CN1435181A - 金粉蕨素在制备治疗或预防心血管疾病药物中的应用 - Google Patents

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廖端芳
郑兴
黄红林
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Nanhua University
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Abstract

本发明涉及金粉蕨素在制备治疗或预防心血管疾病药物中的应用。该物质可以明显改善心肌缺血状况，减轻异丙肾上腺素引起的心电图ST段下降；可以明显抑制氧化应激引起的内皮细胞凋亡，并有促进内皮细胞生长作用还能促进血管内皮细胞释放和合成一氧化氮；其对受伤的内皮细胞具有明显保护作用，可以明显降低LDH的释放，增强cNOS活性，增加NO释放，降低内皮细胞的凋亡；可以明显抑制氧化应激诱导的血管平滑肌细胞增殖、钙超载和抑制丝裂素活化蛋白激酶活性。其对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖的舒张功能具有保护作用。该物质在临床和药理实验上应用是安全的。本发明是一种选择性高、作用效果明显，具有心血管保护作用及防治心血管疾病的药物。

Description

金粉蕨素在制备治疗或预防心血管疾病药物中的应用
                      技术领域
本发明涉及金粉蕨素的用途，尤其涉及在制备治疗或预防心血管疾病药物中的应用。
                      背景技术
《天然产物研究与开发》2000年第12期第42-45页发表的《栗柄金粉蕨的黄酮成分》文章中和《云南植物研究》1999年第21期第386-392页发表的《高山金粉蕨的黄酮类成分》文章中已经公开了金粉蕨素，其化学名称为7-鼠李糖葡萄糖基-5-羟基-二氢黄酮，结构式为：
分子式为C27H32O13，分子量为564，白色针状结晶，易溶于二甲亚砜，溶于乙醇，微溶于水，属黄酮类化合物。
该化合物可由中国蕨科(Sinopteridaceae)金粉蕨属(Onychiumching)粟柄金粉蕨(Onycium lucidum)植物全草及高山金粉蕨(Onychium japonica)中提取制得。
                      发明内容
本发明的目的在于提供金粉蕨素的一种用途，即在制药中的应用。
本发明涉及金粉蕨素在制备治疗或预防心血管疾病及具有保护心血管作用的药物中的应用。
为了更好地理解本发明的实质，下面将用金粉蕨素的药理试验及结果来说明其在制药领域中的用途。
采用从湖南永州采集的中国蕨科(Sinopteridaccac)金粉蕨属(Onychium ching)粟柄金粉蕨(Onycium lucidum)植物全草干粉先用工业酒精浸泡，然后其粗提取物经101大孔吸附树脂柱层析，收集到30％乙醇洗脱部分，再减压回收溶液后，经硅胶层析用氯仿—甲醇梯度洗脱，收集到含10％甲醇之氯仿洗脱部分，最后浓缩即析出金粉蕨素结晶。结晶先用少许二甲亚砜(DMSO)溶液溶解后，再用磷酸缓冲液(PBS)稀释制成制剂产品备用。
经初步研究发现金粉蕨素在异丙肾上腺素诱导SD大鼠心肌缺血模型实验中，金粉蕨素可以明显改善心肌缺血状况，减轻异丙肾上腺素引起的心电图ST段下降。
在培养的牛主动脉内皮细胞，金粉蕨素明显抑制氧化应激引起的内皮细胞凋亡，并有促进内皮细胞生长作用还能促进血管内皮细胞(VEC)释放利合成一氧化氮(NO)。另外，采用MTT比色法、Westenr Blot法、流式细胞仪等方法，观测金粉蕨素对超氧阴离子损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用，结果发现金粉蕨素对受伤的内皮细胞具有明显保护作用，明显降低LDH的释放，增强eNOS活性，增加NO释放，降低内皮细胞的凋亡。
在培养的大鼠血管平滑肌细胞，金粉蕨素明显抑制氧化应激(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖、钙超载和抑制丝裂素活化蛋白激酶(ERK1/2)活性。
通过家兔离体胸主动脉血管环实验，发现其对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖的舒张功能具有保护作用，其作用可被一氧化氮合酶(nitric oxide synthase NOS)抑制剂N-L-A和环氧酶抑制剂吲哚美辛所阻断，提示金粉蕨素作用与其保护血管内皮释放小分子物质NO和PGI2有关。因为NO和PGI2是氧自由基和过氧化物的清除剂，推测金粉蕨素应具有抗过氧化物的作用。经采用溴代苯致小鼠实验性肝损伤模型，发现金粉蕨素能降低肝匀浆TBARs含量，具有抗脂质过氧化作用。
为观察金粉蕨素(Onychin)的毒性，首先采用急性毒性实验方法，以一次大剂量给小白鼠灌胃金粉蕨素，连续观察小鼠行为活动等指标和毒性反应程度，并在实验结束时处死小白鼠进行剖检，以获得金粉蕨素最初的毒性资料，为评价其毒性等级以及拟订临床安全剂量提供依据。实验连续观察14天，小鼠无明显行为异常，也未出现死亡，求不出LD50，结果表明本实验设定的最高剂量640mg/kg及其以下剂量对小白鼠无明显毒性作用。故金粉蕨素在临床和药理实验上应用是安全的。再通过SD大鼠腹腔注射金粉蕨素每次150mg/kg，每天1次，连续七天，未见明显器官毒性，血液学检查和骨髓象与溶媒对照组比较无明显改变。因此本发明是一种作用效果明显，毒副作用小，有一定发展前景的防治心血管疾病的新药。
                    具体实施方式
采用从湖南永州采集的中国蕨科(Sinopteridaceae)金粉蕨属(Onychium ching)粟柄金粉蕨(Onycium lucidum)植物全草干粉先用工业酒精浸泡，然后其粟柄金粉蕨素的工业酒精粗提取物经101大孔吸附树脂柱层析，收集到30％乙醇洗脱部分，再减压回收溶液后，经硅胶层析用氯仿一甲醇梯度洗脱，收集到含10％甲醇之氯仿洗脱部分，最后浓缩即析出金粉蕨素结晶。结晶先用少许二甲亚砜(DMSO)溶液溶解后，再用磷酸缓冲液(PBS)稀释制成制剂产品备用。

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1、金粉蕨素在制备治疗或预防心血管疾病药物中的应用。
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