CN104170749A - 一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明研究了一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤，本发明方法所制备的一枝黄花生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。
Description
技术领域
本发明涉及一枝黄花脱毒培养的快繁方法，属于植物技术领域。
背景技术
一枝黄花，菊科，别称野黄菊、山边半枝香、酒金花、满山黄、等，是一个多型性的种，叶形与花序式有极大变化。花期8-10月，果期10-12月。生于海拔565-2850米的山坡、阔叶林缘、林下、路旁及草丛之中。原产北美，上世纪30年代中期（1935年）作为观赏植物引入上海、南京等地后逸生为恶性杂草,成为入侵植物。喜光，喜凉爽干燥的环境，耐寒，耐热，耐瘠薄，肥力过大容易倒伏。在各类土壤中均能生长。稍能耐短期积水。对环境适应性强，宜栽种于肥沃疏松富含腐殖质排水良好的砂质土壤中。全草含槲皮苷、异斛皮苷、芸香甙、紫云英苷、山柰酚-3-芸香糖甙、一枝黄花酚甙、2，6-二甲氧基苯甲酸苄酯、当归酸-3，5-二甲氧基-4-乙酰氧基肉桂酯及2-顺、8-顺-母菊酯。咖啡酸、奎尼酸、绿元酸、矢车菊双苷。含少量挥发油及皂苷、烟酸、乙醇酸，根含挥发油。可采用种子、分株等方法繁殖。全草入药，性味辛、苦，微温，功能主治：疏风清热，抗菌消炎。用于风热感冒；头痛；咽喉肿痛；肺热咳嗽；黄疸；泄泻；热淋；痈肿疮疖；毒蛇咬伤，目前主要是自然繁殖，利用组培技术生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种一枝黄花的快速繁殖方法，由该方法所制备的一枝黄花生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：
取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率。
采用本发明制备的一枝黄花分化成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率90%。
实施例2
取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率89%。
实施例3
取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率87%。
Claims (3)
1. 一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：
（1）取一枝黄花幼嫩的茎尖，对其进行消毒处理；
（2）取步骤（1）消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%；
（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃；
（4）取步骤（3）分化出来的丛生芽接入1/3MS培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5g/L，pH5.7，光照16000lx，温度25±2℃；
（5）取步骤（4）生根的试管苗进行炼苗移栽。
2. 按照权利要求1所述的一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述一枝黄花无菌茎尖的获得为，取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm。
3. 按照权利要求1所述的一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中一枝黄花的炼苗培养方法为已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108901850A (zh) * | 2018-07-26 | 2018-11-30 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种金丝皇菊茎尖离体再生的方法 |
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2014
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| CN108901850A (zh) * | 2018-07-26 | 2018-11-30 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种金丝皇菊茎尖离体再生的方法 |
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| CN109874679B (zh) * | 2019-04-23 | 2022-07-15 | 黔南民族师范学院 | 一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法 |
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|---|---|---|---|
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Application publication date: 20141203 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |