CN104224911A - 一种新的丹参提取物及其制备 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种新的丹参提取物及其制备,本发明所述丹参提取物的制备方法,包括如下步骤:(1)丹参药材用低级醇提取,过滤得到醇提液,药渣A备用;(2)药渣A加水提取,过滤,得水提液,药渣B弃去;(3)醇提液、水提液分别降温静置,再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液;(4)水提上清液浓缩得水提浓缩液;(5)水提浓缩液逐步加入醇提上清液,合并浓缩,得混合浓缩液;(6)在混合浓缩液加入纯化水,合并浓缩,至一定浓缩比重收膏,即得丹参提取物。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药材的提取方法,具体涉及中药丹参提取物及提取方法。
背景技术
丹参为唇形科鼠尾草植物丹参(Salvia miltiorrhiza Beg.)干燥的根。在我国治疗冠心病心绞痛方面,已有近千年的使用历史,最早记载于东汉的《神农本草经》,并列为上品,具有行气止痛,宁心安神,清热凉血,活血化瘀等功效。
自上世纪以来,随着化学分离手段的不断发展,以及近代植物化学的悄然兴起,人们对丹参的化学成分也有了进一步的研究。
研究表明,丹参的活性成分主要有两类:一类是以丹参酮为代表的脂溶性有效部位;另一类则是以丹酚酸为代表的水溶性有效部位。近年来研究认为,水溶性有效成分是活血化瘀的有效成分。例如,丹酚酸A对缺血再灌注引起的心肌细胞损伤有明显的保护作用,总丹酚酸表现出较强的抗缺血再灌性心律失常作用;丹酚酸A、丹酚酸B以及总丹酚酸对小鼠脑缺血再灌注引起的脑损伤有保护作用,可以减少脑组织中MDA含量;丹酚酸抗血栓作用;丹酚酸对肝、肾的保护作用;丹酚酸具有很强的抗氧化作用,可以清除超氧阴离子和释基自由基,抑制脂质过氧化反应,等等。(杜冠华等,基础医学与临床,2000,20(5):10~14)。
目前,丹参水溶性部位的提取方法多为水提后过树脂柱或聚酰胺柱,例如,Takashi Tanaka等报道的丹参多酚酸盐的提取方法(Chemical PharmaceuticalBulletin,1989,37(2),340~344),另外,KojiHase等(PlantaMedica,1997,63,22~26)、徐亚明等(中国专利CNl247855A,2000年3月公开)、刘平等(中国专利CNl270809A,2000年10月公开)、黎莲娘等(中国专利,申请号01142288.2,申请日2001年9月)亦采用类似的方法从丹参中提取酚酸类化合物。
现有技术中,丹参提取方法大概分为以下几种:
1、丹参水煎煮得水提取液,提取液浓缩后醇沉,将醇沉液浓缩得丹参粗提取物,主要成分为丹酚酸类成分;
2、丹参水煎煮得水提取液,提取液浓缩后醇沉,将醇沉液浓缩一定程度后,过大孔树脂柱或聚酰胺柱,水洗,醇洗,洗脱液浓缩干燥即可,得丹参精提取物,主要成分为丹酚酸类成分。
3、丹参CO2超临济萃取得丹参酮提取物,药渣水提醇沉后,上清液过树脂柱,水洗,醇洗得水溶性成分提取物。
上述方法中,一般都是选择一类成分作为有效成分,如丹参酚酸类或丹参酮类,丹参药材的利用率比较低,舍弃了丹参的另一种有效活性成分,没有将丹参药材的全部成分表达出来。造成药材资源的浪费。
发明内容
为了更好的利用丹参药材,充分发挥丹参药材的药理作用,本发明提供了具有较强药理活性的丹参提取物。
本发明还提供了丹参提取物的制备方法,该方法能够充分将丹参药材的水溶性成分及脂溶性成分完全提取出来,并能够适应产业化。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明提供一种丹参提取物,是通过下述制备方法得到:
(1)丹参药材用醇提取,过滤得到醇提液,药渣A备用;
(2)药渣A加水提取,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)醇提液、水提液分别降温静置,再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液;
(4)水提上清液浓缩得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入醇提上清液,合并浓缩,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液中加入纯化水,混合均匀后浓缩,即得丹参提取物。
其中步骤(1)所述醇为乙醇,其用量为药材用量2-7倍重量,醇浓度为50-100%(v/v),提取时间0.5-4小时。
其中步骤(2)中的加水量为药渣的3-7倍重量,提取时间0.5-4小时。
其中步骤(3)中降温静置是将提取液搅拌20-60分钟,料液温度降至15℃以下静置6-24小时吸取上清液。
优选的,本发明的丹参提取物的制备方法,包括以下步骤:
(1)丹参药材加药材量2-7倍量50-100%乙醇,回流提取约0.5-4小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣A加药材量3-7倍量水,煎煮约0.5-4小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌20-60分钟,醇提液温度降至15℃以下静置6~24小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌20-60分钟,水提液温度降至15℃以下静置6~24小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.10~1.35(优选1.20-1.30),得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对密度不得低于1.10,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入10L~100L纯化水,每次加入5~50L纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
其中,优选的步骤(5)中浓缩水提液至相对密度1.10~1.35后逐步加入步骤(3)醇提上清液。
其中,更优选的步骤(5)中浓缩水提液至相对密度1.10~1.35后逐步加入步骤(3)醇提上清液,浓缩至相对密度为1.25~1.35(82.5±2.5℃)收膏。
本发明所述步骤(3)中降温静置是将提取液搅拌20-60分钟,料液温度降至15℃以下静置6~24小时吸取上清液。作用:降至室温以下,可以迅速除去杂质,如泥土颗粒等,二温度低可以缩短静置时间,适合产业化,同时也能保证丹参酮和丹酚酸的稳定性。
本发明所述步骤(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,减压浓缩至相对密度≥1.20得混合浓缩液;如果单独先浓缩醇提上清液时,随着料液乙醇浓度降低,丹参酮类成分容易析出结块,粘附在设备壁上。本发明采取水提浓缩液逐步加入醇提上清液合并浓缩,可以使醇提上清液中丹参酮类成分均匀分散在水提浓缩液中,因此本发明浓缩方式所得提取物粒度均匀,丹参酮类成分回收率比较高,对设备清洁的要求比较简单,更易于操作和产业化,更重要的是对后续制剂工艺是有利的。本发明将后附不同浓缩方式对丹参提取物性状影响实验进行详细阐述。
本发明所述步骤(6)混合浓缩液分两次加入10L纯化水,每次加5L,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。此加水步骤为挥发掉乙醇,控制乙醇残留量,提高了丹参提取物的质量,本工艺产品能满足欧盟市场对提取物乙醇残留限度要求(≤0.5%)。
。
为了更好都说明本发明都浓缩方式与现有技术的不同,特做如下实验分析比较:
试验例一
不同浓缩方式对丹参提取物影响
一、实验目的:考察不同浓缩方式对丹参提取物性状、粒度分布以及酚酸成分影响。
二、实验结论:
从提取物浓缩过程中粘壁情况、粒度分布以及多酚酸成分浓缩过程中含量变化的结果分析显示:先浓缩水提液后逐步加醇提液浓缩,优于先浓缩醇提液后浓缩水提液浓缩方式。
三、实验设备:
电热套、旋转蒸发器、UPLC、鼓风干燥箱等
四、实验原料:丹参20100309
五、实验方案
准确称量丹参药材450g,用4倍量90%乙醇提取1.5h,药液过滤;药渣用5倍量水回流提取1h,过滤,得醇提液和水提液。每个实验平行提取两次。
实验方案一、先浓缩醇提液后逐步加入浓缩水提液合并浓缩,至糖度86±2%收膏。
实验方案二、先浓缩水提液至糖度84±2%后,逐步加入醇提液合并浓缩,至糖度86±2%收膏。
六、丹参提取物实验过程中图片
样品来源:20120823 先浓缩醇提液再加水提液浓缩
20120829 先浓缩水提液再加醇提液浓缩
6.1实验过程中实验图片,见图1。
1、从丹参提取物放料后烧瓶粘附的图片可知20120823黑子渣子颗粒大且粘附比较严重,20120829可以看到析出黑色渣子比较细小并且比较均匀,从而20120829浓缩方式提取物性状较好。
2、用水清洗各自批次烧瓶结果图片可以看出20120823烧瓶黑子渣子粘附比严重,后种浓缩方式粘壁情况较少。从而从水清洗效果来说20120829批次浓缩方式对设备清洗较好。
3、从95%乙醇清洗的照片可知20120823清洗溶液颜色比较重,20120829溶液颜色较清。
综上所述,从丹参提取物表观性状和后续设备清洗来说20120829批次浓缩方式先浓缩水提液后逐步加入醇提液合并浓缩方式最优。
6.2不同浓缩方式对丹参提取物粒度分布的影响
6.2.1丹参提取物涂布照片
从上图2可以看出涂布图片中,20120823有明显大颗粒的黑子渣子析出,另种浓缩方式丹参提取物黑色渣子分布比较均匀且颗粒比较小,对丹参提取物对后续制剂影响较小。
6.2.2药典筛检测粒度分布
分别取各批次丹参提取物浸膏50,加5倍量水溶解,过1-8号药典筛(药典筛依次叠放),用约500ml蒸馏水冲洗,观察每层药典筛中浸膏颗粒分布情况,然后将每层中的颗粒用水冲洗,收集,抽滤,连同滤纸烘干称重。
如上述图表可知从提取物颗粒大小以及大颗粒出现顺序可知,提取物性状优略顺序为20120829-J>20120823-J。因此20120829浓缩方式较好。
本发明浓缩方式给制剂带来的好处主要是:提取物中难溶性颗粒显著改善,载药过程不在出现堵喷枪问题。提取物乙醇残留水平较低,制剂过程不再增加挥醇操作,确保产品乙醇残留符合要求。提取物稳定性提高,制剂过程指标成分转移率稳定。
本发明所涉及丹参提取物及其制备方法具有如下优势:
1、本工艺利用醇提和水提两种工序,将丹参药材脂溶性成分和水溶性成分充分浸出。
2、本工艺通过调整水提液和醇提液的浓缩顺序,并且严格控制浓缩工序中间体浓缩过程中相对比重,以便水溶性和脂溶性成分均匀分散,为后续制剂提供性状均匀分散的原料。
3、因为醇提上清液后加入料液进行合并浓缩,有效地避免了丹参酮类成分长时间高温浓缩含量降低,有效保留了丹参醇提出来的脂溶性成分。
4、本工艺为各种类似药材水溶性成分和脂溶性成分均匀分散提供了借鉴方法。
5、本工艺通过浓缩后期加水合并浓缩,为降低提取物有机溶剂残留提供借鉴方法。
附图说明
图1实验过程中实验图片,其中,第一排丹参提取物放料后烧瓶粘附图片,第二排烧瓶水清洗后图片,第三排烧瓶95%乙醇清洗后图片
图2丹参提取物涂布照片
具体实施方式
以下通过实施例进一步说明本发明,但不作为对本发明的限制。
实施例1
丹参提取物的制备,步骤如下:
(1)丹参药材加药材量5倍量75%乙醇,回流提取2小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)药渣A加药材量5倍量水,煎煮2小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌30分钟,醇提液温度降至15℃以下静置12小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌30分钟,水提液温度降至降至15℃以下静置12小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.20~1.30,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对密度不得低于1.10,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液
(6)混合浓缩液分次加入50L纯化水,每次加入25L,搅拌均匀,合并后减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
实施例2
丹参提取物的制备,步骤如下:
(1)丹参药材加药材量2倍量50%乙醇,回流提取约0.5小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣A加药材量2倍量水,煎煮约0.5小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌20分钟,醇提液温度降至15℃以下静置6小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌20分钟,水提液温度降至15℃以下静置6小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.20,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对比重不得低于1.10,减压浓缩至相,对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入10L纯化水,每次加入5纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25,趁热过滤,得丹参提取物。
实施例3
丹参提取物的制备,步骤如下:
(1)丹参药材加药材量7倍量100%乙醇,回流提取约4小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣1加药材量7倍量水,煎煮约4小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌60分钟,醇提液温度降至15℃以下静置24小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌60分钟,水提液温度降至15℃以下静置24小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.30,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对密度不得低于1.10,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入100L纯化水,每次加入50L纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
实施例4
丹参提取物的制备,步骤如下:
(1)丹参药材加药材量5倍量75%乙醇,回流提取约2小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣1加药材量5倍量水,回流提取约2小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌30分钟,醇提液温度降至15℃以下,静置12小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌30分钟,水提液温度降至15℃以下,静置12小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.20~1.30,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入50L纯化水,每次加入25L纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
实施例5
丹参提取物的制备,步骤如下:
(1)丹参药材加药材量5倍量75%乙醇,回流提取约2小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣1加药材量5倍量水,回流提取约2小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌30分钟,醇提液温度降至15℃以下,静置12小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌30分钟,水提液温度降至15℃以下,静置12小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.20~1.30,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对密度不得低于1.10,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入50L纯化水,每次加入25L纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
实施例6
丹参提取物:E切制丹参:药材外观检查,称量,备用。
药材投料要求:
E切制丹参:可根据需要将不同批次E切制丹参按适当比例搭配使用。
加入物料顺序:投料时先投E切制丹参,一煎加入90±0.5%乙醇、二煎加入一级RO水作为提取溶媒进行提取。
提取:
一批次由2罐组成,每罐均按批处方分别称取E切制丹参100kg,加90±0.5%乙醇400±12L,煎煮90±5min,200目过滤,两罐E01醇提液合并放入静置罐中;药渣进行第二次提取,加水500±15L,煎煮60±3min,200目过滤,药渣弃去,两罐E01水提液合并放入不同静置罐中。
降温静置:
E01醇提混合液和E01水混合提液分别置于不同静置罐中,静置罐通冷冻水降温静置,提取液搅拌30分钟后,料液温度降至15℃以下,静置6~24小时,吸取E01醇提上清液和E01水提上清液放至各自储罐中。
浓缩:
先浓缩E01水提上清液至E01水提浓缩液比重1.25~1.30(82.5±2.5℃)之间;逐步加入E01醇提上清液进一步合并浓缩,浓缩过程中浓缩液比重不得低于1.15;浓缩至E01混合浓缩液比重≥1.34,分两次加入10L纯化水,每次加5L(45±5℃),合并浓缩,浓缩至比重1.33~1.35(82.5±2.5℃),趁热过滤(40目筛)得E01丹参提取物。
Claims (8)
1.一种丹参提取物,其特征在于,是通过如下制备方法得到:
(1)丹参药材用醇提取,过滤得到醇提液,药渣A备用;
(2)药渣A加水提取,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)醇提液、水提液分别降温静置,再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液;
(4)水提上清液浓缩得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入醇提上清液,合并浓缩,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液中加入纯化水,混合均匀后浓缩,进一步浓缩即得丹参提取物。
2.权利要求1所述的丹参提取物,其特征在于,其中步骤(1)所述醇为乙醇,其用量为药材用量2-7倍量,醇浓度为50-100%,提取时间0.5-4小时。
3.权利要求1所述的丹参提取物,其特征在于,其中步骤(2)中的加水量为药渣的3-7倍量,提取时间0.5-4小时。
4.权利要求1所述的丹参提取物,其特征在于,其中步骤(3)中降温静置是将提取液搅拌20-60分钟,料液温度降至15℃以下静置6~24小时吸取上清液。
5.权利要求1所述的丹参提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)丹参药材用醇提取,过滤得到醇提液,药渣A备用;
(2)药渣A加水提取,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)醇提液、水提液分别降温静置,再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液;
(4)水提上清液浓缩得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入醇提上清液,合并浓缩,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液中加入纯化水,混合均匀后浓缩,进一步浓缩即得丹参提取物。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)丹参药材加药材量2-7倍量50-100%乙醇,回流提取约0.5-4小时,过滤得醇提液,药渣A备用;
(2)上述药渣A加药材量3-7倍量水,煎煮约0.5-4小时,过滤,得水提液,药渣B弃去;
(3)步骤(1)中的醇提液搅拌20-60分钟,15℃以下静置6~24小时吸取上清液得醇提上清液,步骤(2)中的水提液搅拌20-60分钟,15℃以下静置6~24小时,吸取上清液得水提上清液;
(4)水提上清液浓缩至相对密度1.10~1.35,得水提浓缩液;
(5)水提浓缩液逐步加入步骤(3)醇提上清液,合并浓缩,浓缩过程中料液相对密度不得低于1.10,减压浓缩至相对密度≥1.20,得混合浓缩液;
(6)混合浓缩液分次加入10L~100L纯化水,每次加入5~50L纯化水,合并浓缩,减压浓缩至82.5±2.5℃相对密度为1.25~1.35,趁热过滤,得丹参提取物。
7.如权利要求5或6任何一项所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中浓缩水提液至相对密度1.10~1.35后逐步加入步骤(3)醇提上清液。
8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中浓缩水提液至相对密度1.10~1.35后逐步加入步骤(3)醇提上清液,浓缩至相对密度为1.25~1.35(82.5±2.5℃)收膏。
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