CN102772487A - 一种丹参软胶囊的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种丹参软胶囊制剂的制备方法,将丹参提取物与甘油、聚乙二醇400充分混合,使丹参酮ⅡA等脂溶性成分溶解于液态基质中,起到了一定的增溶作用,提高了丹参脂溶性成分的生物利用度。在本发明的制备过程中,提供了一种制备丹参水溶性成分提取物的方法,采用大孔树脂分离技术,乙醇溶液洗脱后浓缩,喷雾干燥,得到的提取物中,总丹参酚酸类成分占总固体量的60%以上,其中主要酚酸类成分丹酚酸B的含量在45%~60%之间,丹参素含量控制在10%~20%之间。在提高丹参总酚酸收率的同时,控制丹参素的含量,使主要有效成分丹酚酸B的比例显著提高。安全有效、低毒环保,能够满足工业化生产需要,具有广泛且实际的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及一种含有丹参提取物的软胶囊的制备方法,属于医药技术领域。
背景技术
丹参又名赤参,紫丹参,红根等。其有效成分主要包括两类:脂溶性非醌色素类化合物,如丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮及其异构体和水溶性酚酸类成分,如丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素等。其中丹参酮ⅡA能增加冠脉血流量,改善缺氧后引起的心肌代谢紊乱,从而提高心肌耐缺氧的能力;能显著延长小鼠耐缺氧时间,减轻缺氧引起的心肌损伤,同时,改善心肌收缩力,促进心肌再生;还具有显著保护红细胞膜的作用。对动物心肌梗塞有缩小梗塞面积的效应。而丹参酚酸类成分具有明显的抗氧化作用,抑制血小板聚集,及抑制血栓形成的作用,并能延长缺氧条件下动物的存活时间。另外,丹酚酸类成分对心肌缺血再灌注损伤具有预防作用并对动脉粥样硬化具有防治作用。因此,丹参提取物所制成的制剂被广泛应用于心脑血管疾病的治疗和预防领域。
丹参酮ⅡA等脂溶性成分在水溶液中溶解度差,以脂溶性成分为主要成分之一的丹参固体制剂如丹参片、丹参硬胶囊在口服后,丹参酮ⅡA的溶出差,导致吸收不充分或吸收时间延长,生物利用度低,影响了丹参制剂的疗效。本发明提供了一种丹参软胶囊制剂的制备方法,将丹参提取物与甘油、聚乙二醇400充分混合,使丹参酮ⅡA等脂溶性成分溶解于液态基质中,起到了一定的增溶作用。当软胶囊壳在体内崩解后,有效成分以液体状态直接释放,提高了丹参脂溶性成分的生物利用度。
随着中药提取技术的不断发展,追求高含量有效成分的提取物已成为中药制剂过程中的主要目的之一。提取丹参水溶性成分的方法很多,传统方法(如《中国药典》2010年版 一部 丹参总酚酸提取物项下)为丹参药材加水煎煮后直接进行浓缩,减压干燥即得,所得提取物中含丹酚酸B不少于5%。丹参水溶性成分中,丹酚酸B为主要有效成分,而丹酚酸B的稳定性很差,随着水提液的放置、浓缩和干燥过程,酚酸类成分会分解和氧化破坏,造成提取物中丹酚酸B含量很低。申请号200610113897.4公开了一种丹参有效部位标准提取物的制备方法,将水煎煮提取的水溶性丹酚酸类成分以乙酸乙酯纯化,所得提取物中丹酚酸B含量不小于35%。然而,乙酸乙酯作为一种化工用试剂,吸入后可致麻醉作用,导致急性肺水肿,肝、肾损害,误服者可产生恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状,在药品生产中应对其进行有机溶剂残留量的严格控制,以确保患者用药安全。申请号200610200604.6公开了一种中药丹参的提取物及其制备方法,不仅使用乙酸乙酯萃取,还在提取液中加入了Ca2+,Mg2+,Al3+,Zn2+,Ba2+,Cu2+等重金属离子使丹酚酸盐沉淀。虽然所得提取物中总丹参酚酸类成分占总固体量的60%-80%,然而其提取物存在重金属限量可能超标的风险,所得提取物不宜用于制备药品供患者使用。申请号200610170981.X公开的一种从丹参提取物中分离纯化丹酚酸B的方法。将丹参饮片粉碎、醇提、抽滤后的滤液减压浓缩得浓缩液,加水,用碱调pH值至7.5,用乙醚萃取;水相用酸调节pH值至3,再用乙醚萃取,回收溶剂后得到丹参粗提物,再应用pH区带逆流色谱法分离制备高纯度的丹酚酸B。工艺中涉及抽滤、两次调节pH值、两次乙醚萃取,以及相应的浓缩工作,处理步骤繁杂,造成收率降低。而乙醚沸点低、易燃且其蒸气存在麻醉作用,回收过程中亦存在安全隐患。另外,区带逆流色谱法目前还停留在实验室阶段,其上样量相对较小,单次制备量一般在百毫克以下,无法满足产业化需要,难以广泛应用。申请号200510037786公开了一种丹参提取物、其制备方法、药物制剂及检测方法,采用水加温提取丹参药材,调节PH后过滤提取液,过大孔树脂柱、水洗后50%-95%乙醇洗脱、洗脱液回收乙醇至尽、干燥后所得提取物制备丹参制剂。其制备的提取物含有丹参素28%-38%、原儿茶醛9%-18%,丹酚酸B 29%-38%。从有效成分含量的角度分析,该方法简便安全,所得提取物含量高,适合产业化生产,是一个具有实际应用价值的发明。然而,该发明所制备的丹参制剂中不含有丹参有效成分群之一的脂溶性成分,而且没有注重制备过程中丹酚酸B的稳定性问题。由于丹酚酸B是由3分子丹参素和1分子咖啡酸缩合形成的化合物,丹酚酸B在分解过程中会生成丹参素,造成丹参素含量增加,所得提取物中,丹参素与丹酚酸B的含量相当。本发明提供的软胶囊制备方法中,提供一种制备丹参水溶性成分提取物的方法,采用大孔树脂分离技术,乙醇溶液洗脱后浓缩,喷雾干燥,得到的提取物中,总丹参酚酸类成分占总固体量的60%以上,其中主要酚酸类成分丹酚酸B的含量在45%-60%之间,丹参素含量控制在10%-20%之间。在提高丹参总酚酸收率的同时,控制丹参素的含量,使主要有效成分丹酚酸B的比例显著提高。安全有效、低毒环保,能够满足工业化生产需要,具有广泛且实际的应用价值。
发明内容
本发明提供一种丹参软胶囊的制备方法,包括如下步骤:
(1)将丹参药材放入提取罐中,加乙醇溶液温浸,收集提取液,回收乙醇后浓缩、干燥,得含丹参脂溶性成分的丹参酮提取物;
(2)药渣加水温浸,收集提取液,放冷,备用;
(3)步骤(2)所得的提取液直接经大孔树脂上柱、洗脱、收集洗脱液浓缩、干燥,得含丹参水溶性成分的丹参总酚酸提取物,其中丹酚酸B的含量在45%~60%之间,丹参素含量在10%~20%之间;
(4)将步骤(1)、(3)所得的提取物加入适当辅料预混合,用胶体磨进一步混匀,得药液备用;
(5)取明胶、甘油、水,加入适当辅料,置容器中加热溶解,混匀,脱气后得囊皮溶液;
(6)取上述药液和囊皮溶液,用软胶囊生产设备压制成型,干燥、抛光后即得。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(1)中,使用乙醇溶液的浓度为80%~95%,优选85%~90%,使用量为药材用量的5~15倍,优选8~10倍,温浸的次数为1~3次,优选2次。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(2)中,使用水的量为药材用量的5~15倍,优选6~8倍,温浸的次数为1~3次,优选2次。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(1)和(2)中,温浸的温度为65℃~90℃,优选75℃,温浸的时间为0.5~2.5小时,优选1~1.5小时。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中大孔树脂选用HPD-100、HPD-400、HPD-600、D-001、D-101,AB-8,优选D-101。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中大孔树脂的使用量按照丹参药材(Kg)∶大孔树脂(L)为1∶1.0~1:2.0为宜,优选1∶1.5~1∶1.7。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中所用洗脱液为有机醇,优选乙醇,浓度为20%~50%,优选30%~40%;洗脱液体积为1-3BV,优选1.5-2BV;流速为0.5树脂床体积/小时(BV/h)~2树脂床体积/小时(BV/h),优选0.8~1.2树脂床体积/小时(BV/h)。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中所述干燥为减压干燥、喷雾干燥、微波干燥,优选喷雾干燥和微波干燥。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(4)中所述适当辅料为适当的稀释剂、助悬剂、稳定剂、防腐剂等,其中提取物与辅料的比例为40~200∶100~500∶20~50。
本发明所述一种丹参软胶囊的制备方法步骤(5)中所述明胶、甘油、水的比例为0.9~1.2∶0.3~0.5∶0.9~1.5,所述适当辅料包括遮光剂、食用色素等。
作为丹参中有效成分群之一的丹参脂溶性成分(丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA,隐丹参酮等)在水溶液中几乎不溶,传统丹参相关制剂如片剂、硬胶囊剂、滴丸剂中丹参脂溶性成分以固体的形式存在,其有效成分难以溶出,导致有效成分吸收不充分或吸收时间延长,生物利用度低,进而影响了丹参制剂的疗效。本发明提供的软胶囊制剂,改变了丹参酮ⅡA等脂溶性成分在制剂中的存在状态,由传统的固体状态变为溶解在软胶囊基质中的溶液状态,克服了传统固体丹参制剂脂溶性成分溶出困难的现状,改善了丹参酮ⅡA等脂溶性成分的溶出度,提高了丹参酮ⅡA等脂溶性成分的生物利用度,从而提高了丹参制剂的疗效。
另一方面,本发明中使用大孔树脂法分离得到丹参水溶性成分的丹参总酚酸提取物,在纯化过程中,避免了现有技术使用不可食用的有机试剂(如乙醚、乙酸乙酯等)、金属离子等试剂时可能产生的安全性问题,同时克服了逆流色谱等技术存在的上样量低、单次制备量小、无法放大生产等缺点。在发明过程中,考察了调节pH值对丹参酚酸类成分纯化程度的影响,结果发现,适当调节pH值可以使部分非酚酸类成分沉淀而被过滤除去,使获得的提取物中总酚酸含量提高。然而,调节pH值后,需要将提取液放置一段时间,待沉淀完全后过滤除去杂质。在工业化大生产时,这一步骤需要1个工作日才能完成,使得整个纯化过程延长,造成丹酚酸B由于在溶液中放置时间加长而分解增加,得到的提取物中丹参素比例增大,丹酚酸B的总收率降低。因此,本发明采用丹参水提液直接上柱的方法,尽量缩短纯化过程,以提高丹酚酸B的总收率。在发明过程中还发现,10%-95%的乙醇溶液均可以将丹参酚酸类成分有效洗脱。其中,使用1~2BV的60%以上的高浓度乙醇既可以将丹酚酸B等酚酸性成分洗脱完全。然而,由于洗脱液中乙醇浓度较高,洗脱能力强,使得大量吸附性较强的非酚酸性成分被同时洗脱,造成所得提取物杂质较多,提取物总收率可达10%(提取物/生药材×100%)以上,然而总酚酸含量不高(仅能达到30%或更低),而且采用高浓度的乙醇增加了生产成本,并存在安全隐患,不利于产业化。使用10%~20%的低浓度乙醇可以很好地将吸附性较差的酚酸性成分洗脱,吸附性较强的非酚酸性成分由于被树脂柱保留而除去,提取物总收率可以降至3%(提取物/生药材×100%)以下,得到的提取物中,总酚酸含量很高(可达80%以上)。然而,由于洗脱能力较小,使得采用低浓度乙醇洗脱时,需要增加洗脱液的用量(增加至3BV以上)才能将酚酸类成分洗脱完全。在最佳流速一定的条件下,相对延长了洗脱时间,延长了生产周期,使丹酚酸B分解增加,造成所得提取物中,丹参素含量较高,丹酚酸B收率降低。本发明采用1.5~2BV的30%~40%的乙醇作为洗脱液,在除去非酚酸性杂质的同时,缩短了洗脱时间,在减少丹酚酸B分解的同时缩短了生产周期并兼顾生产成本。与现有技术比较,纯化程度高,酚酸性成分放置在溶液中的时间短,在分离过程中最大限度的保护了酚酸类成分。本发明所得丹参总酚酸提取物中总丹参酚酸类成分占总固体量的60%以上,其中主要有效成分丹酚酸B的含量可达45%以上。本发明所适宜的生产批量,折合成生药量可达100kg~2000kg/批,单次可生产软胶囊成品10~200万粒,完全可以满足产业化需求。该工艺所使用的溶剂乙醇为食品、药品行业常用溶剂,安全低毒,没有重金属限量超标、有机溶剂残留量超标的风险,适合作为生产药品和保健品的工艺,供广大患者使用。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。
实施例1丹参中丹参酮提取物和总酚酸提取物制备。
取丹参饮片200kg,加入85%乙醇溶液2000L,80℃下温浸1.5小时,收集提取液,回收乙醇后浓缩、干燥,得含丹参酮ⅡA的丹参酮提取物;药渣加水1600L,80℃下温浸1小时,收集提取液,放冷,直接经大孔树脂D-101(300L)上柱,用水洗至流出液无颜色后,使用20%乙醇溶液(700L)以1.0 BV/h的流速洗脱,收集洗脱液,挥尽乙醇后进行喷雾干燥,得到含丹酚酸B的丹参总酚酸提取物。
高效液相色谱法测定丹参酮提取物中丹参酮ⅡA含量为8.7%。丹参总分酸提取物收率1.2%,紫外分光光度法测定丹参总酚酸含量为86%,高效液相色谱方法丹酚酸B含量为49%。丹参素含量为23%。
实施例2丹参中丹参酮提取物和总酚酸提取物制备。
取丹参饮片200kg,加入85%乙醇溶液1600L,75℃下温浸2次,每次1小时,收集提取液,回收乙醇后浓缩、干燥,得含丹参酮ⅡA的丹参酮提取物;药渣加水2000L,75℃下温浸2次,每次1小时,收集提取液合并,放冷,直接经大孔树脂D-101(340L)上柱,用水洗至流出液无颜色后,使用30%乙醇溶液(550L)以1.2 BV/h的流速洗脱,收集洗脱液,挥尽乙醇后进行喷雾干燥,得到含丹酚酸B的丹参总酚酸提取物。
高效液相色谱法测定丹参酮提取物中丹参酮ⅡA含量为9.6%。丹参总分酸提取物收率3.3%,紫外分光光度法测定丹参总酚酸含量为69%,高效液相色谱方法丹酚酸B含量为52%。丹参素含量为14%。
实施例3 丹参中丹参酮提取物和总酚酸提取物制备。
取丹参饮片500kg,加入90%乙醇溶液4500L,75℃下温浸2次,每次1.5小时,收集提取液合并,回收乙醇后浓缩、干燥,得含丹参酮ⅡA的丹参酮提取物;药渣加水3000L,75℃下温浸2次,每次1小时,收集提取液合并,适当浓缩后放冷,经大孔树脂D-101(800L)上柱,用水洗至流出液无颜色后,使用40%乙醇溶液(1000L)以1.2 BV/h的流速洗脱,收集洗脱液,挥尽乙醇后进行微波干燥,得到含丹酚酸B的丹参总酚酸提取物。
高效液相色谱法测定丹参酮提取物中丹参酮ⅡA含量为10.8%。丹参总分酸提取物收率2.8%,紫外分光光度法测定丹参总酚酸含量为75%,高效液相色谱方法丹酚酸B含量为63%。丹参素含量为8.1%。
实施例4 丹参软胶囊的制备。
取实施例1或实施例2或实施例3中得到丹参酮提取物和丹参总酚酸提取物合并,按照提取物:PEG400:甘油=50:425:25的比例,加入PEG400和甘油混合,置胶体磨中混匀后得药液备用。取明胶、甘油、水(1:0.3:1.1),加入占明胶比例0.5%的二氧化钛作为遮光剂,置于溶胶罐中加热溶解,脱气后得囊皮溶液,取上述药液和囊皮溶液,用软胶囊生产设备压制成软胶囊,干燥、抛光后即得。
实施例5 丹参软胶囊的制备。
取实施例1或实施例2或实施例3中得到丹参酮提取物和丹参总酚酸提取物合并,按照提取物:PEG400:甘油=100:375:25的比例,加入PEG400和甘油混合,置胶体磨中混匀后得药液备用。取明胶、甘油、水(1:0.3:1.1),加入占明胶比例0.5%的二氧化钛作为遮光剂,以及占明胶比例0.01%的焦糖色天然色素,置于溶胶罐中加热溶解,脱气后得囊皮溶液,取上述药液和囊皮溶液,用软胶囊生产设备压制成软胶囊,干燥、抛光后即得。
Claims (10)
1.一种丹参软胶囊的制备方法,包括如下步骤:
(1)将丹参药材放入提取罐中,加乙醇溶液温浸,收集提取液,回收乙醇后浓缩、干燥,得含丹参脂溶性成分的丹参酮提取物;
(2)药渣加水温浸,收集提取液,放冷,备用;
(3)步骤(2)所得的提取液直接经大孔树脂上柱、洗脱、收集洗脱液浓缩、干燥,得含丹参水溶性成分的丹参总酚酸提取物,其中丹酚酸B的含量在45%~60%之间,丹参素含量在10%~20%之间;
(4)将步骤(1)、(3)所得的提取物加入适当辅料预混合,用胶体磨进一步混匀,得药液备用;
(5)取明胶、甘油、水,加入适当辅料,置容器中加热溶解,混匀,脱气后得囊皮溶液;
(6)取上述药液和囊皮溶液,用软胶囊生产设备压制成型,干燥、抛光后即得。
2.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(1)中,使用乙醇溶液的浓度为80%~95%,优选85%~90%,使用量为药材用量的5~15倍,优选8~10倍,温浸的次数为1~3次,优选2次。
3.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(2)中,使用水的量为药材用量的5~15倍,优选6~8倍,温浸的次数为1~3次,优选2次。
4.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(1)和(2)中,温浸的温度为65℃~90℃,优选75℃,温浸的时间为0.5~2.5小时,优选1~1.5小时。
5.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中大孔树脂选用HPD-100、HPD-400、HPD-600、D-001、D-101,AB-8,优选D-101。
6.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中大孔树脂的使用量按照丹参药材(Kg)∶大孔树脂(L)为1∶1.0~1∶2.0为宜,优选1∶1.5~1∶1.7。
7.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中所用洗脱液为有机醇,优选乙醇,浓度为20%~50%,优选30%~40%,洗脱液体积为1-3BV,优选1.5-2BV;流速为0.5树脂床体积/小时(BV/h)~2树脂床体积/小时(BV/h),优选0.8~1.2树脂床体积/小时(BV/h)。
8.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(3)中所述干燥为常规方法干燥,优选喷雾干燥。
9.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(4)中所述适当辅料为适当的稀释剂、助悬剂、稳定剂、防腐剂等,其中提取物与辅料的比例为40~200∶100~500∶20~50。
10.根据权利要求1所述丹参软胶囊的制备方法步骤(5)中所述明胶、甘油、水的比例为0.9~1.2∶0.3~0.5∶0.9~1.5,所述适当辅料包括遮光剂、食用色素等。
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