CN104487061B - 组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种组合物，其作为皮肤功能改善剂是有用的。本发明的组合物含有选自维生素K、皂草精醇及胶原蛋白水解物中的至少两种。该组合物可作为皮肤功能改善剂使用，特别是作为用于抑制经皮水分散失、及/或用于保持角质层水分量的皮肤功能改善剂是有用的。

Description

组合物

技术领域

本发明涉及一种新的组合物，其含有维生素K、皂草精醇(sapogenol)及胶原蛋白水解物(collagen hydrolysate)中的至少两种，更详细而言，涉及作为皮肤功能改善剂有用的上述组合物。

背景技术

皮肤主要分为表皮、真皮及皮下组织。表皮进一步地从表面依次分为皮脂膜、角质层、颗粒层、棘层及基底层。

皮脂膜由皮脂形成，所述皮脂是从皮脂腺和汗腺等分泌的。皮脂具有防止水分散发的作用。经皮水分散失量(Transepideramal water loss，TEWL)是指在不自觉的情况下从体内透过角质层而挥发的水分量。皮脂的量与TEWL存在反相关的关系，例如，若皮脂多，则TEWL减少。所谓TEWL值高，是指角质层的阻隔功能下降。结果，肌肤变得粗涩或干燥，导致肌肤粗糙。即使皮脂的分泌过多，肌肤也油腻发粘，皮脂变为刺激物质，成为导致肌肤的炎症和痤疮(acne)的重要原因。为使皮脂膜发挥重要的功能，适度的皮脂的分泌是必要的。

在皮脂膜下面的角质层中，由硬角蛋白(hard keratin proteins)形成的角质细胞重叠成1mm左右的层状。角质细胞之间通过细胞间脂质相连接。角质层的结构致密，使得体内的水分和体液不会泄漏出去。角质层的最上层的角质细胞脱落时，基底细胞分裂1次，将该现象称为角化。老化的角质脱落，更换为新的角质细胞，由此维持角质层的功能，并且保持表皮的厚度为一定。

即使角质细胞由硬角蛋白形成，仍需要在一定程度上维持肌肤的柔软性。为此，角质层中含有20～30％的水分。若水分丧失，则角质变硬，肌肤变得干燥。

对于角质层的水分的保持，天然保湿因子(Natural Moisturizing Factor，NFM)发挥着作用。NFM由氨基酸、PCA(吡咯烷酮羧酸，pyrrolidone carboxylic acid)、乳酸盐、尿素等构成。具有高亲水性的NMF有助于保持水分。

细胞间脂质是通过角质形成细胞的角化而形成的脂质。细胞间脂质由神经酰胺类、胆固醇、胆固醇酯等构成。神经酰胺和包含在其中的亚油酸等游离脂肪酸在水分的保持和角质层的阻隔功能中发挥作用。若细胞间脂质发生异常，则保水功能丧失，肌肤干燥，变得容易引起炎症。

真皮位于表皮的基底层之下，是由蛋白质纤维和基质构成的厚2mm的层，所述蛋白质纤维包括胶原蛋白及弹性蛋白(elastin)。胶原蛋白对皮肤赋予紧致度(tautness)，并且发挥支撑弹性蛋白的作用。弹性蛋白虽然为2％左右，但可使皮肤具有弹力。将蛋白质纤维之间填满的基质是蛋白多糖、透明质酸这样的细胞外基质(matrix)成分。细胞间脂质保持真皮中的大部分水分。在保持着年轻状态的皮肤中，细胞外基质成分的产生得以促进，保持了皮肤的弹性、保水性和紧致度。

年龄增长、疾病、紧张、内分泌异常等内部因素、和干燥、紫外线等外部因素使来自皮肤组织中的水分和细胞外基质(胶原蛋白、透明质酸等)减少，使皮肤的表皮和真皮的功能下降。皮肤功能的下降表现为皮肤的皱纹、弹力下降(松弛)、肌肤粗糙等状态。

为了解决皮肤的老化和肌肤粗糙等与美容有关的问题，用于摄取各种有效成分的功能性食品和化妆品组合物已经被开发并市售。

专利文献1中公开了一种美肌用经口组合物，其特征在于，含有蜂王浆、异黄酮及胶原蛋白。该发明提供一种具有美肌效果(提高皮肤的柔软性，修复皮肤纹理)的食品。

专利文献2中公开了一种美容食品，其特征在于，含有山白竹、绞股蓝、刺五加、甜菜碱(betaine)、大豆皂苷中的一种或两种以上、且含有胶原蛋白肽。该发明提供一种能恢复肌肤的紧致度和光泽度、并且能保持水润细嫩的年轻的素肤的食品。

专利文献3中公开了大豆皂苷、和在该大豆皂苷中配合选自透明质酸、透明质酸的盐、胶原蛋白、弹性蛋白中的至少一种而成的化妆品材料(cosmetic material)组合物。该发明通过由配合大豆皂苷而产生的效果(即抑制皮下过氧化脂质的生成从而防止皮肤老化的效果)、与由配合选自透明质酸、透明质酸的盐、胶原蛋白、弹性蛋白中的至少一种而产生的保湿效果的协同效果，能够进一步提高肌肤的光润度，维持水润健康且美丽的肌肤。

专利文献4中公开了一种含有有效成分即大豆提取物和红豆粉末作为必需成分而形成的化妆品材料组合物。该发明能减少伴随过氧化脂质在体内的增加而出现的皮肤异常，即肌肤的暗淡无光、色斑、肌肤粗糙等。

专利文献5公开了一种饮料，其特征在于，含有对皮肤美容有效的成分和醇，还公开了包含所述饮料和含大豆胚芽提取物的外用制剂的、防止·改善皮肤老化及/或防止·改善肌肤粗糙的试剂盒。对皮肤美容有效的成分选自生物体胶原合成促进剂(biologicalcollagen synthesis promoter)、异常蛋白质去除剂(abnormal protein remover)、雌激素样作用剂(female hormone-like agent)及保湿剂。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2008-99562(美肌用经口组合物)

专利文献2：日本特开2000-93121(美容食品)

专利文献3：日本特开平11-35445(化妆品材料组合物)

专利文献4：日本特开平10-29911(化妆品材料组合物)

专利文献5：日本特开2004-250372(皮肤老化防止·改善剂及/或肌肤粗糙防止·改善剂试剂盒)

发明内容

本发明的目的在于提供一种皮肤功能的改善效果高的新的组合物。

本申请的发明人等对上述课题进行了潜心研究，结果成功地通过并用两种以上的特定成分，与单独使用相比提高了改善皮肤功能的效果，从而完成了本发明。即，本发明提供一种组合物，其含有选自维生素K、皂草精醇及胶原蛋白水解物中的至少两种。

现有技术虽然记载了含有皂苷、胶原蛋白水解物的组合物，但并未记载像本申请发明这样的含有选自维生素K、皂草精醇及胶原蛋白水解物中的至少两种的组合物。两种以上的成分的并用在皮肤改善功能方面具有协同作用也是完全未知的。

对于本发明的组合物而言，优选必需含有所述维生素K。

所述维生素K优选为维生素K2。

所述维生素K2特别优选为甲萘醌-7(Menaquinone-7)。

所述皂草精醇来自例如大豆。

对于所述胶原蛋白水解物而言，优选分子量200以上且低于3000的肽的含有率为40质量％以上。

另外，本发明提供一种皮肤功能改善剂，其将上述组合物作为有效成分。

上述皮肤功能改善剂含有所述维生素K及所述皂草精醇，用于抑制经皮水分散失。

上述皮肤功能改善剂含有所述维生素K及所述胶原蛋白水解物，用于保持角质层水分量。

如上文所述，若在皮肤组织的各层中所保持的水分减少，则皮肤功能将下降。通过将选自维生素K、皂草精醇及胶原蛋白水解物中的至少两种作为必需成分的本发明，在皮肤组织的保水方面能够获得通过单独成分无法实现的协同效果，尽管其理由并不清楚。

本发明的组合物具有改善皮肤功能的作用。因此，本发明的组合物作为皮肤功能改善剂是有用的。皮肤功能改善剂以功能性食品、补充剂、医药及/或化妆品的形式提供。

在上述皮肤功能剂含有上述维生素K及上述皂草精醇的情况下，能发挥抑制经皮水分散失的作用。此外，在上述皮肤功能剂含有上述维生素K及上述胶原蛋白水解物的情况下，能发挥保持角质层水分量的作用。

上述三种成分是来自于天然动植物的成分，因此，副作用少的可能性高。通过长期服用或施用本发明的组合物，能够获得优异的效果。

附图说明

[图1A]是表示将本发明的组合物作为皮肤功能改善剂使用时的效果的图。表示实施例1(甲萘醌-7+胶原蛋白水解物)、比较例1(甲萘醌-7)及比较例2(胶原蛋白水解物)的皮肤水分散失量变动值(被测物质给予第28天相对于给予开始前一天的差)。对比实施例1、比较例1及比较例2可知，通过并用甲萘醌-7+胶原蛋白水解物，在抑制皮肤水分散失的方面显现了协同效果。

[图1B]与图1A同样地，是表示皮肤水分散失量变动值的图。与比较例1(甲萘醌-7)及比较例3(大豆皂醇(soyasapogenol))相比，实施例2(甲萘醌-7+大豆皂醇)在抑制皮肤水分散失方面显现了显著的协同效果。

[图1C]与图1A同样地，是表示皮肤水分散失量变动值的图。与比较例2(胶原蛋白水解物)及比较例3(大豆皂醇)相比，实施例3(胶原蛋白水解物+大豆皂醇)在抑制皮肤水分散失方面显现了协同效果。

[图2A]是表示将本发明的组合物作为皮肤功能改善剂使用时的效果的图。表示实施例1(甲萘醌-7+胶原蛋白水解物)、比较例1(甲萘醌-7)及比较例2(胶原蛋白水解物)的角质水分量变动值(被测物质给予第28天相对于给予开始前一天的差)。对比实施例1、比较例1及比较例2可知，虽然甲萘醌-7、胶原蛋白水解物的单独使用不具有角质保水(保湿)的功能，但甲萘醌-7+胶原蛋白水解物的并用显现了该功能。

[图2B]与图2A同样地，是表示角质水分量的变化的图。对比实施例2(甲萘醌-7+大豆皂醇)、比较例1(甲萘醌-7)及比较例3(大豆皂醇)可知，虽然甲萘醌-7不具有角质层保水功能，但通过将大豆皂醇与甲萘醌-7并用，能够发挥与大豆皂醇近似的角质保水功能。

[图2C]与图2A同样地，是表示角质水分量的变化的图。将实施例3(胶原蛋白水解物+大豆皂醇)、比较例2(胶原蛋白水解物)及比较例3(大豆皂醇)进行比较可知，虽然胶原蛋白水解物不具有角质层保水功能，但通过将大豆皂醇与胶原蛋白水解物并用，能够发挥角质保水功能。

具体实施方式

以下，对本发明的组合物的一个实施方式进行详细的说明。可在本发明的组合物中使用的维生素K包括维生素K1～K3。维生素K1(亦称为叶绿醌(phylloquinone))大量包含在黄绿色蔬菜、豆类、植物油、海藻类、海鲜类等中。维生素K2(亦称menaquinone)是由微生物产生的，大量包含在纳豆和奶酪等乳产品中。维生素K2也可以由肠道内的细菌生成。根据连接在萘醌骨架上的侧链类异戊二烯基团的长度，维生素K2中存在从甲萘醌-4(MK-4)到甲萘醌-15(MK-15)的同族体。例如奶酪中大量包含MK-6～MK-9，纳豆中大量包含MK-7。维生素K3(亦称为menadione)为合成物质。

各维生素K的制造方法没有特别限定。也可以没有限制地使用市售的维生素K。

对于维生素K1，可采用公知方法(例如日本特开平5-155803)从绿苏(greenperilla)、紫苏、棣棠花(Jew’s marrow)、欧芹、茼蒿、小松菜、菠菜、鸭儿芹、苜蓿、亚洲榛(Asian Hazel)的叶、栗树的叶、大麦的幼茎、野燕麦的幼茎、甘蓝、西兰花、花椰菜、番茄、植物油(大豆油、菜籽油、芝麻油、花生油、玉米油、红花油、葵花籽油、米糠油、橄榄油)等中提取及纯化。维生素K1也可以通过合成得到。维生素K1为可溶于脂肪的淡黄色油状，对热稳定，但对光不稳定。维生素K1也可以是氧化物。

维生素K2可按照例如日本特开平08-073396、日本特开平11-92414、日本特开平10-295393、日本特开2001-136959等中记载的方法、利用纳豆菌等微生物发酵生产。

维生素K3可通过化学合成得到。

若大量摄取维生素K3，则担心会产生副作用。因此，根据至今为止的饮食经验，从安全性较高的方面考虑，从蔬菜中提取纯化的维生素K1和从使用纳豆菌等得到的发酵物中提取的维生素K2是优选的。进一步优选可廉价且容易地进行生产的维生素K2。特别优选为作为食品添加剂已得到认可的甲萘醌-4及/或能作为食品原材料使用的甲萘醌-7。

本发明的组合物的维生素K的含量根据组合物的用途和形态而改变，通常可以为0.00001～99重量％、优选为0.00005％～70重量％、更优选为0.0001～60重量％、进一步优选为0.01～50重量％的范围。若维生素K的含量为0.00001重量％以下，则有时无法获得通过与其他成分(胶原蛋白水解物及/或皂草精醇)并用而产生的协同效果。

皂苷是丰富地存在于大豆、小豆、橄榄等中的无定形糖苷。皂苷具有疏水性部分和亲水性部分，其与水混合振荡时会产生持续性的泡沫，因此被赋予了该名称。根据苷元的种类，皂苷被大致分为甾体皂苷和三萜皂苷。大豆中、特别是大豆胚轴中所大量包含的大豆皂苷是三萜皂苷中的一种。皂草精醇是指从皂苷糖苷(saponin glycoside)(来自大豆、小豆、橄榄)中除去一部分或全部的糖链残基而得到的苷元。作为本发明的组合物中使用的皂草精醇，优选来自大豆。

来自大豆的大豆皂醇中，存在大豆皂醇A及大豆皂醇B，所述大豆皂醇A可由大豆皂苷Aa、Ab、Ac、Ad、Ae、Af、Ag及Ah(大豆皂苷A组的糖苷)得到，所述大豆皂醇B可由大豆皂苷I、II、III、IV及V(大豆皂苷B组的糖苷)得到。

大豆皂醇可通过从大豆皂苷糖苷中除去一部分或全部的糖链而得到。具体而言，对大豆皂苷糖苷施以利用糖苷酶的酶反应(US2006/0275862)、或者进行高温高压处理(WO2008/155890号)或发酵处理。也可以通过化学合成(日本特开2005-137201号)来得到大豆皂醇。将上述文献插入本说明书中，用于参考。

关于具有一部分糖链残基的大豆皂醇(例如，3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸基(glucuronopyranosyl)大豆皂醇B、3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸基大豆皂醇A)，可通过将大豆皂苷糖苷部分地酸分解而得到。具体而言，将大豆皂苷糖苷溶解在乙醇、甲醇、丁醇等有机溶剂中，然后添加硫酸、盐酸等酸。作为另一个方法，在用水、乙醇、甲醇等对酸进行稀释而得到的反应溶剂中添加大豆皂苷糖苷并使其溶解。通过对添加了酸的溶液进行加热，使酸分解开始进行。酸分解温度可基于酸的种类和浓度、部分分解的程度等来适当地选定。采用合适的检测手段(例如色谱法)对部分分解的进展进行检测，在达到规定的分解度时，使用氢氧化钠等碱将溶液中和。通过对中和物进行离心分离、过滤等来回收固相。回收物中除含有所期望的大豆皂醇以外，还含有普通的大豆皂醇、原料糖苷、蛋白质、低聚糖等作为杂质，因此，也可以采用合适的纯化手段(例如柱色谱法)对目标物进行纯化。

大豆皂苷糖苷本身可从大豆的子叶、胚芽或整粒中采用已知方法提取。具体而言，采用日本再表03-75939号公报等中记载的方法从大豆的子叶、胚芽或整粒中进行提取及纯化。作为大豆皂苷糖苷，可以没有限制地使用市售物。

本发明的组合物的皂草精醇的含量根据组合物的用途和形态而改变，通常为0.00002～99重量％、优选为0.0001％～70重量％、更优选为0.005～60重量％、进一步优选为0.01～50重量％的范围。皂草精醇的含量为0.00002重量％以下时，有时无法获得通过与其他成分(维生素K及/或胶原蛋白水解物)并用而产生的协同效果。

胶原蛋白是分子量为约30万、且具有像钢那样的强的刚性的纤维状的蛋白质。胶原蛋白大量包含在哺乳类、鸟类、鱼类等动物的皮肤的真皮、肌腱、动脉、软骨等中。胶原蛋白可通过下述方法进行提取：对上述动物的真皮进行清洗，碱处理后进行中和。

胶原蛋白水解物是通过热使胶原蛋白变性成为明胶后、将明胶进一步水解从而使分子量低至数千～数百而得到的物质。对于水解反应，通常使用胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶等蛋白质分解酶。对于反应温度、反应时间、pH等反应条件，可根据使用的酶和量适当地进行调整。水解结束后，加热从而使酶失活，冷却后，适当地进行过滤及干燥。胶原蛋白水解物也可以使用市售品(例如，产品名：胶原三肽，JELLICE株式会社制)。

胶原蛋白水解物通常为具有100～10000的范围内的分子量分布的肽混合物。分子量200～1000的三肽的含量通常为5～30质量％。

对于本发明中使用的胶原蛋白水解物而言，分子量200以上且小于3000的肽的含量优选为40质量％以上，进一步优选为50质量％以上，更优选为60质量％以上。

本发明的组合物的胶原蛋白水解物的含量根据组合物的用途和形态而改变，通常为0.00003～99重量％、优选为0.0003％～95重量％、更优选为0.003～90重量％、进一步优选为0.03～85重量％的范围。胶原蛋白水解物的含量为0.00003重量％以下时，有时无法获得通过与其他成分(维生素K及/或皂草精醇)并用而产生的协同效果。

如图1A～C所示，通过含有上述必需的三种成分中的至少两种，本发明的组合物发挥抑制水分从皮脂膜散失的功能(皮肤阻隔功能)。如图1A及B所示，从提高皮肤阻隔功能的方面考虑，优选必需含有维生素K2。如图1B所示，从更进一步地提高皮肤阻隔功能的方面考虑，优选必需含有维生素K2及大豆皂醇。

如图2A～C所示，通过含有上述必需的三种成分中的至少两种，本发明的组合物发挥保持角质层的水分的功能(保湿功能)。如图2A所示，在单独使用维生素K或胶原蛋白水解物的情况下，未发挥保湿功能，但通过并用维生素K及胶原蛋白水解物，变得能发挥保湿功能。

对于本发明的组合物，可通过向其中适当地配合在功能性食品、补充剂、医药及化妆品领域中公知的助剂或辅助成分来进行制造。

本发明的组合物能够期待具有抑制经皮水分散失的功能和保持角质层水分量的功能。本发明的组合物以对皮肤进行保湿、并且基于保湿来改善皮肤状态(皮肤的皱纹、松弛、肌肤粗糙等)的功能性食品或补充剂的形式被提供。

本发明的组合物，通过经口摄取能发挥以对皮肤进行保湿和改善肌肤粗糙为目的的美容作用。这些作用也是以美容为目的的化妆品的功能，因此，也可以说本发明的组合物是经口摄取的化妆品。

将本发明的组合物用作改善皮肤功能的功能性食品或补充剂的情况下，除必需成分以外，还可以添加作为补充剂的添加剂通用的成分。例如，根据经口给予剂的形态，可在不损害发明的效果的质的及量的范围内添加通用的赋形剂；崩解剂；粘合剂；润滑剂；pH调节剂；清凉剂；悬浮剂；乳化剂；增粘剂；助溶剂；抗氧化剂；包衣剂；增塑剂；表面活性剂；矫味剂；甜味剂；柠檬酸等酸味材料等；水；香料；着色剂；维生素A、生物素、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素P、叶酸、肌醇、泛酸、烟酸(niacin)等维生素类；钙、钾、钠、磷、硫、铁、锌等矿物质类；黄嘌呤衍生物；蛋白质；甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、精氨酸、氨基葡萄糖等氨基酸；玫瑰提取物等植物提取物；油酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、胆固醇等脂肪酸类；脂肪醇类；水溶性高分子；低聚糖、果糖、乳糖等糖类；不溶性食物纤维、水溶性食物纤维、甲壳素·壳聚糖等食物纤维类；神经酰胺；氨基葡萄糖；N-乙酰氨基葡萄糖；透明质酸；硫酸软骨素；多酚；辅酶Q10等。

为了将本发明的组合物作为功能性食品或补充剂使用，可以将其加工成例如粉剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片、滴剂、饼干(biscuit)、胶状物、凝胶、糖浆、液体制剂等这样的经口给予剂。由于皂草精醇为粉状，所以形态优选为片剂。

关于将本发明的组合物用作功能性食品或补充剂时的摄取量，考虑到症状和安全性，以每天的维生素K的摄取量计，优选为0.01～50mg、进一步优选为0.01～1mg。以每天的皂草精醇的摄取量计，优选为0.1～100mg、进一步优选为5～50mg。以每天的胶原蛋白水解物的摄取量计，优选为0.1～15g、进一步优选为1～10g。

本发明的组合物也可以在面包、米饭、汤、配菜、点心、糖果等普通加工食品的加工时直接添加在原料中。

将本发明的组合物用作改善皮肤功能的医药的情况下，除必需成分以外，也可以添加作为医药助剂通用的成分。例如，根据剂型及给予方法，可在不损害发明的效果的质的及量的范围内添加通用的赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、维生素、黄嘌呤衍生物、氨基酸、pH调节剂、清凉剂、悬浮剂、增粘剂、助溶剂、抗氧化剂、包衣剂、增塑剂、表面活性剂、水、醇类、水溶性高分子、甜味剂、矫味剂、酸化剂、香料、着色剂等。

为了将本发明的组合物作为医药使用，可以将其加工成经口给予剂(散剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片、滴剂这样的固体制剂；可饮用制剂(drinkablepreparation)、水剂、悬浮剂、乳剂、糖浆、干糖浆这样的液体制剂等)或经皮给予剂(液体制剂、水剂、乳剂、乳膏等)的形态。由于皂草精醇为粉状，所以形态优选为固体制剂。

对于将本发明的组合物作为医药使用时的摄取方法，没有特别限定。例如，为经口摄取、经皮摄取等。从患者的负担少的方面考虑，优选为片剂、胶囊剂等的经口摄取。

将本发明的组合物用作医药时，可根据症状适当地设定摄取量，一般而言，用作预防药的情况下，以每天的甲萘醌-7的摄取量计通常可以为10μg～100mg、优选为20μg～100mg、进一步优选为5～50mg。用作治疗药的情况下，可以以1～150mg的量使用。

将本发明的组合物用作医药时，可根据症状适当地设定摄取量，一般而言，用作预防药的情况下，以每天的皂草精醇的摄取量计优选为0.1～100mg、进一步优选为5～50mg。用作治疗药的情况下，优选为5～1200mg、进一步优选为150～900mg。

将本发明的组合物用作医药时，可根据症状适当地设定摄取量，一般而言，用作预防药的情况下，以每天的胶原蛋白水解物的摄取量计优选为0.1～15g、进一步优选为1～10g。用作治疗药的情况下，优选为0.1～20g、进一步优选为1～15g。

将本发明的组合物用作化妆品材料的情况下，除必需的成分以外，还可以添加作为化妆品的助剂通用的成分。可以举出例如乙二醇、聚乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇、1,4-丁二醇、一缩二丙二醇、甘油、双甘油、聚甘油、戊二醇、异戊二醇、葡萄糖、麦芽糖、果糖、木糖醇、山梨糖醇、麦芽三糖、赤藓醇等多元醇；甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异丁醇等低级醇；油酸、异硬脂酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、山嵛酸、十一烯酸等高级脂肪酸类；橄榄油、玉米油、山茶油、澳洲坚果油、鳄梨油、菜籽油、芝麻油、蓖麻油、红花籽油、棉籽油、霍霍巴油、椰子油、棕榈油等油脂；巴西棕榈蜡、小烛树蜡、蜂蜡、羊毛脂等蜡类；山梨糖醇、甘露糖醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖等糖类；卡拉胶、黄原胶、明胶、果胶、琼脂糖、褐藻酸盐、糊精、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、羧乙烯聚合物(carboxyvinyl polymer)、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯胶、刺梧桐胶(karayagum)、黄蓍胶(Tragacanth gum)、罗望子胶等增粘剂；苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben)、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸酯(para-hydroxybenzonate)、苯甲酸、水杨酸和其盐类、山梨酸和其盐类、脱氢乙酸和其盐类、氯甲酚、六氯酚等防腐剂；月桂基硫酸钠、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯等非离子表面活性剂，烷基硫酸酯盐(alkyl sulfate salt)、正十二烷基苯磺酸钠等阴离子表面活性剂，聚氧乙烯十二烷基单甲基氯化铵等阳离子表面活性剂；甾体类及非甾体类抗炎剂；维生素A、维生素D、维生素E、维生素F、维生素K等维生素类和吡多素二辛酸酯、吡多素二棕榈酸酯、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸单棕榈酸酯、抗坏血酸单硬脂酸酯等维生素衍生物；类黄酮、类胡萝卜素等抗氧化剂；角鲨烷、角鲨烯、液体石蜡等高级脂肪族烃类；神经酰胺、脑苷脂、鞘磷脂等鞘脂；胆固醇、植物甾醇等甾醇类；聚甲基硅氧烷、聚甲基苯基硅氧烷、环聚甲基硅氧烷(methylcyclopolysiloxane)、八甲基环四硅氧烷、八甲基环戊硅氧烷、十甲基环戊硅氧烷、聚甲基氢硅氧烷(methyl hydrogen polysiloxane)等有机硅类；对氨基苯甲酸、对氨基苯甲酸单甘油酯、氨茴酸甲酯、N-乙酰基邻氨基苯甲酸三甲基环已酯(homomenthyl-N-acetyl anthranilate)、对甲氧基肉桂酸辛酯、4-异丙基肉桂酸乙酯(ethyl-4-isopropyl cinnamate)等紫外线吸收剂；膨润土、蒙脱石、贝得石、绿脱石、皂石、锂皂石、锌蒙脱石、硅镁石等矿物；氧化铁红、氧化铁黄、氧化铁黑、氧化钴、群青、铁蓝、氧化钛、氧化锌等无机颜料；红色202号、黄色4号、蓝色404号等着色剂；香料；香油等。

为了将本发明的组合物作为化妆品使用，可将其加工成经皮给予剂(液体制剂、水剂、乳剂、乳液、乳膏、粉体等)或经口给予剂(散剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片、滴剂等固体制剂；可饮用制剂、水剂、悬浮剂、乳剂、糖浆、干糖浆等液体制剂等)的形态。

作为化妆品使用时的摄取方法为经口摄取或经皮摄取。从作为化妆品的速效性的观点考虑，水剂、乳剂、乳液、乳膏的经皮给予是优选的。

关于将本发明的组合物用作化妆品材料时的摄取量，考虑到症状和安全性，以每天的维生素K的摄取量计优选为0.01～50mg、进一步优选为0.01～1mg。以每天的皂草精醇的摄取量计优选为0.001～100mg、进一步优选为0.05～50mg。以每天的胶原蛋白水解物的摄取量计优选为0.001～20g、进一步优选为0.01～10g。

给出本发明的组合物的配合例。但是，本发明并不限定于以下配合例。

[配合例1]片剂

[表1]

[配合例2]胶囊

[表2]

[配合例3]化妆水

[表3]

[配合例4]乳膏

[表4]

实施例

以下，使用实施例更详细地说明本发明，但本发明并不限定于以下实施例。

〔实施例1〕

1.组合物(皮肤功能改善剂)的制备

准备甲萘醌-7、胶原蛋白水解物及大豆皂醇。作为甲萘醌-7，使用HPLC对市售的甲萘醌-7试剂(和光纯药工业株式会社制)进行纯度检验后，使用纯度为99.6％的甲萘醌-7试剂。

作为胶原蛋白水解物，使用市售的胶原蛋白水解物(产品名：胶原三肽，JELLICE株式会社制)。将胶原蛋白水解物的分子量分布示于表5。

[表5]

分子量范围	比例(％)
		6,000以上	3
3,000以上、且低于6,000	15
		1,000以上、且低于3,000	48
500以上、且低于1,000	12
		200以上、且低于500	8
低于200	14
		总计	100

三肽(分子量200～1000)的含量为20％。

大豆皂醇使用市售的大豆皂苷制剂(产品名：皂苷B-50，(株)J-OILMILLS制)。该产品包含27.4％的皂苷A组及52.3％的皂苷B组。向750g该产品中添加7.5L含有2N的硫酸的80％乙醇，于75℃保温25小时。保温后，向反应混合物中添加7.5L水，进行离心分离。向离心分离后的剩余物中添加7.5L的水，用1N的KOH进行中和。再次进行离心分离，从离心分离机的上方再次添加水，使其干燥，得到251.5g的粉末。

基于Rupasinghe等人的方法(J.Agric.Food.Chem.51.5888-5894,2003)对粉末中的大豆皂醇浓度进行测定。结果，大豆皂醇A为19.6％，并且大豆皂醇B为45.8％。

对于实施例及比较例的试验组，除给予标准饲料(reference diet)外，还给予表6所示的被测物质。通过将被测物质溶解在0.5％羧甲基纤维素-钠溶液(以下称为CMC-Na溶液)中，制作了组合物(皮肤功能改善剂)。

对被测物质在组合物中的配合量进行调整，使得0.5％CMC-Na溶液的给予量为每10g体重0.05mL、并且被测物质的给予量为表1所示的值。

2.给予试验

准备42只无毛小鼠Hos：HR1(雄性，5周龄)。在一周的驯化期间及试验期间，使小鼠自由摄取标准饲料(产品名：CRF-1，Oriental酵母株式会社制)和水。日照条件为设定昼夜各12小时。驯化期间后，进行每组6只的分组，使组间的体重均匀。

使用胃导管向小鼠连续强制胃内给予上述组合物，1天1次，28天。需要说明的是，向对照组给予标准饲料及0.05mL/10g体重的0.5％CMC-Na溶液。

[表6]

3.对皮肤功能改善剂的评价

(1)抑制经皮水分散失的功能

通过测定TEWL的值，对组合物(皮肤功能改善剂)的抑制经皮水分散失的功能(即，皮肤阻隔功能)进行了评价。TEWL测定使用市售的Tewameter(产品名：TM300，Integral公司制)。测定部位为小鼠的背部。在被测物质给予开始前一天、及给予后第14天和第28天进行测定。

图1A～C表示从被测物质给予第28天的经皮水分散失量中减去被测物质给予开始前一天的经皮水分散失量而得到的值。利用Tukey多重比较检验，进行测定结果的显著性检验。图中，将显著性水平(P)为P＜0.05及P＜0.01、存在显著性差异的情况分别表示为＊及＊＊。

图1B中，与对照组相比，在实施例2(甲萘醌-7及大豆皂醇)中，经皮水分散失量的减少显著地被抑制(P＜0.05)。在图1A的实施例1(甲萘醌-7及胶原蛋白水解物)及图1C的实施例3(胶原蛋白水解物及大豆皂醇)中，也观察到了抑制经皮水分散失量的倾向。由上述结果可知，本发明的皮肤功能改善剂、特别是含有甲萘醌-7及大豆皂醇的皮肤功能改善剂可有效地用于抑制皮脂膜中的水分散失。

(2)角质层保水功能

角质通常含有20～30％的水分。可以认为：角质的水分量越低，则越使得角质层的水分或与保水有关的天然保湿因子(NMF)减少，从而引起皮肤的干燥状态。通过测定角质水分量，可对皮肤功能改善剂的角质层保水功能(即，皮肤的保湿功能)进行评价。

角质水分量的测定使用市售的Corneometer(产品名：CM825，Integral公司制)。测定部位为小鼠的背部。在被测物质给予开始前一天、及给予后第14天和第28天进行测定。

图2A～C表示以被测物质给予开始前一天的角质水分量为基准、将其从被测物质给予第28天的角质水分量中减去而得到的值。利用Tukey多重比较检验，进行测定值的显著性检验。图中，将显著性水平(P)为P＜0.05及P＜0.01、存在显著性差异的情况分别表示为＊及＊＊。

由图2A可见，在单独使用甲萘醌-7或胶原蛋白水解物的情况下，未发挥角质保水功能。但是，若像本发明这样将甲萘醌-7及胶原蛋白水解物并用，则显现出角质保水功能。由此可知，含有甲萘醌-7及胶原蛋白水解物的本发明的皮肤功能改善剂可有效地用于对角质层进行保湿。

由图2B可见，甲萘醌-7的单独使用不具有角质层保水功能，但大豆皂醇的单独使用具有该功能。像本发明这样将甲萘醌-7及大豆皂醇并用，也能显现出角质保水功能。

Claims (2)

1.甲萘醌-7和皂草精醇的组合用于制造经皮水分散失抑制剂的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其中，所述皂草精醇来自大豆。