CN104026309B - 一种连钱草茶叶制备方法及连钱草茶叶和应用 - Google Patents

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Abstract

一种连钱草茶叶制备方法,包括原料准备、原料摊放、杀青、摊凉、一次揉捻、初炒、二次揉捻、复炒和干燥冷却步骤。本发明还提供一种由前述连钱草茶叶制备方法制备而成的连钱草茶叶和应用。本发明提供的连钱草茶叶制备方法中,经原料准备、原料摊放、杀青、摊凉、一次揉捻、初炒、二次揉捻、复炒和干燥冷却即可得到连钱草茶叶成品,因而生产工艺简单,成本低廉,节能环保,利用率高;同时揉捻能够破坏细胞组织,茶饮服用时能增加有效成分例如总黄酮、茶多酚及主要活性成分的溶出率;并且杀青能够破坏连钱草植株中氧化酶的活性,从而避免对植物中含量较高的多酚类物质的氧化,保证连钱草茶叶外观色泽的同时,最大限度的保持其有效成分不受破坏。

Description

一种连钱草茶叶制备方法及连钱草茶叶和应用
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及一种连钱草茶叶制备方法及连钱草茶叶和应用。
背景技术
连钱草(Glechomalongituba(Nakai)Kupr.)又名活血丹、透骨消、透骨风、遍地香、江苏金钱草等,为唇形科多年生草本植物活血丹的干燥地上部分。除西北、内蒙古外,全国各地均有分布。味辛、微苦,性微寒,入肝、肾、膀胱经。擅利湿通淋,清热解毒,散瘀消肿,为民间常用药材,并被《中国药典》(2010版)所收载。临床上主要用于治疗尿路结石,肝胆结石,湿热黄疸和跌扑损伤,并已作为中成药排石颗粒的主药之一。现有文献对连钱草中化学成分报道较为系统,主要含有黄酮类、萜类、酚类、挥发油类、有机酸类和甾体类等,其中黄酮、酚类成分最具特征性且含量较高,为该植物降糖、减肥、降脂、降压、利尿排石、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老和增强免疫的主要药效物质成分。
公开号为CN101711791A的中国专利申请,公开了一种连钱草水提取物的制备方法及应用,其制备工艺主要采用的是回流提取,过滤,滤液浓缩来形成连钱草水提取物。
公开号为CA103113196A的中国专利申请,公开了一种连钱草酚及其制备方法和应用,其制备工艺主要包括将连钱草置于溶液中浸提,获得浸提液;对浸提液进行萃取,将萃取液浓缩,获得提取物;从提取物中分离纯化获得所述连钱草酚。
申请号为201410104913的中国专利申请提供了一种连钱草水提取物的制备方法,其提取物和主要单体化合物(木犀草素-7-二葡萄糖醛酸苷和芹菜素-7-二葡萄糖醛酸苷)可发挥多方面药理活性。
但是,本发明的发明人经过研究发现,现有的文献并未涉及到对连钱草原药材的加工处理,进而以茶叶形式提高其活性成分的溶出率或得率。
发明内容
针对现有技术存在的技术问题,本发明提供一种连钱草茶叶的制备方法,主要涉及到对连钱草原药材的加工处理,该制备方法工艺简单,成本低廉,节能环保,利用率高,能显著提高连钱草中总黄酮、茶多酚及主要活性成分的溶出率。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种连钱草茶叶制备方法,包括以下步骤:
A、原料准备:挑选连钱草成熟植株个体上的完整叶片,或连钱草成熟植株顶端嫩芽,或连钱草成熟植株个体即全草作为原料,并经流水快速冲掉所述原料表面的异物,且所述全草需要切成段;
B、原料摊放:将经流水快速清洗后的嫩芽、叶或切段后的全草均匀摊放在竹筛内,置通风凉好且阴凉处摊放;
C、杀青:将经过摊放后的嫩芽、叶或全草杀青,让连钱草植株中氧化酶的活性被破坏;
D、摊凉:将经过杀青处理后的嫩芽、叶或全草趁热摊放于竹筛内冷却;
E、一次揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时将杀青后的嫩芽、叶或全草沿一个方向揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后均匀摊开、抖散;再揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后再均匀摊开、抖散;如此循环往复,直至嫩芽、叶或全草的成条率至少达到60%以上后,均匀摊放于竹筛内;
F、初炒:将一次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行炒制,炒至减重率为20%;
G、二次揉捻:将初炒后的嫩芽、叶或全草按照步骤E中的方法再次揉捻,直至嫩芽、叶或全草的成条率达到90-100%后,再均匀摊放于竹筛内;
H、复炒:将二次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行复炒,炒至减重率为70-80%;
I、干燥冷却:将复炒后的嫩芽、叶或全草置于干燥箱内,干燥至恒重,然后取出室温下冷却,即可得到连钱草茶叶成品。
相比于现有技术,本发明提供的连钱草茶叶制备方法中,经原料准备、原料摊放、杀青、摊凉、一次揉捻、初炒、二次揉捻、复炒和干燥冷却即可得到连钱草茶叶成品,因而生产工艺简单,成本低廉,节能环保,利用率高;同时揉捻能够破坏细胞组织,茶饮服用时能增加有效成分例如总黄酮、茶多酚及主要活性成分的溶出率;并且杀青能够破坏连钱草植株中氧化酶的活性,从而避免对植物中含量较高的多酚类物质的氧化,保证连钱草茶叶外观色泽的同时,最大限度的保持其有效成分不受破坏。
进一步,所述步骤A中原料准备包括:
选取连钱草成熟植株顶端嫩芽进行采摘,以顶芽带两对新生嫩叶为采集对象,采集长度3-8厘米,流水下快速冲洗掉嫩芽表面的泥沙、杂质;或
挑选连钱草成熟植株个体,采集除嫩芽、枯叶、烂叶以外的完整叶片,经流水快速冲洗掉新鲜叶表面泥沙、杂质;或
挑选连钱草成熟植株个体,经流水快速冲洗掉连钱草成熟植株个体即全草表面的泥沙、杂质后,将全草切成3-5厘米小段。
进一步,优选连钱草成熟植株个体上的完整叶片或顶端嫩芽作为制茶原料,由此以嫩芽或叶为原料制备的茶叶,外形紧细卷曲、色泽均匀。
进一步,所述步骤B中,所述嫩芽、叶或切段后的全草摊放在竹筛内的厚度为2-3厘米,时间为1-2小时。
进一步,所述步骤C中,所述杀青包括:
炒制杀青:将铁锅烧热,锅内温度为100-120度,将摊放后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中,手动快速翻炒,炒制温度为60-80度,每次投量为1-5千克;嫩芽杀青时间10-15分钟,叶杀青时间8-12分钟,全草杀青时间8-12分钟;或
微波杀青:将摊放后的嫩芽、叶或全草置于微波炉里面,放置厚度为3-5厘米,且在嫩芽、叶或全草的表面放置一层纱布,微波功率为600-800瓦,火力100%,每次投量为1-3千克,杀青时间1-3分钟;或
蒸汽杀青:将容器内的水烧开,上汽后将摊放后的嫩芽、叶或全草放置于蒸锅里,每次投量为1-3千克,放置厚度为5-15厘米;嫩芽杀青时间8-15分钟,叶杀青时间6-12分钟,全草杀青时间6-12分钟。
进一步,优选微波杀青或蒸汽杀青进行杀青处理,由此制备的茶叶色泽绿润,且优于炒制和滚筒杀青制备的茶品。
进一步,更优选微波杀青进行杀青处理,并选用连钱草叶作为制茶原料,由此可以可高效利用连钱草植物资源,保证野生或种植资源的可持续利用,且低碳减排,绿色环保,为连钱草茶叶最佳制茶工艺。
进一步,所述步骤E中,所述一次揉捻包括:
手工揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时用手将杀青后的嫩芽、叶或全草沿一个方向揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后均匀摊开、抖散;再揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后再均匀摊开、抖散;如此循环往复,揉捻至使嫩芽、叶或全草的成条率至少达到60%以上后,以2-3厘米的厚度均匀摊放于竹筛内;或
机器揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时将杀青后的嫩芽、叶或全草置于揉捻机里,揉捻至使嫩芽、叶或全草的成条率达到60-80%后,以2-3厘米的厚度均匀摊放于竹筛内;采用所述手工揉捻或机器揉捻方式,由此可以避免所述嫩芽、叶或全草出现打结、成团现象。
进一步,所述步骤E和G中,所述揉捻过程中加入改善连钱草茶叶味道的甜味剂,由此可以改善和增进连钱草茶叶的味道,达到增效祛味的效果。
进一步,所述甜味剂选用安赛蜜、甜菊素、薄荷脑、海藻糖和阿斯巴甜中的一种或几种;或选用甘草、枸杞、大枣和菊花中的一种或几种;或选用其他的甜味剂或甜味剂组合进行使用。
进一步,所述步骤F中,所述初炒时铁锅内的温度为60-80度,炒制时间为30-60分钟。
进一步,所述步骤H中,所述复炒时铁锅内的温度为50-70度,炒制时间为30-60分钟。
进一步,所述步骤I中,所述干燥箱内的温度为60-80度,放置的嫩芽、叶或全草要干燥三次,每次干燥的时间为30-60分钟,并在每次干燥完后需将嫩芽、叶或全草取出摊晾5-15分钟。
本发明还提供一种连钱草茶叶,所述连钱草茶叶由前述连钱草茶叶制备方法制备而成。
相比于现有技术,本发明提供的连钱草茶叶,很好的改善了原植物的味道,茶香持久,且所述连钱草茶叶冲泡后叶面展开完全,叶质柔软,形态美观,汤色嫩绿、清澈,味道清香;同时,所述连钱草茶叶可直接包装,亦可粉碎后定量放入不同规格茶叶袋中,还可以以本品为原料,经水等液体溶液冲泡、提取得到液体溶液制作成相关产品后进行包装。
本发明再提供一种连钱草茶叶在制备保健茶、减肥茶或药茶中的应用。
相比于现有技术,本发明提供的连钱草茶叶在制备保健茶、减肥茶或药茶中的应用,可以将得到的连钱草茶叶作为组成成份之一,与其他提取物和/或活性化合物和/或保健食品进行组合,制作具有降糖、减肥、降脂、降压、利尿排石、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老和增强免疫功效的新型保健茶、减肥茶或药茶。
茶多酚(TeaPolyphenols,简称TP)又名茶单宁、茶鞣质,是茶叶中所含的一类多羟基酚类化合物的总称。绿茶中茶多酚含量较高,占茶叶干重的15-30%,是形成茶叶色香味的主要成分之一,也是茶叶中具有保健功效的主要成分之一。早在《本草纲目》中则有记载:“茶苦而寒,最能降火,火为百病之因,火降则百病清也”。茶由古代的药发展到后来的饮料,时下又回归到药物,是现代生物技术发展和医学进步的结果。目前,国内外学者对茶多酚的大量研究表明,茶多酚具有增强机体抵抗力、抗氧化、防癌、抗肿瘤、抗辐射、抑菌、抗病毒、降血糖和血脂、预防心血管疾病、抗衰老等多种天然生物活性。因此,茶多酚已作为评定茶叶质量优劣的一项重要指标。
参考国家标准(GB/T8313-2008)对所制备的连钱草茶叶中茶多酚进行含量测定,以评价其质量。结果显示,采用上述工艺制备的连钱草茶叶与市面上药材比较其茶多酚含量提高了1-5倍。具体地,全草茶叶中茶多酚含量在7-10%,未做前期处理直接干燥得到的连钱草原料中茶多酚含量为5-7%,市场上销售的连钱草药材中所含的茶多酚含量为5-7%;嫩芽茶叶中茶多酚含量为10-30%,选用叶制备的茶叶中茶多酚含量则高达20-35%,略超过了绿茶中茶多酚平均含量。
迷迭香酸(Rosmarinicacid)是一种广泛分布于植物中的水溶性多酚羟基化合物,于1958年首次从唇形科植物迷迭香中分离得到,随后在多种植物中被发现。此后几十年时间里,该化合物被证实具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等多种生物活性,并在食品、医药、化妆品等领域得到广泛应用。近年来研究发现,迷迭香酸可通过调节免疫系统,在治疗肿瘤、免疫排斥反应中发挥作用,从而再次成为研究热点。现有文献(田萍等,高效液相色谱法测定连钱草中的迷迭香酸的含量,2008,25(2):169-171)虽对连钱草药材中迷迭香酸含量进行了测定,但并未提到对植物的前期处理是否可增加该化合物的溶出率。此外,由于多酚羟基化合物易氧化,文中使用的连钱草药材存放时间过长可能导致该化合物含量测定值有一定误差,缺乏可比性。
采用HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography,高效液相色谱法)测定连钱草茶叶中主要活性成分迷迭香酸含量变化。测定结果显示,连钱草经制茶工艺处理后的活性化合物迷迭香酸溶出率显著提高,不同部位、不同杀青方法对迷迭香酸的含量影响更为明显。具体地,全草茶叶中迷迭香酸含量为1-3%,其中经微波、蒸汽杀青处理后的全草茶叶迷迭香酸含量略有升高,达到2-3%,直接干燥得到的连钱草药材中迷迭香酸含量为0.1-0.3%,市场上销售的连钱草药材中所含的迷迭香酸含量也仅为0.1-0.3%;嫩芽茶叶中迷迭香酸含量则高达3-5%,其中以微波、蒸汽杀青方式最佳;采用叶制备的连钱草茶叶中迷迭香酸含量为2-4%;经制茶工艺处理的连钱草嫩芽和叶中迷迭香酸含量是直接干燥后全草以及连钱草药材的10-30倍,显著改善了主要活性化合物迷迭香酸的溶出率及含量。
茶氨酸(L-Theanine)是茶叶中一种特征游离氨基酸,为茶树的次级代谢产物,对茶叶的滋味和香气起着重要的作用。该化合物由日本学者酒户弥二郎于1950年首次从玉露茶新梢中发现,迄今为止,除茶以外,仅在油茶、茶梅、红山茶等以及蕈(菌类)中发现含有少量茶氨酸。进入21世纪后,随着科学技术的飞速发展,茶氨酸对人体的生理功能以及保健作用逐渐成为新的研究热点,并引起了国内外的广泛关注。
参考国家标准(GB/T23193-2008)对所制备的连钱草茶叶中茶氨酸进行含量测定。结果显示,总体上连钱草植物中茶氨酸含量较低,但不同部位中茶氨酸含量差异明显,嫩芽中茶氨酸含量相对较高,在0.01-0.03%,微波杀青制备得到的嫩芽茶中茶氨酸含量在0.02-0.03%;叶和全草中茶氨酸含量均保持在0.004-0.006%;直接干燥的连钱草全草以及市面上销售的连钱草药材中所含茶氨酸含量为0.004-0.005%。此外,本专利申请为首次提到连钱草植物中含有少量的茶氨酸物质。
生物总黄酮是黄酮类化合物的统称,主要是指以2-苯基色原酮为基本母核的化合物,是一大类天然产物,广泛分布于植物界,是许多中草药的主要有效成分。连钱草植株中含有多种黄酮及其苷类化合物,包括芹菜素、木犀草素、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸乙酯苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸乙酯苷、大波斯菊苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、芦丁、海常素、蒙花苷、槲皮素等。其中很多单体化合物已被报道具有显著的抗氧化、抗炎、抗病毒、抗菌、抗肿瘤、降糖、降脂、减肥等药理作用,同时对心脑血管和免疫系统等疾病具有很好的治疗作用。
根据文献(杨曦亮等,不同产地连钱草药材中总黄酮成分含量测定,2009,5(1):21-23)提供方法,测定不同制备方法得到的连钱草茶中总黄酮含量。测定结果显示,连钱草经制茶工艺处理后总黄酮含量可增加5-10倍。具体地,全草茶叶中总黄酮含量为10-25%,直接干燥得到的连钱草全草中总黄酮含量仅为1-5%,市场上销售的连钱草药材中所含的总黄酮含量为1-5%;嫩芽茶叶中总黄酮含量为25-35%,连钱草叶制备的茶叶中总黄酮含量略低于嫩芽,为20-35%,均远远超过直接干燥后的全草以及市场上销售的连钱草药材。因此说明本专利申请提供的制茶工艺能显著提高连钱草中总黄酮的溶出率,能更加高效利用植物资源。
参考申请号为201410104913的中国专利申请中活性降糖主成分化合物Ⅰ(木犀草素-7-二葡萄糖醛酸苷)和Ⅱ(芹菜素-7-二葡萄糖醛酸苷)的富集方法,采用HPLC对其进行含量测定,观察冲泡后连钱草茶叶中活性成分化合物Ⅰ和Ⅱ的含量变化。测定结果显示,连钱草经制茶工艺处理后的活性化合物Ⅰ溶出度得到很好的改善,但不同部位、不同杀青方法对化合物Ⅰ的含量影响更加显著。具体地,全草茶叶中化合物Ⅰ含量为0.1-0.3%,其中微波、蒸汽杀青后化合物Ⅰ含量略有升高,为0.2-0.3%,直接干燥得到的连钱草全草中化合物Ⅰ含量为0.1-0.2%,市场上销售的连钱草药材中所含的化合物Ⅰ含量为0.1-0.2%;嫩芽茶叶中化合物Ⅰ含量为0.1-0.2%;而采用叶制备的连钱草茶叶中化合物Ⅰ含量与连钱草直接干燥后药材比较,活性化合物Ⅰ含量增加了1-6倍,达到0.3-0.6%。此外,与化合物Ⅰ比较,化合物Ⅱ在连钱草全草中平均含量相对较低,但采用微波制茶工艺处理后叶中化合物Ⅱ含量依然高于直接干燥得到的全草以及市面上销售的连钱草药材。
附图说明
图1是本发明实施例提供的连钱草茶叶制备方法流程示意图。
图2是本发明实施例提供的12件样品中主成分迷迭香酸HPLC分析结果示意图。
图3是本发明实施例提供的12件样品中茶氨酸HPLC分析结果及紫外特征示意图。
图4是本发明实施例提供的12件样品中主要活性成分化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的HPLC分析结果示意图。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体图示,进一步阐述本发明。
请参考图1所示,本发明提供一种连钱草茶叶制备方法,包括以下步骤:
A、原料准备:挑选连钱草成熟植株个体上的完整叶片,或连钱草成熟植株顶端嫩芽,或连钱草成熟植株个体即全草作为原料,并经流水快速冲掉所述原料表面的异物,且所述全草需要切成段;
B、原料摊放:将经流水快速清洗后的嫩芽、叶或切段后的全草均匀摊放在竹筛内,置通风凉好且阴凉处摊放;
C、杀青:将经过摊放后的嫩芽、叶或全草杀青,让连钱草植株中氧化酶的活性被破坏;
D、摊凉:将经过杀青处理后的嫩芽、叶或全草趁热摊放于竹筛内冷却;
E、一次揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时将杀青后的嫩芽、叶或全草沿一个方向揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后均匀摊开、抖散;再揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后再均匀摊开、抖散;如此循环往复,直至嫩芽、叶或全草的成条率至少达到60%以上后,均匀摊放于竹筛内;
F、初炒:将一次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行炒制,炒至减重率为20%;
G、二次揉捻:将初炒后的嫩芽、叶或全草按照步骤E中的方法再次揉捻,直至嫩芽、叶或全草的成条率达到90-100%后,再均匀摊放于竹筛内;
H、复炒:将二次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行复炒,炒至减重率为70-80%;
I、干燥冷却:将复炒后的嫩芽、叶或全草置于干燥箱内,干燥至恒重,然后取出室温下冷却,即可得到连钱草茶叶成品。
相比于现有技术,本发明提供的连钱草茶叶制备方法中,经原料准备、原料摊放、杀青、摊凉、一次揉捻、初炒、二次揉捻、复炒和干燥冷却即可得到连钱草茶叶成品,因而生产工艺简单,成本低廉,节能环保,利用率高;同时揉捻能够破坏细胞组织,茶饮服用时能增加有效成分例如总黄酮、茶多酚及主要活性成分的溶出率;并且杀青能够破坏连钱草植株中氧化酶的活性,从而避免对植物中含量较高的多酚类物质的氧化,保证连钱草茶叶外观色泽的同时,最大限度的保持其有效成分不受破坏。
以下将提供多种实施例,用于针对不同原料来源、不同制备工艺下制备的连钱草茶叶进行对比说明。
选用的材料、试剂与仪器如下:
材料连钱草:2014年4月采于重庆万州,经鉴定为唇形科植物活血丹(Glechomalongituba(Nakai)Kupr.)。
连钱草药材:2013年12月购于上海康桥中药饮片有限公司;批号:131125;生产日期:2013年11月25日。
试剂:95%乙醇、蒸馏水、甲醇、色谱甲醇、色谱乙腈等试剂均购于国药集团化学试剂有限公司。
仪器:
旋转蒸发仪:EYELARotaryevaporatorN1001,东京理化。
电子天平:BT125D,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司。
超声仪:SK7200H(350W),上海科导超声仪器有限公司。
微波炉:格兰仕G80F20CN2L-B8。
离心机:TGL-18C,上海安亭科学仪器厂。
高效液相色谱仪(HPLC):Agilent1260高效液相系统,DAD检测器。
实施例1:
a、摘取连钱草成熟植株顶端嫩芽1.5千克,以顶芽带两对新生嫩叶为采摘对象,长度3-8厘米,采用流水快速冲洗新鲜嫩芽,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后嫩芽均匀放置于已加热铁锅中杀青,锅内温度100度,用手反复翻炒锅内嫩芽,抖搓均匀,嫩芽温度保持在60-80度,可见大量水汽逸出,炒制嫩芽由翠绿变墨绿色,茎、叶柄变软,不易折断,杀青时间12分钟;
c、经铁锅杀青后嫩芽趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后嫩芽沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见嫩芽中有汁液渗出,摊开后使嫩芽成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内嫩芽,抖搓均匀,嫩芽温度保持在50-60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间40分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的嫩芽再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使嫩芽成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度在60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度为65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至嫩芽重量恒定,随后放置于室温下冷却,即可得到连钱草嫩芽茶叶成品190克,样品名为LQC-C-NY。
实施例2:
a、摘取连钱草成熟植株顶端嫩芽1.5千克,以顶芽带两对新生嫩叶为采摘对象,长度3-8厘米,采用流水快速冲洗新鲜嫩芽,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后的嫩芽均匀放置于微波炉(格兰仕G80F20CN2L-B8)里面,厚度3-5厘米,嫩芽表面放置一层纱布,防止水分过度流失,微波炉的输出功率为800瓦,火力100%,杀青时间1分40秒;
c、将微波杀青后嫩芽趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后嫩芽沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见嫩芽中有汁液渗出,摊开后使嫩芽成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内嫩芽,抖搓均匀,嫩芽温度保持在50-60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的嫩芽再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使嫩芽成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度在60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度为65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至嫩芽重量恒定,随后至于室温下冷却,即可得到连钱草嫩芽茶叶成品227克,样品名为LQC-W-NY。
实施例3:
a、摘取连钱草成熟植株顶端嫩芽1.5千克,以顶芽带两对新生嫩叶为采摘对象,长度3-8厘米,采用流水快速冲洗新鲜嫩芽,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、大火将容器内水烧开,上汽后将摊放后的嫩芽放置于木蒸子里,放置厚度10厘米,杀青时间12分钟;
c、将蒸汽杀青后的嫩芽趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的嫩芽沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见嫩芽中有汁液渗出,摊开后使嫩芽成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内嫩芽,抖搓均匀,嫩芽温度保持在50-60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的嫩芽再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使嫩芽成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的嫩芽置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度50-60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至嫩芽重量恒定,随后至于室温下冷却,即可得到连钱草嫩芽茶叶成品183克,样品名为LQC-Z-NY。
实施例4:
a、摘取连钱草成熟植株新鲜叶片4千克,采用流水快速冲洗新鲜叶片,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后的叶片均匀放置于已加热铁锅中杀青,锅内温度100度,用手反复翻炒锅内叶片,抖搓均匀,叶内温度保持在60-80度,可见大量水汽逸出,炒制叶片由翠绿变墨绿色,叶柄变软,不易折断,杀青时间10分钟;
c、经铁锅杀青后的叶片趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的叶沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见叶中有汁液渗出,摊开后使叶成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的叶至于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内叶片,抖搓均匀,叶内温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的叶子再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使叶成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的叶子置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至叶子重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草叶的成品茶584克,样品名为LQC-C-YE。
实施例5:
a、摘取连钱草成熟植株新鲜叶片1千克,采用流水快速冲洗新鲜叶片,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后的叶片均匀放置于微波炉(格兰仕G80F20CN2L-B8)里面,厚度3-5厘米,叶片表面放置一层纱布,防止水分过度流失,微波炉的输出功率为800瓦,火力100%,杀青时间1分40秒;
c、将微波杀青后的叶片趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的叶片沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见叶中有汁液渗出,摊开后使叶成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的叶置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内叶,抖搓均匀,叶内温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的叶再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使叶成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的叶子置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至叶重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草叶的成品茶163克,样品名为LQC-W-YE。
实施例6:
a、摘取连钱草成熟植株新鲜叶片1千克,采用流水快速冲洗新鲜叶片,去除表面泥沙、杂质,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、大火将容器内水烧开,上汽后将摊放后的叶片放置于木蒸子里,厚度10厘米,杀青时间10分钟;
c、将蒸汽杀青后的叶片趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的叶片沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见叶中有汁液渗出,摊开后使叶成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的叶置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内叶片,抖搓均匀,叶内温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的叶子再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,摊开后使叶成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的叶子置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至叶重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草叶的成品茶160克,样品名为LQC-Z-YE。
实施例7:
a、挑选连钱草成熟植株1.85千克,先经流水快速冲洗掉全草表面泥沙、杂质,切成3-5厘米小段,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后的全草均匀放置于已加热铁锅中杀青,锅内温度100度,用手反复翻炒锅内全草,抖搓均匀,全草温度保持在60-80度,可见大量水汽逸出,炒制全草由翠绿变墨绿色,茎、叶柄变软,不易折断,杀青时间10分钟;
c、经铁锅杀青后的全草趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青的后全草沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见全草中有汁液渗出,摊开均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的全草置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内全草,抖搓均匀,全草温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的全草再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,之后均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的全草置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至全草重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草全草茶成品280克,样品名为LQC-C-QC。
实施例8:
a、挑选连钱草成熟植株1千克,先经流水快速冲洗掉全草表面泥沙、杂质,切成3-5厘米小段,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、将摊放后的全草均匀放置于微波炉(格兰仕G80F20CN2L-B8)里面,厚度3-5厘米,全草表面放置一层纱布,防止水分过度流失,微波炉的输出功率为800瓦,火力100%,杀青时间1分40秒;
c、经微波杀青后的全草趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的全草沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见全草中有汁液渗出,摊开均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的全草置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内全草,抖搓均匀,全草温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的全草再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,之后均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的全草置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至全草重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草全草茶成品170克,样品名为LQC-W-QC。
实施例9:
a、挑选连钱草成熟植株1千克,先经流水快速冲洗掉全草表面泥沙、杂质,切成3-5厘米小段,然后均匀摊放于竹筛中沥水,置通风良好、阴凉处摊放1.5小时;
b、大火将容器内水烧开,上汽后将摊放后的全草放置于木蒸子里,厚度10厘米,杀青时间10分钟;
c、经蒸汽杀青后的全草趁热均匀摊放于竹筛内,厚度2厘米,趁温度下降时将杀青后的全草沿同一方向揉搓成团,然后均匀摊开、抖散,反复多次,避免出现打结、成团现象,揉捻至可见全草中有汁液渗出,摊开均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
d、将一次揉捻后的全草置于铁锅中进行初炒,锅内温度控制在60-80度,用手反复翻炒锅内全草,抖搓均匀,全草温度保持在60度,严格控制锅内温度,避免出现焦叶现象,炒制时间30分钟,至减重率为20%,随后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的全草再次进行揉捻,避免出现打结、成团现象,之后均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;
e、将二次揉捻后的全草置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至全草重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草全草茶成品150克,样品名为LQC-Z-QC。
实施例10
按国家标准GB/T8302和GB/T8303进行取样及试样制备,参考国家标准(GB/T8313-2008)对所制备的连钱草茶叶中茶多酚进行含量测定。茶叶磨碎后样品中茶多酚用70%甲醇在70度水浴中提取,福林酚试剂氧化茶多酚中羟基基团并显蓝色,最大吸收波长λ为765纳米。采用没食子酸(纯度99.0%,购于梯希爱(上海)化成工业发展有限公司)作校正标准定量茶多酚含量,根据没食子酸工作液吸光度值与各工作液的没食子酸浓度,绘制标准曲线(Y=0.0092X-0.0005,R2=0.9965)。精密称取0.2克(精确到0.0001克)均匀磨碎的茶叶样品于10毫升离心管中(同一批次茶叶样品称取3份,n=3),加入在70度中预热过的70%甲醇溶液5毫升,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润,立刻移入70度水浴中,浸提10分钟(隔5分钟搅拌一次),浸提后冷却至室温,转入离心机在3500转/分钟转速下离心10分钟,转移上清液至10毫升容量瓶。残渣再用5毫升的70%甲醇溶液提取一次,重复上述操作。合并提取液定容至10毫升,摇匀,过0.45微米滤膜后作为母液。移取母液1.0毫升于100毫升容量瓶中,用水定容至刻度即得测试液。测试样品共计12件:连钱草炒制嫩芽茶叶(LQC-C-NY)、炒制叶茶叶(LQC-C-YE)、炒制全草茶叶(LQC-C-QC)、微波杀青嫩芽茶叶(LQC-W-NY)、微波杀青叶茶叶(LQC-W-YE)、微波杀青全草茶叶(LQC-W-QC)、蒸汽杀青嫩芽茶叶(LQC-Z-NY)、蒸汽杀青叶茶叶(LQC-Z-YE)、蒸汽杀青全草茶叶(LQC-Z-QC)、直接干燥后全草(LQC-YS-QC)、连钱草茎单独干燥样品(LQC-YS-J)、市面销售连钱草药材(LQC-YC-QC)。下表1为连钱草茶不同样品中茶多酚含量测定值(n=3,取平均值)。
表1:
编号 样品名 百分含量(%) 质量比(毫克/克)
1 LQC-C-NY 16.86 168.56
2 LQC-C-YE 20.31 203.15
3 LQC-C-QC 8.11 81.06
4 LQC-W-NY 16.98 169.81
5 LQC-W-YE 24.03 240.25
6 LQC-W-QC 8.52 85.18
7 LQC-Z-NY 22.68 226.81
8 LQC-Z-YE 27.21 272.12
9 LQC-Z-QC 8.75 87.54
10 LQC-YS-QC 6.12 61.21
11 LQC-YS-J 7.27 72.65
12 LQC-YC-QC 6.33 63.27
根据表1测定结果显示:采用三种制茶工艺均能有效提高连钱草中茶多酚含量,全草茶叶中茶多酚平均含量为8.46%,直接干燥全草中茶多酚含量为6.12%,市面连钱草药材中茶多酚含量为6.33%;叶茶中茶多酚平均含量最高,为23.85%,为连钱草全草茶叶中茶多酚含量的2.8倍;嫩芽茶叶中茶多酚平均含量为18.84%,均显著高于全草茶叶中茶多酚含量。因此连钱草叶为获取茶多酚类物质的最佳制茶原料,三种制茶工艺中蒸汽杀青能最大限度的保留连钱草植株中茶多酚类物质,为最优杀青工艺。
实施例11
采用高效液相色谱仪(HPLC)测定连钱草茶叶中主要活性成分迷迭香酸含量变化,色谱分析结果显示:采用本专利提供的制备方法对连钱草药材进行加工处理,与市场上销售的连钱草药材以及直接干燥野生药材比较,迷迭香酸含量显著增加,测定结果如图2所示。具体地,图2中从上到下依次为迷迭香酸标准品和12件测试样品,图2中横坐标表示HPLC运行时间(min),可表示样品中单体化合物的出峰时间;纵坐标表示样品中化合物的紫外吸收强度(mAU),可进行峰面积计算从而确定单体化合物含量。具体测定方法如下:
仪器:安捷伦1260型(DAD检测器)高效液相色谱仪器;
色谱柱型号:AgilentZORBAXSB-C18,5微米,4.6×250毫米;
流动相:乙腈(A)-水(B,含0.2%冰醋酸)=20:80;流速:1毫升/分钟;
检测波长:330纳米;
进样量:10微升;
迷迭香酸标准品(纯度98.0%,购于上海厉鼎生物科技有限公司)浓度:0.62毫克/毫升;
精密称定已粉碎的连钱草成品茶各1克(精确到0.0001克),置于100毫升具塞三角瓶中,加入沸水50毫升加塞冲泡5分钟,趁热抽滤,滤液转移至200毫升容量瓶中,滤渣继续加入沸水重复上述操作两次,合并滤液转移至200毫升容量瓶中,用水定容至刻度作为测试液。通过外标法测定12个连钱草成品茶叶样品中迷迭香酸含量。下表2为连钱草茶叶不同样品中迷迭香酸含量测定值。
表2:
编号 样品名 百分含量(%) 质量比(毫克/克)
1 LQC-C-NY 3.07 30.67
2 LQC-C-YE 2.47 24.65
3 LQC-C-QC 1.38 13.81
4 LQC-W-NY 3.76 37.62
5 LQC-W-YE 3.68 36.76
6 LQC-W-QC 2.40 23.98
7 LQC-Z-NY 4.48 44.83
8 LQC-Z-YE 3.87 38.68
9 LQC-Z-QC 1.62 16.23
10 LQC-YS-QC 0.27 2.74
11 LQC-YS-J 0.21 2.07
12 LQC-YC-QC 0.17 1.65
根据表2测定结果显示,采用三种制茶工艺均能有效提高连钱草中迷迭香酸含量,不同部位、不同杀青方法对迷迭香酸的含量影响显著。三种制茶工艺得到的全草茶叶中迷迭香酸平均含量为1.8%,而直接干燥得到的连钱草全草中迷迭香酸含量为0.27%,市场上销售的连钱草药材中所含的迷迭香酸含量也仅为0.17%,通过制茶工艺可使全草中迷迭香酸含量提高6-11倍;采用连钱草嫩芽制备的茶叶中,迷迭香酸平均含量达3.77%,比全草茶叶含量高出2倍以上,比市面上销售的连钱草药材中迷迭香酸含量高22倍;采用连钱草叶制备的茶叶中,迷迭香酸平均含量也达到了3.34%,远超过直接干燥后全草以及药材中迷迭香酸含量。此外,三种杀青工艺中以蒸汽杀青方式最佳,能最大限度的保存植株中迷迭香酸成分稳定性,其次为微波杀青。
实施例12
参考国家标准(GB/T23193-2008),对所制备的连钱草茶叶中茶氨酸经水加热提取、净化脱色、衍生化处理后,采用HPLC测定12个茶叶样品中茶氨酸含量,测定结果显示:12个茶叶样品中均能检测出微量的茶氨酸成分,其中以连钱草嫩芽为原料制备的茶叶样品中茶氨酸含量相对较高,色谱分析结果如图3所示。具体地,图3中从上到下依次为茶氨酸标准品和12件测试样品,12件测试样品编号与图2一致;图3中横坐标表示HPLC运行时间(min),可表示样品中单体化合物的出峰时间;纵坐标表示样品中化合物的紫外吸收强度(mAU),可进行峰面积计算从而确定单体化合物含量;同时,图3右上角表示了茶氨酸标准品以及样品中茶氨酸的紫外吸收特征图,表示两者为同一化合物。
仪器:安捷伦1260型(DAD检测器)高效液相色谱仪器;
色谱柱型号:AgilentZORBAXSB-C18,5微米,4.6×250毫米;
流动相:20毫摩尔/升乙酸铵溶液(A)
20毫摩尔/升乙酸铵溶液:甲醇:乙腈=1:2:2(B)
VA:VB=1:1;
流速:1毫升/分钟;
柱温:40度;
检测波长:338纳米;
进样量:10微升;
茶氨酸标准品(纯度99.0%,上海百灵威化学技术有限公司)浓度:0.2012毫克/毫升;
精密称定0.5克(精确到0.0001克)磨碎后茶叶样品,至于250毫升圆底烧瓶中,加水100毫升,80度振摇恒温水浴锅中浸提45分钟,冷却后将浸提液离心、过滤,上清液混匀后待用。混匀后上清液经C18固相萃取柱脱色净化,再过0.45微米滤膜,至棕色液相小瓶中待衍生用。进样前准确吸取0.5毫升样品试液至液相小瓶中,随后加入0.5毫升邻苯二甲醛(OPA)衍生试剂,反应2分钟后,立即进样10微升测定含量。下表3为连钱草茶叶不同样品中茶氨酸含量测定值。
表3:
编号 样品名 百分含量(%)
1 LQC-C-NY 0.0142
2 LQC-C-YE 0.0056
3 LQC-C-QC 0.0048
4 LQC-W-NY 0.0212
5 LQC-W-YE 0.0057
6 LQC-W-QC 0.0047
7 LQC-Z-NY 0.0126
8 LQC-Z-YE 0.0047
9 LQC-Z-QC 0.0054
10 LQC-YS-QC 0.0047
11 LQC-YS-J 0.0052
12 LQC-YC-QC 0.0043
表3结果显示,总体上连钱草植物中茶氨酸含量较低,但不同部位中茶氨酸含量差异明显。嫩芽中茶氨酸含量相对较高,平均含量为0.016%,叶和全草中茶氨酸平均含量较为接近,分别为0.0053%和0.0050%,直接干燥的连钱草全草以及市面上销售的连钱草药材中所含茶氨酸含量分别为0.0047%和0.0043%。此外,本专利申请为首次提到连钱草植物中含有少量的茶氨酸物质。
实施例13
根据文献(杨曦亮等,不同产地连钱草药材中总黄酮成分含量测定,2009,5(1):21-23)提供方法,测定不同制备方法得到的连钱草茶中总黄酮含量。精密称定茶叶磨碎后样品0.5克(精确到0.0001克,,同一批次茶叶样品称取3份,n=3),置100毫升具塞烧瓶中,精密加入60毫升60%乙醇,密塞,称重,超声提取30分钟,放冷,密塞,再称重,用60%乙醇补足减失重量,摇匀过滤,重复上次操作两次,合并滤液置于200毫升容量瓶中,60%乙醇定容至刻度,即得供试品溶液。精密称定芦丁标准品19.93毫克(纯度≥98%,实验室自制),60%乙醇定容至20毫升容量瓶作为标准液。根据芦丁工作液吸光度值与各工作液的芦丁浓度,绘制标准曲线(Y=0.1596X-0.0092,R2=0.9984)。下表4为连钱草茶叶不同样品中总黄酮含量测定值(n=3,取平均值)。
表4:
编号 样品名 百分含量(%) 质量比(毫克/克)
1 LQC-C-NY 26.26 262.61
2 LQC-C-YE 20.47 204.57
3 LQC-C-QC 11.45 114.46
4 LQC-W-NY 33.72 337.23
5 LQC-W-YE 28.13 281.32
6 LQC-W-QC 22.10 221.02
7 LQC-Z-NY 29.51 295.14
8 LQC-Z-YE 29.91 299.11
9 LQC-Z-QC 18.51 185.12
10 LQC-YS-QC 2.95 29.50
11 LQC-YS-J 4.52 45.24
12 LQC-YC-QC 3.67 36.66
表4测定结果显示,连钱草经制茶工艺处理后总黄酮含量显著增加:全草茶叶中总黄酮平均含量为17.35%,直接干燥得到的连钱草全草中总黄酮含量仅为2.95%,市场上销售的连钱草药材中所含的总黄酮含量为3.67%。嫩芽茶叶中总黄酮平均含量为29.83%,连钱草叶茶中总黄酮平均含量略低于嫩芽,为26.17%,上述原料制备的连钱草茶中总黄酮含量均超过直接干燥后的全草以及市场上销售的连钱草药材中总黄酮的7-10倍。说明本专利申请提供的制茶工艺能显著提高连钱草中总黄酮的溶出率,选取嫩芽和叶作为制茶原料能更加高效利用植物资源。
实施例14
采用高效液相色谱仪(HPLC)通过外标法测定12个连钱草成品茶中主要活性成分木犀草素-7-二葡萄糖醛酸苷(化合物Ⅰ)和芹菜素-7-二葡萄糖醛酸苷(化合物Ⅱ)的含量变化,色谱分析结果显示:12个茶叶样品中均能有效检测出活性化合物Ⅰ和化合物Ⅱ,采用连钱草叶作为原料进行加工处理,与市场上销售的连钱草药材以及直接干燥野生药材比较,均能显著增加化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的含量,测定结果如图4所示。具体地,图4中从上到下依次为化合物Ⅰ标准品、化合物Ⅱ标准品和12件测试样品,12件测试样品编号与图2一致。在图4中,横坐标表示HPLC运行时间(min),可表示样品中单体化合物的出峰时间;纵坐标表示样品中化合物的紫外吸收强度(mAU),可进行峰面积计算从而确定单体化合物含量。具体测定方法如下:
仪器:安捷伦1260型(DAD检测器)高效液相色谱仪器;
色谱柱型号:AgilentZORBAXSB-C18,5微米,4.6×250毫米;
流动相:乙腈(A)-水(B,含0.2%冰醋酸)=15:85;流速:1毫升/分钟;
检测波长:360纳米;
进样量:10微升;
木犀草素-7-二葡萄糖醛酸苷标准品(纯度98.65%,实验室自制)浓度:0.98毫克/毫升;
芹菜素-7-二葡萄糖醛酸苷标准品(纯度96.52%,实验室自制)浓度:1.165毫克/毫升;
测定试样制备方法参考申请号为201410104913的中国专利申请。精密称定已粉碎的连钱草成品茶各1克(精确到0.0001克),置于100毫升具塞三角瓶中,加入沸水50毫升加塞冲泡5分钟,趁热抽滤,滤液转移至200毫升三角瓶中,滤渣继续加入沸水重复上述操作两次,合并滤液转移至200毫升三角瓶中;将滤液采用旋转蒸发仪减压浓缩至5毫升,加入3倍体积的95%乙醇,4度环境静置过夜,随后采用离心机,3500转/分钟,离心10分钟,取固体沉淀,蒸馏水溶解后定容至10毫升容量瓶,即得供试品溶液。下表5为连钱草茶叶不同样品中活性成分化合物Ⅰ的含量测定值,表6为连钱草茶叶不同样品中活性成分化合物Ⅱ的含量测定值。
表5:
编号 样品名 百分含量(%) 质量比(毫克/克)
1 LQC-C-NY 0.1005 1.0048
2 LQC-C-YE 0.3914 3.9139
3 LQC-C-QC 0.1372 1.3717
4 LQC-W-NY 0.1467 1.4673
5 LQC-W-YE 0.5448 5.4485
6 LQC-W-QC 0.2758 2.7582
7 LQC-Z-NY 0.1220 1.2196
8 LQC-Z-YE 0.3215 3.2153
9 LQC-Z-QC 0.2296 2.2959
10 LQC-YS-QC 0.1549 1.5495
11 LQC-YS-J 0.0459 0.4589
12 LQC-YC-QC 0.1345 1.3453
表6:
编号 样品名 百分含量(%) 质量比(毫克/克)
1 LQC-C-NY 0.0166 0.1661
2 LQC-C-YE 0.0855 0.8546
3 LQC-C-QC 0.0267 0.2667
4 LQC-W-NY 0.0166 0.1665
5 LQC-W-YE 0.0989 0.9877
6 LQC-W-QC 0.0480 0.4805
7 LQC-Z-NY 0.0137 0.1372
8 LQC-Z-YE 0.0547 0.5468
9 LQC-Z-QC 0.0371 0.3711
10 LQC-YS-QC 0.0649 0.6485
11 LQC-YS-J 0.0095 0.0946
12 LQC-YC-QC 0.0897 0.8968
表5、6测定结果显示,通过制茶工艺处理后,全草茶叶中化合物Ⅰ溶出率提高1-2倍,平均含量为0.2142%,直接干燥得到的连钱草全草中化合物Ⅰ含量为0.1549%,市场上销售的连钱草药材中化合物Ⅰ含量为0.1345%;叶茶中化合物Ⅰ平均含量为0.4192%,嫩芽茶中化合物Ⅰ平均含量为0.1231%,茎中化合物Ⅰ含量较低,仅为0.0459%;而微波杀青工艺能更好的保留原植物中活性化合物Ⅰ。此外,与化合物Ⅰ比较,化合物Ⅱ在连钱草全草中平均含量相对较低,但采用微波制茶工艺处理后叶中化合物Ⅱ含量(0.0989%)依然高于直接干燥得到的全草(0.0649%)以及市面上销售的连钱草药材(0.0897%)。因此,选取连钱草叶作为制茶原料,采用微波进行杀青处理,为最优保存原植物中活性化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的方法。
实施例15
根据前述连钱草茶中活性成分的测定结果,优选连钱草新鲜叶作为原料,制备方法参考实施例5。微波杀青后的叶片趁热揉捻过程中,按每公斤鲜叶加入甜菊素150毫克,揉捻摊开后使叶成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;随后将揉捻后的叶置于铁锅中进行初炒,至减重率为20%;之后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的叶再次进行揉捻,揉捻过程中再次按每公斤鲜叶加入甜菊素150毫克,摊开后使叶成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;将二次揉捻后的叶子置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至叶重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草叶的成品茶。
上述成品茶采用细筛筛去茶叶中细碎末杂质,然后按色泽、形状、味道进行分级,包装密封后即可得到连钱草保健茶。
实施例16
为增强其保健功能,同时改善口感,本发明还提供一种连钱草茶,可以同其他天然植物配制成药茶,且加入重量不超过茶叶总重量的30%为宜。
优选连钱草新鲜叶作为原料,制备方法参考实施例5、15。微波杀青后的叶片趁热揉捻过程中,按每公斤鲜叶加入20克甘草粉末,或加入等比例的甘草水浸提浸膏(用水稀释后均匀喷晒在叶片上),揉捻摊开后使叶成条率达60%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;随后将揉捻后的叶置于铁锅中进行初炒,至减重率为20%;之后出锅均匀摊放于竹筛内,趁温度下降将初炒后的叶再次进行揉捻,揉捻过程中再次按每公斤鲜叶加入20克甘草粉末,或加入等比例的甘草水提浸膏(用水溶解稀释后均匀喷晒在叶片上),混匀且吸收完全后,摊开使叶成条率达95%以上,均匀放置于竹筛内,厚度2厘米;将二次揉捻后的叶子置于铁锅中进行复炒,避免出现打结、成团现象,小火加热,控制锅内温度60度,炒制减重率为80%,炒制时间40分钟,随后置于鼓风干燥箱内均匀摊开,厚度2厘米,再次干燥,设定温度65度,分三次进行干燥,每次干燥完后中途取出摊晾10分钟,每次干燥时间45分钟,至叶重量恒定,随后置于室温下冷却,即可得到连钱草叶的药茶。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (13)

1.一种连钱草茶叶制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、原料准备:挑选连钱草成熟植株个体上的完整叶片,或连钱草成熟植株顶端嫩芽,或连钱草成熟植株个体即全草作为原料,并经流水快速冲掉所述原料表面的异物,且所述全草需要切成段;
B、原料摊放:将经流水快速清洗后的嫩芽、叶或切段后的全草均匀摊放在竹筛内,置通风 良好且阴凉处摊放;
C、杀青:将经过摊放后的嫩芽、叶或全草杀青,让连钱草植株中氧化酶的活性被破坏;
D、摊凉:将经过杀青处理后的嫩芽、叶或全草趁热摊放于竹筛内冷却;
E、一次揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时将杀青后的嫩芽、叶或全草沿一个方向揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后均匀摊开、抖散;再揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后再均匀摊开、抖散;如此循环往复,直至嫩芽、叶或全草的成条率至少达到60%以上后,均匀摊放于竹筛内;
F、初炒:将一次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行炒制,炒至减重率为20%;所述初炒时铁锅内的温度为60-80度,炒制时间为30-60分钟;
G、二次揉捻:将初炒后的嫩芽、叶或全草按照步骤E中的方法再次揉捻,直至嫩芽、叶或全草的成条率达到90-100%后,再均匀摊放于竹筛内;
H、复炒:将二次揉捻后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中进行复炒,炒至减重率为70-80%;所述复炒时铁锅内的温度为50-70度,炒制时间为30-60分钟;
I、干燥冷却:将复炒后的嫩芽、叶或全草置于干燥箱内,干燥至恒重,然后取出室温下冷却,即可得到连钱草茶叶成品。
2.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤A中原料准备包括:
选取连钱草成熟植株顶端嫩芽进行采摘,以顶芽带两对新生嫩叶为采集对象,采集长度3-8厘米,流水下快速冲洗掉嫩芽表面的泥沙、杂质;或
挑选连钱草成熟植株个体,采集除嫩芽、枯叶、烂叶以外的完整叶片,经流水快速冲洗掉新鲜叶表面泥沙、杂质;或
挑选连钱草成熟植株个体,经流水快速冲洗掉连钱草成熟植株个体即全草表面的泥沙、杂质后,将全草切成3-5厘米小段。
3.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤A中,优选连钱草成熟植株个体上的完整叶片或顶端嫩芽作为制茶原料。
4.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤B中,所述嫩芽、叶或切段后的全草摊放在竹筛内的厚度为2-3厘米,时间为1-2小时。
5.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤C中,所述杀青包括:
炒制杀青:将铁锅烧热,锅内温度为100-120度,将摊放后的嫩芽、叶或全草置于铁锅中,手动快速翻炒,炒制温度为60-80度,每次投量为1-5千克;嫩芽杀青时间10-15分钟,叶杀青时间8-12分钟,全草杀青时间8-12分钟;或
微波杀青:将摊放后的嫩芽、叶或全草置于微波炉里面,放置厚度为3-5厘米,且在嫩芽、叶或全草的表面放置一层纱布,微波功率为600-800瓦,火力100%,每次投量为1-3千克,杀青时间1-3分钟;或
蒸汽杀青:将容器内的水烧开,上汽后将摊放后的嫩芽、叶或全草放置于蒸锅里,每次投量为1-3千克,放置厚度为5-15厘米;嫩芽杀青时间8-15分钟,叶杀青时间6-12分钟,全草杀青时间6-12分钟。
6.如权利要求5所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,优选微波杀青或蒸汽杀青进行杀青处理。
7.如权利要求6所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,更优选微波杀青进行杀青处理,并选用连钱草叶作为制茶原料。
8.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤E中,所述一次揉捻包括:
手工揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时用手将杀青后的嫩芽、叶或全草沿一个方向揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后均匀摊开、抖散;再揉搓成团,揉至有明显汁液渗出后再均匀摊开、抖散;如此循环往复,揉捻至使嫩芽、叶或全草的成条率至少达到60%以上后,以2-3厘米的厚度均匀摊放于竹筛内;或
机器揉捻:在摊凉过程中趁温度下降时将杀青后的嫩芽、叶或全草置于揉捻机里,揉捻至使嫩芽、叶或全草的成条率达到60-80%后,以2-3厘米的厚度均匀摊放于竹筛内。
9.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤E和G中,所述揉捻过程中加入改善连钱草茶叶味道的甜味剂。
10.如权利要求9所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述甜味剂选用安赛蜜、甜菊素、薄荷脑、海藻糖和阿斯巴甜中的一种或几种;或选用甘草、枸杞、大枣和菊花中的一种或几种。
11.如权利要求1所述的连钱草茶叶制备方法,其特征在于,所述步骤I中,所述干燥箱内的温度为60-80度,放置的嫩芽、叶或全草要干燥三次,每次干燥的时间为30-60分钟,并在每次干燥完后需将嫩芽、叶或全草取出摊晾5-15分钟。
12.一种连钱草茶叶,其特征在于,所述连钱草茶叶由权利要求1-11中任一项所述的连钱草茶叶制备方法制备而成。
13.如权利要求12所述连钱草茶叶在制备保健茶、减肥茶或药茶中的应用。
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