CN104160966A - 一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法 - Google Patents

一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法 Download PDF

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mongolian
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杨存
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Abstract

本发明涉及一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽。采用本发明的蒙古栎再生率高，操作简单且生长周期短，可以获得大量的蒙古栎幼苗。

Description

一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及蒙古栎组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。
背景技术
蒙古栎，Quecusmongolica，为壳斗科、栎属，落叶乔木，国家二级珍贵树种，又名：柞木，柞栎，蒙栎，柞树，是中国东北林区中主要的次生林树种。蒙古栎主要分布在中国东北、华北、西北各地，华中地区亦少量分布。在俄罗斯、日本、蒙古及朝鲜半岛也有分布。喜光，在侧方庇荫条件下，高生长较快。适应性强，耐火，耐干旱瘠薄，耐寒性强，能耐－50℃低温。喜温凉气候，喜中性至酸性土壤，通常生于向阳干燥山坡。深根性，主根发达，不耐移植。 其树皮中药名为柞树皮，春、秋季采，刮去外层粗皮，晒干或煅灰。清热利湿，解毒消肿。主治痢疾；肠炎，小儿消化不良，气管炎，黄疸，痔疮等症。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种蒙古栎的快速繁殖方法，由该方法所制备的蒙古栎再生分化率高，遗传稳定性好，可以短期内获得大量的蒙古栎幼苗。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照800lx，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照2000lx，分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L，试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭：锯末=1：1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌。
采用本发明制备的蒙古栎成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照800lx，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照2000lx，分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1mg/L+0.1mg/LIBA+EMT1.0mg/L，试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭：锯末=1：1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率90%。
实施例2
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照800lx，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照2000lx，分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMT2.0mg/L，试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭：锯末=1：1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率88%。
实施例3
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照800lx，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照2000lx，分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMT1.0mg/L，试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭：锯末=1：1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率87%。

Claims (5)

1. 一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下：
（1）取蒙古栎的腋芽，对其进行灭菌处理；
（2）将步骤（1）灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照800lx；
（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照2000lx；
（4）取步骤（3）分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L；
（5）取步骤（4）生根后的蒙古栎试管苗进行炼苗培养。
2. 按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述蒙古栎无菌腋芽的获得为，取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍。
3. 按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2）腋芽诱导过程中附加了柠檬酸，可以抗氧化，防止培养过程中褐化现象的产生。
4. 按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）中的生根培养基中附加了EMT，可以促进蒙古栎的壮苗培养。
5. 按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中蒙古栎的炼苗培养方法为试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭：锯末=1：1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105993953A (zh) * 2016-05-27 2016-10-12 贵州德江易盛农业科技发展有限公司 一种罗汉果外植体表面灭菌技术
CN106134802A (zh) * 2016-06-29 2016-11-23 黑龙江省带岭林业科学研究所 蒙古栎裸根苗嫁接方法
CN106342559A (zh) * 2016-09-29 2017-01-25 黑龙江省带岭林业科学研究所 一种缩短蒙古栎无性系嫁接种子园建园时间的方法
CN106359097A (zh) * 2016-09-13 2017-02-01 辽宁省蚕业科学研究所 一种抑制多年生蒙古栎外植体褐化的方法
CN110178730A (zh) * 2019-06-17 2019-08-30 中国林业科学研究院林业研究所 一种栓皮栎愈伤组织及不定芽诱导的方法

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