CN104055805A - 一种具有抗炎作用的解毒草提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物中草药配方领域，具体涉及一种具有抗炎作用的解毒草提取物及其制备方法。本发明解毒草提取物的制备方法是：选取解毒草药材，采用水或40-80％乙醇水混合溶媒进行提取，然后浓缩为解毒草浓缩液，将解毒草浓缩液加入适量水稀释，在常温方式下静置6-24小时，过滤，得解毒草溶液；将制备好的解毒草溶液，采用预处理好的非极性或弱极性大孔树脂进行吸附，先用水洗，再用乙醇水混合溶媒按15-35％、40-90％乙醇梯度洗脱，收集40-90％乙醇洗脱部位洗脱液，减压回收溶剂，浓缩、干燥即得解毒草总黄酮提取物。解毒草提取物具有较好的抗炎、镇痛和治疗抑制小鼠醋酸扭体反应的作用，其生产工艺降低了纯化成本，容易实现工业化生产，并且对环境无污染。

Description

一种具有抗炎作用的解毒草提取物及其制备方法

技术领域：

本发明涉及植物中草药配方领域，具体涉及一种具有抗炎作用的解毒草提取物及其制备方法。

技术背景：

解毒草为中国蕨科植物野鸡尾Onychium japonicum(Thunb.)Kunze的全草，亦称小叶金花草、人头草、小金花草、解毒蕨等。为西南地区少数民族常用药物。其味苦、性寒，具有清热，利湿，解毒，止血等功效，用于风热感冒，咳嗽，急性胃肠炎，痢疾，黄疸，咳血，吐血，便血，尿血，农药中毒，砷中毒，食物中毒，木薯中毒，野山薯中毒，疔疮，烧烫伤，外伤肿痛等症。解毒草全草主要含有含黄酮类化合物蕨素、蕨苷、金粉蕨醇、山柰酚二鼠李糖苷以及菊苣酸等。

炎症是十分常见而又重要的基本病理过程，炎症就是平时人们所说的“发炎”，是机体对于刺激的一种防御反应，许多疾病与炎症有关，是疾病发生、发展的重要影响因素，因此，治疗疾病时抑制炎症显得相当重要。炎症产生时，可以出现红、肿、热、痛和功能障碍等局部表现，并伴有体温升高、外周血白细胞数目变化等全身症状。炎症可以是感染引起的感染性炎症，也可以不是由于感染引起的非感染性炎症。

有研究表明，解毒草水提取物和醇提取物具有一定的抗炎、镇痛作用，各剂量抗炎效果较好。其水提取物和醇提取物各剂量均具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P＜0.01，P＜0.05)，且抑制率随剂量的增大而增大。解毒草化学成分方面的研究较少，有报道主要含有蕨素、蕨苷、金粉蕨醇、以及山柰酚二鼠李糖苷、菊苣酸等。上述化学和药理研究为其进一步开发应用提供了科学依据。目前尚未见有关解毒草总黄酮提取物的制备方法，及其在抗炎作用方面的研究报道。

发明内容：

本发明的目的是为了提供了一种科学稳定的，适用于工业化生产的制备解毒草总黄酮的方法，公开一种具有抗炎作用的解毒草提取物及其制备方法。该解毒草提取物是解毒草药材经过提取、浓缩、干燥而成。

通过对中药解毒草的试验研究，发现解毒草提取物具有较好的抗炎、镇痛作用，且具有治疗抑制小鼠醋酸扭体反应的作用。

具体实施方式

本发明一种具有抗炎作用的解毒草提取物的制备方法是：

(1)选取解毒草药材，采用水或40-80％乙醇水混合溶媒进行提取，然后浓缩为解毒草浓缩液，将解毒草浓缩液按解毒草药材干重计的1至3倍量加入适量水稀释，在常温方式下静置6-24小时，过滤，得解毒草溶液；

(2)将制备好的解毒草溶液，采用预处理好的非极性或弱极性大孔树脂进行吸附，先用水洗，再用乙醇水混合溶媒按15-35％、40-90％乙醇梯度洗脱，收集40-90％乙醇洗脱部位洗脱液，减压回收溶剂，浓缩、干燥即得解毒草总黄酮提取物。

根据上述制备方法的技术方案，解毒草总黄酮提取物中主要含有黄酮类成份，其中主要成份有蕨素、蕨苷、金粉蕨醇和山柰酚二鼠李糖苷等多种黄酮类成分，采用比色法测定(芦丁对照)，测得提取物中总黄酮含量平均为45％。通过试验研究，发现解毒草提取物具有较好的抗炎、镇痛作用，且具有治疗抑制小鼠醋酸扭体反应的作用。该解毒草提取物生产工艺降低了纯化成本，容易实现工业化生产，并且对环境无污染。

实施例一.

棉球诱导大鼠肉芽肿

方法：取SD大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组。即NS对照组、阳性对照组(阿司匹林200mg.kg-1)和解毒草总黄酮提取物组，灌胃给药，每天一次，连续5天，模型组给予相应体积的生理盐水。末次灌胃后于每鼠右足趾皮下注射1％角叉菜胶0.1ml致炎。分别在致炎前和致炎后1、3、5、7小时，用足爪仪测量致炎侧足容积，以各鼠致炎前、后容积的差值为肿胀度。

实验结论：解毒草总黄酮提取物4g/kg、8mg/kg两个剂量在各个时段均能明显抑制角叉菜胶所致的足肿胀。

实施例二.

大鼠血和足爪组织生化指标测定

上述大鼠足爪容积测定完成后，于股动脉取血，离心(3000r/min，5min)，血清置-20℃保存待测各生化指标。于大鼠左踝关节处取下脚掌去皮后称重剪碎，按20％浓度浸于生理盐水中40min，取上清液置-20℃中保存待测各生化指标。

A.丙二醛(MDA)量的测定取0.5ml组织浸泡液或01ml血清标本加入到2.5ml的25％的三氯乙酸中，摇匀后再加入0.67％硫代巴比妥酸(TBA)1ml，于沸水中加热30min，流水冷却，30000r×10min，离心取上清液在535nm处测定吸光度A值，以2μmol/L的四氧甲基丙烷(TMP)溶液为标准品。

实验结果：与NS组比较，解毒草总黄酮提取物4、8g/kg能降低足爪局部炎症组织中MDA含量；解毒草总黄酮提取物各剂量组血清中MDA含量也有降低。

B.一氧化氮(NO)含量的测定取0.5ml组织浸泡液或0.1ml血清标本与75mmol/L的硫酸锌2.5ml混匀，离心(30000r/min、10min)，取上清液2ml加人1ml1％对氨基苯磺酸的2.5％磷酸溶液和1ml0.1％萘乙二胺盐酸的2.5％磷酸溶液，30℃放置10min，在550nm处测定A值，以亚硝酸钠作为标准品。

实验结果：解毒草总黄酮提取物4、8g/kg可减少足爪局部炎症组织NO含量。与NS组比较有显著差异性。

C.前列腺素E₂(PGE₂)含量测定取0.5ml组织浸泡液或0.1ml血清标本，加人0.5mmol/L KOH甲醇液2ml，在50℃水浴中异构化20min，用甲醇液稀释至4ml，离心(30000r/min，10min)取上清液在278nm处测A值。

实验结果：与NS组相比较，解毒草总黄酮提取物8g/kg可降低肿胀足爪组织中PGE₂含量；解毒草总黄酮提取物各剂量组均可降低血清中PGE₂含量。

Claims (2)

1.一种具有抗炎作用的解毒草提取物，其特征在于：该解毒草提取物是解毒草药材经过提取、浓缩、干燥而成。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗炎作用的解毒草提取物，其特征在于：一种具有抗炎作用的解毒草提取物的制备方法是：

(1)选取解毒草药材，采用水或40-80％乙醇水混合溶媒进行提取，然后浓缩为解毒草浓缩液，将解毒草浓缩液按解毒草药材干重计的1至3倍量加入适量水稀释，在常温方式下静置6-24小时，过滤，得解毒草溶液；

(2)将制备好的解毒草溶液，采用预处理好的非极性或弱极性大孔树脂进行吸附，先用水洗，再用乙醇水混合溶媒按15-35％、40-90％乙醇梯度洗脱，收集40-90％乙醇洗脱部位洗脱液，减压回收溶剂，浓缩、干燥即得解毒草总黄酮提取物。