CN106538387B - 一种苦蘵的组织培养方法 - Google Patents

一种苦蘵的组织培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106538387B
CN106538387B CN201610967383.9A CN201610967383A CN106538387B CN 106538387 B CN106538387 B CN 106538387B CN 201610967383 A CN201610967383 A CN 201610967383A CN 106538387 B CN106538387 B CN 106538387B
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
zhi
seedling
illumination
days
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610967383.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106538387A (zh
Inventor
卢江杰
王慧中
邱胜
史钰军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hangzhou Normal University
Original Assignee
Hangzhou Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hangzhou Normal University filed Critical Hangzhou Normal University
Priority to CN201610967383.9A priority Critical patent/CN106538387B/zh
Publication of CN106538387A publication Critical patent/CN106538387A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106538387B publication Critical patent/CN106538387B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001Culture apparatus for tissue culture
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants

Abstract

本发明公开了一种苦蘵的组织培养方法,该方法包括以下步骤:种子无菌萌发、诱导愈伤组织、愈伤组织分化、生根培养和炼苗及移栽。本发明的方法用于苦蘵的组织培养,具有繁殖速度快、繁殖系数大,繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状,不受季节的限制的优点。

Description

一种苦藤的组织培养方法
技术领域
[0001]本发明涉及植物组织培养技术领域,具体的是一种苦藤的组织培养方法。
背景技术
[0002] 苦藤(Physalis angulata L.)又名灯笼泡、灯笼草,为前科酸楽属一年生草本,分 布于我国华东、华中、华南及西南;日本、印度、澳大利亚和美洲亦有。常生于海拔500-1500 米的山谷林下及村边路旁。苦藤以果、根或全草入药,性味苦、寒,主治咽喉肿痛,腮腺炎,急 慢性气管炎,肺脓疡,痢疾,小便不利,外用治脓泡疮等。研究发现苦藤主要有醉茄内酯、酸 浆苦素、黄酮、生物碱及留醇等化学成分,其中酸浆苦素和谷留醇具有多种体内外的抗癌活 性,对于宫颈癌和皮肤癌都具有明显疗效。苦藤作为一种药用植物,具有潜在抗癌效果,而 且还具有生长周期短、单株种子多、近缘物种(番茄、马铃薯、辣椒和茄子)参考基因组多等 特点,便于进行遗传转化和基因功能研究,在作为药用植物基因工程受体模式植物方面具 有广阔的前景。
[0003] 目前关于苦藤的研究报道主要集中在有效成分分析及药理研究方面。苦藤种子的 发芽率普遍较低,采用常规的种子繁殖方法速度慢。组织培养技术具有繁殖速度快、繁殖系 数大,繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状,不受季节的限制等优点,虽然同属 植物酸浆和毛酸浆的组织培养研究较多,但对苦藤组织培养的研究和应用微乎其微。
发明内容
[0004] 本发明的目的是提供一种苦藤的组织培养方法,解决了苦藤因种子发芽率较低而 繁殖速度慢的问题。本发明的方法用于苦藤快速繁殖,具有繁殖速度快、繁殖系数大,繁殖 后代整齐一致,移栽成活率高的优点。
[0005] 本发明所提供的技术方案是:
[0006] —种苦藤的组织培养方法,包括以下步骤:
[0007] (1)种子无菌萌发:选用饱满的苦藤种子,经酒精、次氯酸钠及吐温灭菌,然后无菌 水冲洗,最后均匀播种在1/2MS培养基上,种子萌发出小苗;
[0008] 培养条件是无菌环境下,培养温度为25 土 TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时 间为12〜14天;
[0009] (2)诱导愈伤:将种子萌发后小苗的子叶切下,切去叶子两端,然后接种在含有6-BA和NAA的改良MS培养基上,得到愈伤组织;
[0010] 培养条件是无菌环境下,培养温度为25 土 TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时 间为35〜42天;
[0011] ⑶愈伤组织分化:将获得的愈伤组织接种在含6-BA和NAA的改良MS培养基上,得 到组培小苗;
[0012] 培养条件是无菌环境下,培养温度为25 土 TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时 间为14〜16天;
[0013] (4)生根培养:待愈伤上的不定芽长到2-3cm时,用剪刀剪下小苗,转接在1/2MS培 养基上,得到根系较为发达的组培苗,主根约有3-4条,根长约为3-5cm。
[0014] 培养条件是无菌环境下,温度为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时间为 12〜15天。
[0015] ⑸炼苗及移栽:待小苗长出白色且粗壮的根后,进行驯化移栽;
[0016] 具体驯化移栽过程是首先在培养室将瓶盖打开炼苗2-3天,然后取出植株,洗净根 部培养基,移栽。炼苗培养条件为往组培瓶中加入〇. 5-lcm蒸馏水,打开瓶盖,置于培养温度 为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗的培养室中炼苗2-3天。移栽条件是采用体积比为2:1 〜3:1营养花卉土与蛭石的混合物作为培养基质,置于26°C光照培养箱,光周期为16h光照/ 8小时黑暗。
[0017] 其中,步骤(1)中所述灭菌方法为混合消毒剂灭菌,具体是种子先在95%乙醇(即 上述的酒精)中浸泡3-6分钟,再加入15-25%酒精体积的次氯酸钠、0.1-0.2%酒精体积的 吐温20,浸泡15-25分钟。
[0018] 其中,步骤⑵中所述改良MS培养基的配制方法为:配置IL培养基是将MS培养基固 体粉末4 · 74g、2_吗啉乙横酸(MES, 2- [N-morphoIino] ethansulfonic acid) lg、鹿糖30g,溶 解于蒸馏水中,然后将pH值调至5.8〜6.0后定容至IL,最后加入一定浓度的6-BA和NAA,以 及8g琼脂粉。
[0019] 其中,步骤⑴和(4)中所述1/2MS培养基的配制方法为:配置IL培养基是将MS培养 基固体粉末2.37g、蔗糖30g,溶解于蒸馏水中,然后将pH值调至5.8〜6.0后定容至1L,最后 加入8g琼脂粉。
[0020] 其中,步骤⑵和⑶中所用诱导愈伤和不定芽的不同浓度培养基为15+6-8六(1.0-3 · Omg/L) +NAA (0 · 05-0 · 2mg/L)。
[0021] 其中,步骤⑷中所述生根组培苗为真叶已长出,主根约有3-4条,根长约为3-8cm 的苗。
[0022] 本发明的优点是:
[0023] 1.本发明的方法具有繁殖速度快、繁殖系数大的优点。
[0024] 2.本发明的方法具有繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状的优点。
[0025] 3.本发明的方法具有不受季节限制的优点。苦藤在野外为一年生草本,花果期5-12月,而在实验室,通过组织培养得到的组培苗,栽种在培养室一年四季均可开花结果。
附图说明
[0026] 图1为本发明苦藤组织培养体系不同阶段;其中A:苦藤种子0天;B:苦藤2周的小 苗;C:叶盘0天;D:叶盘21天;E:叶盘32天;F:芽生根培养12天;G:幼苗;H:苦藤组培植株;I: 组培苗花与果,图中标尺为lcm。
[0027] 图2为本发明实施例中9个激素组合的出芽率情况;其中9个组合的基本培养基均 为MS培养基。
具体实施方式
[0028] 下面结合具体例对本发明作进一步详细的说明。
[0029] 实施例I:
[0030] 以饱满苦藤种子为试验材料,材料为浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重 点实验室收集的浙江浦江野生种源,种植在杭州师范大学下沙校区试验地,取成熟果实后 剥开,洗出种子,硅胶干燥并保存于实验室4°C冰箱备用,并按照如下所述步骤进行培养,如 图1具体步骤如下:
[0031] (1)种子无菌萌发:选取颗粒饱满的种子进行试验。种子在95%乙醇中摇晃浸泡 5min。再加入20 %酒精体积的次氯酸钠,0.1 %酒精体积的吐温20,继续浸泡20min。倒净液 体后,用无菌的ddH20清洗种子3-5次。将种子均匀播种在含1/2MS培养基的玻璃培养皿上, 用Paraf i Im膜封口后置于培养室中进行培养,培养温度为25 ± 1°C,光周期为16h光照/8h黑 暗,培养2周左右,待长出真叶,获得无菌苗,用于后续实验。
[0032] (2)愈伤诱导分化培养:选取苦藤种子萌发2周时的幼苗子叶为外植体。用剪刀剪 去子叶两端,接种于培养基MS+6-BA (lmg/L-3mg/L) +NAA (0.05mg/L-0· 2mg/L)上。植物激素 6-BA和NAA组合共设9个梯度,每梯度设3个重复,每重复接种30个叶盘。置于培养室中进行 培养,培养条件同上。1周左右叶盘开始加厚,进一步培养3周左右,愈伤组织表面开始分化 出绿色芽点,并进一步发育形成不定芽。40天后统计愈伤诱导率和愈伤出芽率。
[0033] (3)生根培养:待愈伤上的不定芽长到2-3cm时,用剪刀剪下小苗,转接在1/2MS培 养基上,生根率可达100 %。2周左右植株即可形成粗壮的根系,主根3-5条,长3-8cm。
[0034] ⑷炼苗及移栽:待小苗长出白色且粗壮的根后,进行驯化移栽,。首先在培养室将 瓶盖打开炼苗2-3天,然后取出植株,洗净根部培养基,移栽。移栽条件:营养花卉土:蛭石体 积比为3:1,光照培养箱,16h光照,8小时黑暗,26°C。
[0035] 上述实施例中所涉及的公式如下:
[0036] 诱导率(%)=诱导出愈伤的叶盘数/接种的叶盘数X 100%
[0037] 出芽率(%)=长出芽的愈伤数/接种的愈伤数X 100%
[0038] 表1
Figure CN106538387BD00051
[0040] *9个组合的基本培养基为MS培养基,表中不同小写字母表示各处理间差异显著水 平(P〈0.05)。
[0041] 本研究结果表明苦藤种子在1/2MS培养基中萌发可培养出适于后续试验的健康子 叶;诱导愈伤和不定芽的最佳培养基为MS+6BA (3mg/L) +NAA (0.05mg/L),愈伤诱导率达 100%,愈伤出芽率为78% ;将生长良好的2-3cm的不定芽插在1/2MS生根培养基中,两周左 右可形成较好的根系,生根率可达100% (图2)。
[0042] 实施例2:
[0043] 以饱满苦藤种子为试验材料,材料为浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重 点实验室收集的浙江浦江野生种源,种植在杭州师范大学下沙校区试验地,取成熟果实后 剥开,洗出种子,硅胶干燥并保存于实验室4°C冰箱备用,并按照如下所述步骤进行培养,具 体步骤如下:
[0044] (1)种子无菌萌发:选取颗粒饱满的种子进行试验。种子在95%乙醇中摇晃浸泡 5min。再加入20 %酒精体积的次氯酸钠,0.1 %酒精体积的吐温20,继续浸泡20min。倒净液 体后,用无菌的ddH20清洗种子3-5次。将种子均匀播种在含1/2MS培养基的玻璃培养皿上, 用Paraf i Im膜封口后置于培养室中进行培养,培养温度为25 ± 1°C,光周期为16h光照/8h黑 暗,培养12天左右,待长出真叶,获得无菌苗,用于后续实验。
[0045] (2)愈伤诱导分化培养:选取苦藤种子萌发2周时的幼苗子叶为外植体。用剪刀剪 去子叶两端,接种于培养基MS+6-BA (3mg/L) +NAA (0.05mg/L)上,培养35天左右,愈伤组织表 面开始分化出绿色芽点,并进一步发育形成不定芽。
[0046] (3)生根培养:待愈伤上的不定芽长到2-3cm时,用剪刀剪下小苗,转接在1/2MS培 养基上,生根率可达100%。12天左右植株即可形成粗壮的根系,主根3-5条,长3-8cm。
[0047] (4)炼苗及移栽:待小苗长出白色且粗壮的根后,进行驯化移栽。首先在培养室将 瓶盖打开炼苗2-3天,然后取出植株,洗净根部培养基,移栽。移栽条件是营养花卉土 :蛭石 体积比为2:1,光照培养箱,16h光照/8小时黑暗,26°C。
[0048] 本研究结果表明苦藤种子在1/2MS培养基中萌发可培养出适于后续试验的健康子 叶;愈伤诱导率达100%,愈伤出芽率为81%;将生长良好的2-3cm的不定芽插在1/2MS生根 培养基中,两周左右可形成较好的根系,生根率可达100%。
[0049] 实施例3:
[0050] 以饱满苦藤种子为试验材料,材料为浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重 点实验室收集的浙江浦江野生种源,种植在杭州师范大学下沙校区试验地,取成熟果实后 剥开,洗出种子,硅胶干燥并保存于实验室4°C冰箱备用,并按照如下所述步骤进行培养,具 体步骤如下:
[0051] (1)种子无菌萌发:选取颗粒饱满的种子进行试验。种子在95%乙醇中摇晃浸泡 5min。再加入20 %酒精体积的次氯酸钠,0.1 %酒精体积的吐温20,继续浸泡20min。倒净液 体后,用无菌的ddH20清洗种子3-5次。将种子均匀播种在含1/2MS培养基的玻璃培养皿上, 用Paraf i Im膜封口后置于培养室中进行培养,培养温度为25 ± 1°C,光周期为16h光照/8h黑 暗,培养13天左右,待长出真叶,获得无菌苗,用于后续实验。
[0052] (2)愈伤诱导分化培养:选取苦藤种子萌发2周时的幼苗子叶为外植体。用剪刀剪 去子叶两端,接种于培养基MS+6BA (3mg/L) +NAA (0.05mg/L)上,培养42天左右,愈伤组织表 面开始分化出绿色芽点,并进一步发育形成不定芽。
[0053] (3)生根培养:待愈伤上的不定芽长到2-3cm时,用剪刀剪下小苗,转接在1/2MS培 养基上,生根率可达100%。12天左右植株即可形成粗壮的根系,主根3-5条,长3-8cm。
[0054] (4)炼苗及移栽:待小苗长出白色且粗壮的根后,进行驯化移栽。首先在培养室将 瓶盖打开炼苗2-3天,然后取出植株,洗净根部培养基,移栽。移栽条件是营养花卉土 :蛭石 体积比为2.5:1,光照培养箱,16h光照/8小时黑暗,26°C。
[0055] 本研究结果表明苦藤种子在1/2MS培养基中萌发可培养出适于后续试验的健康子 叶;愈伤诱导率达100%,愈伤出芽率为74%;将生长良好的2-3cm的不定芽插在1/2MS生根 培养基中,两周左右可形成较好的根系,生根率可达100%。
[0056] 上述实施例并非是对于本发明的限制,本发明并非仅限于上述实施例,只要符合 本发明要求,均属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1. 一种苦藤的组织培养方法,其特征在于该方法包括以下步骤: (1) 种子无菌萌发:苦藤种子经酒精、次氯酸钠及吐温灭菌,然后无菌水冲洗,最后均匀 播种在I /2MS培养基上,种子萌发出小苗; 培养条件是无菌环境下,培养温度为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时间为 12〜14天; (2) 诱导愈伤组织:将种子萌发后小苗的子叶切下,切去叶子两端,然后接种在含有6-BA和NAA的改良MS培养基上,得到愈伤组织; 培养条件是无菌环境下,培养温度为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时间为 35〜42天; (3) 愈伤组织分化:将获得的愈伤组织接种在含6-BA和NAA的改良MS培养基上,得到组 培小苗; 培养条件是无菌环境下,培养温度为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时间为 14〜16天; ⑷生根培养:待愈伤上的不定芽长到2-3cm时,用剪刀剪下小苗,转接在1/2MS培养基 上,得到生根组培苗; 培养条件是无菌环境下,温度为25± TC,光周期为16h光照/8h黑暗,培养时间为12〜 15天; ⑸炼苗及移栽:待小苗长出白色且粗壮的根后,进行驯化移栽; 具体驯化移栽过程是首先在培养室将瓶盖打开炼苗2-3天,然后取出植株,洗净根部培 养基,移栽;炼苗培养条件为往组培瓶中加入0.5-1 cm蒸馏水,打开瓶盖,置于培养温度为25 ± TC,光周期为16h光照/8h黑暗的培养室中炼苗2-3天;移栽条件是采用花卉营养土与蛭 石的混合物作为培养基质,置于26°C光照培养箱,光周期为16h光照/8小时黑暗; 所述步骤⑵、⑶改良MS培养基的配制方法为:配置IL培养基是将MS培养基固体粉末 4.74g、2-吗啉乙磺酸lg、鹿糖30g,溶解于蒸馏水中,然后将pH值调至5.8〜6.0后定容至IL, 最后加入1.0-3.011^/1684和0.05-0.211^/1熟4,以及88琼脂粉。
2. 如权利要求1所述的一种苦藤的组织培养方法,其特征在于步骤(1)中所述灭菌方法 为混合消毒剂灭菌,具体是种子先在酒精中浸泡3-6分钟,再加入15-25%酒精体积的次氯 酸钠、O. I-0.2 %酒精体积的吐温20,浸泡15-25分钟。
3. 如权利要求1所述的一种苦藤的组织培养方法,其特征在于步骤(1)和(4)中所述1/ 2MS培养基的配制方法为:配置IL培养基是将MS培养基固体粉末2.37g、蔗糖30g,溶解于蒸 馏水中,然后将pH值调至5.8〜6.0后定容至1L,最后加入8g琼脂粉。
4. 如权利要求1所述的一种苦藤的组织培养方法,其特征在于步骤(4)中所述的生根组 培苗为真叶已长出,主根有3-4条,根长为3-8cm的苗。
5. 如权利要求1所述的一种苦藤的组织培养方法,其特征在于6BA的浓度为3. Omg/L; NAA的浓度为0.05mg/L。
6. 如权利要求1所述的一种苦藤的组织培养方法,其特征在于步骤(5)移栽培养基为体 积比为2:1〜3:1的花卉营养土与蛭石混合物。
CN201610967383.9A 2016-10-31 2016-10-31 一种苦蘵的组织培养方法 Active CN106538387B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610967383.9A CN106538387B (zh) 2016-10-31 2016-10-31 一种苦蘵的组织培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610967383.9A CN106538387B (zh) 2016-10-31 2016-10-31 一种苦蘵的组织培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106538387A CN106538387A (zh) 2017-03-29
CN106538387B true CN106538387B (zh) 2018-09-07

Family

ID=58394544

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610967383.9A Active CN106538387B (zh) 2016-10-31 2016-10-31 一种苦蘵的组织培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106538387B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107439374A (zh) * 2017-07-26 2017-12-08 浦江县合洪园艺研发有限公司 苦蘵根分化培养液
CN107372108A (zh) * 2017-07-26 2017-11-24 兰溪市顺光园艺技术有限公司 苦蘵根分化培养液的制备方法
CN107439375A (zh) * 2017-07-26 2017-12-08 兰溪市顺光园艺技术有限公司 一种苦蘵快速培养的方法
CN111296294B (zh) * 2020-04-13 2022-03-08 通化天妍生物技术有限公司 一种诱导酸浆花瓣突变的新品种培育方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104304018A (zh) * 2014-10-17 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种挂金灯组织培养的快速繁殖方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104304018A (zh) * 2014-10-17 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种挂金灯组织培养的快速繁殖方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
苦蘵组织培养中不同激素与外植体类型的交互用;张蓓等;《自然杂志》;19911231(第12期);第953页 *
通肯酸浆的组织培养与植株再生;宗宪春等;《植物生理学通讯》;20100430;第46卷(第4期);第381-382页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106538387A (zh) 2017-03-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106538387B (zh) 一种苦蘵的组织培养方法
CN105638477A (zh) 一种竹叶石斛种子快速繁殖方法
CN103299911B (zh) 一种高效获得素心建兰脱毒幼苗的方法
CN105815213A (zh) 一种猕猴桃离体再生体系的建立方法
CN106577273A (zh) 一种铁甲秋海棠叶片离体再生体系建立的方法
CN107211891B (zh) 一种魔芋愈伤组织直播快繁技术
CN103155868B (zh) 樱桃砧木zy-1组培快速育苗方法
CN110663552B (zh) 一种滇桐的组培快繁方法
CN105706872A (zh) 白芨种子直播自然繁殖育苗方法
CN103548695B (zh) 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法
CN109156350B (zh) 一种抗风桐繁芽与生根培养基及促进抗风桐离体快速繁殖的方法
CN103155869A (zh) 甜樱桃砧木Colt组织培养方法
CN101810144B (zh) 瓜叶菊的快速繁殖方法
CN106561453B (zh) 大花金钱豹的快速繁殖方法
KR101401096B1 (ko) 유성생식을 통한 자마 증식방법
CN105557515B (zh) 一种圆叶鸟巢蕨的组培快繁方法
CN105230493B (zh) 一种白术种苗的繁殖方法及其应用
CN112616663A (zh) 一种大幅度缩短兰州百合种植周期和种苗快速繁殖的方法
CN104106468B (zh) 一种五指毛桃的组织培养快速繁殖方法
CN101473792B (zh) 丫蕊花组培及种植方法
CN105746347A (zh) 一种岩黄连的离体保存方法
CN108391591B (zh) 一种黄花风铃木组织培养快繁方法
CN107494269A (zh) 一种消除小花万代兰组织培养过程中内生菌的方法
CN102499082A (zh) 东方百合种球的试管繁育方法
CN112841032B (zh) 一种海岸桐不定芽增殖培养基及海岸桐离体快速繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB03 Change of inventor or designer information
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Lu Jiangjie

Inventor after: Wang Huizhong

Inventor after: Qiu Sheng

Inventor after: Shi Yujun

Inventor before: Qiu Sheng

Inventor before: Lu Jiangjie

Inventor before: Wang Huizhong

Inventor before: Shi Yujun

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant