CN105582132A - 一种甘草配方颗粒的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药领域,公开了一种甘草配方颗粒的制备方法,将甘草洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取2-3次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.05-1.25的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.20-1.30的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒,并公开以甘草配方颗粒做成复方,还公开了其在制备抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖药物中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域,具体涉及一种甘草配方颗粒的制备方法及应用。
背景技术
中药配方颗粒是由单味中药饮片经提取浓缩制成的、供中医临床配方用的颗粒。国内以前称单味中药浓缩颗粒剂,商品名及民间称呼还有免煎中药饮片、新饮片、精制饮片、饮料型饮片、科学中药等。是以传统中药饮片为原料,经过提取、分离、浓缩、干燥、制粒、包装等生产工艺,加工制成的一种统一规格、统一剂量、统一质量标准的新型配方用药。中药作为我国医药行业“十二五”规划的重点发展产业之一,新医改和国家发布的《意见》都表明了我国对中药行业的发展导向和相应的扶持政策,未来各方资金都将会加快向中药行业倾斜,以促进中药产业的发展。配方颗粒销售规模小、市场潜力大、主要生产企业均着手产能扩增,未来几年中药配方颗粒仍将保持30%左右增速,到2016年市场整体规模有望突破110亿元,至2018年将快速增长到188亿元。但目前提取方法落后,迄今为止,人们正在寻找一种有效的配方颗粒提取方法。
发明内容
发明目的:为了解决上述问题,本发明的目的在于提供一种甘草配方颗粒的制备方法及应用。
技术方案:本发明的目的是通过如下的方案实现的:
一种甘草配方颗粒的制备方法,步骤如下:将甘草洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取2-3次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.05-1.25的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.20-1.30的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒。
所述的连续逆流超声提取机为单级式6节管,其中1-2节为浸泡提取管,3-6节为超声提取管,加入为原药粉8倍量的50%乙醇水溶液在超声波功率为40-80KHz的室温条件下每次超声逆流提取30-45min。
所述的超声逆流提取后的合并滤液是在真空度0.85~0.95Mpa,60℃减压浓缩成1.05-1.25的清膏。
一种含有甘草的植物组合物,它所含的活性成分由下列重量份原料配比制备而成:甘草配方颗粒2份、秋海棠20份、木棉根18份、响叶杨15份、石松子25份,甘草配方颗粒为上述方法制备而得。
所述含有甘草的植物组合物,制备方法步骤为:取上述除甘草配方颗粒外其他药材合并,加水煎煮两次,合并煎液,浓缩至65℃时相对密度为1.10-1.20,加入乙醇,搅拌,使含醇量按体积百分比计算达65-85%,静置,过滤,滤液减压浓缩至65℃时相对密度为1.20-1.30并回收乙醇,将浓缩液喷雾干燥,所得颗粒粉碎成干浸膏粉,加入甘草配方颗粒和辅料,制成所需制剂。
所述含有甘草的植物组合物,制备方法中煎煮条件为:第一次加水量为药材重量的8-12倍量,煎煮1-2h,第二次加水量为药材重量的6-10倍量,煎煮1-2h。
所述含有甘草的植物组合物,制备方法中喷雾干燥条件为:进风温度为90-110℃,出风温度为60-90℃,物料温度为60-90℃,雾化压力为0.2-0.5兆帕,喷雾速度为1-10ml/s。
所述含有甘草的植物组合物在制备抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖药物中的应用。
上述秋海棠为秋海棠科植物秋海棠的花朵。木棉根为木棉科植物木棉的根或根皮。响叶杨为杨柳科植物响叶杨的根皮、树皮或叶。石松子为石松科植物石松的孢子。其余为药典品种。
有益效果:现有技术中,甘草配方颗粒的制备方法一般是水提,喷雾干燥,杂质多,服用量大,本发明提取的甘草配方颗粒有效成分含量高;另外含有甘草的植物组合物可以抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖,减少鼠神经胶质瘤C6细胞的生长数目,该作用呈剂量依赖性。
具体实施方式
以下通过实施例形式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明,但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例,凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1:取甘草1kg洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取2次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,真空度0.85Mpa,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.25的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.20的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒提取物。连续逆流超声提取机为单级式6节管,其中1-2节为浸泡提取管,3-6节为超声提取管,加入为原药粉8倍量的50%乙醇水溶液在超声波功率为40KHz的室温条件下每次超声逆流提取45min。
实施例2:取甘草1kg洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取3次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,真空度0.95Mpa,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.05的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.30的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒提取物。所述的连续逆流超声提取机为单级式6节管,其中1-2节为浸泡提取管,3-6节为超声提取管,加入为原药粉8倍量的50%乙醇水溶液在超声波功率为80KHz的室温条件下每次超声逆流提取30min。
实施例3:取甘草1.3kg洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取2-3次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,真空度0.9Mpa,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.10的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.25的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒提取物。所述的连续逆流超声提取机为单级式6节管,其中1-2节为浸泡提取管,3-6节为超声提取管,加入为原药粉8倍量的50%乙醇水溶液在超声波功率为60KHz的室温条件下每次超声逆流提取40min。
实施例4:取秋海棠20g、木棉根18g、响叶杨15g、石松子25g药材混合,加水煎煮两次,第一次加水为药材重量的8倍量,煎煮1.5h,第二次加水为药材重量的6倍量,煎煮1h,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.10(65℃),加适量乙醇使含醇量(体积分数)达65%,搅拌,静置24小时,滤过,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.10(65℃)的浸膏,经喷雾干燥(条件为进风温度为100℃,出风温度为80℃,物料温度为70℃,雾化压力为0.2兆帕,喷雾速度为5ml/s。),粉碎成干浸膏粉,再加入上述实施例1制备的甘草配方颗粒2g、糊精50g,用适量80%乙醇润湿,制软材,过14目筛制粒,70℃干燥,60目整粒,得颗粒剂。
实施例5:取秋海棠20g、木棉根18g、响叶杨15g、石松子25g药材混合,加水煎煮两次,第次加水为药材重量的10倍量,煎煮2h,第二次加水为药材重量的8倍量,煎煮1h,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15(65℃),加适量乙醇使含醇量(体积分数)达75%,搅拌,静置24小时,滤过,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.25(65℃)的浸膏,经喷雾干燥(条件为进风温度为120℃,出风温度为90℃,物料温度为80℃,雾化压力为0.3兆帕,喷雾速度为7.5/s。),粉碎成干浸膏粉,再加入上述实施例1制备的甘草配方颗粒2g、淀粉50g,混合均匀,用适量80%乙醇润湿,制软材,过30目筛制粒,于70~80℃干燥,用60目筛整粒,压片,包脂衣,分装,外包装,送检合格,得成品。
实施例6:取秋海棠20g、木棉根18g、响叶杨15g、石松子25g药材混合,加水煎煮两次,第一次加水为药材重量的10倍量,煎煮1.5h,第二次加水为药材重量的8倍量,煎煮1.5h,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15(65℃),加适量乙醇使含醇量(体积分数)达75%,搅拌,静置24小时,滤过,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.25(65℃)的浸膏,经喷雾干燥(条件为进风温度为120℃,出风温度为90℃,物料温度为90℃,雾化压力为0.4兆帕,喷雾速度为7.5/s。),粉碎成干浸膏粉,过6号筛,加入上述实施例1制备的甘草配方颗粒2g,再装入1号胶囊即可得成品。
实施例7:含甘草的植物组合物抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1实验用细胞株
鼠神经胶质瘤C6细胞,南京医科大学实验动物中心实验室细胞库,DMEM+10%FBS常规培养。
1.2实验药物
研究药物:本发明含甘草的植物组合物:按实施例1方法制备。
药液储液:称取100mg含甘草的植物组合物,溶于5ml无水乙醇中,0.2μm滤器过滤,500μldoff管分装,-20℃存储,同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3实验试剂
DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419);NaHCO3(上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387);Trypsin(AMRESCO公司批号:2010/04);EDTA(AMRESCO公司批号:2009/10);PenicillinGSodiumSalt(AMRESCO公司批号:2010242);StreptomycinSulfate(AMRESCO公司批号:2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号:080310182);MTT(Biosharp批号:0793);PBS(实验室自配);
1.4实验器材
莱卡倒置显微镜(德国Leica型号:DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号:SPECTRAMAX190);CO2培养箱(FORMA型号:3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号:SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号:S/N020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号:P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号:BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANYO公司型号:MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号:DHG9123A);冰箱(西门子公司型号:KG18V21TI);液氮罐(CBS型号:2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号:KA-1000);0.2μm滤器(MILLIPORE型号:SLGP033RB);10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司);细胞计数板;离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法
1)鼠神经胶质瘤C6细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养(10cm培养皿),当细胞生长至对数期时,收集细胞,弃去培养液,PBS轻洗3遍,加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA,37℃消化2min后,向其中加入5ml完全培养基中和反应,吹打细胞后将其转入离心管中,1000rpm离心5min,调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2)将细胞种入96孔培养板中,每孔加入细胞悬液180μl,培养板放入细胞培养箱中(37℃,5%CO2)常规培养。
3)根据细胞生长情况,一般长至50%-70%,加入含甘草的植物组合物溶液,继续培养24h。
4)24h后加入20μlMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。
5)4h后扣板法倒去上清,用吸水纸轻轻拍干,每孔加入200μl二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
6)同时设置本底(不加细胞,只加培养液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),每组设定6个复孔。
7)结果以药物对细胞的抑制率表示:
细胞增值抑制率(%)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3统计处理
采用MicrosoftExcel2003软件中的相关分析和Studentt检验,数据以mean±S.D.表示。
4实验结果
MTT法实验后统计结果显示,与对照组比较,当剂量达到5mg/ml时,对鼠神经胶质瘤C6细胞增殖抑制有差异(P<0.05),剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P<0.01),当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(P<0.001)。
表1含甘草的植物组合物对鼠神经胶质瘤C6细胞增殖抑制影响研究
注:与对照组比较,*P<0.01;**P<0.001
5实验结论
含甘草的植物组合物可以抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖,减少鼠神经胶质瘤C6细胞的细胞生长数目,该作用呈剂量依赖性。
Claims (8)
1.一种甘草配方颗粒的制备方法,其特征是步骤如下:将甘草洗净、烘干,并粉碎,放入连续逆流超声提取机中,加入乙醇水溶液后超声逆流提取,过滤提取液,收集滤液和滤渣,滤渣再重复超声逆流提取2-3次,且每次提取后再过滤,合并滤液,减压浓缩,回收乙醇,至60℃时相对密度为1.05-1.25的清膏;醇沉24h,用微孔滤膜过滤,滤液减压回收乙醇,并浓缩成60℃时相对密度为1.20-1.30的清膏,减压真空干燥即得甘草配方颗粒。
2.如权利要求1所述的方法,其特征是所述的连续逆流超声提取机为单级式6节管,其中1-2节为浸泡提取管,3-6节为超声提取管,加入为原药粉8倍量的50%乙醇水溶液在超声波功率为40-80KHz的室温条件下每次超声逆流提取30-45min。
3.如权利要求1所述的方法,其特征是所述超声逆流提取后的合并滤液是在真空度0.85~0.95Mpa,60℃减压浓缩成1.05-1.25的清膏。
4.一种含有甘草的植物组合物,其特征在于,它所含的活性成分由下列重量份原料配比制备而成:甘草配方颗粒2份、秋海棠20份、木棉根18份、响叶杨15份、石松子25份,甘草配方颗粒为上述权利要求1的方法制备而得。
5.如权利要求4所述含有甘草的植物组合物,其特征在于,制备方法步骤为:取上述除甘草配方颗粒外其他药材合并,加水煎煮两次,合并煎液,浓缩至65℃时相对密度为1.10-1.20,加入乙醇,搅拌,使含醇量按体积百分比计算达65-85%,静置,过滤,滤液减压浓缩至65℃时相对密度为1.20-1.30并回收乙醇,将浓缩液喷雾干燥,所得颗粒粉碎成干浸膏粉,加入甘草配方颗粒和辅料,制成所需制剂。
6.如权利要求5所述含有甘草的植物组合物,其特征在于,制备方法中煎煮条件为:第一次加水量为药材重量的8-12倍量,煎煮1-2h,第二次加水量为药材重量的6-10倍量,煎煮1-2h。
7.如权利要求5所述含有甘草的植物组合物,其特征在于,制备方法中喷雾干燥条件为:进风温度为90-110℃,出风温度为60-90℃,物料温度为60-90℃,雾化压力为0.2-0.5兆帕,喷雾速度为1-10ml/s。
8.如权利要求4所述含有甘草的植物组合物在抑制鼠神经胶质瘤C6细胞增殖药物中的应用。
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