CN104288207A - 一种杜仲饮片的炮制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种杜仲饮片的炮制方法,其主要步骤包括将杜仲药材除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干后的置于纤维素酶、果胶酶、木质素酶的预处理混合溶液中浸泡1-3h后过滤,滤渣于60℃-70℃烘干后迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡0.5-2h后,40℃-60℃低温烘干即得。采用本发明的炮制方法得到的杜仲饮片断丝率高,活性成分能够有效溶出,活性成分流失小,药效较高,且操作步骤简单,生产时间短,对设备要求低,适合工业生产。
Description
技术领域
本发明涉及中药炮制技术领域,具体涉及一种杜仲饮片的炮制方法。
背景技术
杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.),别名胶木、思仲、银丝树、扯丝皮等,为杜仲科落叶乔木,系名贵木本药材,是我国特有的一种经济树种。自古以来,杜仲以干燥树皮入药而著称药用杜仲,是中国名贵滋补药材,味甘,性温,归肝、肾、胃经,功效补益肝肾、强筋壮骨、调理冲任、固经安胎,用于治疗肾阳虚引起的腰腿痛或酸软无力、肝气虚引起的胞胎不固,阴囊湿痒等症。早在二千年前,我国第一部药物学专著《神农本草经》就记载了杜仲皮的药效,主治“腰脊痛,补中,益精气,坚筋骨,强志,除阴下痒湿,小便余沥,久服轻身耐老”,并把杜仲列为中药上品。《本草纲目》和《本草备要》对杜仲的药理、药效都作了详细阐述:杜仲色紫,味甘而辛,其性温平,甘温能补,微辛能润,故能入肝而补肾,治腰膝酸痛,安胎等症。
近代大量研究证明,杜仲游离氨基酸极少,含有的少量蛋白质,是和绝大多数食品类似的完全蛋白,即能够水解检出对人体必需的8种氨基酸,其中含有15种矿物元素,包括锌、铜、铁等微量元素,及钙、磷、钾、镁等宏量元素。同时,杜仲还具有清除体内垃圾,加强人体细胞物质代谢,防止肌肉骨骼老化,平衡人体血压,分解体内胆固醇,降低体内脂肪,恢复血管弹性,利尿清热,广谱抗菌,兴奋中枢神经,提高白血球药理作用。进一步的研究表明,杜仲具有抗肿瘤、补肾、增强免疫等方面的作用,其抑癌、抗癌作用可能与其有效成分木脂素、苯丙素及环烯醚萜类化合物有关;杜仲水煎液可使实验动物血中嗜酸性粒细胞及淋巴细胞显著降低,血糖和血浆皮质醇含量升高,促进肝糖元堆积,具有一定的兴奋垂体-肾上腺皮质系统、增强肾上腺皮质功能的作用;杜仲水煎液对细胞免疫具有双向调节作用:既能激活单核巨噬细胞系统和腹腔巨噬细胞系统的吞噬活性,增强机体的非特异免疫功能,又能对迟发型超敏反应起抑制作用,能够有效增强人体免疫功能。近代,随着医药学的迅速发展和各种现代化检测技术的应用,杜仲的医疗保健作用有了更多更新的内容。与此同时,人们也开始了对杜仲综合应用的研究,研究证明杜仲叶中含有与杜仲皮一样的次生代谢物,如绿原酸、杜仲胶等,具有同样的降低血压、抗衰老、强身健体之功效。杜仲果实及种子也具有较高的药理价值,其果实中含有绿原酸、桃叶珊瑚甙、京尼平甙酸、松脂素双糖甙、多糖、氨基酸以及Zn、Mn、Cu、Fe、Ca、P、B、Mg、K等多种矿质元素,具有和杜仲皮相似的药理功能,并且无毒副作用;杜仲种仁含有丰富的α-亚麻酸等不饱和脂肪酸,其中α-亚麻酸含量达60%以上,具有显著降血脂、降血压和抑制血栓性疾病,预防心肌梗塞和脑梗塞等作用。
因此杜仲整数都具有极高的经济价值和利用前景,其原产我国,分布广泛,长江、黄河流域均有栽培,以贵州、陕西、湖南、江西、河南、四川等省居多,栽培面积约500万亩。近年来,随着杜仲药用功效的不断开发、拓展,保健品种类的增多,人们对杜仲叶的研究和开发越来越重视。但是,杜仲生品在临床使用较少,大多数经盐炙后入药,杜仲经盐水炙时高温加热使其断丝,目的为破坏其硬质胶类成分杜仲胶,使得杜仲活性成分易于煎出,但高温同时也会造成其中其它活性成分如绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷的破坏,导致整体药效受到影响,温度过低则杜仲胶不易被破坏,断丝不够,松脂醇二葡萄糖苷不易被煎出,含量低。因此,寻求一种断丝率高、活性成分能够有效煎出且未被破坏的杜仲饮片炮制方法对于本领域技术人员而言是一个亟需解决的问题。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种杜仲饮片的炮制方法,其包括以下步骤:
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)将晒干后的杜仲置于纤维素酶、果胶酶、木质素酶的预处理混合溶液中浸泡1-3h后过滤,其中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为1~5:6~3:1;
3)收集步骤2)中滤渣,于60℃-70℃烘干;
4)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡0.5-2h;
5)将浸泡后杜仲置于40℃-60℃低温烘干即得。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤2)中纤维素酶、果胶酶、木质素酶重量配比优选为2~4:5~4:1,进一步优选为3:4:1。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤2)中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的总重量优选为杜仲重量的2%~5%,进一步优选为3%。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤2)中浸泡时间优选为2h。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤3)中烘干温度优选为65℃。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤4)中盐用量为杜仲重量的2%;所述浸泡时间优选为1-2h,进一步优选1h。
上述杜仲饮片的炮制方法中,所述步骤5)中烘干温度优选为50℃~60℃,进一步优选为55℃。
本发明提供的杜仲饮片的炮制方法,其包括以下步骤:
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)将晒干后的杜仲置于纤维素酶、果胶酶、木质素酶的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤,其中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为3:4:1;
3)收集步骤2)中滤渣,于65℃烘干;
4)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
5)将浸泡后杜仲置于55℃低温烘干即得。
上述杜仲饮片炮制方法中,预处理混合溶液的制备方法为:分别称取适量的纤维素酶、果胶酶、木质素酶加入水中溶解即得。
本发明提供的杜仲饮片的炮制方法与现有技术相比,存在以下优势:
1、采用本发明中方法炮制得到的杜仲饮片断丝率高,活性成分能够有效溶出;
2、采用本发明中方法炮制得到的杜仲饮片中活性成分流失小,药效较高;
3、本发明方法操作步骤简单,生产时间短,对设备要求低,适合工业生产。
本申请发明人通过大量实验考查炮制过程中的条件对于炮制结果(断丝率、绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量)的影响,其中:
采用2010版中国药典中公开的HPLC法对成品中松脂醇二葡萄糖苷进行检测,其中:
松脂醇二葡萄糖苷标准曲线制作方法:精密称取脂醇二葡萄糖苷对照品适量,用甲醇定容至10ml容量瓶中,配制成0.509mg/ml的对照品溶液,精密吸取对照品溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml分别置于10ml容量瓶中,加甲醇醇至刻度,摇匀,取10μl注入高效液相色谱仪中进行检测,以浓度为横坐标,吸收度为纵坐标,计算得到标准曲线回归方程为:y=10-6x-0.108(R2=0.9981);
采用高效液相色谱法对成品中绿原酸含量进行检测,其具体步骤为:
1)供试品溶液制备:取剪碎的杜仲样品2g,置锥形瓶中,加50%甲醇溶液40ml超声30min,过滤,将滤液浓缩干燥,用70%甲醇溶液定容于10ml容量瓶中,摇匀,即得供试品溶液。
2)对照品溶液制备及标准曲线绘制:精密称取甘草酸对照品适量,用50%甲醇溶液定容至10ml容量瓶中,配制成0.4mg/ml的对照品溶液,精密吸取对照品溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml分别置于10ml容量瓶中,加甲醇醇至刻度,摇匀,取10μl注入高效液相色谱仪中进行检测,以浓度为横坐标,吸收度为纵坐标,计算得到标准曲线回归方程为:y=0.9901x+5.9614(R2=0.9996);
3)色谱条件:色谱柱:C18反相柱,流动相:甲醇:水(28:72),流速:1ml/min,柱温:25℃,检测波长:327nm,进样量:10ml。
本申请实施方案或具体实施方式中,所使用的药品、试剂、实验仪器如下:
松脂醇二葡萄糖苷对照品(中检所提供),绿原酸对照品(中检所提供),甲醇(成都市科龙化工试剂场,AR)、生育酚(北京三区生物技术有限公司)、纤维素酶(苏柯汉(潍坊)生物工程有限公司)、果胶酶(苏柯汉(潍坊)生物工程有限公司)、木质素酶(苏柯汉(潍坊)生物工程有限公司)
Agilent infinity 1100液相色谱仪(Agilent,USA)。
实验1预处理溶液种类及配比的选择
将1kg杜仲除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干后置于20g不同组成的预处理溶液中浸泡2h后过滤,90℃烘干后获得杜仲饮片成品,计算得到不同样品的断丝率、甘草酸含量和松脂醇二葡萄糖苷含量,部分不同种类预处理溶液种类实验结果见表1,部分预处理溶液配比选择实验结果见表2。
表1 预处理溶液种类选择实验结果
表2 预处理溶液配比选择实验结果
根据上述结果可以看出,当预处理溶液选择纤维素酶、果胶酶、木质素酶的混合溶液时,杜仲断丝率、绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量均优于其它预处理液,而当纤维素酶:果胶酶:木质素酶的重量配比为1~5:6~3:1时,断丝率、绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量均较高,超出该范围时,上述指标均迅速降低,其中2~4:5~3:1时效果更优,3:4:1时效果最好。
申请人进一步考察了预处理酶与杜仲的重量配比发现,当预处理酶总量为杜仲重量的2%~5%时,均能有效提高炮制后杜仲饮片的断丝率、绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量,当重量配比为3%时,效果更佳。
申请人更进一步考察了杜仲浸泡时间发现,当预处理溶液浸泡1~3h时,均能有效提高炮制后杜仲饮片的断丝率、绿原酸含量、松脂醇二葡萄糖苷含量,当浸泡时间为2h时,效果更佳。
实验2烘干程序的选择
将1kg杜仲除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干后置于30g纤维素酶、果胶酶、木质素酶(3:4:1)组成的预处理溶液中浸泡2h后过滤,收集滤渣,采用第一温度烘干后,迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡0.5h后采用第二温度烘干即得杜仲饮片成品,计算得到不同样品的断丝率、甘草酸含量和松脂醇二葡萄糖苷含量,部分实验结果见表3。
表3 烘干程序选择实验结果
根据表3结果可以看出,当第一温度为60℃~70℃、第二温度为40℃~60℃时,绿原酸含量及松脂醇二葡萄糖苷含量均优于其它温度,其中第一温度为65℃、第二温度为50℃-60℃时,绿原酸含量及松脂醇二葡萄糖苷含量更高,当第一温度为65℃、第二温度为55℃时,绿原酸含量及松脂醇二葡萄糖苷含量最高。
申请人通过实验考查发现,加入预冷至0℃的盐水中冷却这一步骤能够使得杜仲断丝率略有提高,绿原酸含量及松脂醇二葡萄糖苷含量也有一定提高;进一步考察发现,冷盐水浸泡步骤中,浸泡时间为0.5h-2h时,均能达到上述效果,浸泡时间为1~2h时,效果更优,但浸泡时间过长不利于后续烘干程序进行,因此浸泡时间进一步优选1h。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的内容作进一步的详细说明,并不能用于限制本发明的保护范围。
实施例一杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量2%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为1:6:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡1h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于60℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡2h;
6)将浸泡后杜仲置于40℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为92%,绿原酸含量为1.2%,松脂醇二葡萄糖苷含量为1.5%。
实施例二杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量5%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为5:3:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡3h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于65℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡0.5h;
6)将浸泡后杜仲置于50℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为90%,绿原酸含量为1.3%,松脂醇二葡萄糖苷含量为2.1%。
实施例三杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量4%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为3:3:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于65℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
6)将浸泡后杜仲置于60℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为93%,绿原酸含量为1.2%,松脂醇二葡萄糖苷含量为2.1%。
实施例四杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量3%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为3:4:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于65℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
6)将浸泡后杜仲置于55℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为96%,绿原酸含量为1.6%,松脂醇二葡萄糖苷含量为2.5%。
实施例五杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量3%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为3:5:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于70℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
6)将浸泡后杜仲置于50℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为90%,绿原酸含量为1.1%,松脂醇二葡萄糖苷含量为1.9%。
实施例六杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量3%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为2:5:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于70℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
6)将浸泡后杜仲置于60℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为91%,绿原酸含量为1.1%,松脂醇二葡萄糖苷含量为1.6%。
实施例7杜仲饮片炮制方法
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)称取杜仲总量5%的纤维素酶、果胶酶及木质素酶,加水至能够浸没杜仲药材,配制成预处理溶液,其中所述纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为2:4:1;
3)将晒干后的杜仲步骤2)中配制的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤;
4)收集步骤2)中滤渣,于70℃烘干;
5)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
6)将浸泡后杜仲置于55℃低温烘干即得。计算得到其断丝率为93%,绿原酸含量为1.3%,松脂醇二葡萄糖苷含量为1.9%。
Claims (9)
1.一种杜仲饮片的炮制方法,其包括以下步骤:
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)将晒干后的杜仲置于纤维素酶、果胶酶、木质素酶的预处理混合溶液中浸泡1-3h后过滤,其中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为1~5:6~3:1;
3)收集步骤2)中滤渣,于60℃-70℃烘干;
4)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡0.5-2h;
5)将浸泡后杜仲置于40℃-60℃低温烘干即得。
2.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤2)中纤维素酶、果胶酶、木质素酶重量配比优选为2~4:5~4:1,进一步优选为3:4:1。
3.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述所述步骤2)中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的总重量优选为杜仲重量的2%~5%,进一步优选为3%。
4.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤2)中浸泡时间优选为2h。
5.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤3)中烘干温度优选为65℃。
6.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤4)中盐用量为杜仲重量的2%;所述浸泡时间优选为1-2h,进一步优选1h。
7.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤5)中烘干温度优选为50℃~60℃,进一步优选为55℃。
8.根据权利要求1所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于其包括以下步骤:
1)除去粗皮,洗净,切成方块或丝条,晒干;
2)将晒干后的杜仲置于纤维素酶、果胶酶、木质素酶的预处理混合溶液中浸泡2h后过滤,其中纤维素酶、果胶酶、木质素酶的重量配比为3:4:1;
3)收集步骤2)中滤渣,于65℃烘干;
4)将烘干后杜仲迅速加入预冷至0℃的盐水中冷却,并浸泡1h;
5)将浸泡后杜仲置于55℃低温烘干即得。
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的杜仲饮片的炮制方法,其特征在于所述步骤2)中预处理混合溶液的制备方法为:分别称取适量的纤维素酶、果胶酶、木质素酶加入水中溶解即得。
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