CN104304002B - 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法 - Google Patents

一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104304002B
CN104304002B CN201410438646.8A CN201410438646A CN104304002B CN 104304002 B CN104304002 B CN 104304002B CN 201410438646 A CN201410438646 A CN 201410438646A CN 104304002 B CN104304002 B CN 104304002B
Authority
CN
China
Prior art keywords
lonicera confusa
inducing
adventitious bud
culture medium
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410438646.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104304002A (zh
Inventor
谭木秀
师凤华
蒲祖宁
莫乔程
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants
Original Assignee
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants filed Critical Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants
Priority to CN201410438646.8A priority Critical patent/CN104304002B/zh
Publication of CN104304002A publication Critical patent/CN104304002A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104304002B publication Critical patent/CN104304002B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明公开了一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,包括:步骤1)、利用壮苗培养基培养华南忍冬无菌苗,第25‑31天时,摘取叶片,其中,壮苗培养基含0.1‑0.5mg/L的α‑萘乙酸;步骤2)、将摘取的叶片制成0.2‑0.3cm2小块;步骤3)、利用诱导培养基培养0.2‑0.3cm2小块,获取华南忍冬不定芽,其中,诱导培养基含1.5‑2.0mg/L的6‑苄基氨基嘌呤和0.3‑0.5mg/L的呋喃氨基嘌呤。本发明能够在40天内从华南忍冬的叶片中诱导出华南忍冬不定芽,可以快速地培养出华南忍冬苗,满足市场需求。同时,为华南忍冬物种资源的保存和材料的来源提供新的参考途径,为今后更进一步研究和利用该物种提供技术参考。

Description

一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法。
背景技术
[0002]华南忍冬,属多年生半常绿的木质藤本,别名山银花,为华南地区“金银花”中药材的主要品种,是我国大宗常用中药材之一。全株均可入药,供应临床药用,制剂生产,凉茶和保健品生产,同时可作为庭院绿化的观赏植物,市场需求量大。多年的开垦荒山导致华南忍冬野生资源逐渐减少,濒临灭绝,供需缺口很大,需要快速发展人工种植,而快速规模化种植与常规扦插、压条和种子繁殖周期长之间的矛盾日趋严重,因此,对华南忍冬组培快繁技术的研究日益重要。目前,对华南忍冬组织培养研究的报道不多,主要集中在以带腋芽的半木质化的茎段为外植体进行丛生芽诱导方面的研究,关于华南忍冬无菌组培苗叶片诱导芽的研究,国内外均尚未见报道。
发明内容
[0003]本发明设计开发了一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法。本发明能够在40天内从华南忍冬的叶片中诱导出华南忍冬不定芽,利用植物细胞的全能性和植物组织培养技术,可以快速地培养出华南忍冬无菌苗,满足市场需求。同时,本发明也为华南忍冬物种资源的保存和材料的来源提供新的参考途径,为今后更进一步研究和利用该物种提供技术参考。
[0004]本发明提供的技术方案为:
[0005] —种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,包括:
[0006]步骤1)、利用壮苗培养基培养华南忍冬无菌苗,第25-31天时,摘取叶片,其中,壮苗培养基含0.1-0.5mg/L的α-萘乙酸;
[0007]步骤2)、将摘取的叶片制成0.2-0.3cmM、块;
[0008]步骤3)、利用诱导培养基培养0.2-0.3cmM、块,获取华南忍冬不定芽,其中,诱导培养基含I.5-2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤和0.3-0.5mg/L的呋喃氨基嘌呤。
[0009]优选的是,所述的华南忍冬不定芽的诱导方法中,所述步骤I)中壮苗培养基为含
0.lmg/La-萘乙酸的1/2MS培养基;步骤3)中诱导培养基为含2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤和0.5mg/L的呋喃氨基嘌呤的MS培养基。
[0010]优选的是,所述的华南忍冬不定芽的诱导方法中,所述1/2MS培养基是指将MS培养基中的大量元素含量减半,微量元素和琼脂含量不变配制的培养基。
[0011]优选的是,所述的华南忍冬不定芽的诱导方法中,所述步骤3)诱导培养基培养
0.2-0.3cmM、块,培养温度28°c,相对湿度75%,光照时间12小时/天,光照强度3000勒克斯。
[0012]优选的是,所述的华南忍冬不定芽的诱导方法中,所述所制得小块在诱导培养基上培养40-45天,得到华南忍冬不定芽。
[0013]本发明所述的华南忍冬不定芽的诱导方法利用华南忍冬无菌苗的叶片作为外植体诱导愈伤组织,进而促进愈伤组织分化成不定芽,缩短了获得华南忍冬无菌试管苗周期。同时,本发明也为华南忍冬物种资源的保存和药材的来源提供新的参考途径,为更进一步研究和利用该物种提供技术参考。
具体实施方式
[0014]下面对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0015] 实施例一:
[0016]利用含0.lmg/La-萘乙酸的1/2MS培养基培养华南忍冬无菌苗,第31天时,摘取叶片作为外植体,在超净工作台上将叶片剪切成0.25cm2的小块,并在小块中再剪几刀以增加伤口面积,转接至诱导培养基中培养,其中诱导培养基为含2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤和0.5mg/L的呋喃氨基嘌呤的MS培养基,培养条件:培养温度28°C,相对湿度75%,光照时间12小时/天,光照强度3000勒克斯。培养40天后诱导出不定芽,诱导率达42.86%。
[0017] 实施例二:
[0018]利用含0.5mg/La-萘乙酸的1/2MS培养基培养华南忍冬无菌苗,第25天时,摘取叶片作为外植体,在超净工作台上将叶片剪切成0.25cm2的小块,并在小块中再剪几刀以增加伤口面积,转接至诱导培养基中培养,其中诱导培养基为含1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤和
0.3mg/L的呋喃氨基嘌呤的MS培养基,培养条件:培养温度28°C,相对湿度75%,光照时间12小时/天,光照强度3000勒克斯。培养40天后诱导出不定芽,诱导率达40.53 %。
[0019]本发明能够在40天内从华南忍冬的叶片中诱导出华南忍冬不定芽,可以快速地培养出华南忍冬苗,满足市场需求。同时,本发明也为华南忍冬物种资源的保存和材料的来源提供新的参考途径,为今后更进一步研究和利用该物种提供技术参考。
[0020]尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节。

Claims (4)

1.一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,其特征在于,包括: 步骤I)、利用壮苗培养基培养忍冬无菌苗,第25-31天时,摘取叶片,其中,壮苗培养基为含0.1-0.5mg/L的α-萘乙酸的1/2MS培养基; 步骤2)、将摘取的叶片制成0.2-0.3cmM、块; 步骤3)、利用诱导培养基培养0.2-0.3cmM、块,获取华南忍冬不定芽,其中,诱导培养基为含1.5-2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤和0.3-0.5mg/L的呋喃氨基嘌呤的MS培养基。
2.如权利要求1所述的华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,其特征在于,所述1/2MS培养基是指将MS培养基中的大量元素含量减半,微量元素和琼脂含量不变配制的培养基。
3.如权利要求1所述的华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,其特征在于,所述步骤3)诱导培养基培养0.2-0.3cmM、块,培养温度28 V,相对湿度75%,光照时间12小时/天,光照强度3000勒克斯。
4.如权利要求1所述的华南忍冬叶片不定芽的诱导方法,其特征在于,所述所制得小块在诱导培养基上培养40-45天,得到华南忍冬不定芽。
CN201410438646.8A 2014-08-29 2014-08-29 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法 Active CN104304002B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410438646.8A CN104304002B (zh) 2014-08-29 2014-08-29 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410438646.8A CN104304002B (zh) 2014-08-29 2014-08-29 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104304002A CN104304002A (zh) 2015-01-28
CN104304002B true CN104304002B (zh) 2017-01-11

Family

ID=52359443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410438646.8A Active CN104304002B (zh) 2014-08-29 2014-08-29 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104304002B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105454046A (zh) * 2015-12-17 2016-04-06 北华大学 一种早花忍冬的离体快繁方法
CN105409778B (zh) * 2015-12-22 2017-11-10 广西壮族自治区药用植物园 红腺忍冬无菌组培苗叶柄不定芽诱导的方法
CN107347644B (zh) * 2017-08-04 2020-02-07 上海市农业科学院 一种利用大花六道木叶片进行离体再生的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101574055A (zh) * 2008-05-08 2009-11-11 黑龙江省林业科学研究所 蓝靛果忍冬组织培养方法
CN101455180B (zh) * 2009-01-09 2012-01-25 华中科技大学 一种开放式植物组织培养育苗方法
JP5377182B2 (ja) * 2009-09-10 2013-12-25 株式会社東芝 制御装置
CN102577969B (zh) * 2012-03-08 2013-10-02 重庆文理学院 灰毡毛忍冬渝蕾1号组培种苗的繁育方法
CN102577970B (zh) * 2012-03-08 2013-06-05 重庆文理学院 灰毡毛忍冬渝蕾1号种苗的组织培养基

Also Published As

Publication number Publication date
CN104304002A (zh) 2015-01-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103651121B (zh) 一种白及分化、壮苗培养基
CN102369881B (zh) 一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖方法
CN104082138B (zh) 一种通城虎的组织培养快繁方法
CN103651122B (zh) 一种白及原球茎诱导培养基
CN102907323A (zh) 一种白及种子无菌生产微型种茎的方法
CN101461327A (zh) 滇重楼快繁技术和炼苗、种植的方法
CN104304002B (zh) 一种华南忍冬叶片不定芽的诱导方法
CN104041412A (zh) 一种贵州半蒴苣苔的组织培养快速繁殖方法
CN103766128A (zh) 一种山桐子苗无性快繁方法
CN105165617A (zh) 血叶兰种子的组织培养与快速育苗方法
CN102640708A (zh) 一种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法
CN102599064B (zh) 一种以叶原基为外植体的金钱松愈伤组织培养方法
CN103503776A (zh) 一种山豆根组织培养育苗方法
CN105494098A (zh) 一种快速繁殖金铁锁种苗的方法
CN103548695B (zh) 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法
CN105557513A (zh) 一种姜黄组织培养快速繁殖方法
CN104521754B (zh) 高山卵叶韭快速繁殖方法
CN102138527B (zh) 土茯苓组培苗的培养方法
CN106171996B (zh) 一种野生白桦的快速繁殖方法
CN104170733B (zh) 红腺忍冬无菌组培苗叶柄愈伤组织不定根诱导的方法
CN104770297B (zh) 一种以金钱松叶片为外植体的金钱松植株再生方法
CN107155881B (zh) 一种适于多种类型植物快速繁殖的方法
CN104170749A (zh) 一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法
CN105210863A (zh) 一种天麻的组培快繁方法
CN105340749B (zh) 一种澳洲茶油树无菌扦插快繁育苗的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
C06 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C10 Entry into substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant