CN104147031A - 一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物，该药物组合物中活性成分由秦皮甲素和环磷酰胺组成。秦皮甲素和环磷酰胺联用后不仅具有协同抗肿瘤效果，而且降低了环磷酰胺在免疫抑制方面的毒副作用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体而言，涉及一种抗肿瘤药物，尤其涉及一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物。
背景技术
目前，肿瘤是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。肿瘤与心脑血管疾病和意外事故一起，构成当今世界所有国家三大死亡原因。因此，世界卫生组织和各国政府卫生部门都把攻克肿瘤列为一项首要任务。世界上治疗肿瘤的方法主要有三种，一是采用手术切除法，切除病变组织，防止肿瘤细胞扩散；而是采用化疗或放疗，以杀死肿瘤细胞；三是用药物治疗。采用手术切除的方法增加了病人的痛苦，伤其元气，费用巨大。用放疗的方法，在杀死肿瘤细胞的同时，也伤及红细胞和白细胞，病人苦不堪言。
研究表明，肿瘤患者存在不同程度的免疫功能低下。因此，增强机体免疫功能是治疗肿瘤重要的目标之一。目前在抗肿瘤药物筛选中，除着重研究对肿瘤细胞有直接抑制或杀伤作用的药物外，还应重视可增强机体的防御功能，并可阻止肿瘤生长和扩散的药物。
秦皮为常用的中药，系木犀科植物白蜡树Fraxinus chinensis Roxb等五种植物的干燥枝皮或树干皮，是我国一味常用中药，始载于汉代的药学专著《神农本草经》，历代本草均有记载。秦皮具有清热燥湿、收涩、明目之功效，常用于治疗热痢、泄泻、赤白带下、目赤肿痛、目生翳膜等症。现代药理研究表明，秦皮具有抗炎镇痛、降低尿血酸、抗凝、止咳祛痰平喘以及抗肿瘤作用，主要用于治疗肠炎、痢疾、白带、慢性气管炎、结膜炎，用于治疗痛风效果甚佳。正品秦皮中主要成分为香豆素类(秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素、宿柱白蜡苷、6，7-二甲氧基香豆素等)，此外还有芬类、皂苷和鞣质等，其中秦皮甲素、秦皮乙素是治疗气管炎和菌痢疾患的有效成份。环磷酰胺为临床常用的广谱抗肿瘤药物，由于其对免疫系统的毒副作用较强使其临床应用受到了一定的限制。
目前，尚没有秦皮甲素具有减轻环磷酰胺所致的免疫抑制的文献报道。
发明内容
为了发挥环磷酰胺的抗肿瘤功效，同时降低其毒副作用，本发明人创造性地降低环磷酰胺的用量，并将其与秦皮甲素联合应用，意外发现二者用药后不仅具有协同增效的抗肿瘤效果，而且秦皮甲素具有减轻环磷酰胺所致的免疫抑制的功效。
基于此研究，本发明的目的在于提供一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物。具体地，本发明的目的是这样实现的：
一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物，其中所述的药物组合物中活性成分由秦皮甲素和环磷酰胺组成。
优选地，如上所述的抗肿瘤药物组合物，其中所述的活性成分中秦皮甲素和环磷酰胺的重量用量比为0.5-5：1。
进一步优选地，如上所述的抗肿瘤药物组合物，其中所述的活性成分中秦皮甲素和环磷酰胺的重量用量比为1-2：1。
本发明所述的抗肿瘤药物组合物通过注射给药后即可发挥药效，因此将其制备为注射剂，所述的注射剂包括注射液、冻干粉针剂。
以秦皮甲素和低剂量的环磷酰胺为研究对象，腋下接种H22肉瘤的昆明种小鼠为载体，腹腔注射给药，结果发现二者联用后不仅具有协同抗肿瘤效果，而且降低了环磷酰胺在免疫抑制方面的毒副作用。因此，本发明还提供一种制药用途，即：秦皮甲素和环磷酰胺组成的活性成分在制备抗肿瘤的药物中的应用；以及：秦皮甲素在制备减轻环磷酰胺所致免疫抑制的药物中的应用。
与现有技术相比，本发明涉及的药物组合物具有如下优点和显著进步：秦皮甲素和环磷酰胺联用后具有协同抗肿瘤效果，以及提高肿瘤患者免疫功能的效果，同时，秦皮甲素为天然提取产物，毒性非常小，副作用和不良反应率低；环磷酰胺用量仅仅为常规用量的二分之一，因此费用、副作用和不良反应率也较低。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于该实施例。
实施例1 秦皮甲素联合环磷酰胺对H22荷瘤小鼠的影响试验
SPF级健康KM种小鼠50只，18～22 g，雌雄各半。所有小鼠适应性喂养1周，随机取出10只作为正常对照组，其余小鼠接种腹腔传代7d的小鼠H22肿瘤细胞，复制小鼠实体瘤模型。无菌环境取小鼠腹腔内传代7d的瘤细胞，0.9％氯化钠溶液洗涤、离心2次，计数并调至1×107个/mL，接种于小鼠右前肢腋皮下，每只接种细胞2×106个。正常组小鼠注射0.9％氯化钠溶液0.2mL。模型小鼠接种肿瘤细胞24h后，按体质量随机分成如下四组：模型对照组、秦皮甲素组、环磷酰胺组、联合用药组，每组10只，雌、雄各半。从接种第2天开始，腹腔注射给药，各组的受试物和剂量如下：
正常对照组：等体积0.9％氯化钠溶液；
模型对照组：等体积0.9％氯化钠溶液；
秦皮甲素组：50mg／(kg·d) 秦皮甲素；
环磷酰胺组：25mg／(kg·d) 环磷酰胺；
联合用药组：25mg／(kg·d) 秦皮甲素+12.5mg／(kg·d) 环磷酰胺。
隔日给药1次，连续给药14d，停药次日处死动物，解剖皮下瘤块，剥离瘤组织，分别称取每只小鼠瘤块重，计算肿瘤生长抑制率。抑瘤率= (模型对照组平均瘤质量- 给药组平均瘤质量)／模型对照组平均瘤质量×100％。
通过表1的试验结果可以看出，与模型对照组比较，环磷酰胺组和联合用药组对肿瘤细胞生长均有显著的抑制作用，且各组差异有统计学意义(P＜0.01）；秦皮甲素组小鼠肿瘤生长受到一定抑制，但与模型对照组没有统计学差异。与各单药组（秦皮甲素组、环磷酰胺组）相比，联合用药组的抑瘤率差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01）。这些试验结果预示着，秦皮甲素联合环磷酰胺具有抑制H22肿瘤生长的协同作用。
表1 秦皮甲素联合环磷酰胺对H22荷瘤小鼠瘤重的影响
| 组别 | n | 瘤质量（g） | 抑制率（%） |
| 模型对照组 | 10 | 3.22±0.46 | - |
| 秦皮甲素组 | 10 | 2.96±0.51 | 8.07 |
| 环磷酰胺组 | 10 | 2.15±0.33★★ | 33.23 |
| 联合用药组 | 10 | 1.59±0.40★★▼▼● | 50.62 |
与模型对照组比较，★ P＜0.05，★★ P＜0.01；与秦皮甲素组比较，▼ P＜0.05，▼▼ P＜0.01；与环磷酰胺组比较，● P＜0.05，●● P＜0.01。
实施例2 秦皮甲素对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响试验研究
SPF级健康KM种小鼠30只，18～22 g，雌雄各半。所有小鼠适应性喂养1周，随机取出6只作为正常对照组，其余小鼠接种腹腔传代7d的小鼠H22肿瘤细胞，复制小鼠实体瘤模型。无菌环境取小鼠腹腔内传代7d的瘤细胞，0.9％氯化钠溶液洗涤、离心2次，计数并调至1×107个/mL，接种于小鼠右前肢腋皮下，每只接种细胞2×106个。正常组小鼠注射0.9％氯化钠溶液0.2mL。模型小鼠接种肿瘤细胞24h后，按体质量随机分成如下四组：模型对照组、秦皮甲素组、环磷酰胺组、联合用药组，每组6只，雌、雄各半。从接种第2天开始，腹腔注射给药，各组的受试物和剂量如下：
正常对照组：等体积0.9％氯化钠溶液；
模型对照组：等体积0.9％氯化钠溶液；
秦皮甲素组：50mg／(kg·d) 秦皮甲素；
环磷酰胺组：25mg／(kg·d) 环磷酰胺；
联合用药组：25mg／(kg·d) 秦皮甲素+25mg／(kg·d) 环磷酰胺。
各组均每天给药一次，连续7d，末次给药后30min，每组小鼠自眼眶取血，脱颈椎处死，无菌操作，取出脾脏，称单细胞悬液，按常规噻唑蓝(MTT)法测脾淋巴细胞转化功能。
通过表2的试验结果可以看出，环磷酰胺能明显抑制荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化功能，而秦皮甲素可增强淋巴细胞转化功能，当秦皮甲素与环磷酰胺联用后能明显改善环磷酰胺所致淋巴细胞转化功能抑制。
表2 各组小鼠淋巴细胞转化功能测定结果
| 组别 | n | 脾淋巴细胞转化功能 |
| 正常对照组 | 6 | 0.204±0.016●● |
| 模型对照组 | 6 | 0.193±0.029●● |
| 秦皮甲素组 | 6 | 0.285±0.042●●★★ |
| 环磷酰胺组 | 6 | 0.129±0.017 |
| 联合用药组 | 6 | 0.227±0.022●●★ |
与模型对照组比较，★ P＜0.05，★★ P＜0.01；
与环磷酰胺组比较，● P＜0.05，●● P＜0.01。
Claims (6)
1.一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物中活性成分由秦皮甲素和环磷酰胺组成。
2.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述的活性成分中秦皮甲素和环磷酰胺的重量用量比为0.5-5：1。
3.根据权利要求2所述的抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述的活性成分中秦皮甲素和环磷酰胺的重量用量比为1-2：1。
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗肿瘤药物组合物，其特征在于： 所述的药物组合物为注射剂，所述的注射剂包括注射液、冻干粉针剂。
5.秦皮甲素和环磷酰胺组成的活性成分在制备抗肿瘤的药物中的应用。
6.秦皮甲素在制备减轻环磷酰胺所致免疫抑制的药物中的应用。
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