CN109874679A - 一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法。a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；b.将外植体无菌接种在MS+0.5～2.0mg/L 6‑BA+0.5～1.0mg/L NAA的培养基上获得愈伤组织；c.将步骤b的愈伤组织转接在MS+0.5～2.0mg/L 6‑BA+0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽；d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS+0.5～1.0mg/L 6‑BA+Ac的培养基上促进生根，获得生根苗；e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，苗达8～10CM高，即可移苗种植。本发明具有缩短一枝黄花种苗培养时间、提高增殖系数的特点。
Description
技术领域
本发明涉及农业育苗技术领域，特别是一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法。
背景技术
一枝黄花（学名：Solidago decurrens Lour.），别名：百根草、一朵云、汗马兰、一支黄花、一枝黄花金柴胡、一只黄花、蛇王、野黄菊、钓鱼杆柴胡、满山黄、土柴胡、百条根、金汤匙、疔疮药、金盖顶、黄花仔、红箭杆菜、黄花老虎尿、山金汤匙、铁柴胡、竹叶柴胡、大叶七星剑、一支箭、山厚合、蛇头黄、千根癀、蛇头王、土细辛、金花草、一支轮、一支枪、金锁匙、红柴胡、金柴胡、粘糊菜、金锁钥、老虎尿、六叶七星剑、一枝香、破布叶、朝天一柱香、黄花草，属菊科，一枝黄花属。其为多年生草本，高35-100厘米。茎直立，通常细弱，单生或少数簇生，不分枝或中部以上有分枝。中部茎叶椭圆形，长椭圆形、卵形或宽披针形，长2-5厘米，宽1-1.5厘米，下部楔形渐窄，有具翅的柄，仅中部以上边缘有细齿或全缘；向上叶渐小；下部叶与中部茎叶同形，有长2-4厘米或更长的翅柄。全部叶质地较厚，叶两面、沿脉及叶缘有短柔毛或下面无毛。头状花序较小，长6-8毫米，宽6-9毫米，多数在茎上部排列成紧密或疏松的长6-25厘米的总状花序或伞房圆锥花序，少有排列成复头状花序的。总苞片4-6层，披针形或披狭针形，顶端急尖或渐尖，中内层长5-6毫米。舌状花舌片椭圆形，长6毫米。瘦果长3毫米，无毛，极少有在顶端被稀疏柔毛的。花果期4-11月。这是一个产于我国南方的种。江苏、浙江、安徽、江西、四川、贵州、湖南、湖北、广东、广西、云南及陕西南部、台湾等地广为分布。生阔叶林缘、林下、灌丛中及山坡草地上。海拔565-2850米。也是一个多型性的种，叶形与花序式有极大变化。本种地方名很多，主要别称有蛇头王、见血飞。全草入药，性味辛、苦，微温。疏风解毒、退热行血、消肿止痛。主治毒蛇咬伤、痈、疖等。全草含皂苷，家畜误食中毒引起麻痹及运动障碍。而目前传统的一枝黄花的种苗培育方法存在，培育周期长，且增殖系数小的缺点。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法。本发明具有缩短一枝黄花种苗培养时间、提高增殖系数的特点。
本发明的技术方案：一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法，按下述步骤进行：
a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；
b.将外植体无菌接种在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～1.0mg/L NAA的培养基上获得愈伤组织；
c.将步骤b的愈伤组织转接在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽；
d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + Ac 的培养基上促进生根，获得生根苗；
e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，苗达8～10CM高，即可移苗种植。
具体地，前述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法所述的步骤a中，所述的消毒为：采用75%酒精处理3min，1%升汞处理8min，再使用无菌水冲洗6次。
具体地，前述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法所述的步骤b中，所述的培养基为MS + 0.8～1.5mg/L 6-BA + 0.6～0.9mg/L NAA。
具体地，前述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法所述的步骤b中，所述的培养基为MS + 1.2mg/L 6-BA + 0.8mg/L NAA。
具体地，前述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法所述的步骤d中，生根苗的炼苗时间为20～30天。
具体地，前述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法所述的步骤d中，移栽至大棚后，大棚温度为16～25℃，湿度≥80%。
有益效果
与现有技术相比，本发明使用一枝黄花的种子作为外植体，经消毒、无菌接种、无菌苗的获得、愈伤组织的诱导、丛生芽的分化、以及壮苗生根培养和炼苗移栽等步骤，获得大量优质的种苗。其相比传统的种播等方法而言，生产周期短，增殖系数大（增殖系数能达3～5），实验室内培育，不受季节的影响，成活率高并且可获得脱毒种苗，满足产业化推广种植。
本发明选用当年成熟的种子减去冠毛作为外植体，相对于传统的黄花幼嫩茎尖而言，种子易萌发，种子萌发率达90%以上，且形成种苗的获得率较茎叶消毒后更高，因茎叶消毒后易产生污染，组织中可能带菌，消毒严重会使外植体死亡，茎叶消毒后存活的在20%左右。
本发明将种子作为外植体无菌接种在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～1.0mg/LNAA的培养基上培养，能够获得大量愈伤组织。本发明中，诱导愈伤组织需1-2个月，增殖4-5倍需要2个月；而其他方法诱导愈伤组织，获得相当量的时间约3-4个月，增殖到相同的愈伤组织量时间相近，无明显差异。相比较，用种子作为外植体接种到本发明的培养基，提高了产生愈伤组织的量，缩短了培育周期。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
实施例1。一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法,按下述步骤进行：
a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；
b.将外植体无菌接种在MS + 1.2mg/L 6-BA + 0.8mg/L NAA的培养基上获得无菌材料的同时，获得愈伤组织；
c.将步骤b的愈伤组织转接在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽，且增殖系数达3～5；
d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + Ac 的培养基上促进生根，得根系发达的生根苗；获得的生根苗根系发达，能够提高成活率；
e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，经2-3个月的管理后，苗达8-10CM高，即可移苗种植。
具体地，前述步骤a中，所述的消毒为：采用75%酒精处理3min，1%升汞处理8min，再使用无菌水冲洗6次。
具体地，步骤d中，移栽至大棚后，大棚温度为16～25℃，湿度≥80%，成活率85%以上。
实施例2。一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法,按下述步骤进行：
a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；
b.将外植体无菌接种在MS + 0.5mg/L 6-BA +0.5mg/L NAA的培养基上获得无菌材料的同时，获得愈伤组织；
c.将步骤b的愈伤组织转接在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽，且增殖系数达3～5；
d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + Ac 的培养基上促进生根，得根系发达的生根苗；
e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，经2-3个月的管理后，苗达8-10CM高，即可移苗种植。
具体地，前述步骤a中，所述的消毒为：采用75%酒精处理3min，1%升汞处理8min，再使用无菌水冲洗6次。
具体地，步骤d中，移栽至大棚后，大棚温度为16～25℃，湿度≥80%。
实施例3。一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法,按下述步骤进行：
a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；
b.将外植体无菌接种在MS + 2.0mg/L 6-BA + 1.0mg/L NAA的培养基上获得无菌材料的同时，获得愈伤组织；
c.将步骤b的愈伤组织转接在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽，且增殖系数达3～5；
d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + Ac 的培养基上促进生根，得根系发达的生根苗；
e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，经2-3个月的管理后，苗达8-10CM高，即可移苗种植。
具体地，前述步骤a中，所述的消毒为：采用75%酒精处理3min，1%升汞处理8min，再使用无菌水冲洗6次。
具体地，步骤d中，移栽至大棚后，大棚温度为16～25℃，湿度≥80%。
Claims (6)
1.一种一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法，其特征在于，按下述步骤进行：
a.取当年成熟的种子剪去冠毛后消毒，得外植体；
b.将外植体无菌接种在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～1.0mg/L NAA的培养基上获得愈伤组织；
c.将步骤b的愈伤组织转接在MS + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.5～2.0mg/L IBA的培养基上获得丛生芽；
d.将步骤c的丛生芽分离转接到1/2MS + 0.5～1.0mg/L 6-BA + Ac 的培养基上促进生根，获得生根苗；
e.将步骤d的生根苗在常温下炼苗后，移栽至大棚，苗达8～10CM高，即可移苗种植。
2.根据权利要求1所述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法，其特征在于，步骤a中，所述的消毒为：采用75%酒精处理3min，1%升汞处理8min，再使用无菌水冲洗6次。
3.根据权利要求1所述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法，其特征在于，步骤b中，所述的培养基为MS + 0.8～1.5mg/L 6-BA + 0.6～0.9mg/L NAA。
4.根据权利要求3所述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法，其特征在于，步骤b中，所述的培养基为MS + 1.2mg/L 6-BA + 0.8mg/L NAA。
5.根据权利要求1所述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法，其特征在于，步骤d中，生根苗的炼苗时间为20～30天。
6.根据权利要求1所述的一枝黄花的组织培养及快速繁殖技术育苗方法的使用方法，其特征在于，步骤d中，移栽至大棚后，大棚温度为16～25℃，湿度≥80%。
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