CN104186330A - 一种白花灯笼的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种白花灯笼的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽、生长的调控。本发明白花灯笼组培方法操作简便，成活率高，周期短，可以短期内获得大量生长速度快的白花灯笼幼苗，为其药用资源的开发奠定基础。
Description
技术领域
本发明涉及组培条件下白花灯笼的培养，属于植物技术领域。
背景技术
白花灯笼，Clerodendrum fortunatum，又名：灯笼草，鬼灯笼，苦灯笼，是马鞭草科大青属植物。灌木，产中国江西南部和华南部分地区。喜阳光，较耐干旱和瘠薄土壤。生于海拔1000米以下的丘陵、山坡、路边、村旁和旷野，主要产于江西南部、福建、广东、广西地区，其它各地温室亦有栽培。药用部位：以茎及叶、根或根皮入药，含有赪桐烯醇，赪桐二醇烯酮，赪桐酮，赪桐甾醇，甾醇，蔗糖，乳糖，麦芽糖，半乳糖，果糖等。茎及叶主治：肺痨咳嗽，骨蒸潮热，咽喉肿痛，跌打损伤，疖肿疔疮。根主治：感冒发热，咳嗽，咽痛，衄血，赤痢，疮疥，瘰疬，跌打肿痛。繁殖技术主要通过播种繁殖，具有一定的局限性，利用组培技术可以有效的提高白花灯笼的繁殖率，且简单易操作，但目前国内外尚无研究。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供白花灯笼的快速繁殖方法，并采用赤霉素对其生长进行调控，繁殖率高，生长速度快，操作简单，可以获得大量白花灯笼幼苗。
为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：
取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃，生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.2mg/L+ABA2mg/L+KT1.5mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h，生根后的白花灯笼试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，喷施30mg/LGA3，培养20天后，统计成活率。
采用本发明制备的白花灯笼生长速度快，成活率达93%，操作简单，能耗小。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃，生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.1mg/L+ABA2mg/L+KT0.5mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h，生根后的白花灯笼试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，喷施20mg/LGA3，培养20天后，成活率达89%。
实施例2
取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃，生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.3mg/L+ABA2mg/L+KT1.5mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h，生根后的白花灯笼试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，喷施40mg/LGA3，培养20天后，成活率达91%。
实施例3
取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃，生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.2mg/L+ABA2mg/L+KT1mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h，生根后的白花灯笼试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，喷施30mg/LGA3，培养20天后，成活率达92%。
实施例4
取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃，生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.3mg/L+ABA2mg/L+KT1mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h，生根后的白花灯笼试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，喷施30mg/LGA3，培养20天后，成活率达90%。
Claims (6)
1. 一种白花灯笼的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽、生长的调控，其主要步骤如下：
（1）取白花灯笼的带芽茎段，对其进行消毒处理；
（2）将步骤（1）灭菌处理过的白花灯笼接入改良DKW+1g/L活性炭培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx，温度25℃；
（3）取步骤（2）生长出来的白花灯笼腋芽，放入增殖培养基改良DKW+IAA0.1-0.3mg/L+ABA2mg/L+KT0.5-1.5mg/L+6mg/LAgNO3，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照2000lx；
（4）取步骤（3）增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L，光照4000lx，温度25℃，光期15h，暗期9h；
（5）取步骤（4）生根后的白花灯笼试管苗移栽到大田进行炼苗培养，喷施20-40mg/LGA3。
2. 按照权利要求1所述的一种白花灯笼的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述白花灯笼外植体的消毒处理为：取白花灯笼带腋芽的茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理12min，无菌水冲洗5-7遍。
3. 按照权利要求1所述的一种白花灯笼的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2）无菌苗生长培养中附加了活性炭，可以防止褐化现象。
4. 按照权利要求1所述的一种白花灯笼的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3）中的增殖培养基中附加了ABA和6mg/LAgNO3，ABA可以促进丛生芽的分化，AgNO3可以防止玻璃化现象，此两种物质需待灭菌后的培养基冷却到60℃以下进行过滤灭菌。
5. 按照权利要求1所述的一种白花灯笼的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中加入了GA3，可以促进幼苗的粗壮和生长，且采用叶面喷施。
6. 按照权利要求1所述的一种白花灯笼的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中白花灯笼的炼苗培养方法为将试管苗从培养瓶中取出，洗去根部的培养基，甲基托布津浸根，栽植于椰子壳：珍珠岩：腐殖土=2：1：1的基质中培养，培养20天后，统计成活率。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105918132A (zh) * | 2016-05-26 | 2016-09-07 | 南京林业大学 | 一种海州常山快速繁育方法 |
| CN109548655A (zh) * | 2019-01-07 | 2019-04-02 | 惠州市林业科学研究所(广东省林业区域性试验(惠州)中心) | 苦郎树的组织培养方法 |
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2014
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN109548655A (zh) * | 2019-01-07 | 2019-04-02 | 惠州市林业科学研究所(广东省林业区域性试验(惠州)中心) | 苦郎树的组织培养方法 |
| CN109548655B (zh) * | 2019-01-07 | 2020-11-24 | 惠州市林业科学研究所(广东省林业区域性试验(惠州)中心) | 苦郎树的组织培养方法 |
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