CN104151197B

CN104151197B - 芳香丙酰胺类化合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN104151197B
Application number: CN201410360216.9A
Authority: CN
Inventors: 朱新法; 孙继华; 梁发香
Original assignee: SUZHOU ELITE DRUGS RESEARCH DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: Ningbo Xijian Pharmaceutical Technology Co.,Ltd.
Priority date: 2014-07-25
Filing date: 2014-07-25
Publication date: 2017-02-22
Anticipated expiration: 2034-07-25
Also published as: CN104151197A

Abstract

本发明提供了一种芳香丙酰胺类化合物是一类新的选择性非甾体类雄激素受体调节剂，具有调节雄激素受体的作用，从而可以用于治疗或预防各种与雄激素相关的疾病，如男性雄激素缺乏(ADAM)的病症，女性雄激素缺乏(ADIF)的病症，肌消耗，肌肉消瘦，肌肉萎缩，骨质疏松，骨质减少，贫血，肥胖，脂肪肝，糖尿病，干眼症和由癌症、爱滋病、肾病、烧伤等疾病引起的肌消耗等，还能用于运动和/或体能增强剂，动物生长剂和饲料添加剂等。

Description

芳香丙酰胺类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种芳香丙酰胺类化合物及其制备方法和应用，属于药物合成技术领域。

背景技术

雄激素受体(Androgen Receptor，AR)属于核受体超家族中的类固醇受体，是由配体诱导的核转录因子的受体，一般由四个功能结构域组成：N端转录激活区(NTD)、DNA结合区(DBD)、铰链区和包含雄激素结合结构域的261个残基的配体结合区(LBD)。雄激素受体以高亲和性和低能量结合活化的雄激素，若无雄激素受体，则雄激素对组织无刺激反应(refractory)。雄激素受体是雄激素作用的中介物质。雄激素受体是一种重要的细胞调节蛋白，其主要功能是作为调控基因表达的一种结合DNA的转录因子，它通过内源性甾体雄激素在众多的生理过程中起着至关重要的作用，包括男性第二性征发育和维护，包括肌肉和骨骼的生产和维持，前列腺的生长，男性毛发生长和精子发育等。内源性甾体雄激素一般被称为男性性激素，包括睾酮和二氢睾酮(DHT)。睾酮是在男性血清中发现的主要的甾体雄激素，它主要由睾丸分泌的。在许多外周组织，如前列腺和皮肤，睾酮可被5α-还原酶转化为更有效的二氢睾酮。当睾酮或二氢睾酮在细胞质中与雄激素受体结合后，会使之激活继而转运进核内。雄激素受体与孕酮受体之间的关系很密切，高剂量的黄体制剂可阻断雄激素受体。

目前，甾体类雄性激素被用于治疗由雄激素缺乏而导致的疾病。睾酮注射剂，贴片和胶剂在临床中普遍使用，然而，睾酮及其各种衍生物属于类固醇激素，因此都具有类固醇激素所特有的副作用，尤其是甾体雄性激素的副作用，如前列腺增生及前列腺癌，男性乳房增大，肝毒和口服生物利用度差等。尽管人们已尝试各种方法去克服激素类药物的局限性，但效果有限。

非甾体类雄激素受体拮抗剂(抗雄激素)，如氟他胺，尼鲁米特和比卡鲁胺，已作为抗前列腺癌的药物被广泛地应用于临床上。最近有文献报道对选择性非甾体雄激素受体调节剂的研制进展，具有高选择性，同时消除不良反应，因此寻找和研发选择性非甾体雄激素调节剂，及其潜在的用于预防和/或治疗由雄激素缺乏导致各种疾病，引起学术界和制药界越来越大的兴趣。而在临床上，人们更需要一种可口服，无肝毒，无激素副作用，具有良好的物理化学，药代动力学和药理特性的选择性非甾体类雄激素受体的调节剂。

发明内容

鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种芳香丙酰胺类化合物及其制备方法和应用，是一类新的选择性非甾体类雄激素受体调节剂，具有调节雄激素受体的作用，从而可以用于治疗或预防各种与雄激素相关的疾病，如男性雄激素缺乏(ADAM)的病症，女性雄激素缺乏(ADIF)的病症，肌消耗，肌肉消瘦，肌肉萎缩，骨质疏松，骨质减少，贫血，肥胖，脂肪肝，糖尿病，干眼症和由癌症、爱滋病、肾病、烧伤等疾病引起的肌消耗等，还能用于运动和/或体能增强剂，动物生长剂和饲料添加剂等。

本发明的目的通过以下技术方案得以实现：

一种芳香丙酰胺类化合物，及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种晶型或各种异构体，具有化学式Ⅰ或化学式Ⅱ所示的结构：

其中，R₁为C₁-C₁₈烷基，C₁-C₁₈环烷基，C₁-C₁₈杂环烷基，C₁-C₁₈烷基氧基，C₁-C₁₈链烯基，C₁-C₁₈链炔基，氨基，单或双C₁-C₁₈烷基取代氨基，芳香氧基，芳香胺基，芳香基，或杂环芳香基；

R₂为C₁-C₄烷基，C₁-C₄卤代烷基，芳香基，或杂环芳香基；

R₃为C₁-C₇烷基酮基，C₁-C₇卤代烷基酮基，环烷基酮基，杂环烷基酮基，C₁-C₇烷基酯基，C₁-C₇卤代烷基酯基，C₁-C₇链烯基酯基，C₁-C₇链炔基酯基，酰氨基，单或双烷基取代酰氨基，芳基酮基，或杂环芳基酮基；

R₄，R₅分别为氢原子，卤素，氰基，硝基，三氟甲基，C₁-C₄卤代烷基，羧基，C₁-C₄烷基酮基，C₁-C₄卤代烷基酮基，C₁-C₄烷基酰基胺基，C₁-C₄卤代烷基酰基胺基，C₁-C₄烷基磺酰基，C₁-C₄卤代烷基磺酰基，酰氨基，或取代基a取代的单或双烷基酰氨基；取代基a为氢原子，羟基，氰基，C₁-C₄烷基，C₁-C₄烷氧基，或C₁-C₄烷基磺酰基；

R₆，R₇分别为氢原子，卤素，氰基，硝基，三氟甲基，C₁-C₄卤代烷基，羧基，C₁-C₄烷基酮基，C₁-C₄卤代烷基酮基，C₁-C₄烷基酰基胺基，C₁-C₄卤代烷基酰基胺基，C₁-C₄烷基磺酰基，C₁-C₄卤代烷基磺酰基，C₁-C₄烷基磺酰胺基，C₁-C₄卤代烷基磺酰胺基，酰氨基，或取代基b取代的单或双烷基酰氨基；取代基b为氢原子，羟基，氰基，C₁-C₄烷基，C₁-C₄烷氧基，或C₁-C₄烷基磺酰基；

X，Y分别为一个键，氧原子，-NH-，-CH₂-，-S(O)_0-2，或取代基c取代的胺基；取代基c为羟基，烷基，卤代烷基，烷基氧基，酯基，羧酸，氰基，酰氨基，取代酮基，烷酰基氨基，芳基酰基氨基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，烷基磺酰氨基，芳基磺酰氨基，苯基，苯氧基，或三氟甲磺酰基；

m为0-5的整数；n为0-5的整数。

优选的，上述的芳香丙酰胺类化合物，其中：所述烷基，环烷基，杂环烷基，烷基氧基，芳香氧基，链烯基，链炔基，芳香基和杂环芳香基被取代基d取代，取代基d为卤素，烷基，卤代烷基，烷基氧基，卤代烷氧基，烷基酯基，芳基酯基，羟基，羧基，氰基，硝基，氨基，单或双烷基取代氨基，烷基酰氨基，芳基酰氨基，取代酮基，烷酰基氨基，芳基酰基氨基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，烷基磺酰氨基，芳基磺酰氨基，苯基或苯氧基中的一种或多种。

优选的，上述的芳香丙酰胺类化合物，其中：所述芳香丙酰胺类化合物为S型光学异构体，具有化学式Ⅲ或化学式Ⅳ所示的结构：

优选的，上述的芳香丙酰胺类化合物，其中：该化合物包括：

一种上述的芳香丙酰胺化合物的制备方法，包括如下步骤：

使化合物(1)与D-脯氨酸在Schottenn-Baumann反应条件下得到化合物(2)；使化合物(2)转化为化合物(3)；使化合物(3)酸水解生成S型光学异构体的化合物(4)；使化合物(4)与化合物(5)反应生成化合物(6)；使化合物(6)与化合物(7)反应得到化合物(8)；使化合物(8)在碱性条件和无水溶剂中和酸酐和酰氯化合物进行反应得到S型光学异构体的化学式I和II所示的目标化合物；

或者使化合物(1)与L-脯氨酸在Schottenn-Baumann反应条件下得到化合物(2)；使化合物(2)转化为化合物(3)；使化合物(3)酸水解生成R型光学异构体的化合物(4)；使化合物(4)与化合物(5)反应生成化合物(6)；使化合物(6)与化合物(7)反应得到化合物(8)；使化合物(8)在碱性条件和无水溶剂中和酸酐和酰氯化合物进行反应得到R型光学异构体的化学式I和II所示的目标化合物；

一种药物组合物，包含上述的化学式Ⅰ或化学式Ⅱ所示结构的芳香丙酰胺类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、氮氧化物、代谢物、各种同位素、各种异构体或者各种晶型结构中的至少两种化合物组成的组合。

优选的，上述的药物组合物，其中：包含制药学上可接受的载体或稀释剂。

优选的，上述的芳香丙酰胺类化合物在具有调节雄激素受体作用的药物中的应用。

优选的，上述的芳香丙酰胺类化合物的应用，其中：所述芳香丙酰胺类化合物在治疗和/或预防男性性腺功能减退症和男性雄激素下降/缺乏引起的性功能障碍，性欲减退，勃起功能障碍，性腺功能减退，少肌症(老年性肌肉萎缩)，骨质减少，骨质疏松，认知和情绪的变化，抑郁症，疲劳，贫血，毛发脱落，肥胖症，良性前列腺增生或癌症的药物中的应用；所述芳香丙酰胺化合物在治疗和/或预防女性雄激素缺乏引起的性功能障碍，性欲减退，性腺功能减退，少肌症(老年性肌肉萎缩)，骨质减少，骨质疏松，认知和情绪的变化，抑郁症，疲劳，肌无力，毛发脱落，肥胖症，多囊卵巢综合症，子宫内膜异位，或乳癌，子宫癌及卵巢癌的药物中的应用；所述芳香丙酰胺化合物在治疗和/或预防急性或慢性肌消耗，肌肉消瘦，肌肉萎缩的药物中的应用；所述芳香丙酰胺化合物在治疗和/或预防由癌症，爱滋病，肾病，烧伤引起的急性或慢性肌消耗，肌肉消瘦，肌肉萎缩的药物中应用；所述芳香丙酰胺化合物在治疗和/或预防骨相关病症，贫血，肥胖，脂肪肝，糖尿病，老年性情绪和认知的改变，干眼症和癌症的药物中的应用。

上述的芳香丙酰胺类化合物在运动和/或体能增强剂中的应用，以及在兽药、动物生长剂和饲料添加剂中的应用。

本发明的突出效果为：本发明的一种芳香丙酰胺类化合物是一类新的选择性非甾体类雄激素受体调节剂，具有调节雄激素受体的作用，从而可以用于治疗或预防各种与雄激素相关的疾病，如男性雄激素缺乏(ADAM)的病症，女性雄激素缺乏(ADIF)的病症，肌消耗，肌肉消瘦，肌肉萎缩，骨质疏松，骨质减少，贫血，肥胖，脂肪肝，糖尿病，干眼症和由癌症、爱滋病、肾病、烧伤等疾病引起的肌消耗等，还能用于运动和/或体能增强剂，动物生长剂和饲料添加剂等。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-乙酸酯的合成(C₂₁H₁₅F₄N₃O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.4克，乙酸酐2.1克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间2.5-3.5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物。硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98:2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.4克，纯度约为98％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.50(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.19-8.12(m,2H,ArH),7.87-7.83(m,1H,ArH),7.29-7.26(m,1H,ArH),7.07-7-04(m,1H,ArH),4.59(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.51(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.14(s,3H,CH3),1.73(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,Negative)m/z[M-H]^-448.0。

实施例2：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-苯甲酸酯的合成(C₂₆H₁₇F₄N₃O₄)

在100mL园底烧瓶中加入原料0.20克，苯甲酸酐0.5克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间9-10小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.21克，纯度约为98％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.60(s,1H,NH),8.29(s,1H,ArH),8.19-8.12(m,2H,ArH),7.98-7.96(m,2H,ArH),7.87-7.82(m,1H,ArH),7.74-7.70(m,1H,ArH),7.58-7.40(m,2H,ArH),7.34-7.31(m,1H,ArH),7.10-7.07(m,1H,ArH),4.75(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.67(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),1.87(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 510.0[M-H]^-。

实施例3：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-甲基氨基甲酸酯的合成(C₂₂H₁₈F₄N₄O₄)

在100mL园底烧瓶中加入原料1.50克，无水DMF20mL作为溶剂，温度降至0℃，加入氢化钠0.40克，搅拌2-3小时，再加入二甲氨甲酰氯0.88克，温度升至室温，搅拌，反应时间5-6小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，产物点比较单一，无原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(乙酸乙酯:己烷＝1:1)分离主产物，纯化，得到白色色粉未物质，哄干，称重，得0.99克，纯度约为99.89％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H,NH),8.31(s,1H,ArH),8.17(d,J＝8.8Hz,1H,ArH),8.12(d,J＝8.8Hz,1H,ArH),7.86-7.82(m,1H,ArH),7.26(dd,J＝12.0Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.04(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.61(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.50(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.90(s,3H,CH3),2.77(s,3H,CH3),1.70(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,nigative)m/z 477.0[M-H]^-。

实施例4：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-甲磺酸酯的合成(C₂₀H₁₅F₄N₃O₅S)

在150mL园底烧瓶中加入原料1.00克，无水四氢呋喃20mL作为溶剂，温度降至0℃，加入氢化钠0.22克，搅拌2-3小时，再加入甲磺酰氯0.60克，温度升至室温，搅拌，反应时间4-5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝19:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95:5-9:1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得1.10克，纯度约为99.23％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.63(s 1H,NH),8.34(s,1H,ArH),8.23(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),8.18(d,J＝8.4Hz,1H,ArH),7.88-7.84(m,1H,ArH),7.29(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.06(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.65(s,2H,CH₂),3.37(s,3H,CH₃),1.91(s,3H,CH₃)；质谱：(ESI,nigative)m/z 484.10[M-H]^-。

实施例5：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-苯氧乙酸酯的合成(C₂₇H₁₉F₄N₃O₅)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.28克，苯氧基乙酸酐0.4克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间3-4小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(乙酸乙酯:正己烷＝2：1-1:1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.279克，纯度约为98％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d3)δ10.60(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.21-8.15(m,2H,ArH),7.89-7.85(m,1H,ArH),7.30-7.25(m,1H,ArH),7.21-7.17(m,2H,ArH),7.07-7.04(m,1H,ArH),6.95-6.90(m,3H,ArH),4.94(s,2H,CH2),4.69(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.55(d,J＝10.5Hz,1H,CHHb),1.78(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,nigative)m/z540.0[M-H]^-。

实施例6：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-己酸酯的合成(C₂₅H₂₃F₄N₃O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.11克，正己酸酐0.18克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间3-4小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98：2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得101毫克，纯度为99.5％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d3)δ10.46(s,1H,NH),8.28(s,1H,ArH),8.19-8.12(m,2H,ArH),7.87-7.83(m,1H,ArH),7.27(d,J＝11.2Hz,1H,ArH),7.04(d,J＝7.7Hz,1H,ArH),4.62(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.52(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.41(,t,J＝7.2Hz,2H,CH2),1.73(s,3H,CH3),1.50(t,J＝7.2Hz,2H,CH2),1.23-1.20(m,4H,2xCH2),0.78(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 504.0[M-H]^-。

实施例7：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-尼可丁酸酯的合成(C₂₅H₁₆F₄N₄O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.80克，3-吡啶羧酸酐0.94克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间12小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝4：1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，6：1，4：1，2：1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得1.00克，纯度约为99.5％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.58(s,1H,NH),9.12(d,J＝1.2Hz,1H,ArH),8.88-8.86(m,1H,ArH),8.32-8.27(m,2H,ArH),8.16-8.12(m,2H,ArH),7.84-7.82(m,1H,ArH),7.63-7.61(m,1H,ArH),7.33(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.09(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,2H,ArH),4.77(d,J＝10.5Hz,1H,CHaH),4.70(d,J＝10.5Hz,1H,CHHb),1.89(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z511.0[M-H]^-。

实施例8：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷-2氧)-5-氧正戊酸的合成(C₂₄H₁₉F₄N₃O₆)

在50mL园底烧瓶中加入原料2.00克，戊二酸酐1.17克，无水吡啶20mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间48小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应停止后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95：5-90:10)分离，纯化，得到微黄色粉未物质，哄干，称重，得1.01克，纯度约为98％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ12.12(br s,1H,COOH),10.47(s,1H,NH),8.18-8.12(m,2H,ArH),7.86-7.82(m,1H,ArH),7.27-7.24(m,1H,ArH),7.06-7.03(m,1H,ArH),4.60(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.52(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.48(t,J＝7.2Hz,2H,CH2),2.24(t,J＝7.0Hz,2H,CH2),1.74(q,J＝7.0Hz,2H,CH2),1.73(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 520.0[M-H]^-。

实施例9：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-叔丁酸酯的合成(C₂₃H₁₉F₄N₃O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.10克，叔丁酸酐0.10克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98：2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得60毫克，纯度约为99.38％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.39(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.17-8.12(m,2H,ArH),7.87-7.83(m,1H,ArH),7.27(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.05(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.61(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.53(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.72-2.65(m,1H,CH),1.74(s,3H,CH3),1.10-1.08(m,6H,2xCH2)；质谱：(ESI,negaive)m/z 476.0[M-H]^-。

实施例10：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-戊酸酯的合成(C₂₄H₂₁F₄N₃O₄)

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98：2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得65毫克，纯度约为99.42％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H,NH),8.29(s,1H,ArH),8.14-8.12(m,2H,ArH),7.87-7.83(m,1H,ArH),7.26(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.05(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.62(d,J＝10.4Hz,1H,CHaH),4.53(d,J＝10.4Hz,1H,CHHb),2.52-2.40(m,2H,CH2),1.73(s,3H,CH3),1.52-1.46(m,2H,CH2),1.30-1.23(m,2H,CH2),0.91-0.84(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 490.0[M-H]^-。

实施例11：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-(4-氟)苯甲酸酯的合成(C₂₆H₁₆F₅N₃O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.10克，无水DMF5mL作为溶剂。温度降至0℃，加入氢化钠30毫克，搅拌2-3小时，再加入对氟苯甲酸酰氯80毫克，温度升至室温，搅拌，反应时间5-6小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1。除主要产物点外,还有2个杂点，无原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝19:1)分离，纯化，得到淡黄色粉未物质，哄干，称重，得60毫克，纯度约为99.08％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.57(s,1H,NH),8.28(d,J＝2.0Hz,1H,ArH),8.18-8.11(m,2H,ArH),8.07-8.03(m,2H,ArH),7.86-7.82(m,2H,ArH),7.42-7.38(m,2H,ArH),7.31(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.08(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.75(d,J＝10.6Hz,1H,CHaH),4.66(d,J＝10.6Hz,1H,CHHb),1.87(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 528.0[M-H]^-。

实施例12：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-(4-甲氧基)苯甲酸酯的合成(C₂₇H₁₉F₄N₃O₅)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.25克，对甲氧基苯甲酸酐0.55克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1。产物点比较单一，无原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝19:1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得260毫克，纯度约为98.78％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.55(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.13-8.11(m,2H,ArH),7.92(d,J＝8.2Hz,1H,ArH),7.85-7.81(m,1H,ArH),7.31(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),7.08-7.06(m,3H,ArH),4.74d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.64(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),3.85(m,3H,CH3),1.85(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 540.1[M-H]^-。

实施例13：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-4-甲基苯磺酸酯的合成(C₂₆H₁₉F₄N₃O₅S)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.25克，无水四氢呋喃10mL作为溶剂。温度降至0℃，加入氢化钠55毫克，搅拌2-3小时，再加入甲苯磺酰氯0.18克，温度升至室温，搅拌，反应时间4-5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，产物点比较单一，但仍有少量原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95:5-9:1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.13克，纯度约为99.24％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.16(s,2H,ArH),7.80-7.76(m,3H,ArH),7.30(d,J＝8.2Hz,2H,ArH),7.04(dd,J＝11.6Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),6.82(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),4.60(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.51(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),2.27(s,3H,CH3),1.82(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 560.1[M-H]^-。

实施例14：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-柠檬酸酯的合成(C₂₅H₁₉F₄N₃O₉)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.20克，柠檬酸酐0.27克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1,4:1,2:1)分离，纯化，得到灰色粉未物质，哄干，称重，得40毫克，纯度约为96.04％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ11.26-10.63(m,3H,2xOH and NH),8.61-8.58(m,1H,ArH),8.38-8.31(m,1H,ArH),8.17-8.10(m,1H,ArH),7.82-7.78(m,1H,ArH),7.28-7.23(m,1H,ArH),7.05-7.03(m,1H,ArH),4.62(d,J＝10.4Hz,1H,CHaH),4.57(s,2H,CH2),2.65(s,2H,CH2),2.58(s,2H,CH2),1.76(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,negative)m/z 580.0[M-H]^-。

实施例15：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-乙酸酯的合成(C₂₀H₁₅ClF₄N₂O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.4克，乙酸酐2.0克，无水吡啶10mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间2.5-3.5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物。硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98：2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.4克，纯度约为98.5％。

质谱：(ESI,positive)m/z 459.0[M+H]⁺。

实施例16：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-苯甲酸酯的合成(C₂₅H₁₇ClF₄N₂O₄)

在100mL园底烧瓶中加入原料0.12克，苯甲酸酐0.3克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间8-9小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得117毫克，纯度约为99％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.55(s,1H,NH),8.30(s,1H,ArH),8.19-8.11(m,2H,ArH),7.97-7.95(m,2H,ArH),7.73-7.69(m,1H,ArH),7.57-7.53(m,2H,ArH),7.49-7.45(m,1H,ArH),7.22-7.19(m,1H,ArH),6.94-6.91(m,1H,ArH),4.66(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.56(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),1.86(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,positive)m/z 521.0[M+H]⁺。

实施例17：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-甲基氨基甲酸酯的合成(C₂₁H₁₈ClF₄N₃O₄)

在100mL园底烧瓶中加入原料0.15克，无水DMF5mL作为溶剂，温度降至0℃，加入氢化钠70毫克，搅拌2-3小时，再加入二甲氨甲酰氯0.14克，温度升至室温，搅拌，反应时间5-6小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，产物点比较单一，无原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(乙酸乙酯:己烷＝1:1)分离主产物，纯化，得到白色色粉未物质，哄干，称重，得155毫克，纯度约为99％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.32(s,1H,NH),8.32(s,1H,ArH),8.18-8.10(m,2H,ArH),7.50-7.46(m,1H,ArH),7.16-7.13(m,1H,ArH),6.91-6.88(m,1H,ArH),4.52(d,J＝10.4Hz,1H,CHaH),4.40(d,J＝10.4Hz,1H,CHHb),2.91(s,3H,CH3),2.78(s,3H,CH3),1.70(s,3H,CH3)；质谱：(ESI,positive)m/z 488.0[M+H]⁺。

实施例18：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-甲磺酸酯的合成(C₁₉H₁₅ClF₄N₂O₅S)

在150mL园底烧瓶中加入原料0.25克，无水四氢呋喃5mL作为溶剂，温度降至0℃，加入氢化钠55毫克，搅拌2-3小时，再加入甲磺酰氯0.15克，温度升至室温，搅拌，反应时间4-5小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝19:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝95:5-9:1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得0.27克，纯度约为99％。

质谱：(ESI,positive)m/z 495.5[M+H]⁺。

实施例19：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-己酸酯的合成(C₂₄H₂₃ClF₄N₂O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.10克，正己酸酐0.16克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间3-4小时，点层析板确定终点，薄层色谱法：乙酸乙酯:己烷＝1:1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝98：2-95:5)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得70毫克，纯度为98％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d3)δ10.43(s,1H,NH),8.29(s,1H,ArH),8.19-8.14(m,2H,ArH),7.51-7.46(m,1H,ArH),7.17-7.14(m,1H,ArH),6.91-6.88(m,1H,ArH),4.52(d,J＝10.4Hz,1H,CHaH),4.42(d,J＝10.4Hz,1H,CHHb),2.41(,t,J＝8.0Hz,2H,CH2),1.72(s,3H,CH3),1.50(t,J＝8.0Hz,2H,CH2),1.24-1.20(m,4H,2xCH2),0.78(t,J＝8.0Hz,3H,CH3)；质谱：(ESI,positive)m/z 515.0[M+H]⁺。

实施例20：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-尼可丁酸酯的合成(C₂₄H₁₆ClF₄N₃O₄)

在50mL园底烧瓶中加入原料0.10克，3-吡啶羧酸酐0.10克，无水吡啶5mL作为溶剂，回流，搅拌，反应时间10小时，点层析板确定终点，薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝4：1，产物点比较单一，无原料点。

反应完成后，冷却，抽干，得到油状物，硅胶柱层析(二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，6：1，4：1，2：1)分离，纯化，得到白色粉未物质，哄干，称重，得100毫克，纯度约为99％。

核磁共振谱：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ10.56(s,1H,NH),9.12(d,J＝1.2Hz,1H,ArH),8.87-8.86(m,1H,ArH),8.31-8.28(m,2H,ArH),8.17-8.14(m,2H,ArH),7.62-7.61(m,1H,ArH),7.47-7.45(m,1H,ArH),7.21dd,J＝11.0Hz,J＝2.0Hz,1H,ArH),6.90(dd,J＝8.8Hz,J＝2.0Hz,2H,ArH),4.66(d,J＝10.8Hz,1H,CHaH),4.59(d,J＝10.8Hz,1H,CHHb),1.88(m,3H,CH3)；质谱：(ESI,positive)m/z522.0[M+H]⁺。

实施例21：化合物(S)-1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯胺基)-3-(4-氰基苯氧基)-2-甲基-1-氧丙烷基-2-甲基氨基甲酸酯的合成(C₂₂H₁₉F₃N₄O₄)

在100mL园底烧瓶中加入原料2.00克，无水DMF40mL作为溶剂。温度降至0度，加入氢化钠0.51克，搅拌2-3小时左右，再加入二甲氨甲酰氯1.11克。温度升至室温，搅拌，反应时间大约5-6小时左右。点层析板确定终点。薄层色谱法:二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1，有二个产物点，一主一付，无原料点。

反应停止后，抽干，得到油状物。硅胶柱层析(乙酸乙酯:己烷＝＝1:1)分离主产物，纯化，得到白色色粉未物质，哄干，称重，得1.28克，产率约为54.0％。

核磁共振谱：(500 MHz,DMSO-d₆)δ10.37(s,1H,NH),8.31(s,1H,ArH),8.17(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),8.11(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),7.78(d,J＝8.5Hz,2H,ArH),7.17(d,J＝8.5Hz,2H,ArH),4.59(d,J＝11.0Hz,1H,CHaH),4.46(d,J＝11.0Hz,1H,CHHb),2.89(s,3H,CH₃),2.75(s,3H,CH₃),1.70(s,3H,CH₃)；质谱：(ESI,positive)m/z 483.3[M+Na]⁺。

实施例22

本实施例对实施例1-21所得的化合物进行临床前合成代谢和雄激素药理学实验，研究对去势雄性大鼠性激素水平及附性器官重量的影响,及对去势雄性大鼠14天毒性试验。

22.1实验名称和实验目的

22.1.1实验名称

新的芳香丙酰胺类化合物对去势雄性大鼠性激素水平及附性器官重量的影响及对去势雄性大鼠14天毒性试验。

22.1.2实验目的

观察受试物EG-310(实施例1)、EG-311(实施例2)、EG-312(实施例3)、EG-313(实施例4)、EG-315(实施例5)、EG-316(实施例6)、EG-317(实施例7)、EG-318(实施例8)、EG-319(实施例9)、EG-320(实施例10)、EG-321(实施例11)、EG-322(实施例12)、EG-323(实施例13)、EG-324(实施例14)、EG-211(实施例16)、EG-216(实施例17)、EG-217(实施例20)、EG-012(实施例21)对去势雄性大鼠性激素水平及附性器官重量的影响。通过观察受试物对SD大鼠连续14天给药的毒性特征，预测可能引起的临床不良反应，推测EG类化合物重复给药的临床毒性靶器官或靶组织，预测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围，提示临床试验中需重点监测的指标，为临床试验中的解毒或解救措施提供参考信息。

22.2受试物的名称、稳定性及其他特性

22.2.1受试物名称

EG-310、EG-311、EG-312、EG-313、EG-315、EG-316、EG-317、EG-318、EG-319、EG-320、EG-321、EG-322、EG-323、EG-324、EG-211、EG-212、EG-217、EG-012。

22.2.2受试物保存条件

密闭，室温、阴凉处保存

22.2.3受试物配制

受试物溶媒的选择：0.5％CMC

受试物配制方法：研磨后加溶媒至所需浓度

受试物配制频率：一次配供两天使用

22.2.4实验动物的种、数量、性别、体重范围、来源、动物合格证号及签发单位和饲养条件

种属：SD大鼠

等级：SPF级

预定购入动物数量和性别：270只，雄性

预定使用动物数量和性别：192只，雄性

体重：实验开始时体重均数152～205g

来源：郑州大学动物中心。

实验动物生产许可证号：SCXK(豫)2010-0002

动物合格证号：41003100000907

饲养条件

饲养室：屏障环境

温度：20～24℃，日温差：0～4℃

相对湿度：40～66％

实验期间每天记录温度、相对湿度。

动物饲料、饮水和垫料的种类、来源、批号和质量情况

饲料

名称：维持鼠料

生产厂家：河南省实验动物中心提供

地址：郑州市大学路40号

许可证：SCXK(豫)2010-0002

灭菌方法：Co60照射

给料方法：足量供给，自由采食

参考标准：GB14924.3-2001

饲料检测：符合营养和卫生标准，农业部农产品质量监督检验测试中心(郑州)、河南省疾病预防控制中心、河南省实验动物质量监督检测站提供检测报告。

饮水

种类：无菌水

灭菌方法：自动对反渗透系统冲洗和在线循环消毒

使用LAWS-40T实验动物饮用水处理器供水

供水方法：装入饮水瓶中，自由摄取。

水质检测：符合卫生标准，国家城市供水水质监测网郑州监测站提供检测报告。

垫料

种类：优质刨花。

来源：河南省实验动物中心

垫料检测：符合卫生标准，河南省实验动物质量监督检测站提供检测报告。

22.3实验动物的分组和识别方法

22.3.1动物分组

本实验首先根据体重随机分为正常对照(8只)和去势大鼠(230只)两个大组，去势后，再将去势大鼠根据体重挑选出160只(淘汰体重过大或过小的大鼠)，随机分为阴性对照组、阳性药组、EG-310组、EG-311组、EG-312组、EG-313组、EG-315组、EG-316组、EG-317组、EG-318组、EG-319组、EG-320组、EG-321组、EG-322组、EG-323组、EG-324组、EG-211组、EG-212组、EG-217组、EG-012组，每组8只。分两批实施。

22.3.2动物识别方法

实验期间用饱和苦味酸溶液体染标记，每笼8只，分别为头、背、尾、头背、白、头背、头尾、头背尾(表示每笼第1、2、3、4、5、6、7、8只动物)。

22.4受试物和对照品的给药途径、剂量和频率

22.4.1给药途径

阳性药组经腹腔注射，其余各组均经口灌胃给药。

22.4.2给药剂量

正常对照组：0.5％CMC，给药容积为10mL·kg^-1d^-1。

模型对照组：0.5％CMC，给药容积为10mL·kg^-1d^-1。

阳性药组：丙酸睾酮注射液(厂家：上海通用药业股份有限公司，批号：130403)，7.5mg·kg^-1·d^-1，给药容积为1mL·kg^-1，配制药物浓度为0.75％。

受试物组(EG-N)：5mg·kg^-1·d^-1，给药容积为10mL·kg^-1，配制药物浓度为0.05％。

每周称两次体重，给药量根据最新体重计算。

22.4.3给药频率

阳性药组两天给药一次，其余各组每天给药一次。

22.5所使用的仪器

电子天平(上海精密科学仪器，JA1003N)、大鼠秤(上海友声衡器有限公司，ASC-A)、γ计数仪(郑州大学一附院代测)、1ml注射器、大鼠灌胃管等。

22.6实验方法及检测指标

22.6.1造模方法

将SD大鼠用浓度为3％戊巴比妥钠(美国Sigma公司，Lot：41K10136)，以0.2mL·100g-1剂量腹腔注射麻醉，常规消毒，在阴囊部位做2cm切口，分离双侧睾丸及附睾，在附睾头尾之间结扎后摘除睾丸，青霉素冲洗创口后逐层缝合皮肤，术后每只大鼠每天注射青霉素4×105d-1 U(华北制药股份有限公司，批号：F3092125)，连续3天。

22.6.2给药方法

术后第3天按拟定剂量开始给药，连续14天。

22.6.3一般状况观察

检测频率：给药期间每天观察。

观察指标：观察试验动物的大体反应、活动状况、毛色、粪便，记录动物的异常表现及死亡情况。

22.6.4体重测定

检测频率：给药期间每周测定两次体重(周一、周四)，剖检前先测定体重。

测定时间和方法：测定日(周一、周四)给药前，用电子秤称重记录。

使用仪器：衡新ACS系列电子秤，中山市衡新电子有限公司生产。

22.6.5检测指标

血清睾酮浓度、大鼠提肛肌、前列腺及精囊腺的重量；提肛肌、前列腺及精囊腺的脏器指数，计算方法为脏器指数＝脏器重/体重。

数据统计处理方法：数据使用表示，数据采用单因素方差分析(one-wayANOVA法检验)，组间用LSD法两两比较，检验水准α＝0.05。

22.7实验结果

22.7.1EG类化合物对大鼠体重、一般状态、睾酮、提肛肌、前列腺及精囊腺的影响

体重：由于去势手术的影响，各组大鼠各时间点体重均低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05；但从组内看，各组大鼠体重均呈缓慢上升的趋势。结果见表1和表2。

一般状态：在造模后的3天内，造模组大鼠运动次数减少、毛色较差、粪便较稀，在给药期间，各组大鼠的外观、行动、被毛、粪便等一般状况良好，未见明显与药物相关的毒性症状，与正常对照组比较无明显差异。

22.7.2EG类化合物对大鼠睾酮、提肛肌、前列腺、精囊腺的影响(结果见表3和表4)

睾酮：与正常对照组相比较，除阳性药组外各组大鼠睾酮值均低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05；与阴性对照组相比较，阳性药组睾酮值显著高于阴性对照组，P＜0.05，各受试物组睾酮值均处于较低水平，与阴性对照组无显著性差异。

提肛肌：与正常对照组相比较，阴性对照组大鼠提肛肌的器官指数低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05，阳性药组、EG-323组与EG-012组大鼠提肛肌的器官指数与正常对照组大小近似，EG-312组、EG-217组、EG-310组、EG-315组、EG-318组、EG-321组与EG-212组大鼠提肛肌的器官指数略高于正常对照组，但无显著差异，其余各受试物组(EG-311组、EG-313组、EG-316组、EG-317组、EG-319组、EG-320组、与EG-322组)与正常对照组比较，均高于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05；与阴性对照组相比较，各组大鼠提肛肌的器官指数均高于阴性对照组，差异有显著性，P＜0.05。

前列腺：与正常对照组相比较，阴性对照组、EG-312组、EG-323组及EG-217组大鼠前列腺器官指数均低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05，阳性药组与其余各受试物组与正常对照组无显著性差异；与阴性对照组相比较，EG-312组、EG-323组及EG-217组大鼠前列腺器官指数略高于阴性对照组，但无显著差异，阳性药组与其余各受试物组大鼠的前列腺器官指数高于阴性对照组，差异有显著性，P＜0.05。

精囊腺：与正常对照组相比较，EG-313组、EG-316组、EG-320组、EG-322组、EG-310组、EG-212组大鼠精囊腺器官指数与正常对照组大小近似，阴性对照组、EG-312组、EG-323组、EG-217组大鼠精囊腺器官指数低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05，EG-315组、EG-318组、EG-321组大鼠精囊腺器官指数高于正常对照组，但无显著差异，阳性药组、EG-317组、EG-319组、EG-311组大鼠精囊腺器官指数高于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05；与阴性对照组相比较，阳性药组及各受试物组大鼠精囊腺器官指数均高于阴性对照组，差异有显著性，P＜0.05。

22.7.3血液学指标的检测

检测指标：红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC)及其分类(中性粒细胞NEU、淋巴细胞LYM、单核细胞MON、嗜酸性粒细胞EOS、嗜碱性粒细胞BAS)、凝血酶原时间(PT)。

检测频率：给药结束后统一检测。

检测方法：测定前一日18时撤取饲料，禁食15小时，检测日麻醉动物、解剖，从腹主动脉取血：①血常规：取血2ml，加入EDTA-K2常规管中。②PT：取血1.8ml，加入3.28％枸椽酸钠血凝管中。

使用仪器：ABX-PENTRA-80全自动血液细胞分析仪检测，法国产；普利生C2000-4型血凝仪。

22.7.4血液生化学指标的检测

检测指标：天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(TBIL)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、肌酸磷酸激酶(CK)、钠离子浓度(Na)、钾离子浓度(K)、氯离子浓度(Cl)。

检测频率：给药结束后统一检测。

检测方法：测定前一日18时撤取饲料，禁食15小时，检测日麻醉动物、解剖，从腹主动脉取血(约5ml)，分离血清。

ALT(U/L)：连续监测法。

AST(U/L)：连续监测法。

ALP(U/L)：连续监测法。

TP(g/L)：双缩脲法。

ALB(g/L)：溴甲酚绿法。

TBIL(umol/L)：重氮法。

GLU(mmol/L)：葡萄糖氧化酶法。

TG(mmol/L)：酶比色法。

CHO(mmol/L)：酶比色法。

BUN(mmol/L)：酶两点动力法。

CRE(umol/L)：苦味酸法。

CK(U/L)：连续监测法。

K(mmol/L)：离子选择电极法。

Na(mmol/L)：离子选择电极法。

Cl(mmol/L)：离子选择电极法。

Ca(mmol/L)：离子选择电极(ISE)。

Nca(mmol/L)：离子选择电极法。

pH：离子选择电极法。

使用仪器：TDL80-2B低速台式离心机，上海安亭科学仪器总厂生产；BT－2000PLUS生化分析仪，意大利产；DSI 905电解质分析仪，上海迅达医疗仪器有限公司生产。

22.8结论

一般状况：在去势手术后可见去势组大鼠行动减少、被毛无光泽、粪便较稀，应与去势手术相关；给药期间各用药组大鼠的外观、行动、被毛、粪便等一般状况良好，未见明显与药物相关的毒性症状，与正常对照组比较无明显差异。

在给药第1、4天时，由于去势手术的影响，各组大鼠体重均低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05；随后的给药过程中，各组大鼠与正常对照组间体重差异逐渐降低，解剖当天，各受试物组与正常对照组无显著差异，模型组与阳性药组仍均有显著性差异。去势大鼠组别间各时间点均无显著性差异。从组内看，各组大鼠体重均呈缓慢上升的趋势。结果见表1和表2。

血液学检查：14天时，阴性对照组雄性大鼠RBC、HGB测定值降低，与正常对照组相比P＜0.05；除EG-316组、EG-311组外，其余各组这两项指标均高于阴性对照组P＜0.05。其余各项血液学检测指标各组件均无差异，P>0.05。结果见表5和表6。

血液生化学检查：各组间血液生化指标均无差异，P>0.05。结果见表7和表8。

在本实验室条件下，在受试物组与正常对照、阴性对照及阳性对照组的比较中，可以看到受试物对三个附性器官指数的比较中，都显著高于阴性对照组，但各受试物均不能提高去势雄性大鼠的性激素水平。EG-310、EG-311、EG-313、EG-315、EG-316、EG-317、EG-318、EG-319、EG-320、EG-321、EG-322、EG-212、EG-012能显著提高去势雄性大鼠提肛肌、前列腺、精囊腺的器官指数。EG-311组、EG-313组、EG-316组、EG-317组、EG-319组、EG-320组、与EG-322组大鼠提肛肌的器官指数，均高于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05。与正常对照组相比较，EG-312组、EG-323组、与EG-217组受试物组能显著提高去势雄性大鼠提肛肌、但前列腺和精囊腺的器官指数均低于正常对照组，差异有显著性，P＜0.05。说明受试物EG-312、EG-323、与EG-217能选择性得提高去势雄性大鼠的提肛肌、但不影响前列腺、精囊腺的器官指数。大鼠的睾酮均处于较低水平，却能提高去势雄性大鼠的提肛肌、前列腺、精囊腺的器官指数，说明这些受试物并不具有激素样作用，可能具有同化激素样作用。

用本发明中新的芳香丙酰胺化合物给去势SD大鼠连续灌胃14天，各用药组动物一般状况良好，体重、血液学、血液生化学检测，与正常对照组相比均无显著性差异，试验组动物组织器官未出现与药物相关的毒性反应。表明本发明中新的芳香丙酰胺化合物在该剂量条件下对去势SD大鼠无明显蓄积性毒性反应。由于趋势手术过程中失血，14天时阴性对照组雄性大鼠RBC、HGB测定值低于正常对照组，各给药组除阳性药组外，这两项指标均高于阴性对照组，表明本发明中新的芳香丙酰胺化合物可能能够增加失血性大鼠红细胞总数及血红蛋白含量。

在本实验中，阴性对照组与正常对照组各项指标均有显著性差异，说明通过摘除双侧睾丸所建立的模型是成功的。通过改变阳性药的给药途径及加大剂量，阳性药的药效开始显现，阳性对照组与阴性对照组相比较，各指标均出现显著性差异，说明在阳性药的吸收问题得到解决。由于提供的受试物EG-211、EG-324量较少，经过计算，EG-211仅供3只大鼠14天的药量，EG-324仅供2只大鼠14天的药量，故仅列出实验结果未加统计分析。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims

1.一类芳香丙酰胺类化合物，其特征在于，它是具有如下化学结构式的化合物：

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