CN104170737A - 一种川桂的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种川桂的快速繁殖方法,包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽。本发明的川桂组培方法操作简便,生长周期短,增殖系数高,成活率高,可以短期内获得大量的川桂幼苗,进行大规模栽种。
Description
技术领域
本发明涉及川桂组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。
背景技术
川桂,Cinnamomum wilsoniiGamble,乔木,樟科,产陕西、四川、湖北、湖南、广西、广东及江西。生于山谷或山坡阳处或沟边,疏林或密林中,海拔(30-300)800-2400米。枝叶和果均含芳香油,油供作食品或皂用香精的调合原料。川桂树皮入药,功效补肾和散寒祛风,治风湿筋骨痛、跌打及腹痛吐泻等症。川桂皮在西方古代被用作香料。中餐里用它给炖肉调味,是五香粉的成份之一。目前关于川桂的种植栽培尚未见报道,组培技术是川桂快速繁殖的有效方法之一,可以有效提高川桂的资源开发和充分利用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种川桂的快速繁殖方法,由该方法所制备得到的川桂组培方法简便,生长周期短,增殖系数高,成活率高,可以短期内获得大量的川桂幼苗,进行大规模栽种。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.1mg/L+2ip1mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.1mg/L+KT0.3mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx;增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物,将试管苗长约5cm的幼苗去掉封口膜,放入培养室照射5d,取出试管苗,高锰酸钾溶液浸根,栽植椰子壳:泥炭土:珍珠岩=2:0.5:0.5基质中,培养30d统计成活率。
采用本发明制备的川桂成活率为94%,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
实施例1
取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.05mg/L+2ip0.5mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.05mg/L+KT0.2mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物,生根后的川桂试管苗进行炼苗培养,川桂成活率为90%。
实施例2
取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.2mg/L+2ip1mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.15mg/L+KT0.4mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物,生根后的川桂试管苗进行炼苗培养,川桂成活率为91%。
实施例3
取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.1mg/L+2ip0.5mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.1mg/L+KT0.2mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物,生根后的川桂试管苗进行炼苗培养,川桂成活率为92%。
实施例4
取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.1mg/L+2ip1mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.15mg/L+KT0.4mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物,生根后的川桂试管苗进行炼苗培养,川桂成活率为93%。
Claims (6)
1. 一种川桂的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、芽的诱导、芽的增殖、生根诱导、野外炼苗移栽,其主要步骤如下:
(1)取川桂带芽茎段,按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理;
(2)将步骤(1)灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.05-0.2mg/L+2ip0.5-1mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx;
(3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.05-0.15mg/L+KT0.2-0.4mg/L+1mg/LABA,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,PH5.8,光照3000lx;
(4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物;
(5)取步骤(4)生根后的川桂试管苗先移栽到温室,然后移栽到大田进行炼苗培养。
2. 按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述川桂无菌芽的获得为,取川桂带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3min,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1.5h,超净工作台上75%酒精处理30s,次氯酸钠处理12min,无菌水冲洗5遍。
3. 按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(2)诱导培养基中附加了卡那霉素15mg/L,能克服苗在培养过程中内生菌的产生。
4. 按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(3)中的增殖培养基中附加了ABA,可以促进川桂芽的增殖和分化。
5. 按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(4)中加入250mg/L酵母提取物,可以促进川桂试管苗的生根和生长。
6. 按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(5)中川桂的炼苗培养方法为将试管苗长约5cm的幼苗去掉封口膜,放入培养室照射5d,取出试管苗,高锰酸钾溶液浸根,栽植椰子壳:泥炭土:珍珠岩=2:0.5:0.5基质中,培养30d统计成活率。
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Cited By (2)
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CN109380123A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-02-26 | 福建农林大学 | 一种珍珠彩桂组培苗继代培养基配方及其应用 |
CN109380124A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-02-26 | 福建农林大学 | 一种珍珠彩桂组培苗瓶内生根培养基配方及应用 |
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2014
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CN109380123A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-02-26 | 福建农林大学 | 一种珍珠彩桂组培苗继代培养基配方及其应用 |
CN109380124A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-02-26 | 福建农林大学 | 一种珍珠彩桂组培苗瓶内生根培养基配方及应用 |
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