CN104273038A - 一种黄山栾树的组培方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种黄山栾树的组培方法，包括如下步骤，(1)黄山栾树叶提取液的置备；(2)初代诱导培养：将黄山栾树茎段外植体接种于初代诱导培养基上进行培养，初代诱导培养基中添加有黄山栾树叶提取液；(3)继代增殖培养：将初代诱导培养得到的黄山栾树无菌苗的茎段或茎尖无菌接种于继代增殖培养基上进行培养，继代增殖培养基中添加有黄山栾树叶提取液；(4)组培苗生根：将增殖培养获得的黄山栾树无菌丛生苗切成单株接种于生根培养基上，生根培养基中添加有黄山栾树叶提取液；(5)试管苗的驯化和移栽。采用本方案可缩短周期时长15％，节约成本20％，适用于工厂化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种黄山栾树的组培方法，属于生物技术领域。
背景技术
黄山栾树(Koelreuteria integrifolia Merr.)为无患子科栾树属落叶乔木，其树形端正，具有春观红叶、夏看黄花、秋赏“灯笼”之优点，加之生长迅速和抗烟尘等特点，现已成为比较理想的绿化、美化和水土保持林树种，并迅速发展成为长江流域替代杨树等一般树种的风景林树种，是我国城市绿化十大落叶树种之一。
黄山栾树的繁殖可以用播种、分蘖和扦插等方法进行，但播种法容易出现不发芽或发芽率低的问题，分蘖法的繁殖系数低，扦插育苗则容易受季节影响。通过黄山栾树组织培养，不仅可以扩大其繁殖系数，实现规模化繁殖，而且可以在保存其原有优良性状的基础上，实现黄山栾树种苗的快速繁殖和壮苗生产。
植物组培工厂化育苗中，如何减少培养基费用尤其植物生长调节物质费用通常是降低植物组培苗成本的关键，如果能通过培养基改造，既降低培养基成本，又不影响试管苗的增殖和生长，则可以显著提高工厂化育苗的经济效益。本发明通过在黄山栾树培养基中添加黄山栾树叶提取液，由于提取液中具有促进黄山栾树组培苗增殖、生长和生根的有效化学成份，减少了基本培养基用量和植物生长调节物质费用，降低了黄山栾树组培苗生产成本，提高了经济效益。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种黄山栾树的组培方法，以建立一个低廉高效的黄山栾树组培快繁技术体系。
本发明解决所述技术问题的方案是：一种黄山栾树的组培方法，包括如下步骤，
(1)黄山栾树叶提取液的置备
将新鲜黄山栾树叶切割成小块后在蒸馏水中煮沸，冷却、过滤后配成质量浓度为10％的提取液；
(2)初代诱导培养
初代诱导培养基为3/4WPM+6-BA 0.5～1.0mg/L+NAA 0.05～0.08mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
从健壮黄山栾树植株上获取黄山栾树茎段外植体，外植体经常规消毒后接种于初代诱导培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(3)继代增殖培养
继代增殖培养基为：3/4WPM+6-BA 0.3～0.8mg/L+NAA 0.03～0.05mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
将初代诱导培养得到的黄山栾树无菌苗的茎段或茎尖无菌接种于继代增殖培养基上进行培养，培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(4)组培苗生根
生根培养基为：2/5WPM+IBA 0.1～0.3mg/L+1～2％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，1～2％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
将增殖培养获得的黄山栾树无菌丛生苗切成单株接种于生根培养基上，培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(5)试管苗的驯化和移栽
将黄山栾树生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置5～7d后，去瓶盖炼苗3～5d，然后从瓶内取出黄山栾树幼苗，用水轻轻洗净培养基，将待栽的黄山栾树幼苗根部用0.1％多菌灵处理10s后，将幼苗移栽入穴盘中的栽培基质内，覆膜保湿5～7d，其间每天通风透气10～15min两次，视光照强度适当加盖遮阳网，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，喷施1000倍液的甲基托布津，此后进行正常的栽培管理。
由于本方法在初代培养、继代培养和生根培养的培养基中添加了黄山栾树叶提取液，提取液中的有效化学成份有利于黄山栾树组培苗的增殖、生长和生根，降低了基本培养基和植物生长调节物质用量，该方法与常规黄山栾树组培方法相比，可缩短周期时长15％，节约成本20％，适用于工厂化生产。
具体实施方式
实施例1
一种黄山栾树的组培方法，其特征在于：包括如下步骤，
(1)黄山栾树叶提取液的置备
将50g新鲜黄山栾树叶切割成小于5mm×5mm的小块，放在500ml蒸馏水中煮沸2h，冷却后用玻璃纤维滤纸过滤，最后将滤液定容至500ml，即得到了质量浓度为10％的提取液；
(2)初代诱导培养
初代诱导培养基为3/4WPM+6-BA 0.5～1.0mg/L+NAA 0.05～0.08mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
从健壮黄山栾树植株上获取黄山栾树茎段外植体，外植体经常规消毒后接种于初代诱导培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(3)继代增殖培养
继代增殖培养基为：3/4WPM+6-BA 0.3～0.8mg/L+NAA 0.03～0.05mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
将初代诱导培养得到的黄山栾树无菌苗的茎段或茎尖无菌接种于继代增殖培养基上进行培养，培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(4)组培苗生根
生根培养基为：2/5WPM+IBA 0.1～0.3mg/L+1～2％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，1～2％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
将增殖培养获得的黄山栾树无菌丛生苗切成单株接种于生根培养基上，培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(5)试管苗的驯化和移栽
将黄山栾树生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置5～7d后，去瓶盖炼苗3～5d，然后从瓶内取出黄山栾树幼苗，用水轻轻洗净培养基，将待栽的黄山栾树幼苗根部用0.1％多菌灵处理10s后，将幼苗移栽入穴盘中的栽培基质内，覆膜保湿5～7d，其间每天通风透气10～15min两次，视光照强度适当加盖遮阳网，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，喷施1000倍液的甲基托布津，此后进行正常的栽培管理。
Claims (1)
1.一种黄山栾树的组培方法，其特征在于：包括如下步骤，
(1)黄山栾树叶提取液的置备
将新鲜黄山栾树叶切割成小块后在蒸馏水中煮沸，冷却、过滤后配成质量浓度为10％的提取液；
(2)初代诱导培养
初代诱导培养基为3/4WPM+6-BA 0.5～1.0mg/L+NAA 0.05～0.08mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
从健壮黄山栾树植株上获取黄山栾树茎段外植体，外植体经常规消毒后接种于初代诱导培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；
(3)继代增殖培养
继代增殖培养基为：3/4WPM+6-BA 0.3～0.8mg/L+NAA 0.03～0.05mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是质量浓度，由步骤(1)中质量浓度为10％的提取液稀释而成；
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(5)试管苗的驯化和移栽
将黄山栾树生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置5～7d后，去瓶盖炼苗3～5d，然后从瓶内取出黄山栾树幼苗，用水轻轻洗净培养基，将待栽的黄山栾树幼苗根部用0.1％多菌灵处理10s后，将幼苗移栽入穴盘中的栽培基质内，覆膜保湿5～7d，其间每天通风透气10～15min两次，视光照强度适当加盖遮阳网，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，喷施1000倍液的甲基托布津，此后进行正常的栽培管理。
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