CN104487079A - 通过微波辐照产生的具有提高的人参皂苷Rg3、Rg5和Rk1含量比的人参属植物提取物、制备所述人参属植物提取物的方法以及包含所述人参属植物提取物的组合物 - Google Patents

通过微波辐照产生的具有提高的人参皂苷Rg3、Rg5和Rk1含量比的人参属植物提取物、制备所述人参属植物提取物的方法以及包含所述人参属植物提取物的组合物 Download PDF

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Abstract

提供了可通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Re3、Rk1和Re5重量而言包含90％或更高Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物，制备人参属植物提取物的方法，以及用于以下的药物组合物和健康功能性食品组合物：改善抗癌药物的副作用(例如降低免疫力和产生抗癌药物抗性)之一，提高抗氧化、抗癌、抗炎、脑功能或认知功能，血管舒张，抑制血小板聚集，改善皮炎或改善银屑病。

Description

通过微波辐照产生的具有提高的人参皂苷Rg3、Rg5和Rk1含量比的人参属植物提取物、制备所述人参属植物提取物的方法以及包含所述人参属植物提取物的组合物
技术领域
本发明涉及经加工的人参属植物提取物，并且更特别地涉及通过加工人参属植物提取物获得的相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量而言包含90％或更多Rg3、Rk1和Rg5的经加工人参属植物提取物、制备经加工人参属植物提取物的方法以及包含经加工人参属植物提取物的药物组合物和健康功能性食品组合物。
背景技术
人参(Panax ginseng)是属于五加科人参属的多年生植物。与人参具有类似功效的人参属植物的实例包括西洋参(Panax quinquefolia)、三七(Panax notoginseng)、竹节参(Panax japonica)、三叶参(PanaxTrifolia)、喜马拉雅参(Panax pseudoginseng)、越南参(Panaxvietnamensis)等。与其他植物不同，这些人参属植物含有基于达玛烷(dammarane-based)的皂苷，其都具有与达玛烷骨架组合的1至4个糖。特别地，以高浓度包含在人参中的皂苷包括人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1和Re。根据其结构，这些皂苷具有种类和强度有很大不同的多种药学作用。人参属植物的基于达玛烷的皂苷具有原人参二醇(protopanaxadiol，PPD)或原人参三醇(protopanaxatriol，PPT)作为芯核(core nucleus)，并且可如式1所示进行分类。
式1
基于达玛烷的皂苷可根据如下图1的R1、R2和R3进行分类。
表1
[表1]
Rg5和Rk1可各自分别为式2和3所示化合物，其中R1为-Glc-Glc且R2为-H。
式2。
式3。
人参皂苷Rg5因其以下作用而出名：抗氧化作用、抗癌作用、促进免疫功能、对作为抗癌药物副作用的降低免疫功能和产生抗癌药物抗性的抑制作用、促进例如记忆能力和学习能力的脑功能和认知功能、通过对脑细胞的活化预防痴呆、血管舒张、对血小板聚集的抑制作用、对皮炎和/或银屑病的改善作用以及抗炎作用。人参皂苷Rk1主要因其以下作用而出名：血管舒张作用、对血小板聚集的抑制作用以及对例如记忆能力和学习能力之脑功能和认知功能的改善作用、通过活化脑细胞预防痴呆、抗衰老和抗癌症以及细胞再生。人参皂苷Rg5因其以下的活性而出名：抑制癌细胞转移、抑制血小板凝集、抗血液凝结、抑制肝损伤、抗癌药物以及抑制产生抗癌药物抗性。
当-Glc-Glc或-Glc-Ara(pyr)在20位被去糖基化时，原人参二醇型人参皂苷Rb1与Rb2可产生20(S)-Rg3和20(R)-Rg3。另外，当20(S)-Rg3和20(R)-Rg3的20位发生脱水时，可产生Rg5和Rk1。
需要研究人参皂苷Rg5和Rk1之含量比充分提高的人参提取物。另外，由于人参皂苷Rg5和Rk1可来自人参皂苷Rg3，人参皂苷(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值在定义Rg5和Rk1的含量提高中是重要的。需要基于原人参二醇型人参皂苷(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)量之人参皂苷Rg5、Rg3和Rk1含量比充分提高的人参提取物。
发明的公开内容
技术问题
本发明提供了具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3含量比的人参属植物提取物。
本发明还提供了药物组合物，其包含具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3含量比的人参属植物提取物。
本发明还提供了健康功能性食品组合物，其包含具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3含量比的人参属植物提取物。
本发明还提供了制备具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3含量比的人参属植物提取物的方法。
根据本发明的一个方面，提供了可通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量而言包含90％或更多Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物。
根据本发明的另一个方面，提供了通过在对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取而获得的相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量而言包含90％或更多Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物。
根据本发明的另一个方面，提供了包含人参属植物提取物的药物组合物，其用于改善抗癌药物的副作用(例如降低免疫功能和产生抗癌药物抗性)之一，提高抗氧化、抗癌、抗炎、脑功能或认知功能，血管舒张、抑制血小板聚集、改善皮炎、或改善银屑病。
根据本发明的另一个方面，提供了包含所述人参属植物提取物的功能性食品组合物。
根据本发明的另一个方面，提供了制备人参属植物提取物的方法，所述人参属植物提取物相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更多的Rg3、Rk1和Rg5，其中所述方法包括对人参属植物进行微波辐照。
根据本发明的另一个方面，提供了制备人参属植物提取物的方法，所述人参属植物提取物相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更多Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物，其中所述方法包括在对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取。
问题的解决方案
本文中使用的术语“和/或”包括一个或更多个相关所列项目的任何组合和全部组合。当词语例如“至少一个/种”位于要素列表之前时，其修饰整个要素列表，而非该列表的单个要素。
下文中，将参照附图对本发明的一个或更多个实施方案进行详细描述。
除非另有定义，否则本文中使用的所有技术术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常的理解相同的含义。此外，虽然在本说明书中描述了示例性的方法或实例，但应该理解的是，与其类似或等同的那些也包含在本发明的范围内。本文在此引用的所有参考文献通过引用并入本文。
本发明的发明人研究了加工人参属植物提取物(包括人参)的方法，以便与常规的人参属植物提取物或加工产品相比，显著提高人参属植物提取物中人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1的含量，结果，开发了通过对人参属植物本身或人参属植物提取物进行微波辐照来提高人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1含量比的方法。特别地，与简单热处理的人参属植物提取物的情况相比，通过使人参属植物提取物在微波辐照器中反应而获得的产品具有显著提高的人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1含量比。另外，与简单热处理的人参属植物提取物的情况相比，通过在微波辐照器中对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取而获得的人参属植物提取物具有显著提高的人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1含量比。
因此，根据本发明的一个方面，提供了可通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的人参属植物提取物，其相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更高的Rg3、Rk1和Rg5。
根据本发明的另一个方面，提供了可在对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取而获得的人参属植物提取物，其中，可通过向人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的人参属植物提取物相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更多的Rg3、Rk1和Rg5。
与简单热处理人参属植物提取物的情况(下文中称为“简单热处理加工产品”)相比，可通过对人参属植物提取物进行微波辐照而获得的提取物或者可通过在对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取而获得的人参属植物提取物(下文中称为“经微波辐照加工产品”)可相对于可通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更高的Rg3、Rk1和Rg5。例如，相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)的重量，Rg3、Rk1和Rg5的含量可以是95％至100％、98％至100％、90％至100％、99％至100％、或100％。另外，经微波辐照加工产品可具有显著高比例的人参皂苷(Rg5+Rk1)/(Rg3)，例如(Rg5+Rk1)/(Rg3)可以是至少2、至少3、至少4或至少5。
经微波辐照加工产品比简单热处理加工产品具有更高含量的人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1(特别是Rg5和Rk1)，因此人参皂苷Rg3+Rg5+Rk1(特别是Rg5和Rk1)具有提高的药效。人参皂苷Rg3因其以下作用而出名：抗癌作用、神经保护功能、对血小板聚集的抑制作用、抗氧化作用、抗炎功能、肾脏保护功能和抗疲劳作用。人参皂苷Rg5因其以下作用而出名：抗氧化作用、抗癌作用、对作为抗癌药物副作用的降低免疫功能和产生抗癌药物抗性的抑制作用、对脑功能和认知功能的改善作用、血管扩张作用、对血小板聚集的抑制作用、对皮炎和银屑病的改善作用、以及抗炎作用。人参皂苷Rk1主要因其以下作用而出名：血管舒张作用、对血小板聚集的抑制作用、以及对脑功能和认知功能的改善作用。因此，与简单热处理加工产品相比，经微波辐照加工产品可具有显著提高的以上所列作用。
因此，根据本发明的另一个方面，药物组合物包含经微波辐照加工产品，其用于改善抗癌药物的副作用(例如降低免疫功能和产生抗癌药物抗性)之一，提高抗氧化、抗癌、抗炎、脑功能或认知功能，血管舒张，抑制血小板聚集，改善皮炎，或改善银屑病。
根据本发明的另一个方面，提供了包含经微波辐照加工产品的健康功能性食品组合物。
本文中使用的健康功能性食品是指是由2008年修订的关于健康功能性食品的法律新规定的并且在韩国食品药品管理局(Korea Food&DrugAdministratio，KFDA)关于接受健康功能性食品的功能性原料的管理条例第2008-72号通知中列出的对人体充分具有功能性和稳定性的健康功能食品。
根据本实施方案的药物组合物和健康功能性食品组合物在本文中还统称为“根据本发明的组合物”。
微波辐照表示通过微波辐照对人参属植物或人参属植物提取物进行加热的热反应。该微波可以是波长为约1m至约1mm且频率为约300MHz至约300GHz的无线电波。通过使用微波加热可根据反应物状态的量而变化。微波辐照可在150℃至190℃的温度下进行，例如160℃至190℃、170℃至190℃、180℃至190℃、150℃至180℃、150℃至170℃、150℃至160℃、170℃至180℃、或者160℃至170℃。另外，微波辐照可进行30分钟至90分钟、30分钟至80分钟、30分钟至70分钟、30分钟至60分钟、30分钟至50分钟、30分钟至40分钟、40分钟至90分钟、50分钟至90分钟、60分钟至90分钟、70分钟至90分钟、80分钟至90分钟、50分钟至80分钟、60分钟至80分钟、70分钟至80分钟、或者50分钟至70分钟。微波辐照可以在2atm至100atm、5atm至100atm、或者10atm至100atm的压力下进行。微波辐照可以在中性溶液(例如水溶液)中进行。微波的输出功率没有特别的限制，可根据反应物的量适当地提高或降低。例如，微波的输出功率可以是50W至1000W或者100W至700W。微波辐照的条件并不特别地限于此，并且可包括通过微波辐照使得Rg3、Rk1和Rg5的含量相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量之90％或更高的任意反应条件。另外，微波辐照的条件可包括使得(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值达到至少2、至少3、至少4或至少5的任意反应。微波辐照的产物可以原样使用，或者可以以原料被干燥或冷冻干燥的形式来使用。根据本发明的一个实施方案，微波辐照可在包含人参属植物或人参属植物提取物的水溶液中，在150℃至190℃的温度下，在例如2atm至100atm、5atm至100atm、或10atm至100atm的压力下进行30分钟至90分钟。
人参属植物可包含至少一种人参皂苷原人参二醇，例如Rb1、Rb2、Re、Rg1、Rc和Rd。人参属植物的实例可包括但不限制于：人参、西洋参、三七、竹节参、三叶参、喜马拉雅参、越南参，其经培养的根、其热处理或酶处理的加工产品、及其组合。热处理的加工产品包括红参或黑参。例如，所述人参属植物可以是人参。
与微波辐照的反应物相对应的人参属植物提取物可以是包含至少一种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rd之任意人参属植物的提取物。该人参属植物提取物还可包含Re和/或Rg1。人参属植物的提取物可以是粗提物或者经额外溶剂级分或色谱法纯化的产物。例如，人参属植物的提取物可以是例如任何人参属植物的水、C1-C4醇或其混合物的粗提物；粗提物的正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇或其混合物的溶剂级分；或者溶剂级分的纯化产物。
水、C1-C4醇或其混合物的粗提物可以是例如甲醇或乙醇的粗提物，并且在提取时，使用的溶剂的量可以是人参属植物的约5至15倍，例如约10倍。在将溶剂加到人参属植物中后，可使用一般的方法(例如加热提取、超声提取和回流提取，特别是超声提取)之一来提取人参属植物。在提取过程中，溶剂的温度可以是约50至约200℃、约50至约150℃、约80至约200℃、或者约120℃，但是温度并不限于此。此外，提取时间可以是约2至约4小时、约2至约3小时、约3至约4小时、或者约3小时，但是并不限于此。此外，提取过程可进行1次至5次，例如3次，但次数并不限与此。由上述方法获得的粗提物可以被用作人参属植物的提取物。或者，通过用有机溶剂另外对粗提物进行提取而获得的溶剂级分可以用作人参属植物的提取物。溶剂级分可以是通过用二氯甲烷、己烷、乙酸乙酯、丁醇或其混合物的粗提物进行提取而获得的级分，但是其不限于此。
上述溶剂级分的进一步纯化产物可被用作人参属植物的提取物。例如，至少一种人参皂苷Rb1、Rb2、Re、Rg1、Rc和Rd可进一步通过柱色谱法纯化。
经微波辐照加工产品可相对于所获得提取物中人参皂苷总重量而言包含90％或更高、95％或更高、98％或更高的Rg3、Rk1和Rg5。人参皂苷的总重量可以是原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)的总重量或者Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5的总重量。经微波辐照加工产品是使用溶剂提取的而不是级分的状态。
根据本发明的另一个方面，制备相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更高Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物的方法包括对人参属植物提取物进行微波辐照。
根据本发明的另一个方面，制备相对于人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)重量而言包含90％或更多Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物的方法包括在对人参属植物进行微波辐照后用提取溶剂进行提取来获得人参属植物提取物。
对根据本发明实施方案的经加工人参属植物提取物的描述也适用于制备经加工的人参属植物提取物的方法。
由于对人参属植物提取物或人参属植物进行微波辐照，大多数的人参皂苷原人参二醇(例如Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5)被转变为人参皂苷Rg3、Rk1和Rg5，因此确认了在人参属植物提取物或人参属植物中人参皂苷Rg3、Rk1和Rg5的含量的提高。另外，与简单热处理的人参属植物提取物的情况相比，人参皂苷Rg3、Rk1和Rg5的总重量显著提高，并且人参皂苷(Rg5+Rk1)/(Rg3)的含量比显著提高(参见实施例1和表2)。
根据本发明的药物组合物可配制成本领域中已知的一般药物制剂形式。所述药物制剂可包括口服施用的制剂、注射剂、栓剂、经皮施用的制剂以及经鼻施用的制剂。然而，药物制剂并不限于以上实例，并可以以任何制剂的形式施用。优选地，药物组合物可配制成用于经口施用的制剂形式，包括液体剂型(例如溶液剂、乳剂、混悬剂、浸膏剂、糖浆剂)和固体剂型(例如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或丸剂)。
当药物组合物被配制成各种制剂时，可通过添加制备每种制剂时所需的可药用赋形剂或添加剂来制备药物组合物。例如，当配制成用于经口施用的固体剂型时，可药用赋形剂可以是选自以下的至少一种：稀释剂、润滑剂、黏合剂、崩解剂、甜味剂、稳定剂和防腐剂。赋形剂可以是可药用的任何赋形剂。特别地，赋形剂可以是乳糖、玉米淀粉、大豆油、微晶纤维素或甘露醇，润滑剂可以是硬脂酸镁或滑石，并且黏合剂可以是聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基纤维素。此外，崩解剂可以是羧甲基纤维素钙、羟基乙酸淀粉钠、波拉克林钾(polacrilin potassium)、或交聚维酮。当配制成用于经口施用的液体剂型时，可以使用多种赋形剂，例如，润湿剂、甜味剂、调味剂和防腐剂，以及经常使用的简单稀释剂(例如水或液态石蜡)。例如，甜味剂可以是蔗糖、果糖、山梨糖醇、或阿斯帕坦(aspartame)。稳定剂可以是羧甲基纤维素钠、β-环糊精、漂白蜂蜡、或黄原胶。防腐剂可以是对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、或山梨酸钾。此外，固体或液体口服制剂的添加剂可以是选自以下的至少一种：调味剂、维生素和抗氧化剂。除了上述成分外，作为已知的调味剂，可组合使用天然香料(例如日本杏香料(Japanese apricot flavor)、柠檬香料、菠萝香料、药草香料)；天然色素(例如天然果汁、叶绿酸、黄酮类)；甜味剂成分(例如果糖、蜂蜜、糖醇、或糖)；或者酸化剂(例如柠檬酸或柠檬酸钠)。
一般的药物制剂可以由本领域普通技术人员通过使用本领域中公知的一般方法来制备。
根据本发明的一个实施方案，药物组合物可以施用多次以使得作为活性成分的经微波辐照加工产品的总日剂量为每个成年人约0.01mg/kg至10g/kg，优选地，约1mg/kg至约1g/kg。根据施用途径、疾病进展的程度、性别、年龄、体重、或专家的临床诊断，剂量可以适当地提高或降低。该药物组合物可单独使用或与手术、激素疗法、化疗和生物应答调节剂疗法一起用于改善选自降低免疫功能和产生抗癌药物抗性的抗癌药物副作用、抗氧化、抗癌、改善脑功能或认知功能、扩张血管、抑制血小板聚集、或改善皮炎或银屑病。
健康功能性食品组合物可以配制成本领域已知的一般健康功能性食品制剂的形式。
健康功能性食品可以以一般剂型的形式(例如散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、输液剂、液体和溶液剂、或浸膏剂)来制备。此外，健康功能性食品可以以健康功能性食品的任何形式(例如肉、香肠、面包、巧克力、糖果、小吃、糕点糖果(confectionery)、比萨饼(pizza)、拉面(ramen)、其他面条、口香糖、果冻、包括冰激凌在内的乳制品、任何一种汤、饮料、茶、保健饮品、酒精饮品、或复合维生素)来制备。为了配制健康功能性食品，可使用营养学上可接受的载体或添加剂以及本领域已知的在制剂的制备中使用的任何载体或添加剂类来进行配制。添加剂的实例包括多种营养补充品、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、在碳酸饮料中使用的碳酸化剂。另外，添加剂可包括用于制备天然果蔬汁的浆状物。这些添加剂可单独使用或组合使用。这些添加剂的含量不重要，但是可以选自按重量计0.01份至0.1份的范围(基于本发明的组合物按重量计为100份)。
在健康功能性食品组合物中，经微波辐照加工产品的含量可根据使用目的(预防或改善)适当地确定。通常，基于健康功能性食品组合物总重量，经微波辐照加工产品的含量可以是0.01wt％至15wt％。当健康功能性食品组合物被制备成饮料时，经微波辐照加工产品的含量可以是(基于100mL的健康功能性食品组合物)0.02g至10g，优选为0.3g至1g。
该饮料还可包含其他成分以及活性成分，并且还可包含多种在饮料中通常使用的调味剂或天然碳水化合物。天然碳水化合物的非限制性实例包括一般的碳水化合物，例如单糖(例如，葡萄糖和果糖)、二糖(例如，麦芽糖和蔗糖)、多糖(例如，糊精和环糊精)以及糖醇(例如木糖醇、山梨糖醇和赤藓糖醇)。此外，调味剂的实例包括天然调味剂(例如，索马甜(thaumatin)和甜叶菊(stevia)提取物)和合成调味剂(例如，糖精和阿斯帕坦)。基于100mL的饮料，天然碳水化合物的含量通常可以是约1g至约20g，优选约5g至约12g。
本发明的有益效果
与通过简单热处理制备的经加工的人参属植物提取物相比，根据本发明的一个或更多个实施方案的经加工人参属植物提取物具有显著高含量比的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3。因此，根据本发明实施方案的经加工人参属植物提取物可以用于制造具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3作用(特别是Rg5和Rk1作用)的药物组合物和健康功能性食品组合物。
附图简述
通过参照附图详细地描述其一些示例性实施方案，将使得本发明的上述和其他特征以及优点变得更加明显，其中：
图1是分析生人参的人参皂苷成分的高效液相色谱(HPLC)色谱图；
图2是分析Cheong-Kwan-Jang的红参提取物丸剂plusTM之简单冷冻干燥产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图3是分析在约120℃的温度下简单热处理生人参约3小时制备的经加工人参提取物中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图4是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理10分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图5是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理20分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图6是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理30分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图7是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理40分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图8是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理50分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图9是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理60分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图10是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理70分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图11是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理80分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图12是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理90分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图13是分析在130℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图14是分析在140℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图15是分析在160℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图16是分析在170℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图17是分析在180℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；
图18是分析在190℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图；以及
图19是分析在200℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
实施本发明的最佳方式
现在将参照以下实施例更全面地描述本发明的一个或更多个实施方案。然而，提供这些实施例仅出于说明性目的，并且不旨在限制本发明的范围。
实施例1：人参提取物的制备
本发明中使用的人参根购买自韩国锦山人参市场(Geumsan ginsengmarket，Korea)的草药店。将50％的乙醇(1.5L)添加至200g精细切碎的人参根粉末中，将所得混合物在70℃下回流提取3个小时，得到50％的乙醇提取物。此后，将所得的50％的乙醇提取物在减压下干燥以使溶剂从中蒸发，以得到27g包含人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1和Re的干燥提取物。
实施例2至10：通过使用微波制备经加工的人参提取物(1)
将根据实施例1制备的50％的乙醇提取物进行热处理。特别地，在由美国CEM公司制造的微波辐照器(型号：908005)的10mL容器中，将每200mg的人参干燥提取物添加至1mL的水中。在密封的容器中，在温度150℃和功率100W(频率为2455MHz)下，将人参干燥提取物用微波辐照10分钟(实施例2)、20分钟(实施例3)、30分钟(实施例4)、40分钟(实施例5)、50分钟(实施例6)、60分钟(实施例7)、70分钟(实施例8)、80分钟(实施例9)和90分钟(实施例10)。将微波辐照的人参干燥提取物冷冻干燥以获得经微波辐照加工产品。微波辐照的压力为20atm。
实施例11至18：通过使用微波制备经加工的人参提取物(3)
在不同的温度下对根据实施例1制备的50％的乙醇提取物进行微波辐照。
特别地，在由美国CEM公司制造的微波辐照器(型号：908005)的10mL容器中，将每200mg根据实施例1所获得的人参干燥提取物添加至1mL的水中。在密封的容器中，在功率100W(频率为2455MHz)，温度130℃(实施例11)、140℃(实施例12)、150℃(实施例4)、160℃(实施例13)、170℃(实施例14)、180℃(实施例15)、190℃(实施例16)、或者200℃(实施例17)下，用微波辐照人参干燥提取物30分钟。将微波辐照的人参干燥提取物冷冻干燥以获得经微波辐照加工产品。微波辐照的压力为20atm。
比较例1和2：Cheong-Kwan-Jang的红参提取物丸剂plusTM之冷冻干燥产品和简单热处理加工的人参提取物的制备(2)
用以下常规热处理加工人参的方法制备Cheong-Kwan-Jang的红参提取物丸剂plusTM之冷冻干燥产品和简单热处理加工的人参提取物，来与根据实施例2至10制备的微波辐照产物的组成进行比较。将市场上可获得的Cheong-Kwan-Jang的红参提取物丸剂plusTM之人参提取物冷冻干燥以获得Cheong-Kwan-Jang的红参提取物的冷冻干燥产品(对比例1)。然后，加工生人参，换言之，对根据实施例1制备的50％的乙醇提取物进行热处理。将200mg的50％的乙醇提取物添加至1mL纯化水中，然后在高压锅中约120℃的温度下简单热处理约3小时。将以如实施例1中相同方式提取的经加工人参提取物冷冻干燥以获得简单热处理提取物(比较例2)。
实验例1：经加工人参提取物的人参皂苷的分析
(1)实验方法
通过使用分别含人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5和Rk1的标准溶液作为对照，用出版物(Kwon等，J.Chromatogr.A，921(2)，335-339，2001)中公开的HPLC分别分析根据实施例1至18和比较例1和2制备的经加工的人参提取物的皂苷。皂苷分析重复三次以确认重现性。洗脱溶剂A以15∶80∶5(vol/vol/vol)的比例分别包含乙腈、水和乙酸。洗脱溶剂B以80∶20(vol/vol)的比例分别包含乙腈和水。所述洗脱溶剂A和B分别通过0.45μm的膜滤器过滤，并分别通过使用两个泵进行泵送使用。通过使用注射器将10μL的标准溶液进样到分离柱，即，反相柱(C18，4.6×150mm)中，并且使含有100体积％洗脱溶剂A和0体积％洗脱溶剂B的洗脱溶剂以1mi/分钟的流量流过反相柱。然后，洗脱溶剂A的体积％逐渐降低到70％(6分钟)、50％(18分钟)和0％(30分钟)，然后，将内容物保持7分钟。在上述过程之后，使用蒸发光散射检测器(evaporative light scattering detector，ELSD)分析从分离柱中分离出的每种组分的峰。
(2)实验结果
图3至19显示的峰作为通过使用ELSD的HPLC分析经加工人参提取物而从分离柱中分离出的各组分的分析结果而获得。
图1是分析生人参之人参皂苷成分的高效液相色谱(HPLC)色谱图。
图2是分析在Cheong-Kwan-Jang的红参提取物丸剂plusTM之简单冷冻干燥产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图3是分析通过在约120℃的温度下简单热处理生人参约3小时制备的经加工人参提取物中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图4是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理10分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图5是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理20分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图6是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理30分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图7是是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理40分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图8是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理50分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图9是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理60分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图10是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理70分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图11是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理80分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图12是分析在150℃的温度、100W下微波加工处理90分钟之经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图13是分析在130℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图14是分析在140℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图15是分析在160℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图16是分析在170℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图17是分析在180℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图18是分析在190℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
图19是分析在200℃的温度、100W下对人参提取物进行微波辐照30分钟后，用提取溶剂提取的经微波辐照加工产品中人参皂苷成分的HPLC色谱图。
另外，在表2中示出了从HPLC色谱图计算出的人参皂苷含量的结果。
表2
[表2]
表3
[表3]
在表2中，每个数字表示每1mg提取物的μg数。计算出了表2中相对于Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量或者Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量之主要人参皂苷Rg3(20(S)+20(R))、Rg5和Rk1的含量，结果在表3中示出。
如图1至3和表2和3中所示，当作为人参所含的主要人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1和Re在120℃的温度下被热处理时，葡萄糖(其为位于20位的糖苷)可被解离，并且随后在20位可能发生脱水使得Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1和Re转变为Rg3、Rg5和Rk1(比较图3和5)。另外，在8分钟到14分钟之间可检测到糖苷未完全解离的白参的其余人参皂苷。
如表2的实施例2至10中所示，当在温度为150℃，压力为20atm下进行微波辐照时，人参皂苷Rg3、Rk1和Rg5的含量的提高与微波辐照的时间成比例。就这一点而言，在反应30分钟后，在经微波辐照加工产品中，相对于Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量或者Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量的Rg3、Rk1和Rg5含量出乎意料地且显著地提高至90％或更高，而且(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值出乎意料地提高至3.0或更高。相对于Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量或者Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量的Rg3、Rk1和Rg5含量的量与简单热处理加工的白参相比提高200％或更高。
此外，如表3的实施例13至16中所示，当在温度为150℃至190℃，压力为20atm下进行微波辐照时，相对于Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量或者Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量，Rg3、Rk1和Rg5含量出乎意料地且显著地提高至95％或更高，例如98％或更高，或提高至100％。(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值也为3.0或更高。
根据以上结果，当对人参提取物或人参本身进行微波辐照时，主要人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd和Re可有效地转变为药学上有效的人参皂苷Rg3、Rg5和Rk1。例如，相对于所获得的Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量或者Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量，经微波辐照加工产品含90％或更高、95％或更高、98％或更高，或者100％的Rg3、Rk1和Rg5。特别地，人参皂苷(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值显著高于简单热处理加工产品。与常规技术相比，这样的效果是完全不可预测的显著效果。
制备实施例1：药物制剂的制备
1.散剂的制备
活性成分 2g
乳糖 1g
通过混合上述成分并用所得的混合物填充密封包装来制备散剂。
2.片剂的制备
活性成分 100mg
玉米淀粉 100mg
乳糖 100mg
硬脂酸镁 2mg
通过混合上述成分并用制备片剂的常规方法将所得的混合物压片来制备片剂。
3.胶囊剂的制备
活性成分 100mg
玉米淀粉 100mg
乳糖 100mg
硬脂酸镁 2mg
通过混合上述成分，并用制备胶囊剂的常规方法用所得混合物填充明胶胶囊来制备胶囊剂。
4.丸剂的制备
活性成分 1g
乳糖 1.5g
甘油 1g
木糖醇 0.5g
通过混合上述成分，通过使用常规方法以使得丸剂的每个药丸包含4g成分来制备丸剂。
5.颗粒剂的制备
活性成分 150mg
大豆提取物 50mg
葡萄糖 200mg
淀粉 600mg
将上述成分混合在一起，将100mg 30％的乙醇添加至该混合成分中，将所得混合物在60℃下干燥以形成颗粒并用颗粒填充包装。
制备实施例2：健康食品的制备
1.番茄酱及调味汁(sauce)的制备
将按重量计0.2至1.0份的活性成分添加至番茄酱和调味汁中来制备用于改善健康的蕃茄酱或调味汁。
2.面制食品的制备
将按重量计0.5至5.0份的活性成分添加至面粉中，并使用所得混合物制备面包、蛋糕、曲奇饼干(cookies)、饼干(cracker)和面条，从而完成用于改善健康的食品的制备。
3.汤和肉汁的制备
将按重量计0.1至5.0份的活性成分添加至汤和肉汁中来制备用于改善健康之经加工的肉制品和面条的汤和肉汁。
4.碎牛肉的制备
将按重量计10份的活性成分添加至碎牛肉中来制备用于改善健康的碎牛肉。
5.乳制品的制备
将按重量计5至10份的活性成分添加至乳中，并使用所得乳制备了多种乳制品(如黄油和冰淇淋)。
6.天然食品的制备
采用已知的方法将糙米、大麦、糯米和薏仁(adlay)预凝胶化并干燥，将干燥的所得混合物进行烘烤并使用粉碎机压成细粉来制备具有60目粒径的粉末。使用已知的方法将黑豆、黑芝麻籽和紫苏籽分别蒸熟并干燥，将干燥的所得混合物进行烘烤并使用粉碎机进行粉碎来制备具有60目粒径的粉末。将活性成分在真空浓缩器中浓缩，并用喷雾对流干燥器进行干燥以获得干燥的材料。其后，使用粉碎机将干燥的材料粉碎以获得具有60目粒径的干燥粉末。
将制备的谷物、种子和坚果以及实施例1和2中提取物的干燥粉末按下面所述的混合比进行混合来制备最终产品：
谷物(按重量计30份的糙米、按重量计15份的薏仁和按重量计20份的大麦)，
种子和坚果(按重量计7份的紫苏籽、按重量计8份的黑豆和按重量计7份的黑芝麻籽)，
按重量计3份的分离自实施例1和2的提取物之复合物的干燥粉末
按重量计0.5份的灵芝
按重量计0.5份的geogen
制备实施例3：健康饮料的制备
1.健康饮品的制备
活性成分 1000mg
柠檬酸 1000mg
寡糖 100g
李子(Plum)浓缩提取物 2g
牛磺酸 1g
用纯化水添加至总体积 900ml
以根据优选实施例的混合比来混合相对适合于饮料的成分以制备如本文所述的组合物，但是成分的混合比可以根据地理偏好和种族偏好(例如目标客户、目标国家、用途等)进行修改。
2.蔬菜汁的制备
将5g的活性成分添加到1000mL的番茄汁或胡萝卜汁中来制备用于改善健康的蔬菜汁。
3.果汁的制备
将1g的活性成分添加到1000ml的苹果汁或葡萄汁中来制备用于改善健康的果汁。
如上所述，与通过简单热处理制备的经加工人参属植物提取物相比，根据本发明的一个或更多个实施方案之经加工人参属植物提取物具有显著高含量比的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3。因此，根据本发明的一个实施方案之经加工的人参属植物提取物可用于制造具有提高的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3作用(特别是Rg5和Rk1作用)的药物组合物和健康功能性食品组合物。
尽管已参考其一些示例性实施方案详细地解释和描述了本发明，但是本领域普通技术人员应该理解，可在其中做出的形式和细节上的多种变化，而不脱离由所附权利要求所限定的本发明的精神和范围。
工业实用性
如上所述，与通过简单热处理制备的经加工人参属植物提取物相比，根据本发明的一个或更多个实施方案之经加工人参属植物提取物具有显著高含量比的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3。因此，根据本发明的一个实施方案之经加工的人参属植物提取物可用于制造具有增强的人参皂苷Rg5+Rk1+Rg3作用(特别是Rg5和Rk1作用)的药物组合物和健康功能性食品组合物。

Claims (16)

1.人参属植物提取物，其可通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得，相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5的重量，所述人参属植物提取物包含90％或更高的Rg3、Rk1和Rg5。
2.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中所述人参属植物提取物是在对所述人参属植物进行微波辐照后用溶剂提取的。
3.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中(Rg5+Rk1)/(Rg3)的比值为至少2。
4.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中Rg3、Rk1和Rg5的含量相对于人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5的重量为90％或更高。
5.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中所述微波辐照在压力下在150℃至190℃的温度下进行30分钟至90分钟。
6.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中所述微波辐照在2atm至100atm的压力下进行。
7.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中所述人参属植物是人参(Panax ginseng)、西洋参(Panax quinquefolia)、三七(Panaxnotoginseng)、竹节参(Panax japonica)、三叶参(Panax trifolia)、喜马拉雅参(Panax pseudoginseng)、越南参(Panax vietnamensis)、其经培养的根、其经热处理或酶处理的加工产品，或其组合。
8.权利要求1所述的人参属植物提取物，其中所述人参属植物提取物是任何人参属植物的水、C1-C4醇或其混合物的粗提物；所述粗提物的正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇或其混合物的溶剂级分；或者所述溶剂级分的纯化产物。
9.药物组合物，其包含权利要求1所述的人参属植物提取物，用于改善抗癌药物的副作用之一例如降低免疫功能和产生抗癌药物抗性，提高抗氧化、抗癌、抗炎、脑功能或认知功能，血管舒张，抑制血小板聚集，改善皮炎或改善银屑病。
10.健康功能性食品组合物，其包含权利要求1所述的人参属植物提取物。
11.制备相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3、Rk1和Rg5重量含有90％或更高Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物的方法，其中所述方法包括对人参属植物或其提取物进行微波辐照，其中所述微波辐照在压力下在150℃至190℃的温度下进行30分钟至90分钟。
12.权利要求11所述的方法，其中所述微波辐照在2atm至100atm的压力下进行。
13.权利要求11所述的方法，其中所述人参属植物提取物具有至少2的(Rg5+Rk1)/(Rg3)比值。
14.权利要求11所述的方法，其中所述人参属植物是人参、西洋参、三七、竹节参、三叶参、喜马拉雅参、越南参、其经培养的根、其经热处理或酶处理的加工产品，或其组合。
15.权利要求11所述的方法，其中所述人参属植物的提取物包括人参属植物的水、C1-C4醇或其混合物的粗提物；所述粗提取物的正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇或其混合物的溶剂级分；或者所述溶剂级分的纯化材料。
16.权利要求11所述的方法，其中所述微波辐照在2atm至100atm的压力下对包含所述人参属植物或所述人参属植物提取物的水溶液进行，其中所述人参属植物提取物具有至少2的人参皂苷(Rg5+Rk1)/(Rg3)比值。
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