CN104130254B - 一种减少未知杂质的鞣酸小檗碱合成工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种简单并可减少未知杂质的鞣酸小檗碱合成工艺。本工艺在合成工艺中通入氮气或在反应体系中加入抗氧化剂如维生素C、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等，可以降低未知杂质含量；同时该工艺相较经典工艺，缩短了反应时间，降低了生产成本，提高了产品中鞣酸小檗碱含量及收率，产品纯度检查及含量测定均符合规定。
Description
技术领域
本发明涉及一种鞣酸小檗碱合成方法，特别是涉及一种可以降低未知杂质含量的鞣酸小檗碱合成工艺，属于医药原料药合成技术领域。
背景技术
鞣酸小檗碱常用于治疗肠道细菌感染性疾病，随着临床上进一步的研究，近年来发现其对宫颈糜烂、急慢性咽炎、心律失常、高血压、血小板聚集、糖尿病、高脂血症、消化性溃疡、胆囊炎等疾病的治疗也均有满意的疗效。因其无味，改变了盐酸小檗碱口服味极苦的缺点，更易为儿童及老年人接受。其应用前景十分广阔。但其合成过程中易产生杂质，经典工艺合成产生的未知杂质大于0.1%，不符合要求，且合成过程中需降温四次，耗能较大。
刘文江等人在《鞣酸小檗碱的制备工艺改进》一文中对鞣酸小檗碱合成工艺进行了研究，取360g溶于1L热水中，过滤，用0.9mol/L碳酸钠调pH至8，加热至75℃时，缓缓加入100g/L鞣酸溶液使pH为7，搅拌20min，生成鞣酸小檗碱固体沉淀，搅拌后陈化、过滤，固体用蒸馏水洗至用0.06mol/L三氯化铁试液检查无蓝色反应为止，固体于60℃下干燥。本文所筛选出制备工艺仅仅适合实验室阶段，产量太少，无法满足市场需求，同时该工艺所得鞣酸小檗碱含量及收率均有待提高。
王其宇在《无味黄连素合成的工艺条件研究》中简述了无味黄连素（即鞣酸小檗碱）合成工艺，于5000ml反应瓶中将3000ml水加热至50℃，于搅拌下一次加入盐酸黄连素60g，升温至80~85℃，待盐酸黄连素全溶后，冷却至70℃，缓慢流加10%碳酸钠溶液进行中和，中和完毕pH应在7~8之间，继续搅拌10min，降温至60℃开始流加15%鞣酸溶液，使无味黄连素析出，加毕，50~60℃持续30min，降温至30℃以下，并用水洗涤至氯化物合格和0.06mol/L三氯化铁溶液检查无蓝色为止，滤饼破碎后于60℃以下干燥。本文所筛选出制备工艺步骤繁琐，所需能耗较高，所获得产品中检测出未知杂质较高，同时该工艺所得鞣酸小檗碱含量及收率均有待提高。
专利（申请号：200610095288.0）公开了8-辛基小檗碱盐酸盐、合成方法及应用，当中简述了8-辛基小檗碱盐酸盐的合成方法，称取0.1mol的干燥盐酸小檗碱置于500ml三颈烧瓶中，加入100ml无水四氢呋喃，使成盐酸小檗碱混悬液后在氮气保护下冰浴到-10℃，在氮气和冰浴保护下，将格氏试剂缓慢加入到小檗碱混悬液，搅拌，加完以后去除冰浴，使回到室温，加热回流2h后反应完毕，将反应液离心，取上清液后，再加入四氢呋喃提取，反复多次，用薄层法监测反应产物的提取情况，至原料点很小为止。离心上清液真空浓缩成固体后用甲醇结晶，即得。本合成方法是在氮气及冰浴的保护下进行，但该工艺过于复杂，所花费时间长，耗能高，生产成本过于大，不适合用于工业化生产鞣酸小檗碱。
目前，经典工艺如下：于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至50℃，搅拌下一次性加入盐酸小檗碱6g，升温至80~85℃使盐酸小檗碱溶解完全；冷却至70℃，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，继续搅拌10min；降温至60℃，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，析出鞣酸小檗碱，加毕，50~60℃持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌60min；降温至30℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，在60℃下干燥至水分至3%以下。
然而鞣酸小檗碱经典工艺合成产生的未知杂质大于0.1%（见附图2：经典工艺所得产品高效液相色谱图），不符合要求，且合成过程中需降温四次（见附图1：现有技术与本发明时间温度比对图），耗能较大，工艺所得鞣酸小檗碱含量及收率均有待提高。因此急需一种可以减少未知杂质、合成过程简单、耗能较低并且适合工业化生产的鞣酸小檗碱的合成工艺。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种鞣酸小檗碱新合成工艺。
为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：
一种鞣酸小檗碱的合成工艺，该方法具体步骤如下：
第一步：于反应瓶中加入纯化水加热，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱；
第二步：通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温使盐酸小檗碱溶解完全；
第三步：缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；
第四步：缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；
第五步：降温，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，干燥。
所选的抗氧化剂可以为1~2%抗氧化剂维生素C、1~2%抗氧化剂焦亚硫酸钠或1~2%抗氧化剂亚硫酸钠。
优选地，鞣酸小檗碱的合成工艺，于反应瓶中加入纯化水加热至58~62℃，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱，同时通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温至70~80℃使盐酸小檗碱溶解完全；缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；降温至15~25℃，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，在45℃~65℃下干燥。
更优选地，鞣酸小檗碱的合成工艺，于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至60℃，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱6g，同时通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全；缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；降温至20℃，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，在50℃~60℃下干燥。
本发明优点在于制备方法简单，在合成工艺中通入氮气或在反应体系中加入抗氧化剂如维生素C、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等，可以降低未知杂质含量；同时该工艺相较经典工艺，缩短了反应时间，降低了生产成本，提高了产品中鞣酸小檗碱含量及收率，产品纯度检查及含量测定均符合规定。
附图说明
附图1：现有技术与本发明时间温度比对图
附图2：经典工艺所得产品高效液相色谱图
附图3：通氮气工艺所得产品高效液相色谱图
附图4：加入1～2%维生素C工艺所得产品高效液相色谱图
附图5：加入1～2%焦亚硫酸钠工艺所得产品高效液相色谱图
附图6：加入1～2%亚硫酸钠工艺所得产品高效液相色谱图。
具体实施例
以下典型反应用来举例说明本发明，在本领域内的技术人员对本发明所做的简单替换或改进均属于本发明所保护的技术方案之内。
实施例1：通氮气工艺1
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至60℃，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g同时通入氮气保护，并升温至80℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，关闭氮气，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分3%以下，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例2：通氮气工艺2
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至58℃，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g同时通入氮气保护，并升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，关闭氮气，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分3%以下，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例3：通氮气工艺3
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至62℃，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g同时通入氮气保护，并升温至70℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出,加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，关闭氮气，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分3%以下，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例4：加1～2%维生素C工艺1
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至60℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂维生素C（按加入鞣酸的重量计），同时升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例5：加1～2%维生素C工艺2
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至58℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂维生素C（按加入鞣酸的重量计），同时升温至80℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例6：加1～2%维生素C工艺3
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至62℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂维生素C（按加入鞣酸的重量计），同时升温至70℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例7：加入1～2%焦亚硫酸钠工艺1
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至60℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂焦亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至70℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例8：加入1～2%焦亚硫酸钠工艺2
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至58℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂焦亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例9：加入1～2%焦亚硫酸钠工艺3
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至62℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂焦亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至80℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例10：加入1～2%亚硫酸钠工艺1
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至60℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g并加入1～2%抗氧化剂亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至80℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于50℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例11：加入1～2%亚硫酸钠工艺2
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至58℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至70℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于50℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例12：加入1～2%亚硫酸钠工艺3
于500ml反应瓶中加入330ml纯化水加热至62℃以上，搅拌，一次加入盐酸小檗碱6g，并加入1～2%抗氧化剂亚硫酸钠（按加入鞣酸的重量计），同时升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加10%碳酸钠溶液11.87g中和，中和完继续搅拌10min后，缓慢流加15%鞣酸溶液163.5g，使鞣酸小檗碱析出。加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min，降温至20℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于50℃干燥至水分在3%以下。所得样品经高效液相色谱法检测，所得样品经高效液相色谱法检测，测定相关未知杂质、已知杂质、鞣酸小檗碱含量以及计算收率。
实施例13：现有技术与本发明工艺时间比较
分析现有技术工艺与本发明工艺可知，本发明技术工艺相较现有技术耗时较短，工艺简单（见附图1现有技术与本发明时间温度比对图）。
经典工艺与无味黄连素合成工艺均先将纯化水加热至50℃，加入盐酸小檗碱，升温至80~85℃使盐酸小檗碱溶解完全；冷却至70℃，缓慢流加碳酸钠溶液，继续搅拌10min；降温至60℃，缓慢流加鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，50~60℃持续搅拌60min（无味黄连素合成工艺搅拌30min）；降温至30℃，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，在60℃下干燥至水分至3%以下。即先后升温2次，降温4次，最后升温干燥。
本发明工艺将纯化水加热至60℃，加入盐酸小檗碱同时通入氮气保护（或加入抗氧化剂如1~2%维生素C、1~2%焦亚硫酸钠及1~2%亚硫酸钠），升温至80℃使盐酸小檗碱溶解完全后，缓慢流加碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min后，缓慢流加鞣酸溶液，使鞣酸小檗碱析出，加毕，持续搅拌30min，降温至20℃以下，关闭氮气，离心机甩干，所得固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，于60℃干燥至水分在3%以下。即先后升温2次，降温2次，最后升温干燥。
综上所述，本发明工艺相较现有技术简单；并且时间比经典工艺缩短约50min，比无味黄连素合成工艺缩短约10min。
实施例14：经典工艺与本发明工艺收率比较
经典工艺与本发明工艺所得收率如下表，增加百分率（%）=（本发明工艺收率-经典工艺收率）/经典工艺收率×100%。
表1经典工艺与本发明工艺收率比较表
由上表可知，本发明工艺所得产品收率高于经典工艺产品收率。
实施例15：减少未知杂质
经典工艺与本发明工艺后鞣酸小檗碱含量及各杂质如下表2，各工艺高效液相色谱图见附图2~6。
表2经典工艺与本发明工艺所得鞣酸小檗碱含量及各杂质比较表
上表及附图2~6可知，经典工艺所得产品经高效液相色谱法检测出一个大于0.1%的未知杂质，而本发明通过通入氮气或者加入抗氧化剂显著降低了所得产品中未知杂质的含量；同时在此基础上提高了鞣酸小檗碱的含量，由此本发明工艺所得产品优于经典工艺所得产品。
实施例16：不同合成工艺得鞣酸小檗碱对实验性大鼠溃疡性结肠炎的作用
1.试验材料：经典工艺所得药物A、本发明工艺所得药物B。
2.试验动物：Wistar大鼠160只，体重200±20g，雌性。试验大鼠饲养于塑料饲育盒内，饲料喂全价纯鼠饲料。饮水为自来水，饲料和饮水均不限量，按常规给予喂养（室温18-22℃，相对湿度55-70%）。
3.试验方法：将Wistar大鼠禁食16个小时，10%水合氯醛麻醉，腹部消毒，开腹，聚回盲端约4cm处结肠用消毒过的动脉夹夹住，结肠内注入7%的乙酸1.0ml，15秒后用5ml生理盐水冲洗，缝合腹部。于第二天随机分组，每组20只，分别为药物A高、中、低剂量给药组，药物B高、中、低剂量给药组，柳氮磺吡啶模型（SASP）组及对照组（给予生理盐水）。给药方式选择肛门给药。给药体积：1.0ml/200mg。以上各组每日给药一次，连续给药7天，实验完毕后处死大鼠，观察距肛门6~8cm处结肠的损伤程度，并取其中0.5cm病变肠组织以4%甲醛固定，常规石蜡切片，HE染色和光镜检查。
4．结肠粘膜损伤指数（CMDI）和病理组织学评分（HS）标准
1）结肠粘膜损伤指数（CMDI）
0分：无损伤；
1分：轻度充血、水肿，表面光滑，无糜烂或溃疡；
2分：充血水肿，粘膜粗燥呈颗粒感，有糜烂或肠粘连；
3分：高度充血水肿，表面有坏死及溃疡形成，溃疡最大纵经＜1cm，肠壁增厚或表面有坏死及炎症；
4分：高度充血水肿，粘膜坏死及溃疡形成，溃疡最大纵经＞1cm，或全壁肠坏死、中毒性巨结肠导致死亡。
2）病理组织学评分标准（HS）
急性炎细胞浸润0分：无；1分：轻度增加；2分：显著增加
慢性炎细胞浸润0分：无；1分：轻度增加；2分：显著增加
纤维蛋白沉淀0分：无；1分：有
粘膜下水肿0分：无；1分：片状；2分：融合状
上皮坏死0分：无；1分：局限性；2分：广泛
上皮溃疡0分：无；1分：有
5.数据处理
实验结果采用SPSS18.0统计软件进行统计学处理，数据用±S表示；多组间比较，方差齐则用方差分析，方差不齐则用非参数检验，P＜0.05时有显著性差异。
6.试验结果
表3不同合成工艺所得鞣酸小檗碱对试验大鼠溃疡性结肠炎的作用
| 组别 | 剂量(mg/kg) | CMDI | HS |
| 对照组 | —— | 3.18±0.71 | 4.15±0.81 |
| 模型组 | 100 | 1.50±0.87★ | 3.15±0.54★ |
| A低剂量 | 50 | 2.84±0.98 | 3.87±1.05 |
| B低剂量 | 50 | 2.61±0.87 | 3.75±1.23 |
| A中剂量 | 150 | 1.98±0.65★ | 3.34±1.02★ |
| B中剂量 | 150 | 1.34±0.75★ | 2.26±0.98★ |
| A高剂量 | 300 | 1.74±0.68★ | 3.15±1.05★ |
| B高剂量 | 300 | 0.53±0.05★● | 1.56±0.54★● |
注：★代表各给药组与对照组相比，P＜0.05，●表示药物B的高剂量组与药物A的高剂量组相比，P＜0.05。
由表3结果可见，大鼠经过乙酸处理后会出现粪便性状改变，表现为粘膜高度充血水肿，表面有坏死及溃疡形成，部分动物甚至发生中毒性巨结肠导致死亡。粘膜病理改变表现为粘膜及粘膜下层明显水肿、纤维蛋白沉淀、中性粒细胞浸润，严重时出现上皮坏死和溃疡。鞣酸小檗碱肛门给药可剂量依赖性地减轻乙酸性结肠炎大鼠CMDI程度，有改善大鼠结肠粘膜病理损伤作用。模型组、药物A中剂量组、药物A高剂量组、药物B中剂量组、药物B高剂量组与对照组相比，均具有显著性差异（P＜0.05）；其中，药物B高剂量组所测的结肠粘膜损伤指数和病理组织学评分，均比药物A高剂量组低，并且具有显著性差异（P＜0.05）。说明采用本发明所得鞣酸小檗碱对试验大鼠溃疡性结肠炎的作用比经典工艺所得鞣酸小檗碱疗效更佳，即说明本发明工艺所得药物B优于经典工艺所得药物A。
Claims (4)
1.一种鞣酸小檗碱的合成工艺，该方法具体步骤如下：
于反应瓶中加入纯化水加热，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱；
通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温使盐酸小檗碱溶解完全；
缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；
缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；
降温，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现，干燥。
2.根据权利要求1所述鞣酸小檗碱的合成工艺，其特征在于抗氧化剂可以选择1~2%抗氧化剂维生素C、1~2%抗氧化剂焦亚硫酸钠或1~2%抗氧化剂亚硫酸钠。
3.根据权利要求1所述鞣酸小檗碱的合成工艺，其特征在于，于反应瓶中加入纯化水加热至58~62℃，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱，同时通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温至70~80℃使盐酸小檗碱溶解完全；缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；降温至15~25℃，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现为止，在45℃~65℃下干燥。
4.根据权利要求1所述鞣酸小檗碱的合成工艺，其特征在于，于500mL反应瓶中加入330mL纯化水加热至60℃，搅拌，一次性加入盐酸小檗碱6g，同时通入氮气保护或者加入抗氧化剂，升温至75℃使盐酸小檗碱溶解完全；缓慢流加10%碳酸钠溶液中和，继续搅拌10min；缓慢流加15%鞣酸溶液，析出鞣酸小檗碱，加毕，持续搅拌，从开始加鞣酸溶液算起共搅拌30min；降温至20℃，关闭氮气，离心机甩干，固体用纯化水洗涤至用三氯化铁溶液检查无蓝黑色出现为止，在50℃~60℃下干燥。
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Non-Patent Citations (3)
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| Berberine and its derivatives: a patent review (2009-2012);Singh IP et al.;《Expert Opinion on Therapeutic Patents》;20131231;第23卷(第2期);第215-231页 * |
| 无味黄连素合成的工艺条件研究;王其宇;《安徽化工》;20011231(第4期);第16-17页 * |
| 鞣酸小檗碱的制备工艺改进;刘文江等;《中国医药工业杂志》;19981231;第29卷(第6期);第252、260页 * |
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