CN104000840A - 一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，目的在于提供一种从天麻中同时尽可能多的提取天麻素和天麻多糖的方法，该方法包括如下步骤：先采用醇提，然后对第一提取液进行减压蒸馏、D101大孔吸附树脂吸附，再在层析柱内加入新的D101大孔吸附树脂，并将吸附有天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于层析柱内新的D101大孔吸附树脂上方，形成立体吸附、洗脱结构，并得到天麻素提取液，而滤渣则采用水在75-85℃条件下进行提取，并得到天麻多糖提取液，即得产品。本发明对设备要求不高，设备投入小、成本低，适合工业化大生产。本发明能有效简化制备流程，降低提取成本，对于天麻的提取应用，具有重要意义。

Description

一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其是天麻提取领域，具体为一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法。

背景技术

天麻为兰科天麻属多年生草本植物天麻（Gastrodia elata Blume）的干燥块茎。其具有息风、定惊止痉、祛风除痹的功效，能够用于高血压、眩晕、头痛、口眼歪斜、各种肢体麻木、小儿惊厥等病症的治疗，作为我国传统名贵中药，药用历史悠久。天麻块茎含有的主要化学成分为天麻素及其苷元、香荚兰醇，其他酚性化合物，和谷甾醇、胡萝卜苷、柠檬酸、棕榈酸、琥珀酸及微量元素等，以及大量的多糖类化合物。据文献报道，天麻中的主要有效成分为天麻素，而天麻中的多糖类化合物（即天麻多糖）则具有提高免疫功能、延缓衰老、降血压、抗炎、抑制病毒、抗抑郁及抗辐射的作用。因此，对天麻中的天麻素及天麻多糖进行提取，显得极为重要。

从天麻中提取天麻素的方法很多，包括微波法、回流提取法、浸泡法等，但所得的含有天麻素的产品中天麻素含量均较低。《天麻提取工艺的研究》（郭增军等）中利用乙醇溶液提取天麻得到的浸膏中，天麻素含量最高为0.252％。《天麻提取物工艺及其功效成分含量的分析》（金虹等）中，以乙醇溶液进行提取，所得到的浸膏中天麻素含量最高为0.331％。《天麻中天麻素的提取工艺》（张媛等）中，利用乙醇溶液提取得到的浸膏中天麻素含量最高为1.767％。中国专利CN201210035854.4公开了一种同时提取天麻多糖和天麻素的新方法，其将干天麻粉经水提、醇沉后，分别将沉淀物经醇洗、减压干燥、粉碎得到天麻多糖，将醇滤液减压浓缩后得到天麻素浸膏；该方法得到的提取物中，天麻素含量只有2.6~2.8％，其采用水提、醇沉、减压浓缩得天麻素浸膏，其中多糖的制备方法经过抽滤的步骤，时间长，设备要求高，工艺较为繁琐，不适合于工业化连续生产。中国专利申请CN201310585026公开了一种天麻多糖提取方法，其采用微波和超滤膜制备，设备成本高，并且天麻多糖含量只有55~62%。另有专利以新鲜天麻进行天麻素和天麻多糖的同时提取，然而该方法操作时间长，工艺繁琐，而且新鲜天麻保存时间有限，这也限制了该方法的工业化应用，无法满足实际生产的需要。

对于天然药物而言，提取的有效成分含量越高，其利用度越高，从而进一步降低有效成分的提取成本。因此，本发明的目的在于提供一种从天麻中同时尽可能多的提取天麻素和天麻多糖的方法。

发明内容

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法。本发明以天麻为原料，对天麻药材进行高效利用，制备出含有天麻素和天麻多糖的混合物。与现有方法采用水提、醇沉不同，本发明采用醇提、水沉的方式，辅以大孔树脂吸附，同时进行天麻素和天麻多糖的加工处理，并使得制备的产品中的天麻素和天麻多糖的含量得到显著提高。本发明对设备要求不高，设备投入小、成本低，适合工业化大生产。本发明能有效简化制备流程，降低提取成本，对于天麻的提取应用，具有重要意义。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，包括如下步骤：

（1）取天麻原料，将天麻原料进行粉碎，然后将粉碎后的天麻原料放入提取釜内，再向提取釜内加入60-80%的乙醇，回流提取2-4次，合并提取液，得第一提取液，余下的滤渣备用；

（2）将第一提取液进行减压蒸馏，至第一提取液无乙醇味，得提取物，将提取物分散于水中，并加入D101大孔吸附树脂，搅拌使D101大孔吸附树脂充分吸附，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂；

（3）取层析柱，向层析柱中加入未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，将步骤2得到的吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂从层析柱上部缓慢加入，使吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂沉降静置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，然后用水对层析柱进行洗脱，收集含有天麻素的洗脱液，得到天麻素提取液；

（4）将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水在75-85℃下提取2-3次，每次提取时间为0.5-2h，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液；

（5）将步骤3得到的天麻素提取液与步骤4得到的天麻多糖提取液合并，并将合并后的溶液干燥，即得产品；

所述步骤1中，以1kg天麻原料计，每次回流提取需要向提取釜内加入3500-4500mL的乙醇，每次回流提取的时间为1.5-2.5h；

所述步骤2中，以1kg天麻原料计，将提取物分散于1400-1700mL水中，并加入1200-1400mL的D101大孔吸附树脂；

所述步骤3中，向层析柱中加入的未进行吸附的D101大孔吸附树脂的体积为步骤2中吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂的2-4倍；

所述步骤3中，用水对层析柱进行洗脱，洗脱速度为0.04-0.06mL·g^-1·min^-1。

所述步骤1中，向提取釜内加入70%的乙醇，回流提取3次，每次回流提取的时间为2h；以1kg天麻原料计，每次回流提取需要向提取釜内加入4000mL的乙醇。

所述步骤2中，将第一提取液进行减压蒸馏，回收乙醇，至第一提取液无乙醇味，得提取物。

所述步骤2中，以1g提取物计，加入的水的体积为6mL，加入的D101大孔吸附树脂的体积为5mL。

所述步骤3中，用水对层析柱进行洗脱，洗脱速度为0.05mL·g^-1·min^-1。

所述步骤4中，将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水，在75-85℃下提取1h，提取2次，趁热过滤，合并滤液，得添天麻多糖提取液。

所述步骤4中，以1kg天麻原料计，每次提取加入的水的体积为13000-15000mL。

所述步骤4中，将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水在80℃下提取2次，以1g滤渣计，每次加入水的体积为14mL。

针对前述问题，本发明提供一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法。本发明打破传统水提、醇沉的提取方式，首先采用醇提，然后对第一提取液进行减压蒸馏、D101大孔吸附树脂吸附，再在层析柱内加入新的D101大孔吸附树脂，并将吸附有天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于层析柱内新的D101大孔吸附树脂上方，形成立体吸附、洗脱结构，并得到天麻素提取液，而滤渣则采用水在75-85℃条件下进行提取，并得到天麻多糖提取液，最终经干燥得到含天麻素和天麻多糖的提取物（即产品）。步骤1中，每次回流提取需要向提取釜内加入3500-4500mL的乙醇，回流提取1.5-2.5h，过滤，得滤渣和提取液，再向滤渣中加入3500-4500mL的乙醇，重复前述步骤2-4次，即完成回流提取2-4次。现有方法，所得到的产品中，天麻素和/或天麻多糖的含量往往较低，为了得到高纯度的产品，往往需要进行二次提纯，其中必然存在能源消耗和有效成分的浪费，而本发明将提取与纯化合为一体，所得的产品中，天麻素与天麻多糖已经具有较高的纯度，无需进行二次提纯。经测定，采用本发明方法制备的产品中，天麻素含量可达到4-5％，相对于现有工艺，天麻素含量大大提高，而天麻多糖的含量更是高达85~95％，天麻药材得到了充分的利用。

本发明采用醇提、水沉，辅以D101大孔吸附树脂吸附，通过控制反应条件，得到了高含量的含天麻素和天麻多糖的提取物。本发明的制备方法操作简单，工艺流程短、成本低，所采用的D101大孔吸附树脂可反复利用，能够满足工业化大规模生产的需要，并且采用的组分均为无毒、无害溶剂，乙醇也可以反复回收利用，具有经济环保的优点。

经高效液相色谱检测，本发明所制备的含天麻素和天麻多糖的提取物中天麻素含量在4.2％以上，天麻多糖含量在85~95％，可用于医疗、保健食品等领域，并且保存、运输方便，具有较好的治疗效果和广阔的市场应用前景。

具体实施方式

本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。

本说明书中公开的任一特征，除非特别叙述，均可被其他等效或具有类似目的的替代特征加以替换。即，除非特别叙述，每个特征只是一系列等效或类似特征中的一个例子而已。

实施例1

取天麻药材，将天麻药材粉碎后，过一号筛，取100g。将所取的过一号筛的药材放入提取釜内，回流提取3次，合并提取液得第一提取液，余下的滤渣备用。每次回流提取时，向提取釜内70％的乙醇400mL，回流2h。对第一提取液进行减压蒸馏，回收其中的乙醇，至无乙醇味为止，得提取物。向提取物中加入155mL水，混合均匀，再加入130mlD101大孔吸附树脂进行吸附，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂，以下简称为第一树脂。取层析柱，向层析柱中加入420mL未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，从层析柱上部缓慢加入第一树脂，然后用水对层析柱进行洗脱，洗脱速度为5mL/min，35mL收集一次，并从1开始依次编号。将编号18至编号60的洗脱液合并，得到天麻素提取液。将经乙醇回流提取后得到的滤渣放入反应釜内，加入1400mL水，在80℃下提取1h，趁热过滤，收集滤液，重复前述水提过程1次。合并两次滤液，得天麻多糖提取液。合并天麻素提取液和天麻多糖提取液，采用喷雾干燥或减压干燥，即得产品。

采用HPLC测定，结果如下：天麻素含量为4.3％，天麻多糖含量为88％。

实施例2

取天麻药材粉碎后，过一号筛，取350g，记做原料。采用乙醇对原料进行回流提取3次，合并滤液，得第一提取液，并收集回流提取后的滤渣备用。其中，单次回流提取采用70％的乙醇1400mL，单次回流提取的时间为2h。对第一提取液进行减压蒸馏，回收其中的乙醇，至无乙醇味为止，得提取物。向提取物中加入545mL的水，混合均匀，再加入460mlD101大孔吸附树脂进行吸附，充分吸附后，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂。

另取层析柱，向层析柱中加入1500mL未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，再将吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，用水进行洗脱，洗脱速度为18mL/min，每125mL洗脱液收集一次，并从1开始依次编号。将编号18-60的洗脱液合并，得到天麻素提取液。

将经乙醇回流提取后得到的滤渣放入反应器内，加水在80℃下提取2次，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液。加水提取时，每次的加水量为5000mL，提取时间为1h。

合并天麻素提取液和天麻多糖提取液，采用喷雾干燥或减压干燥，制成粉末状含天麻素和天麻多糖的提取物。

采用HPLC测定，结果如下：天麻素含量为4.5％，天麻多糖含量为95％。

实施例3

取天麻药材粉碎后，过一号筛，取600g，记做原料。采用乙醇对原料进行回流提取3次，合并滤液，得第一提取液，并收集回流提取后的滤渣备用。其中，单次回流提取采用70％的乙醇2700mL，单次回流提取的时间为2h。对第一提取液进行减压蒸馏，回收其中的乙醇，至无乙醇味为止，得提取物。向提取物中加入930mL的水，混合均匀，再加入780mlD101大孔吸附树脂进行吸附，充分吸附后，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂。

另取层析柱，向层析柱中加入2500mL未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，再将吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，用水进行洗脱，洗脱速度为30mL/min，每215mL洗脱液收集一次，并从1开始依次编号。将编号18-60的洗脱液合并，得到天麻素提取液。

将经乙醇回流提取后得到的滤渣放入提取设备内，加水在80℃下提取2次，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液。加水提取时，每次的加水量为8000mL，提取时间为1h。

合并天麻素提取液和天麻多糖提取液，采用喷雾干燥或减压干燥，制成粉末状含天麻素和天麻多糖的提取物。

采用HPLC测定，结果如下：天麻素含量为4.6％，天麻多糖含量为90％。

实施例4

取天麻药材粉碎后，过一号筛，取650g，记做原料。采用乙醇对原料进行回流提取4次，合并滤液，得第一提取液，并收集回流提取后的滤渣备用。其中，单次回流提取采用60％的乙醇2500mL，单次回流提取的时间为2.5h。对第一提取液进行减压蒸馏，回收其中的乙醇，至无乙醇味为止，得提取物。向提取物中加入1000mL的水，混合均匀，再加入780mlD101大孔吸附树脂进行吸附，充分吸附后，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂。

另取层析柱，向层析柱中加入2400mL未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，再将吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，用水进行洗脱，洗脱速度为33mL/min，每230mL洗脱液收集一次，并从1开始依次编号。将编号18-60的洗脱液合并，得到天麻素提取液。

将经乙醇回流提取后得到的滤渣放入提取设备内，加水在75℃下提取3次，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液。加水提取时，每次的加水量为8500mL，提取时间为2h。

合并天麻素提取液和天麻多糖提取液，采用喷雾干燥或减压干燥，制成粉末状含天麻素和天麻多糖的提取物。

采用HPLC测定，结果如下：天麻素含量为4.5％，天麻多糖含量为92％。

实施例5

取天麻药材粉碎后，过一号筛，取500g，记做原料。采用乙醇对原料进行回流提取2次，合并滤液，得第一提取液，并收集回流提取后的滤渣备用。其中，单次回流提取采用80％的乙醇2200mL，单次回流提取的时间为1.5h。对第一提取液进行减压蒸馏，回收其中的乙醇，至无乙醇味为止，得提取物。向提取物中加入800mL的水，混合均匀，再加入650mlD101大孔吸附树脂进行吸附，充分吸附后，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂。

另取层析柱，向层析柱中加入2000mL未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，再将吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，用水进行洗脱，洗脱速度为25mL/min，每175mL洗脱液收集一次。将含有天麻素的洗脱液合并，得到天麻素提取液。

将经乙醇回流提取后得到的滤渣放入提取设备内，加水在85℃下提取2次，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液。加水提取时，每次的加水量为7000mL，提取时间为0.8h。

合并天麻素提取液和天麻多糖提取液，采用喷雾干燥或减压干燥，制成粉末状含天麻素和天麻多糖的提取物。

采用HPLC测定，结果如下：天麻素含量为4.4％，天麻多糖含量为88％。

本发明并不局限于前述的具体实施方式。本发明扩展到任何在本说明书中披露的新特征或任何新的组合，以及披露的任一新的方法或过程的步骤或任何新的组合。

Claims (8)

1.一种含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）取天麻原料，将天麻原料进行粉碎，然后将粉碎后的天麻原料放入提取釜内，再向提取釜内加入60-80%的乙醇，回流提取2-4次，合并提取液，得第一提取液，余下的滤渣备用；

（2）将第一提取液进行减压蒸馏，至第一提取液无乙醇味，得提取物，将提取物分散于水中，并加入D101大孔吸附树脂，搅拌使D101大孔吸附树脂充分吸附，得吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂；

（3）取层析柱，向层析柱中加入未进行吸附的D101大孔吸附树脂，待未进行吸附的D101大孔吸附树脂沉降静置后，将步骤2得到的吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂从层析柱上部缓慢加入，使吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂沉降静置于未进行吸附的D101大孔吸附树脂上方，然后用水对层析柱进行洗脱，收集含有天麻素的洗脱液，得到天麻素提取液；

（4）将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水在75-85℃下提取2-3次，每次提取时间为0.5-2h，趁热过滤，合并滤液，得天麻多糖提取液；

（5）将步骤3得到的天麻素提取液与步骤4得到的天麻多糖提取液合并，并将合并后的溶液干燥，即得产品；

所述步骤1中，以1kg天麻原料计，每次回流提取需要向提取釜内加入3500-4500mL的乙醇，每次回流提取的时间为1.5-2.5h；

所述步骤2中，以1kg天麻原料计，将提取物分散于1400-1700mL水中，并加入1200-1400mL的D101大孔吸附树脂；

所述步骤3中，向层析柱中加入的未进行吸附的D101大孔吸附树脂的体积为步骤2中吸附天麻提取液的D101大孔吸附树脂的2-4倍；

所述步骤3中，用水对层析柱进行洗脱，洗脱速度为0.04-0.06mL·g^-1·min^-1。

2.根据权利要求1所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，向提取釜内加入70%的乙醇，回流提取3次，每次回流提取的时间为2h；以1kg天麻原料计，每次回流提取需要向提取釜内加入4000mL的70%乙醇。

3.根据权利要求1所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，将第一提取液进行减压蒸馏，回收乙醇，至第一提取液无乙醇味，得提取物。

4.根据权利要求3所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，以1g提取物计，加入的水的体积为6mL，加入的D101大孔吸附树脂的体积为5mL。

5.根据权利要求1所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，用水对层析柱进行洗脱，洗脱速度为0.05mL·g^-1·min^-1。

6.根据权利要求1-5任一项所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水，在75-85℃下提取1h，提取2次，趁热过滤，合并滤液，得添天麻多糖提取液。

7.根据权利要求1-6任一项所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，以1kg天麻原料计，每次提取加入的水的体积为13000-15000mL。

8.根据权利要求1-5任一项所述含天麻素和天麻多糖的提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，将步骤1得到的滤渣放入反应釜内，加水在80℃下提取2次，以1g滤渣计，每次加入水的体积为14mL。