CN104221873A - 一种直立百部组织培养的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明研究了一种直立百部组织培养的快速繁殖方法，包括直立百部无菌带芽茎段的获得、腋芽的诱导、丛生芽的继代、生根诱导等步骤，本发明采用组织培养方法对其进行组织培养，遗传稳定性好，生长周期短，可以获得大量的直立百部幼苗。
Description
技术领域
本发明涉及直立百部组织培养的快繁方法，属于植物栽培技术领域。
背景技术
直立百部，Stemonasessilifolia，又称药虱药、一窝虎，百部科，直立百部是多年生草本植物，半灌木，生长于山坡灌丛或竹林下。主产安徽、江苏、湖北、浙江、山东。宜用于园林绿化，作观赏地被植物，或在花境中配植。块根在春、秋季采挖，除去须根，洗净，置沸水中略烫或蒸至无白心，取出，晒干，可供药用。喜温暖湿润气候，以土层深厚、肥沃的砂质壤土或富含腐殖质的壤土为佳。原产我国浙江、江苏、安徽、山东、河南诸省山区。化学成分：含直立百部碱、霍多林碱、对叶百部碱和原百部碱等。功能主治：润肺下气止咳，杀虫。用于新久咳嗽、肺劳咳嗽、百日咳；外用于头虱、体虱、蜕虫病、阴痒症，目前尚未见人工栽培的研究报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种直立百部组织培养的快速繁殖方法，本发明采用组织培养方法对其进行组织培养，遗传稳定性好，生长周期短，可以获得大量的直立百部幼苗。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：
取直立百步幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在洗涤剂中浸泡5min，流水冲洗1h，超净工作台上75%酒精处理40s，10%双氧水处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的直立百部带芽茎段，接入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.82，光照强度2000lx，光期12h/d，温度25℃，诱导出来的腋芽放入GD+ZT0.1-0.25mg/L+NAA0.001-0.002mg/L+6-BA0.1-0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖45g/L，琼脂7g/L，pH5.82，光照3500lx，温度25℃，将继代后的直立百部丛生芽放入含有细沙的培养基中保持湿度90%左右，适当遮阴，保持通风，增加光照，1个月后统计生根率。
采用本发明制备的直立百步生根率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取直立百步幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在洗涤剂中浸泡5min，流水冲洗1h，超净工作台上75%酒精处理40s，10%双氧水处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的直立百部带芽茎段，接入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.82，光照强度2000lx，光期12h/d，温度25℃，诱导出来的腋芽放入GD+ZT0.1mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.1mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖45g/L，琼脂7g/L，pH5.82，光照3500lx，温度25℃，将继代后的直立百部丛生芽放入含有细沙的培养基中保持湿度90%左右，适当遮阴，保持通风，增加光照，1个月后统计生根率，生根率91%。
实施例2
取直立百步幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在洗涤剂中浸泡5min，流水冲洗1h，超净工作台上75%酒精处理40s，10%双氧水处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的直立百部带芽茎段，接入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.82，光照强度2000lx，光期12h/d，温度25℃，诱导出来的腋芽放入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.002mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖45g/L，琼脂7g/L，pH5.82，光照3500lx，温度25℃，将继代后的直立百部丛生芽放入含有细沙的培养基中保持湿度90%左右，适当遮阴，保持通风，增加光照，1个月后统计生根率，生根率90%。
实施例3
取直立百步幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在洗涤剂中浸泡5min，流水冲洗1h，超净工作台上75%酒精处理40s，10%双氧水处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的直立百部带芽茎段，接入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.82，光照强度2000lx，光期12h/d，温度25℃，诱导出来的腋芽放入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖45g/L，琼脂7g/L，pH5.82，光照3500lx，温度25℃，将继代后的直立百部丛生芽放入含有细沙的培养基中保持湿度90%左右，适当遮阴，保持通风，增加光照，1个月后统计生根率，生根率93%。
Claims (3)
1. 一种直立百部组织培养的快速繁殖方法，包括直立百部无菌带芽茎段的获得、腋芽的诱导、丛生芽的继代、生根诱导，其主要步骤如下：
（1）取直立百部的带芽茎段，对其进行消毒处理；
（2）取步骤（1）消毒处理过的直立百部带芽茎段，接入GD+ZT0.25mg/L+NAA0.001mg/L+6-BA0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行腋芽的诱导，pH5.82，光照强度2000lx，光期12h/d，温度25℃；
（3）取步骤（2）诱导出来的腋芽放入GD+ZT0.1-0.25mg/L+NAA0.001-0.002mg/L+6-BA0.1-0.25mg/L+0.7%琼脂+45g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的继代培养，附加蔗糖45g/L，琼脂7g/L，pH5.82，光照3500lx，温度25℃；
（4）取步骤（3）继代后的丛生芽进行生根诱导。
2. 按照权利要求1所述的一种直立百部组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述直立百部的获得为，取直立百步幼嫩的枝芽，去掉多余叶片，在洗涤剂中浸泡5min，流水冲洗1h，超净工作台上75%酒精处理40s，10%双氧水处理10min，无菌水冲洗5次。
3. 按照权利要求1所述的一种直立百部组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）中直立百部生根诱导的方法为将继代后的直立百部丛生芽放入含有细沙的培养基中保持湿度90%左右，适当遮阴，保持通风，增加光照，1周后统计生根率。
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Cited By (4)
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| CN106577291A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-04-26 | 广西中医药大学 | 直立百部愈伤组织高效诱导成苗的方法 |
| CN106613970A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-10 | 浙江大学 | 黄精叶钩吻的组培快速繁殖方法 |
| CN109924089A (zh) * | 2019-03-28 | 2019-06-25 | 四川大学 | 一种百部种苗产业化繁育方法 |
| CN115735771A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-03-07 | 上海世泽生物科技有限公司 | 一种百部高效离体繁殖方法 |
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