기름층을 제거하는 방법으로 수행할 수 있으며, 상기 꽁치 가수분해물의 수득은 상기 기름층을 제거하여 얻은 나머지 꽁치의 가수분해물을 수득하여 얻을 수 있었고, 수득한 꽁치 가수분해물은 냉장고 또는 냉동고, 바람직하게는 급속 냉동 냉장고(deep freezer)를 이용하여 보관할 수 있다.

또한, 상기 꽁치 가수분해물은 수득된 가수분해물을 농축 또는 건조, 바람직하게는 동결건조를 통하여 수분이 제거된 것일 수 있다.

본 발명에서 뇌혈관 질환이란 뇌의 혈관의 이상으로 인하여 발생하는 여러 가지 질병을 총칭하는 용어를 의미하며, 뇌혈관 질환은 크게 출혈성 뇌혈관질환과 허혈성 뇌혈관질환으로 구분된다.

상기 허혈성 뇌혈관질환이란 뇌의 혈류가 감소되어 산소와 포도당의 공급이 정상적으로 이루어지지 않아, 뇌세포 중 뇌허혈에 민감하다고 알려져 있는 해마조 직 CA1 영역의 신경세포에 지연성 신경세포사가 유발되어 발생되는 질환을 말하며, 허혈성 뇌혈관질환에는 뇌졸증, 알츠하이머병, 치매 또는 헌팅턴병 등이 포함될 수 있다.

본 발명의 꽁치 가수분해물은 부신유래의 신경세포주인 PC12 세포를 저산소환경에 노출시켜 세포로부터 방출되는 락테이트 디하이드게나제 농도 및 PC12 세포의 생존률을 측정하는 실험 및 저빌을 마취시켜 온목동맥을 결찰하여 뇌허혈을 유발시킨 후, 신경세포를 염색하여 효능을 측정하는 실험 모두에서 뇌허혈에 의한 신경세포사를 현저히 억제하였으며, 우수한 신경세포 보호효능을 나타내었다

본 발명의 뇌허혈성 질환의 예방 또는 개선용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 꽁치 가수분해물을 0.001 중량% 내지 99.99 중량%, 바람직하게는 0.1 중량% 내지 99 중량%로 포함할 수 있다.

상기 조성물은 꽁치 가수분해물 외에 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 상기 조성물은 상기 성분들이 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다. 상기 추가성분의 함량은 바람직하게는 상기 꽁치조성물 100 중량부 당 0.1 중량부 내지 20 중량부 범위에서 추가할 수 있다.

본 발명은 상기 뇌허혈성 질환의 예방 또는 개선을 위한 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물 또는 의약 조성물을 제공한다.

상기 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물 또는 의약 조성 물은 그 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 발명의 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 현탁제, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형물로 사용될 수 있다.

상기 경구형 제형물은 경구투여를 위한 고형제제와 액상제제를 포함하는 의미이며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 상기 가수분해물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럼제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

본 발명의 상기 꽁치 가수분해물을 함유하는 조성물의 바람직한 투여량은 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 바람직하게는 상기 꽁치 가수분해물을 함유하는 조성물은 본 발명의 꽁치 가수분해물을 건조중량을 기준으로 1 일 0.0001 mg/kg 내지 1000mg/kg으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 mg/kg 내지 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량과 투여횟수는 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 상기 조성물은 식품으로 사용될 수 있다. 본 명세서에서 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.

본 발명의 꽁치 가수분해물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함 하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 것외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 가수분해물 100 중량부 당 0 중량부 내지 20 중량부, 바람직하게는 1 중량부 내지 10 중량부 범위에서 선택될 수 있다.

본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.

상기 기능성음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 꽁치 가수분해물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g일 수 있다.

또한, 뇌허혈성 질환의 예방 또는 개선의 효과를 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 꽁치 가수분해물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 중량% 내지 15 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 g 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 g 내지 1 g의 비율로 포함할 수 있다.

본 발명의 꽁치 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 조성물 및 식품은 저산소환경에 노출된 부신수질 유래의 세포주인 PC12 세포의 세포사를 현저히 억제하는 신경세포 보호효능이 있으며, 허혈을 유발시킨 수컷 몽골리안 저빌(Mongolian gerbil, Harlan, USA)의 해마(hippocampus) 영역의 신경세포사를 현저히 억제하는 우수한 신경세포 보호효능을 가지고 있는 것으로 확인되었다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 기재한다. 하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1: 꽁치 가수분해물의 제조

신선한 상태로 구입한 꽁치를 내장을 제거한 후, 꽁치 1 kg에 800 ml의 증류수를 넣고 믹서기를 이용하여 3 분간 2회 믹서하여 완전분쇄를 한 다음, 알카라제 효소(Alcalase enzyme, 2 %, Novozyme A/S, Bagsvaerd, Denmark) 1.2 g을 첨가하여 60 ℃의 교반 배양기(shaking incubator)에서 2 시간 동안 반응을 시켜 가수분해물을 수득하였다. 상기 수득한 가수분해물을 90 ℃에서 10 분간 가열시켜 효소를 불활성화 시키고, 7200 rpm으로 원심분리한 후에 상등액만을 수득하여, 뼈 등의 불용물을 제거하고, 상기 상등액을 다시 90 ℃에서 20 분간 가열처리한 다음, 8520 rpm으로 원심분리하여 위의 기름층을 제거하고 나머지 물층을 동결건조하여 꽁치 가수분해물을 수득하였다. 상기 수득한 꽁치 가수분해물은 사용시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관하였다.

실시예 2: PC12 배양세포주를 이용한 꽁치 가수분해물의 뇌허혈시 신경세포 보호효능 측정

상기 실시예 1의 꽁치 가수분해물의 신경세포사 예방 및 개선효과를 부신 유래의 PC12 세포주를 저산소환경으로 유도한 다음 세포외로 방출되는 락테이트디하이드로게나제 농도를 측정하는 방법 및 PC12 세포주의 생존 세포수를 측정하는 방법을 통하여 확인하였다.

2-1: 락테이트 디하이드로게나제( in vitro ) 농도 측정을 통한 꽁치 가수분해물의 뇌허혈시 신경세포 보호 효능 측정

PC12 세포를 이용하여 신경돌기 성장 및 성장인자의 발현을 측정하였다. 또한, PC12 세포에 CoCl₂를 투여하여 저산소환경을 통한 신경세포손상을 유도한 후, 배양세포에서 세포 밖의 배양액으로 분비되는 락테이드 디하이드게나제(LDH) 농도를 측정하여 신경세포의 손상유무를 확인하였다.

한국세포주은행에서 구입하여 수득한 부신 유래 신경세포인 PC12 세포를 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM, Mediatech, USA)에 7 % 송아지혈청(fetal calf serum) 및 7 % 말혈청(horse serum)을 첨가한 배양배지 및 6 % CO₂ 농도를 함유한 37 ℃ 조건에서 배양하였으며, 락테이드 디하이드게나제의 측정은 손상 및 파괴된 세포로부터 거의 분비가 완료되는 20 시간에 세포배양액을 채취하여 측정하였다.

상기 PC12 세포주 배양액에 대해 증류수 및 실시예 1에서 얻은 꽁치 가수분해물을 10 μg/ml, 50 μg/ml, 100 μg/ml, 500 μg/ml 및 1000 μg/ml의 농도로 각각 처리한 다음, 30 분 후에 150 μM의 CoCl₂를 처리하였다. CoCl₂를 처리한 상기 PC12 세포를 37 ℃에서 24 시간 배양한 후 PC12 세포의 배양액을 수득하여, 세포에서 분비된 락테이트 디하이드게나제의 농도를 종셍 바이오테크(Zhong Sheng Biotech) 표준시약으로 한 베크만(Beckman) DU-640 흡광광도계를 이용하여 효소 역학적 방법(Hou et al. J. Neurosci. Res., 74, pp123-133, 2003; Yamakawa et al. Neurol. Res., 23, pp522-530, 2001)으로 측정하여 그 결과를 도 2에 나타내었다.

도 2에 나타낸 바와 같이, 꽁치 가수분해물을 처리한 군에서, 용매만을 처리한 다음 저산소환경을 유발한 대조군에 비하여, 락테이트 디하이드로게나제의 분비 율이 상대적으로 낮게 나타났다. 꽁치 가수분해물을 처리한 군의 경우, 상기 꽁치 가수분해물의 처리 농도가 100 μg/ml까지는 락테이트 디하이드로게나제의 분비량이 농도의존적으로 감소하였으나, 그 이상의 농도에서는 락테이트 디하이드로게나제의 분비율이 증가하는 것이 관찰되었다. 꽁치 가수분해물을 또한 100 μg/ml의 농도로 처리한 세포의 경우 용매만을 투여한 세포에 비하여 락테이트 디하이드로게나제의 분비가 40%가량으로 감소되는 것을 확인할 수 있었다.

상기의 결과에 의해서, 꽁치 가수분해물은 신경세포 보호효과 및 개선효과가 있음을 확인되었으며, 100 μg/ml의 농도에서 신경세포 보호효과 및 개선효과가 가장 크다는 것을 확인 할 수 있었다.

2-2: 신경세포사 측정을 통한 꽁치 가수분해물의 뇌허혈시 신경세포 보호 효능 측정

상기 한국세포주은행에서 구입한 부신 유래 신경세포인 PC12 세포에 CoCl₂를 투여하여 저산소환경을 통한 신경세포손상을 유도한 후, MTT assay를 실시하여 신경세포사 정도를 측정함으로써 꽁치 가수분해물의 신경세포 보호 효능을 확인하였다.

상기 실시예 2-1의 방법으로 수득한 PC12 세포를 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM, Mediatech, USA)에 7 % 송아지혈청(fetal calf serum) 및 7 % 말혈청(horse serum)을 첨가한 배양배지에 6 % CO₂ 농도를 함유한 37 ℃조건에서 배양하 였으며, MTT assay는 MTT formazan(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide))를 첨가한 후에, 570 nm에서 흡광도를 측정하여 살아있는 세포수를 측정하는 방법으로 수행하였다.

상기 배양한 PC12 세포주를 24 웰 플레이트(well plate)에 분주하고 6 % CO₂ 농도를 함유한 37 ℃ 조건에서 48시간 배양한 후, DMEM(Mediatech, USA)에 1 % 송태아혈청(fetal bovine serum)을 함유한 배지로 배양액을 교환하여 세포를 24 시간 배양하였다. 상기 배양을 완료한 배양액에 증류수 및 실시예 1에서 얻은 꽁치 가수분해물을 50 μg/ml, 100 μg/ml, 200 μg/ml 및 400 μg/ml의 농도로 각각 처리한 다음, 30 분 후에 150 μM의 CoCl₂를 처리하였다. 상기 CoCl₂를 처리한 상기 PC12 세포를 37 ℃에서 24 시간 배양한 후, 세포를 배양한 웰 플레이트에서 배지를 제거하고 MTT formazan이 포함된 DMEM(Mediatech, USA) 배지를 1 ml씩 웰 플레이트에 첨가하고 37 ℃에서 3 시간 배양하였다. 상기 배양을 완료한 웰 플레이트에서 MTT가 포함된 배지를 제거하고 이소프로필알코올(isopropyl alcohol)을 첨가하여 용출한 후, 570 nm에서 흡광도를 측정하여 살아있는 세포수를 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.

상기 도 3에 나타낸 바와 같이, 꽁치 가수분해물을 처리한 군에서, 용매만을 처리한 다음 저산소환경을 유발한 대조군에 비하여, 생존한 PC12 세포가 많은 것으로 확인되었다. 꽁치 가수분해물을 처리한 군의 경우, 상기 꽁치 가수분해물의 처리 농도에 비례하여 생존 세포수가 증가하였으며, 400 μg/ml을 처리한 경우에는 CoCl₂를 처리하여 저산소환경을 유발하지 아니한 비교군과 거의 유사한 수준으로 PC12 세포가 생존하는 것으로 확인되었다.

상기의 결과에 의해서, 꽁치 가수분해물은 400 μg/ml까지 농도 비례적으로 신경세포 보호효과 및 개선효과가 있음을 확인되었으며, 400 μg/ml의 농도로 처리한 경우에는 저산소환경을 유발하지 아니한 경우와 유사한 정도로 신경세포를 생존하게 할 수 있는 신경세포 보호효과 및 개선효과가 있다는 것을 확인 할 수 있었다.

실시예 3: 동물실험을 통한 꽁치 가수분해물의 뇌허혈시 신경세포 보호효능 측정

상기 실시예 1의 꽁치 가수분해물의 신경세포사 예방 및 개선효과를 체중 65g 내지 75g인 수컷 몽골리안 저빌(Mongolian gerbil, Harlan, USA)을 마취시켜 온목동맥(common carotid artery)을 노출 후 결찰하여 뇌허혈을 유발시킨 후에, 몽골리안 저빌의 해마조직을 염색하여 관찰하는 방법을 통하여 확인하였다.

3-1. 실험동물의 사육

체중 65 g 내지 75 g의 수컷 몽골리안 저빌(Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus, Halan, USA) 40 마리를 오전 7시부터 오후 7시까지 빛을 가하는 일정한 명암주기, 21 ℃ 내지 25 ℃의 온도 및 45 % 내지 65 %의 상대습도의 조건에 서 사육하였다. 실험동물의 사료는 일반적인 펠렛건조 사료(대한실험동물, 대한민국)를 사용하였고, 사료와 물은 자유로이 섭취할 수 있게 하였다.

3-2. 꽁치 가수분해물의 뇌허혈시 신경세포 보호 효능 검정

상기의 실험동물에 실시예 1의 꽁치 가수분해물을 14 mg / ml(꽁치 가수분해물/증류수)의 농도로 증류수에 용해한 것을 일주일 전부터 매일 식도용 바늘을 이용하여 0.5 ml 즉, 실험동물 체중 1 kg 당 100 mg이 되도록 경구투여하였다.

일주일간 상기 꽁치 가수분해물을 투입한 후에, 질소와 산소가 7 : 3으로 혼합된 가스에 3 % 이소플루란(isoflurane , Baxtor, USA)을 혼합한 가스를 이용하여 실험동물을 전신마취하였다. 상기의 질소와 산소 혼합가스에 2.5 % 이소플루란을 혼합한 가스를 이용하여 실험동물의 마취상태를 유지하면서 실험동물에 대한 수술을 수행하였다. 실험동물에 대한 수술은 목 부위의 털을 깎고 소독한 다음 절개를 하여 양쪽 온목동맥을 노출시키고, 동맥류 클립(aneurysm clip, Staelting, USA)을 이용하여 5 분 동안 결찰하여 뇌허혈을 일으킨 후, 클립을 제거하여 재관류시키는 방법으로 수행하였다. 이 때 각 실험군은 검안경(ophthalmoscope)을 이용하여 망막중심동맥(central artery of retina)의 혈액 순환 유무를 관찰하여 완전한 온목동맥의 폐쇄가 있었는지 여부를 확인하였다. 뇌허혈을 유발시키는 동안 직장 내 체온계를 삽입하여 체온을 측정하였으며, 실험동물의 온도에 따라 자동으로 조절되는 온열 패드를 사용하여 체온을 정상 체온인 36.7 ℃ 내지 37.3 ℃로 일정하게 유지시켰다.

실험군은 뇌허혈 유발 4 일 후에 티오펜탈 소듐(thiopental sodium, 유한양행, 한국)을 체중 1 ㎏ 당 각각 30 ㎎의 용량으로 복강 내 주사하여 마취시킨 다음, 1,000 ㎖ 당 헤파린 1,000 IU를 함유한 4 ℃의 생리식염수를 좌심실로 주입하여 관류 세척하였다. 관류 세척이 완료된 상기 동물에 대해 4 ℃의 4 % 파라포름알데하이드(in 0.1 M phosphate buffer; PB, pH 7.4)를 이용하여 관류고정을 수행하였다.

뼈절단기를 이용하여 관류 고정이 끝난 실험동물의 머리뼈 공간을 열어 뇌를 적출하였다. 적출된 실험동물의 뇌를 4 ℃의 4 % 파라포름알데하이드(in 0.1 M phosphate buffer; PB, pH 7.4)를 이용하여 6 시간 동안 후고정하였다. 후고정이 끝난 뇌는 30% 슈크로스 용액(in 0.1 M phosphate buffer)에 넣어 바닥에 가라앉을 때까지 침강 시킨 후, 슬라이드 마이크로톰(sliding microtome, Reichert-Jung, Germany)으로 상기 뇌의 조직을 30 ㎛ 두께로 잘라 조직절편을 만들었다. 상기의 조직절편을 보존액(storing solution)이 들어있는 6 웰 플레이트에 넣어 염색을 수행할 때까지 4 ℃에서 보관하였다.

상기의 조직절편 중에서 해마형성체(hippocampal formation)가 잘 나와 있는 조직을 선택하고, 조직절편에 묻어있는 보존액을 없애기 위해 0.01 M PBS로 10 분씩 3회 세척하였다. 상기의 세척된 조직절편을 젤라틴 입힌 슬라이드에 도말하여 37 ℃에서 충분히 건조시켰다. 충분히 건조시킨 상기의 조직절편을 증류수에 잠시 담가 둔 후, 2 % 크레실 바이오렛 아세테이트(cresyl violet acetate, Sigma, USA) 용액에 1 분간 담가 조직절편의 염색을 수행하였다. 상기의 염색한 조직절편을 흐 르는 물에 충분히 세척하여 슬라이드에 묻어 있는 과량의 염료를 제거하였다. 상기 과량의 염료를 제거한 조직절편을 증류수에 잠시 담근 후에 50 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 % 및 100 % 에탄올 용액으로 처리하여 탈수 및 과량의 크레실 바이올렛 세척을 수행하였다. 상기 조직절편에서 니슬소체(Nissle body)가 보이는 것을 확인한 후, 자일렌(Junsei, Japan)에 담가 투명화한 다음 카나다 발삼(Canada Balsam, Kanto, Japan)으로 봉입하였다.

대조군은 꽁치 가수분해물을 녹이는데 이용된 증류수만을 투여한 것을 제외하고는 상기와 동일한 방법으로 준비하였으며, 정상군은 허혈-재관류 수술을 시행하지 아니하였을 뿐만 아니라 꽁치 가수분해물을 비롯한 어떠한 물질도 투여하지 않았다.

디지털 카메라(Axiocam, Cal Zeiss, Germany)가 부착되어 있는 악시오팟 현미경(Axiphot microscope, Carl Zeiss, Germany)으로 전체 해마 영역을 25 배로, CA1 영역을 200 배로 각각 확대하여 각 조직절편들을 사진 촬영하였다. 대조군, 정상군 및 상기 꽁치 가수분해물을 0.5 ml 즉, 100 ㎎/㎏의 용량으로 투여한 실험군을 촬영한 결과를 도 4에 나타내었다.

상기 도 4의 A 및 C는 각각 정상군과 대조군의 전체 해마영역을 나타낸 것이고, B 및 D는 각각 정상군과 대조군의 해마의 CA1 영역을 나타낸 것이다. 또한, 상기 도 4의 E 및 F는 꽁치 가수분해물을 100 ㎎/㎏의 용량으로 투여한 실험군의 전체 해마영역과 해마의 CA1영역을 나타낸 것이다.

유의성의 검증을 위하여, 도 4은 각 군 중에서 가장 일반적인 부분을 골라 촬영하였다.

도 4에서 알 수 있는 바와 같이, 정상군은 해마의 영역 전체에서 신경세포가 진하게 염색되는 것을 관찰할 수 있었다. 그러나 꽁치 가수분해물을 투여하지 아니한 대조군의 경우, 뇌허혈에 의해 신경세포사가 일어남으로써 신경세포의 많은 부분이 염색되지 않았음이 관찰되었다. 한편, 상기 꽁치 가수분해물을 0.5 ml 즉, 100 ㎎/㎏의 용량으로 투여한 실험군에서는 해마의 전영역에서 세포가 진하게 염색되는 것을 확인할 수 있어, 꽁치 가수분해물이 신경세포사를 현저히 억제시킴을 확인할 수 있었다

또한, 이미지 분석기(Optimas 6.5, USA) 프로그램을 이용하여 보라색으로 염색된 상기 조직절편의 신경세포를 계수하였다. 각 군에 대한 유의성의 검증을 위하여 일원분산분석(one-way ANOVA test)을 수행하였으며, 데이터는 평균과 표준편균오차로 표시하였다.

조직절편의 신경세포를 계수한 결과를 상대적인 수에 의해 도 5에 나타냈다. 상기 도 5에서 알 수 있는 바와 같이 대조군은 정상군에 비하여 해마의 CA1 영역세포의 수가 약 11 % 정도 관찰되었으나, 상기 100 mg/kg의 용량으로 꽁치 가수분해물을 투여한 경우 대조군에 비해 75%의 세포가 살아남아 높은 신경세포 생존율의 관찰되었다.

상기 도 4E 및 도 4F에서 확인한 바와 같이, 해마 CA1 전 영역에서 신경세포가 거의 생존하였을 뿐만 아니라, 도 5에서 확인한 바와 같이, 허혈을 유도한 경우에도 꽁치 가수분해물을 투여한 경우 높은 신경세포 생존율이 유지되었으므로 꽁치 가수분해물이 신경세포보호에 매우 탁월한 효과를 가지고 있음을 확인할 수 있었다.

실시예 4. 실험용 쥐를 이용한 급성독성 테스트

4-1. 몽골리안 저빌에 경구투여를 통한 독성 테스트

상기 실시예 3의 실험동물에 상기 실시예 1의 꽁치 가수분해물을 중류수에 녹인 꽁치 가수분해물 수용액을 14 mg/kg, 28 mg/kg, 70 mg/kg, 140 mg/kg, 700 mg/kg의 용량으로 일주일 동안 매일 식도용 바늘을 이용하여 0.5 ml 경구투여한 후에, 위장관의 변화, 혈핵학적 변화, 치사율 등을 조사하였다.

상기 조사 결과, 어떠한 군에서도 위장관 및 혈액학적인 변화를 관찰할 수 없었으며, 치사된 개체도 관찰되지 않아 안전한 물질임이 확인되었다.

4-2. 실험용 쥐에 경구투여를 통한 급성독성 테스트

꽁치 가수분해물의 급성독성을 확인하기 위하여, 실시예 1에서 얻은 꽁치 가수분해물을 증류수에 녹여 6 주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD(Sprague-Dawley, Harlan, USA)계 랫트에 경구투입의 방식으로 투여하였다. 상기의 실험용 쥐에 상기 실시예 1의 꽁치 가수분해물을 중류수에 녹인 꽁치 가수분해물 수용액을 14 mg/kg, 28 mg/kg, 70 mg/kg, 140 mg/kg, 700 mg/kg의 용량으로 식도용 바늘을 이용하여 0.5 ml 경구투여 후에 실험동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화를 관찰하고 혈핵학적 검사와 혈액생화화적 검사를 실시하였으며, 상기의 실험용 쥐를 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.

실험 결과, 꽁치 가수분해물을 투여한 모든 실험동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사 및 부검 소견 등에서도 독성 변화는 관찰되지 않았다. 상기의 결과에 따라, 본 발명의 꽁치 가수분해물은 랫트에서 각각 2 g/kg까지도 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD₅₀)은 2 g/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.

제조예 : 꽁치 가수분해물을 이용한 제제

제조예 1. 산제의 제조

꽁치 가수분해물 분말 20 mg

유당 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

제조예 2. 정제의 제조

꽁치 가수분해물 분말 10 mg

옥수수전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제 를 제조하였다.

제조예 3. 캡슐제의 제조

꽁치 가수분해물 분말 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg

락토오스 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

제조예 4. 액제의 제조

꽁치 가수분해물 분말 20 mg

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.

제조예 5. 건강 식품의 제조

꽁치 가수분해물 분말 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B1 0.13 ㎎

비타민 B2 0.15 ㎎

비타민 B6 0.5 ㎎

비타민 B12 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 꽁치 가수분해물은 뇌허혈에 의한 신경세포의 손상을 효과적으로 예방하고, 뇌허혈에 의한 신경세포사를 억제할 뿐만 아니라, 인체에 부작용을 발생시키지 않으므로, 이를 포함하는 조성물은 뇌허혈성 질환의 예방 및 개선을 위한 식품 조성물 또는 의료용 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (7)

1. 꽁치(Coloabis saira) 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸증, 알츠하이머, 혈관성 치매 또는 헌팅턴병의 치료용 약학조성물.
2. 제 1항에 있어서,

   상기 꽁치 가수분해물을 0.1 내지 99 중량%로 함유하는 약학조성물.
3. 삭제
4. 제 1항에 있어서,

   상기 꽁치 가수분해물은 알카라제, 프레보라임, 프로텍스, 파라타제 및 뉴트라제로 이루어진 군중에서 선택된 하나 이상의 단백질 가수분해 효소를 이용하여 제조한 것인 약학조성물.
5. 꽁치(Coloabis saira) 가수분해물을 유효성분으로 0.1 내지 99 중량%로 함유하는 뇌졸증, 알츠하이머, 혈관성 치매 또는 헌팅턴병의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
6. 제5항에 있어서, 상기 식품 조성물은 식품, 식품첨가제 또는 음료인 식품 조성물.
7. 제5항에 있어서,

   상기 꽁치 가수분해물은 알카라제, 프레보라임, 프로텍스, 파라타제 및 뉴트라제로 이루어진 군중에서 선택된 하나 이상의 단백질 가수분해 효소를 이용하여 제조한 것인 식품조성물.

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