KR101339784B1 - 인삼 지하부에서 초단파를 이용한 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법 - Google Patents
인삼 지하부에서 초단파를 이용한 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 초단파 처리를 이용한 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 백삼, 홍삼, 미삼 또는 수삼 등 인삼 지하부에 초단파를 처리하여 인삼 프로사포게닌 성분을 고농도로 함유하는 인삼 제제를 제조함으로써, 홍삼 제조시 열에 의해 소량 생산되는 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 초단파 처리를 이용한 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 백삼, 홍삼, 미삼 또는 수삼 등 인삼 지하부에 초단파를 처리하여 인삼 프로사포게닌을 고농도로 함유하는 인삼 제제를 제조함으로써, 홍삼 제조시 열에 의해 소량 생성되는 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법에 관한 것이다.
고려인삼은 오랜 기간 최고의 브랜드로 인식되어 왔지만, 현재는 세계 인삼시장에서 3% 정도의 시장 점유율을 차지하고 있는 실정인데, 이와 같은 인삼산업의 혁신을 위해서는 고부가가치 인삼 제품의 개발이 필요하다. 그럼에도 불구하고 지금까지의 인삼 제제 및 홍삼 제제는 단순 추출물 수준의 제제가 주류를 이루어 강장제 정도의 수준에서 개발되었다. 그러나 보다 전문적이며 기능성을 갖는 인삼 제제를 개발하기 위해서는, 무엇보다 생리활성이 강하면서 안전성이 확보된 기능성 물질이 고농도로 함유된 인삼 제제의 개발이 필수적이라 할 것이다.
이에 본 발명자들은 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분을 고농도로 함유하는 인삼 제제를 제조하기 위하여 지속적인 연구를 수행해 오던 중 고온에서 인삼을 가열처리하는 가공방법과는 달리, 백삼, 홍삼, 미삼 또는 수삼 등 인삼 지하부에 초단파를 처리하여 인삼 프로사포게닌 성분을 고농도로 함유하는 인삼 제제를 제조함으로써, 홍삼 제조시 열에 의해 소량 생산되는 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분의 함량을 증가시키는 방법을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 백삼, 홍삼, 미삼 또는 수삼 등 인삼 지하부에 초단파를 처리하여 인삼 프로사포게닌 성분을 높은 농도로 함유하는 인삼 제제와 이를 경제적으로 제조하는 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
본 발명의 일 구체예는 백삼 또는 미삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 Rg2, 20S-Rg3, 20R-Rg3, Rg5, Rg6, Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1 또는 F4의 성분을 생성시키는 방법을 제공하는데, 상기 초단파는 1분 ～ 60분 처리하고, 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz, 정격고주파출력 600W~1200W, pH 2 ～ 4에서 수행되는 방법을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 “백삼”이라 함은 수삼의 잔뿌리를 제거하여 껍질을 벗겨 햇빛에 말려서 건조한 것을 말하고, “미삼”이라 함은 수삼의 잔뿌리를 말려서 건조한 것을 말하며, “홍삼”이라 함은 수삼을 수증기에 쪄서 건조한 것을 말하며, “수삼”이라 함은 재배지에서 채굴한 생삼을 말한다.
본 발명의 일 구체예는 홍삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 Rg2, 20S-Rg3, 20R-Rg3, Rg5, Rg6, Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1 또는 F4의 성분 함량을 증가시키는 방법을 제공하는데, 상기 초단파는 1분 ～ 60분 처리하고, 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz, 정격고주파출력 600W~1200W, pH 2 ～ 4에서 수행되는 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예는 수삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 F1, Rk3, Rh4, Rg3, Rg5z 또는 Rg5e의 성분을 생성시키는 방법을 제공하는데, 상기 초단파는 1분 ～ 60분 처리하고, 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz, 정격고주파출력 600W~1200W, pH 2 ～ 4에서 수행되는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명의 일 구체예는 초단파 처리된 백삼, 미삼, 홍삼 또는 수삼 중 어느 하나로부터 선택되는 알코올 추출물을 함유하는 진세노사이드 Rg3 성분이 증가된 항암치료용 약학 조성물, 항암개선용 화장료 조성물 및 식품 조성물을 제공한다.
상기한 과제 해결 수단에 의한 본 발명에 따르면, 본 발명은 홍삼 제조시 열에 의해 소량 생산되는 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분을 고농도로 함유하는 우수한 효능 및 효과의 인삼 제제를 제조할 수 있다.
도 1은 표준 기준(standard authentics)으로부터 측정되는 진세노사이드의 HPLC 크로마토그램이다.
도 2는 실시예 14에서 40분 동안 초단파와 2배식초로 처리된 홍삼 추출물로부터 측정되는 진세노사이드의 HPLC 크로마토그램이다.
도 3은 비교예 2의 홍삼 추출물로부터 측정되는 진세노사이드의 HPLC 크로마토그램이다.
도 2는 실시예 14에서 40분 동안 초단파와 2배식초로 처리된 홍삼 추출물로부터 측정되는 진세노사이드의 HPLC 크로마토그램이다.
도 3은 비교예 2의 홍삼 추출물로부터 측정되는 진세노사이드의 HPLC 크로마토그램이다.
본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 고농도 인삼 프로사포게닌 성분 함유 인삼 제제의 제조방법에 관한 것으로서, 초단파를 이용하여 활성 진세노사이드인 인삼 프로사포게닌 성분을 고농도로 함유하는 새로운 개념의 인삼 제제에 관한 것이다.
이와 같이 본 발명은 초단파를 이용해 인삼 내의 유효성분의 변화 및 인삼 희귀성분의 함량을 극대화함에 그 특징이 있다.
본 발명에 따른 인삼 제제의 제조방법을 더욱 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
인삼 또는 인삼 엑스에 pH 2 ～ 4의 식초 또는 증류수를 5 ～ 15배 가하여 초단파(발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W) 처리하여 인삼 제제를 얻는다.
미삼 제제에서 40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 8.694%, 진세노사이드 Rg5 가 3.010% 고농도로 함유되는 제제 개발의 조건을 확인할 수 있었으며, 진세노사이드 Rh1 은 5분 초단파 처리시 3.176%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 30분 초단파 처리시 2.454%로 고농도 함유를 보여주었다. 백삼 제제에서는 40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 4.613%, 진세노사이드 Rg5가 1.009%로 고농도 함유를 보여주었으며, 진세노사이드 Rh1 은 5분 초단파 처리시 1.05%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 40분 초단파 처리시 1.056%로 고농도 함유를 보여주었다.
또한, 홍삼 제제에서는 40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 4.678%, 진세노사이드 Rg5가 1.010%로 고농도 함유를 보여주었다. 진세노사이드 Rh1 은 5분 초단파 처리시 1.876%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 40분 초단파 처리시 1.078%로 고농도 함유를 보여주었다.
특히, 인삼 또는 인삼 엑스에 1 분 ～ 60 분 초단파 처리하거나, pH 2.0 ～ 3.0의 식초 또는 증류수를 가하여 1분 ～ 60분 초단파 처리하면 진세노사이드 Rg3를 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1 , Rg2, Rg3, Rg6, Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1, F4의 총합에 대해 0.8 ～ 40%로 함유하여 항당뇨, 대사증후군 개선, 항암, 혈압강하, 성기능 개선, 간기능 개선, 뇌인지기능 개선, ADHD 개선, 아토피 및 알레르기 개선 등에 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명에 있어서, 어느 부분으로부터 채취된 인삼을 사용하는가는 본 발명의 효과를 좌우하는 중요인자가 될 수 없다. 따라서 본 발명에서 인삼이라 함은 고려인삼(Panax ginseng)을 비롯한 서양삼(Panax quinquefolium), 삼칠삼(Panax notoginseng), 죽절삼(Panax japonicum) 또는 파낙스 베트남엔시스(Panax vietnamensis)와 같은 파낙스(Panax) 속 식물의 지하부 생약, 예를 들어, 미삼, 백삼, 홍삼, 태극삼, 수삼, 홍미삼, 서양삼, 삼칠삼 및 이들을 가공 처리한 경우도 포함하는 것이며, 이는 인삼과 관련된 반복적인 실험으로부터 확인된 사실에 기초한 것이다.
이때의 가공처리는 필요에 따라 공지의 방법에 의해 추출하여 가공인삼 추출물로 만들 수도 있다. 즉, 인삼류를 물, 저급알콜(예: 메탄올, 에탄올등), 저급케톤(예: 아세톤, 메틸에틸케톤 등), 초임계유체 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출한 후에 농축시키거나 또는 농축된 액을 건조시킴으로써 용매를 제거하여 건조된 분말상의 가공인삼 추출물, 즉 인삼을 연조 또는 건조 엑스의 형태로 제조할 수 있다.
또한, 본 발명에서 특징적으로 사용하는 식초는 상술한 바와 같이 체내 피로요소인 유산의 발생을 방지하거나 해소시키고, 대사를 원활하게 하며 부신피질호르몬도 생성시키는 효과를 가지므로, 이러한 식초를 사용하여 제조한 본 발명의 인삼 제제 또한 제제 내에 구연산을 3% 이상 함유하여 인삼내의 유효성분 효력의 증강 및 보조역할까지 한다. 이러한 식초로는 특별한 제한이 있는 것은 아니며, 통상의 모든 식용 식초, 예를 들어 양조식초 또는 그 대용물로서 모든 종류의 식용 발효식초를 선택하여 적용할 수 있다. 상기 양조식초로는 쌀식초, 현미식초, 몰트식초 또는 술지게미식초 등의 곡물초와 감식초, 사과식초, 포도식초, 배식초, 귤식초, 딸기식초 또는 매실식초 등의 과실초를 사용할 수 있다.
본 발명은 상기와 같은 방법에 의해 제조된 진세노사이드 Rg3가 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1 , Rg2 , Rg3, Rg6, Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1, F4의 총합에 대해 0.8 ～ 40%의 높은 농도로 함유하는 인삼 제제는 항당뇨. 대사증후군 개선, 항암, 혈압강하, 성기능 개선, 간기능 개선, 뇌인지기능 개선, ADHD 개선, 아토피 및 알레르기 개선 등에 유용하게 사용할 수 있다.
상기와 같은 본 발명의 방법에 따라 제조된 인삼 제제는 진세노사이드 Rg3가 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1 , Rg2 , Rg3, Rg6, Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1, F4의 총합에 대해 0.8 ～ 40%로 함유되고, Rg3, Rg5, Rk1, Rh1 이 1 ～ 63%로 함유되어 약효가 우수하다. 특히, 인삼 제제 총합에 대해 Rg3가 0.1 ～ 8.0%, Rg5가 0.1 ～ 3.0%, Rk1이 0.1 ～ 1.0% 및 Rh1이 0.1 ～ 3.0%로 함유되어 약효가 우수하다.
따라서, 본 발명의 방법에 따라 제조된 인삼 제제는 진세노사이드 Rg3를 유효성분으로 함유하므로, 약학 조성물, 화장료 조성물 및 식품 조성물로서 사용된다.
즉, 진세노사이드 Rg3를 유효성분으로 함유하는 조성물은 항암작용(참조문헌: Keum YS, Han SS, Chun KS, Park KK, Park JH, Lee SK, Surh YJ. Inhibitory effects of the ginsenoside Rg3 on phorbol ester-induced cyclooxygenase-2 expression, NF-kappaB activation and tumor promotion. Mutat Res. 523: 75-85 (2003)), 혈관확장작용, 혈압강하작용(참조문헌: Kim ND, Kang SY, Park JH, Schini-Kerth VB. Ginsenoside Rg3 mediates endothelium-dependant relaxation in response to ginsenosides in rat aorta : role of K+ channels. Eur. J. Pharmacol. 367(1): 41-49 (1999)), 항산화작용, 암예방작용(참조문헌: Keum YS, Park KK, Lee JM, Chun KS, Park JH, Lee SK, Kwon H, Surh YJ. Antioxidant and anti-tumor promoting activities of the methanol extract of heat-processed ginseng. Cancer Lett. 150(1): 41-48 (2000)), 대사증후군 개선작용(참조문헌: Vinegar-Processed Ginseng Radix Improves Metabolic Syndrome Induced by a High Fat Diet in ICR Mice, Se Na Yun, Sung Kwon Ko1, Kyung Hee Lee2, and Sung Hyun Chung, Arch Pharm Res 30(5), 587-595 2007. 5. 30.), 혈당강하작용, 고지혈증 개선작용(참조문헌: A vinegar-processed ginseng radix (Ginsam) ameliorates hyperglycemia and dyslipidemia in C57BL/KsJ db/db mice. Eun Jung Han, Keum Ju Park, Sung Kwon Ko, Sung Hyun Chung, Food Sci. Biotechnol.(SCIE) 17(6), 1228-1234, 2008. 12.), 항암작용(참조문헌: Inhibition of in vitro tumor cell invasion by ginsenoside Rg3. Shinkai K, Akedo H, Mukai M, Imamura F, Isoai A, Kobayashi M, Kitagawa I. Jpn J Cancer Res. 1996 Apr;87(4):357-62.), 카테콜라민 분비억제작용(참조문헌: Characterization of ginseng saponin ginsenoside-Rg(3) inhibition of catecholamine secretion in bovine adrenal chromaffin cells. Tachikawa E, Kudo K, Nunokawa M, Kashimoto T, Takahashi E, Kitagawa S. Biochem Pharmacol. 2001 Oct 1;62(7):943-51.) 등의 약리효과가 있다.
본 발명의 인삼 제제를 임상적인 목적으로 투여시에 단일용량 또는 2 내지 3회의 분리용량으로 숙주에게 투여될 총 일일용량은 체중 1 ㎏ 당 1 내지 50 ㎎의 범위가 바람직하나, 특정 환자에 대한 특이 용량 수준은 사용될 특정 화합물, 체중, 연령, 성, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률, 약제혼합 및 질환의 중증도에 따라 변화될 수 있다.
본 발명의 화합물은 목적하는 바에 따라 주사용 제제 및 경구용 제제로 투여할 수 있다. 주사용 제제, 예를 들면 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 공지된 기술에 따라 적합한 분산제, 습윤제 또는 현탁제를 사용하여 제조할 수 있다. 이때, 사용될 수 있는 용매에는 물, 링거액 및 등장성 NaCl 용액이 있으며, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용한다. 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있으며, 올레산과 같은 지방산은 주사용 제제에 사용할 수 있다. 경구투여용 투여 형태는 캅셀제, 정제, 환제, 산제, 과립제 및 액제가 가능하고, 특히 캅셀제와 정제, 액제가 유용하다. 정제 및 환제는 장피제로 제조하는 것이 바람직하다. 고체 및 액체투여 형태는 활성성분을 슈크로오즈, 락토오즈, 전분 등과 같은 하나 이상의 불활성 희석제, 마그네슘 스테아레이트, 탈크와 같은 윤활제, 칼슘 씨엠씨와 같은 붕해보조제, 결합제, 방향제, 소듐벤조에이트와 같은 방부제, 설탕 또는 과당과 같은 감미제 및 계면활성제 중에서 선택된 담체와 혼합시킴으로써 제조한다. 좀더 구체적으로 설명하면, 활성성분 이외에 부형제로서 전분과 유당을 7:3의 비율로 넣고 유동성 증대를 위하여 마그네슘 스테아레이트와 탈크를 3% 이내로 가하여 충진시킴으로써 캅셀제를 제조할 수 있고, 부형제로서 전분과 유당을 7:3의 비율로 넣고 결합제, 그리고 붕해보조제로 칼슘 씨엠씨를 가하여 타정함으로써 정제를 제조할 수 있으며, 방향제로 과일향, 방부제로 소듐벤조에이트, 감미제로 설탕 또는 과당 및 계면활성제를 첨가하여 액제를 제조할 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 더욱 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 실험예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.
제조예. 인삼 엑스의 제조
백삼, 홍삼, 미삼 또는 수삼(충북인삼영농조합법인 구입, 대표 남성엽)의 건조물 각각 500g에 Ethyl alcohol 2,500㎖를 가하여 4회 환류 추출후 여과하여 감압농축하여 Ethyl alcohol 엑스를 얻었다.
실시예 1
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 5분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 2
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 10분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 3
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 20분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 4
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 30분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 5
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 6
백삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 60분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 7
백삼 에탄올 엑스 1g에 증류수 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 8
홍삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 20분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 9
홍삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 30분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예 10
홍삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
11
홍삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 60분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
12
홍삼 에탄올 엑스 1g에 증류수 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
13
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 5분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
14
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 10분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
15
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 20분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
16
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 30분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
17
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
18
미삼 에탄올 엑스 1g에 2배식초 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 60분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
19
미삼 에탄올 엑스 1g에 증류수 200ml를 가하여 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
20
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 5분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
21
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 15분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
22
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 30분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
23
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 40분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
24
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 60분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실시예
25
수삼에 발진주파수 2,450MHz, 정격고주파출력 700W 규격의 전자레인지에 넣고, 초단파 처리를 120분 시행하여 95% 에틸 알콜로 2시간 2회 반복추출한 후, 감압하에 농축시키고 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
비교예
1
백삼 각각 500g에 Ethyl alcohol 2,500㎖를 가하여 2회 환류 추출후 여과하여 감압농축하여 Ethyl alcohol 엑스를 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
비교예 2
홍삼 각각 500g에 Ethyl alcohol 2,500㎖를 가하여 2회 환류 추출후 여과하여 감압농축하여 Ethyl alcohol 엑스를 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
비교예 3
미삼 각각 500g에 Ethyl alcohol 2,500㎖를 가하여 2회 환류 추출후 여과하여 감압농축하여 Ethyl alcohol 엑스를 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
비교예 4
수삼 각각 500g에 Ethyl alcohol 2,500㎖를 가하여 2회 환류 추출후 여과하여 감압농축하여 Ethyl alcohol 엑스를 동결 건조시켜 갈색의 추출물을 얻고, HPLC 법에 준하여 분석하였다.
실험예 1: HPLC법을 통한 진세노사이드 Rg
3
성분 분석
① 실험방법
초단파 처리 제제 각 2g에 diethylether 50㎖를 가하여 1시간씩 3회 진탕 추출한 후, 원심분리하여 상등액을 제거한다. 얻은 잔사에 수포화 butanol 50㎖를 가하여 2시간씩 3회 진탕 추출하고, 원심분리하여 상등액을 취하여 여과하고, 감압농축을 하여 조 사포닌을 얻는다. 얻어진 조 사포닌을 HPLC법에 의하여 정량하였으며, 그 결과를 하기 표 1, 2 및 3에 나타내었다.
② HPLC 분석조건:
위에서 얻은 엑스로 HPLC를 실시하고, 상법에 따라 표품과 직접 비교하여 인삼사포닌의 함량 및 조성을 각 시료당 3회 반복 실험하여 결과의 재현성을 확인하여 분석하였다. 표품은 Chromadex (U.S.A.)로부터 구입한 순도 99% 이상의 ginsenoside를 사용하였다.
사용한 HPLC 장치는 Waters 1525 binary HPLC system (Waters, 미국)이며, 컬럼은 Eurospher 100-5 C18 (250*3mm)을 사용하였다.
이동상은 acetonitrile(HPLC급, Sigma, 미국)과 HPLC용 증류수이며, acetonitrile의 비율을 17 %(0 min)에서 30 %(55 min), 40 %(80 min), 60%(135 min) 그리고 100 %(140 min)로 순차적으로 늘려주고 마지막으로 다시 17%로 조절하였다. 전개온도는 실온, 유속은 분당 0.8 ml, 크로마토그램은 uv/vis Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector (Waters, U.S.A.) 검출기를 이용하여 203nm에서 검출하였다.
표 1에 나타낸 바와 같이, 분석한 인삼 사포닌은 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2, Rg3 , Rg5 , Rg6 , Rh1, Rh4, Rk1, Rk3, F1, F4 이었으며 이들은 도 1～3과 같이 HPLC를 통하여 표품과 직접 비교 확인하고 평균을 통계 처리하여 계산하였다.
40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 4.613%, 진세노사이드 Rg5가 1.009%로 고농도 함유를 보여주었으며, 진세노사이드 Rh1 은 5분 초단파 처리시 1.05%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 40분 초단파 처리시 1.056%로 고농도 함유를 보여주었다.
표 2에 나타낸 바와 같이, 40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 4.678%, 진세노사이드 Rg5가 1.010%로 고농도 함유를 보여주었다. 진세노사이드 Rg5는 30분 초단파 처리시 1.195%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 40분 초단파 처리시 1.078%로 고농도 함유를 보여주었다.
표 3에 나타낸 바와 같이, 40분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 8.678%, 진세노사이드 Rg5 가 3.010% 고농도로 함유되는 제제 개발의 조건을 확인할 수 있었으며, 진세노사이드 Rh1 은 5분 초단파 처리시 3.176%의 함유량을 확인할 수 있었고, 진세노사이드 Rk1 은 30분 초단파 처리시 2.456%로 고농도 함유를 보여주었다.
표 4에 나타낸 바와 같이, 수삼에 15분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg3가 0.1097% 고농도로 함유되는 본 발명 개발의 조건을 확인할 수 있었으며, 60분 초단파 처리시 진세노사이드 Rg5가 0.3476% 고농도로 함유되는 본 발명 개발의 조건을 확인할 수 있었다.
Claims (13)
- 백삼 또는 미삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 Rg2, Rg5, Rg6, Rh4, Rk1, Rk3, F1 또는 F4의 성분을 생성시키는 방법으로, 상기 초단파는 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz에서 30분 내지 60분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 삭제
- 제 1 항에 있어서,
상기 초단파는 정격고주파출력 600W~1200W에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법. - 제 1 항에 있어서,
상기 초단파는 pH 2 ～ 4에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법. - 홍삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 Rg2, Rg5, Rg6, Rh4, Rk1, Rk3, F1 또는 F4의 성분 함량을 증가시키는 방법으로, 상기 초단파는 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz에서 40분 내지 60분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 삭제
- 삭제
- 제5항에 있어서, 상기 초단파는 정격고주파출력 600W~1200W에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제5항에 있어서, 상기 초단파는 pH 2 ～ 4에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 수삼의 알코올 추출물을 초단파 처리하여 진세노사이드 F1, Rk3, Rh4, Rg5z 또는 Rg5e의 성분을 생성시키는 방법으로, 발진주파수 2,000MHz~3,000MHz에서 30분 내지 60분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 삭제
- 제 10 항에 있어서, 상기 초단파는 정격고주파출력 600W~1200W에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 10 항에 있어서, 상기 초단파는 pH 2 ～ 4에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
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| 한국식품영양과학회지 제28권제3호제586~592페이지(1999.6월) * |
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