CN104101716A - 一种羊棘球蚴elisa抗体检测试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，所述检测试剂盒包括羊棘球蚴重组抗原Eg95预包被酶标板、样品稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；所述羊棘球蚴重组抗原Eg95是通过以下方法制备的：首先PCR扩增EG95基因片段，然后采用EcoRI和XhoI同时酶切PCR产物和原核表达载体pET-32a，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pET-EG95，将重组质粒转化到大肠杆菌，经IPTG诱导表达，经Ni-NTA纯化。本发明以重组蛋白Eg95为抗原来检测羊棘球蚴病抗体，该抗体检测试剂盒特异性强、灵敏度高、试剂盒稳定性好。

Description

一种羊棘球蚴 ELISA 抗体检测试剂盒
技术领域
本发明属于基因工程技术和诊断试剂领域，具体涉及一种羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒。
背景技术
棘球蚴病又称包虫病，是由寄生于犬、狼、狐狸等动物小肠的细粒棘球绦虫中绦期—棘球蚴感染中间宿主而引起的一种严重的人兽共患病。棘球蚴寄生于、羊、猪、马、骆驼等家畜及多种野生动物和人的肝、肺及其他器官内。由于蚴体生长力强，体积大，不仅压迫周围组织使之萎缩和功能障碍，还易造成继发感染，如蚴体破裂，还可引起过敏反应，往往给人畜造成严重的病症，甚至死亡。
1996年Lightowler等研制成功抗细粒棘球绦虫虫卵感染的基因工程重组抗原疫苗—Eg95疫苗，为包虫病的免疫预防带来新的希望。初步的动物实验表现了不错的抗感染能力(96%～98%)，Eg95疫苗由此也被认为是最有前途的抗细粒棘球绦虫疫苗。经过多年的发展，EG95重组蛋白疫苗作为目前控制棘球蚴病唯一的疫苗，完全能够用于动物的免疫预防，且已实现商品化生产。但目前尚无简单有效、特异性、敏感性强的免疫学检测试剂盒，以评价疫苗的免疫效果、促进EG95重组蛋白疫苗的应用。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，能够用于羊棘球蚴病抗体的定性检测，具有特异性好、灵敏度高、重复性好的优点。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明公开了一种羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，所述检测试剂盒包括羊棘球蚴重组抗原Eg95预包被酶标板、样品稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。
进一步，所述羊棘球蚴重组抗原Eg95是通过以下方法制备的：首先PCR扩增EG95基因片段，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和原核表达载体pET-32a，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pET-EG95，将重组质粒转化到大肠杆菌，经IPTG诱导表达，经Ni-NTA纯化。
进一步，所述抗原包被的方法为：将纯化的重组蛋白Eg95用pH9.6的碳酸盐缓冲液稀释至10µg/ml，包被酶标板，每孔100µl，4℃过夜，用洗涤液洗5次，每次3min；加入含5% wt.脱脂奶粉的PBS封闭液，每孔200µl，37℃孵育2h，随后用洗涤液洗5次，每次3min，真空包装后置于4℃保存备用。
进一步，所述样品稀释液为含5%wt.BSA和0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液。
进一步，所述阴性对照液为健康未免疫棘球蚴疫苗的羊血清，所述阳性对照液为含有Eg95抗体的羊血清。
进一步，所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的兔抗山羊IgG酶标抗体。
进一步，所述洗涤液为含0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液。
进一步，所述底物显色液包括溶液A和溶液B，溶液A的配方为：每500ml加醋酸钠13.6g、柠檬酸1.6g和30%双氧水0.3ml，溶液B的配方为：每500ml加乙二胺四乙酸二钠0.2g、柠檬酸0.95g、甘油50ml和TMB粉末0.15g。
进一步，所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。
本发明的有益效果在于：本发明以重组蛋白Eg95为抗原来检测羊棘球蚴病抗体，经试验证明，该抗体检测试剂盒特异性强、灵敏度高、试剂盒稳定性好，可用于羊棘球蚴病抗体的定性检测。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1： 棘球蚴重组蛋白Eg95表达的SDS-PAGE分析结果。1.蛋白Marker；2-7.重组蛋白Eg95；
图2：棘球蚴重组蛋白Eg95表达的Western blotting分析结果。1.蛋白Marker；2.阴性对照；3.重组蛋白Eg95；
图3：棘球蚴重组蛋白Eg95纯化结果。1.蛋白Marker；2-11重组蛋白Eg95；
图4：羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒的灵敏性试验结果。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的描述。
实施例 1 ：羊棘球蚴 ELISA 抗体检测试剂盒的制备
羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒包括羊棘球蚴重组抗原Eg95预包被酶标板、样品稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。
羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒的制备方法为：
1. 羊棘球蚴重组抗原Eg95的表达与纯化：首先PCR扩增EG95基因片段，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和原核表达载体pET-32a，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pET-EG95。将酶切鉴定和测序鉴定成功的重组质粒转化到大肠杆菌BL21，筛选阳性菌落并接入含Amp的LB液体培养基，IPTG诱导后，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析，在约35kDa处出现特异性条带，与预期一致。重组菌裂解后，10000rpm离心5min，分别取上清和沉淀进行SDS-PAGE电泳，结果显示目的蛋白主要以不溶性形式表达（图1）。经Western blotting分析，表达产物能与羊棘球蚴(包虫)阳性血清反应（图2）。重组蛋白经Ni-NTA纯化后，纯度达90%以上（图3）。
2. 抗原包被：将纯化的重组蛋白Eg95用pH9.6的碳酸盐缓冲液稀释至10µg/ml，包被96孔酶标板，每孔100µl，4℃过夜，用洗涤液洗5次，每次3min；加入含5% wt.脱脂奶粉的PBS封闭液，每孔200µl，37℃孵育2h，随后用洗涤液洗5次，每次3min，真空包装后置于4℃保存备用。
3. 试剂配制：①磷酸盐缓冲液：每1000ml加磷酸氢二钠19.1g，磷酸二氢钾1.815g，氯化钠8g；②样品稀释液：含5%wt.BSA和0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液；③洗涤液：含0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液；④阴性对照液：健康未免疫棘球蚴疫苗的羊血清，阳性对照液：含有Eg95抗体的羊血清；⑤酶结合物：辣根过氧化物酶标记的兔抗山羊IgG酶标抗体；⑥底物显色液：溶液A：每500ml加醋酸钠13.6g、柠檬酸1.6g和30%双氧水0.3ml，溶液B：每500ml加乙二胺四乙酸二钠0.2g、柠檬酸0.95g、甘油50ml和TMB粉末0.15g；⑦终止液：2mol/L的硫酸溶液。
实施例 2 ：羊棘球蚴 ELISA 抗体检测试剂盒的使用操作步骤
1. 取抗原包被板，分别将稀释好的待检血清和对照各取100μl加入到抗原包被板孔中，待检样品做1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔，每孔100μl；轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37˚C温育60分钟；
2. 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟倒掉，再在吸水纸上拍干，共计洗涤5次；
3. 每孔加兔抗山羊酶标二抗100μl，置37˚C温育60分钟；
4. 洗涤5次，方法同2，切记每次在干净吸水纸上拍干；
5. 每孔先加底物显色液A 50µl、再加底物显色液B 50µl，室温避光显色10分钟；
6. 每孔加终止液50µl，10分钟内测定结果；
7. 利用酶标仪在OD450nm测定光吸收（OD）值；
8. 结果判定：试验成立的条件是阳性对照孔平均OD450nm值≥0.6，阴性对照孔平均OD450nm值必须＜0.3；样品OD450nm值＞0.6，判为阳性；样品OD450nm值＜0.3，判为阴性；0.3~0.6之间为可疑。
实施例 3 ：羊棘球蚴 ELISA 抗体检测试剂盒检测结果评价
1. 灵敏性试验：取一份阳性血清从1:200倍开始倍比稀释，然后用此试剂盒进行ELISA试验，当血清稀释度为1:25600时，OD450=0.672，结果仍为阳性（见图4），证明本发明试剂盒具有较好的灵敏性。
2. 阻断试验：用包被抗原蛋白和已知阳性血清进行阻断反应，将阳性血清
分为两份，第一份用样品稀释液按1：100稀释，第二份用含0.1µg/100µl的Eg95抗原的稀释液按1：100稀释，然后按已确立的操作程序进行ELISA试验，结果见表1，结果显示，经包被抗原处理过的阳性血清，OD450值下降明显，表明了包被抗原具有良好的特异性。
3. 批内重复试验：取3份抗体水平不同的阳性山羊血清和一份阴性山羊血
清，在同一时间、同一条件下用同一批次包被的酶标板按ELISA程序，每份血清做8个平行，测定OD450值，然后计算每份血清的OD450平均值、标准差和变异系数。试验结果见表2，统计分析结果现实变异系数在3.3～5.6%之间，低于10%，表明同一批酶标板有良好的稳定性，ELISA试验批内重复性良好。
4. 批间重复试验：取6个不同时间包被的酶标板，在相同条件下检测3份
阳性血清和1份阴性血清，每份做2个重复，测定OD450值，然后计算每份血清的OD450平均值、标准差和变异系数。试验结果见表3，统计分析结果现实变异系数在4.1～7.6%之间，小于10%，表明批间重复性良好。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (9)

1.一种羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒包括羊棘球蚴重组抗原Eg95预包被酶标板、样品稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。
2.根据权利要求1所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述羊棘球蚴重组抗原Eg95是通过以下方法制备的：首先PCR扩增EG95基因片段，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和原核表达载体pET-32a，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pET-EG95，将重组质粒转化到大肠杆菌，经IPTG诱导表达，经Ni-NTA纯化。
3.根据权利要求2所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述抗原包被的方法为：将纯化的重组蛋白Eg95用pH9.6的碳酸盐缓冲液稀释至10µg/ml，包被酶标板，每孔100µl，4℃过夜，用洗涤液洗5次，每次3min；加入含5% wt.脱脂奶粉的PBS封闭液，每孔200µl，37℃孵育2h，随后用洗涤液洗5次，每次3min，真空包装后置于4℃保存备用。
4.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述样品稀释液为含5%wt.BSA和0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述阴性对照液为健康未免疫棘球蚴疫苗的羊血清，所述阳性对照液为含有Eg95抗体的羊血清。
6.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的兔抗山羊IgG酶标抗体。
7.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述洗涤液为含0.5‰wt.Tween-20的磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述底物显色液包括溶液A和溶液B，溶液A的配方为：每500ml加醋酸钠13.6g、柠檬酸1.6g和30%双氧水0.3ml，溶液B的配方为：每500ml加乙二胺四乙酸二钠0.2g、柠檬酸0.95g、甘油50ml和TMB粉末0.15g。
9.根据权利要求1至3任意一项所述的羊棘球蚴ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。
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Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104458719A (zh) * 2014-11-25 2015-03-25 成都威尔诺生物科技有限公司 一种单组份tmb显色液的制备方法
CN106198978A (zh) * 2016-07-14 2016-12-07 四川农业大学 细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶的应用
CN107831319A (zh) * 2017-12-18 2018-03-23 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒
CN108318696A (zh) * 2018-02-08 2018-07-24 青海省畜牧兽医科学院 一种动物细粒棘球蚴病elisa抗原检测试剂盒
CN108333351A (zh) * 2018-02-08 2018-07-27 青海省畜牧兽医科学院 一种动物细粒棘球蚴病elisa抗体检测试剂盒
CN109239211A (zh) * 2018-09-11 2019-01-18 江苏省血吸虫病防治研究所 用于鉴别人体感染包虫的血清标志物及检测试剂盒
CN110261615A (zh) * 2019-07-04 2019-09-20 中国动物疫病预防控制中心(农业农村部屠宰技术中心) 囊型包虫病诊断试剂盒及其应用
CN110954690A (zh) * 2019-12-30 2020-04-03 北京维德维康生物技术有限公司 一种检测羊包虫病elisa抗体检测试剂盒及其应用
CN111896744A (zh) * 2020-07-28 2020-11-06 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN112014556A (zh) * 2020-08-04 2020-12-01 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种牛棘球蚴eg95蛋白抗体间接elisa检测试剂盒

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102426232A (zh) * 2011-09-06 2012-04-25 厦门大学 一种检测结核菌蛋白抗原的试剂盒及其制备方法
CN103205447A (zh) * 2012-12-24 2013-07-17 四川农业大学 脑多头蚴热休克蛋白抗原的制备方法及其应用
CN103217524A (zh) * 2012-12-28 2013-07-24 新疆维吾尔自治区实验动物研究中心 适用于检测泡型包虫病抗体的囊型包虫病囊液脱酯抗原及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102426232A (zh) * 2011-09-06 2012-04-25 厦门大学 一种检测结核菌蛋白抗原的试剂盒及其制备方法
CN103205447A (zh) * 2012-12-24 2013-07-17 四川农业大学 脑多头蚴热休克蛋白抗原的制备方法及其应用
CN103217524A (zh) * 2012-12-28 2013-07-24 新疆维吾尔自治区实验动物研究中心 适用于检测泡型包虫病抗体的囊型包虫病囊液脱酯抗原及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
贾红等: "羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测方法的建立", 《畜牧兽医学报》, vol. 42, no. 1, 31 January 2011 (2011-01-31), pages 65 - 70 *

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104458719A (zh) * 2014-11-25 2015-03-25 成都威尔诺生物科技有限公司 一种单组份tmb显色液的制备方法
CN104458719B (zh) * 2014-11-25 2017-04-05 成都威尔诺生物科技有限公司 一种单组份tmb显色液的制备方法
CN106198978A (zh) * 2016-07-14 2016-12-07 四川农业大学 细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶的应用
CN106198978B (zh) * 2016-07-14 2018-04-17 四川农业大学 细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶的应用
CN107831319A (zh) * 2017-12-18 2018-03-23 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒
CN108333351A (zh) * 2018-02-08 2018-07-27 青海省畜牧兽医科学院 一种动物细粒棘球蚴病elisa抗体检测试剂盒
CN108318696A (zh) * 2018-02-08 2018-07-24 青海省畜牧兽医科学院 一种动物细粒棘球蚴病elisa抗原检测试剂盒
CN109239211A (zh) * 2018-09-11 2019-01-18 江苏省血吸虫病防治研究所 用于鉴别人体感染包虫的血清标志物及检测试剂盒
CN110261615A (zh) * 2019-07-04 2019-09-20 中国动物疫病预防控制中心(农业农村部屠宰技术中心) 囊型包虫病诊断试剂盒及其应用
CN110954690A (zh) * 2019-12-30 2020-04-03 北京维德维康生物技术有限公司 一种检测羊包虫病elisa抗体检测试剂盒及其应用
CN110954690B (zh) * 2019-12-30 2023-09-19 北京明日达科技发展有限责任公司 一种检测羊包虫病elisa抗体检测试剂盒及其应用
CN111896744A (zh) * 2020-07-28 2020-11-06 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN111896744B (zh) * 2020-07-28 2022-02-22 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN112014556A (zh) * 2020-08-04 2020-12-01 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种牛棘球蚴eg95蛋白抗体间接elisa检测试剂盒

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