CN103988973A

CN103988973A - 大豆乳清蛋白组合物及其回收方法

Info

Publication number: CN103988973A
Application number: CN201410168443.1A
Authority: CN
Inventors: D.马什; K.克勒; C.S.沙斯蒂恩; B.塔尔克; M.梅克尔; J.吴
Original assignee: Central Soya Co Inc
Current assignee: Central Soya Co Inc; Solae LLC
Priority date: 2009-12-30
Filing date: 2010-12-30
Publication date: 2014-08-20
Also published as: US20130023480A1; EP2519245A1; EP2519251A2; US20130023649A1; CN102770147A; BR112012016232A2; JP2013516427A; WO2011082359A1; EP2519117A1; CA2785736A1; US20120329993A1; EP2785730A1; BR112012016225A2; US20120289683A1; CN102781255B; JP2013516431A; CN102781459A; JP2013516429A; JP2013516432A; WO2011082360A1

Abstract

本发明涉及大豆乳清蛋白组合物及其回收方法。本发明公开了从乳清工艺流中回收和分离大豆乳清蛋白和其它组分的方法。

Description

大豆乳清蛋白组合物及其回收方法

本申请为申请号为201080064855.0的分案申请，要求2009年12月30日的优先权。

相关申请的交叉引用

本专利申请要求提交于2009年12月30日的美国临时申请序列61/291,312的优先权，该临时申请全文以引用方式并入本文。

发明领域

本公开提供了从大豆乳清工艺流中回收靶蛋白和其它有用组分的方法。具体地讲，本公开提供了利用一个或多个膜或层析分离操作以分离和移除大豆蛋白、包括新大豆乳清蛋白和纯化靶蛋白，以及糖、矿物和其它组分，从而形成纯化废水流的方法。

发明背景

大豆(Glycine max)是在世界各地生长的豆科作物。大豆作为食用油、高蛋白食物、食物成分和原料、以及许多工业产品的来源，具有巨大的经济重要性。

当人类消费大豆蛋白时它通常为三种形式的其中一种。这些包括粉(粗磨粉)、浓缩物和分离物。所有三种类型均由脱脂大豆粕制成。粉和粗磨粉包含至少50％的蛋白并且通过研磨所述粕制成。基于干重，大豆蛋白浓缩物包含65重量％至90重量％的蛋白，并且主要的非蛋白组分是纤维。浓缩物通过用水重复洗涤所述大豆粕制成，大豆粕可任选地包含低水平的食品级醇或缓冲液。弃去来自重复洗涤过程的流出物并且干燥固体残余，从而产生期望的浓缩物。从原料中得到的浓缩物产量为大约60-70％。

大豆蛋白浓缩物的制备一般产生两种流：大豆分离物和大豆糖浆流，它们可包含至多55重量％的大豆蛋白。在商业规模上，必须弃去产生的显著体积的这种糖浆。总蛋白含量可包含至多15重量％的大豆总蛋白含量，它们来源于所述大豆。因此，在通常用于大豆蛋白浓缩物制备的方法中弃去大部分大豆蛋白。

大豆蛋白分离物是可商购获得的最高度精纯的、以及最昂贵的大豆蛋白产品。然而，与大豆蛋白浓缩物一样，多种有价值的矿物、维生素、异黄酮素和植物雌激素在制备分离物时被取出以形成废物流以及低分子量糖。大豆蛋白分离物包含基于干重最低90％的蛋白和很少或不溶解的碳水化合物或纤维。通常通过用稀碱(pH<9)提取脱脂大豆粕或大豆粉并离心来制备分离物。用食品级酸如硫酸、盐酸、磷酸或乙酸将提取物的pH调节至4.5在pH4.5，蛋白的溶解度是最低的，因此它们将沉淀析出。然后在调节至中性pH之后干燥蛋白沉淀，或者不进行任何pH调节就干燥蛋白沉淀以产生大豆蛋白分离物。分离物的产量为初始大豆粉的30％至50％以及大豆粉中蛋白的60％。这种极低的产量以及所需的多个加工步骤导致生产大豆蛋白分离物的高成本。

至少部分地由于它们相对高的蛋白含量，期望大豆蛋白分离物用于多种用途。在常规的大豆蛋白分离物制造中，通常弃去在沉淀大豆蛋白分离物级份后剩余的水流(即，大豆乳清流)。在商业规模上，处理和处置这种废水流导致可观的成本。例如，大豆乳清流是相对稀的(例如，小于约5重量％的固体，通常约2重量％的固体)。因此，在商业规模上，产生显著体积的大豆乳清流，它们必须被处理和/或弃去。此外，已经观察到大豆乳清流可包含很大比例的大豆总蛋白含量，所述大豆用于制备大豆蛋白分离物。实际上，大豆乳清流可包含至多45重量％的大豆总蛋白含量，大豆蛋白分离物来源于所述大豆。因此，在常规大豆蛋白分离物生产中通常弃去大部分大豆蛋白。

从大豆乳清中回收产品的方法是本领域已知的。例如，使特定异黄酮级份与大豆乳清和大豆糖浆进料流分离的方法在美国专利6,033,714；5,792,503；和5,702,752中进行了描述。在另一个方法中，当真空蒸馏从脱脂大豆粗粉的含水乙醇提取物中移除乙醇时，得到大豆糖浆(也称为大豆溶解物)。根据期望异黄酮级份的特定溶解度将进料流加热到所选温度。然后使所述流通过超滤膜，其允许低于最大分子量的异黄酮分子透过。然后透过物可使用反向渗透膜进行浓缩。然后使浓缩物流通过使用至少一个液相层析柱的树脂吸附方法进一步分离所述级份。

用于从大豆废物中移除低聚糖的方法也是本领域已知的。例如，Matsubara等人[Biosci.Biotech.Biochem.60：421(1996)]描述了使用反向渗透和纳滤膜从大豆废水流中回收大豆低聚糖的方法。JP07-082,287提出了使用溶剂萃取从大豆低聚糖糖浆中回收低聚糖的方法。该方法包括将有机溶剂加到包含低聚糖的水溶液中、加热所述混合物以提供均质溶液、冷却所述溶液以形成两个液体层、并分离和回收底层。

加拿大专利申请2,006,957和2,013,190描述了在乙醇水溶液中进行的离子交换方法，该方法用于从谷物加工废物中回收小量的高值副产品。根据CA2,013,190，来自谷物的醇提取物通过阴离子和/或阳离子离子交换柱进行加工以获取微量但是经济上有价值的产品。

大豆乳清和大豆糖浆也包含显著量的蛋白酶抑制剂。蛋白酶抑制剂已知至少抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶以及可能抑制调控一些关键代谢功能的多种其它关键跨膜蛋白酶。蛋白酶的局部给药对于例如特应性皮炎的病症是有用的，特应性皮炎是皮肤炎症的一种普通形式，其可以局限于少数区块或者涉及身体的大部分。蛋白酶抑制剂的褪色活性和它们防止紫外线导致的色素沉着的能力在体外和体内均已被证明(参见，例如，Paine等人，J.Invest.Dermatol.，116：587-595[2001])。蛋白酶抑制剂还被报道有利于创伤愈合。例如，分泌性白细胞蛋白酶抑制剂被证明当被局部施用时逆转了组织的破坏并加速了创伤愈合过程。此外，丝氨酸蛋白酶抑制剂还能够有助于在红斑狼疮病人中降低疼痛(参见，例如，美国专利6,537,968)。天然存在的蛋白酶抑制剂可见于多种食物中，例如粮谷类(燕麦、大麦和玉米)、芽甘蓝、洋葱、甜菜根、小麦、龙爪稷和花生。所关注的一个来源是大豆。

从大豆和其它豆类中已鉴定了两大类的蛋白酶抑制剂超家族，每一类具有多种同工抑制剂。Kunitz胰蛋白酶抑制剂(KTI)是第一类的重要成员，第一类的成员具有大约170-200个氨基酸，介于20-25kDa之间的分子量，并且主要针对胰蛋白酶。Kunitz胰蛋白酶抑制剂通常是具有以两个二硫键连接的4个半胱氨酸、并且具有一个位于由二硫键限定的环中的反应性位点的单链多肽。第二类的抑制剂包含60-85个氨基酸，具有6-10kDa范围的分子量，相对地热稳定，并且在独立的结合位点抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。Bowman-Birk抑制剂(BBI)是这一类的一个实例。大豆中存在的蛋白酶抑制剂的平均水平，对于KTI和BBI而言分别是约1.4％和0.6％。要注意的是，这些低水平使得分离天然的蛋白酶抑制剂用于临床用途是不现实的。

然而制备纯化BBI涉及昂贵的技术。此外，因为在大豆中存在的BBI平均含量仅为约0.6重量％，这一低含量使得分离天然蛋白酶抑制剂用于临床用途是不现实的和成本过高的。当前在本领域使用的纯化方法有多种。一些方法使用利用固载化胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶的亲和纯化。固载化胰蛋白酶将结合BBI和Kunitz胰蛋白酶抑制剂(KTI)，因此未分离出特别纯的BBI产品。作为另外一种选择，涉及使用固载化胰凝乳蛋白酶的方法，虽然它不结合KTI，具有多个问题，例如对于规模化生产性价比不高以及胰凝乳蛋白酶在多个使用和清洁步骤后可能从树脂中滤掉。许多较老的BBI纯化方法使用阴离子交换层析，该技术能够引起BBI异构体的精馏，此外，用阴离子交换层析获取无KTI的BBI级份、同时不显著损失BBI的产量一直是困难的。因此，当前已知的所有用于分离BBI的方法都有问题，这是由于缓慢的加工、低产量、低纯度、和/或需要导致时间和成本增加的多个步骤引起的。

仅利用过滤作为唯一方法的纯化方法效用不大，这是由于膜污染、非蛋白组分与BBI蛋白不完全的和/或不完整的分离、以及BBI蛋白与其它蛋白的无效的分离。仅利用层析作为唯一方法的纯化方法也效用不大，这是由于结合能力和过载问题、不完全的和/或不完整的分离的问题(例如分离KTI与BBI)、蛋白与树脂的不可逆结合问题、树脂寿命问题、以及与其它技术相比该技术相对更昂贵。仅涉及硫酸铵沉淀作为唯一方法的纯化方法也效用不大，这是由于BBI蛋白的不可逆沉淀的可能性、BBI蛋白活性的潜在损失、BBI蛋白的不完全沉淀(即，产量损失)、以及从最终产品中移除硫酸铵的需求，这增加了一个附加步骤和成本。

尽管在工艺流中通常损失高比例的大豆乳清蛋白，一般来讲尚未认为回收蛋白是经济上可行的。至少部分地，这些潜在有价值的蛋白的损失迄今一直被认为是可接受的，这是因为在乳清中的总蛋白浓度相对较低，并且因此对于每单位质量的回收蛋白来说必须处理的废水体积很大，这产生大量的污染。回收蛋白的尝试已经受到蛋白和大豆乳清中存在的其它组分的复杂混合物、以及蛋白固体的粗混合物缺少商业用途等因素的阻碍。虽然已知大豆乳清包含某些生物活性蛋白，这些蛋白的商业价值已经受到限制，这是因为缺乏以高纯度形式回收它们的方法。

由于Kunitz胰蛋白酶抑制剂(KTI)蛋白对BBI造成的污染，当前本领域已知的用于获取纯化BBI蛋白的方法受到纯度水平较低的困扰。取决于使用的分离方法，内毒素含量也可能是一个问题。当前的方法使用全大豆作为原料，然后通过多种装置将其脱脂。与之相反，本发明的方法使用脱脂大豆白粕作为原料。因此，现有技术尚未描述从大豆蛋白来源获得的、不使用酸或醇萃取或者丙酮沉淀的、具有高纯度水平的BBI产品。因此，存在对适用于高纯度BBI和变体的生产的方法和组合物的需求。

因此，本领域需要一种可用于从大豆工艺流中回收新大豆乳清蛋白、以及其它有用组分并从而减少大规模处理此类废物带来的污染的方法。因此，本发明描述了使高纯度的多种组分与大豆工艺流分离的新方法。此外，本发明的方法利用比本领域当前已知方法更少的步骤，从而减少了时间和成本需求。

发明概述

本公开涉及纯化大豆工艺流的新方法，并且还包括从中回收大豆乳清蛋白和其它组分的新方法。具体地讲，本公开提供了利用一个或多个膜或层析分离操作以分离和移除大豆乳清蛋白、以及糖、矿物和其它组分，从而形成纯化废水流的方法。

在另一方面，本发明方法使一种或多种大豆乳清蛋白与大豆工艺流分离和移除，所述大豆工艺流包含大豆乳清蛋白、一种或多种大豆贮藏蛋白、一种或多种糖、以及一种或多种矿物。

在另一方面，本发明方法使一种或多种糖与大豆工艺流分离和移除，所述大豆工艺流包含一种或多种糖、一种或多种大豆乳清蛋白、一种或多种大豆贮藏蛋白、以及一种或多种矿物。

本发明方法涉及包含至少两个连续步骤的方法，从而分离作为大豆工艺流处理部分的多个蛋白物质。因此，可通过本发明的方法分离以下蛋白：BBI蛋白、KTI蛋白、以及它们的组合。除了分离蛋白外，还可从大豆工艺流中分离糖和矿物以形成纯化废水。

以不同顺序合并下文详述的一系列步骤以包括从工艺流中回收大豆乳清蛋白的总体方法。一般来讲，所述步骤可如下所述。

步骤0是乳清蛋白预处理步骤，该步骤以预处理进料流开始。所述进料流通过多种加工助剂和分离技术处理，这导致产生包含水相中的可溶解组分的流和包含不溶解大分子量蛋白的流，所述不溶解大分子量蛋白如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤1是微生物减少步骤，该步骤可以获取自步骤0中的流(例如预处理大豆乳清)开始。使预处理大豆乳清通过至少一种分离技术以形成包含多种组分的流和包含纯化预处理大豆乳清的流，所述组分包括但不限于贮藏蛋白、微生物、硅、以及它们的组合。

步骤2是水和矿物移除步骤，该步骤可以获取自步骤1的纯化预处理大豆乳清流或获取自步骤0的预处理大豆乳清流或在步骤4中去矿物化预处理大豆乳清开始。使预处理大豆乳清通过至少一种分离技术以形成包含纯化预处理大豆乳清的流和包含水、矿物、一价阳离子、以及它们的组合的流。

步骤3是矿物沉淀步骤，该步骤可以来自步骤2的纯化预处理大豆乳清流或来自步骤0的预处理大豆乳清流或来自步骤1的流开始。使预处理大豆乳清通过至少一种分离技术处理，这导致形成纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬浮液。

步骤4是矿物移除步骤，该步骤以悬浮纯化预处理大豆乳清并沉淀来自步骤3的矿物开始。使所述悬浮液和沉淀通过至少一种分离技术以形成包含去矿物化预处理大豆乳清的流和包含不溶解物质与蛋白矿物络合物的流。

步骤5是蛋白分离和浓缩步骤，该步骤以来自步骤4的纯化预处理大豆乳清流、或来自步骤0、1、或2的预处理大豆乳清开始。使纯化预处理大豆乳清通过至少一种分离技术以形成包含大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合的流和包含肽、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合的流。

步骤6是蛋白洗涤纯化步骤，该步骤能够以来自步骤4或5的蛋白流、或来自步骤0、1、或2的预处理大豆乳清开始。使所述蛋白通过至少一种分离技术以形成包含大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白(例如露那辛、凝集素、脱水蛋白、脂氧合酶)、以及它们的组合的流和包含肽、大豆低聚糖(例如蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖)、水、矿物、以及它们的组合的流。

步骤7是水移除步骤，该步骤能够以来自步骤5和/或6的流开始。使所述流通过至少一种分离技术以形成包含肽、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合的流和包含水、矿物、以及它们的组合的流。

步骤8是矿物移除步骤，该步骤能够以来自步骤5、6、和/或7的流开始。使所述大豆低聚糖通过至少一种分离技术以形成包含去矿物化大豆低聚糖的流和包含矿物、水、以及它们的组合的流。

步骤9是颜色移除步骤，该步骤能够以来自步骤7、8、5和/或6的大豆低聚糖开始。使所述大豆低聚糖通过至少一种分离技术以形成包含颜色化合物的流和包含大豆低聚糖的流。

步骤10是大豆低聚糖分馏步骤，该步骤能够以来自步骤9、5、6、7、和/或8的大豆低聚糖开始。使所述大豆低聚糖通过至少一种分离技术以形成包含大豆低聚糖如蔗糖、单糖、以及它们的组合的流和包含大豆低聚糖如棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、以及它们的组合的流。

步骤11是水移除步骤，该步骤能够以来自步骤10、9、8、7、6、和/或5的大豆低聚糖开始。使所述大豆低聚糖通过至少一种分离技术以形成包含水的流和包含大豆低聚糖的流。

步骤12是附加蛋白的分离步骤，该步骤能够以来自步骤7、5和/或6的流(即，肽、大豆低聚糖、水和矿物)开始。使所述流通过至少一种分离技术以形成包含大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合(它们可用作步骤8中的原料)的流和包含肽和其它蛋白的流。

步骤13是水移除步骤，该步骤能够以来自步骤12的肽和其它蛋白开始。使所述肽和其它蛋白通过至少一种分离技术以形成包含水的流和包含肽与其它蛋白的流，所述其它蛋白如露那辛、凝集素、脱水蛋白、脂氧合酶、以及它们的组合。

步骤14是蛋白分馏步骤，该步骤能够以来自步骤5和/或6的蛋白流开始。使所述蛋白通过至少一种分离技术以形成包含贮藏蛋白的流和包含大豆乳清蛋白、BBI、KTI与其它蛋白的流，所述其它蛋白如露那辛、凝集素、脱水蛋白、脂氧合酶、以及它们的组合。这些蛋白的特性如图1所示。

步骤15是水移除步骤，该步骤能够以来自步骤5、6和/或14的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。使所述蛋白通过至少一种分离技术以形成包含水的流和包含大豆乳清蛋白、BBI、KTI与其它蛋白的流。

步骤16是热处理和闪蒸冷却步骤，该步骤能够以来自步骤5、6、14、和/或15的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。所述蛋白经超高温度处理以形成大豆乳清蛋白。

步骤17是干燥步骤，该步骤能够以来自步骤5、6、14、15、和/或16的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。干燥所述蛋白以形成包含水的流和包含大豆乳清蛋白的流。

附图简述

图1是在乳清流中存在的蛋白以及它们的特性的示意图。

图2图示了大豆乳清蛋白在pH3-7的范围内与大豆蛋白分离物相比的溶解度。

图3图示了大豆乳清蛋白与大豆蛋白分离物相比的流变学特性。

图4A是描述用于从工艺流中回收纯化大豆乳清蛋白的方法中的步骤0至4的流程示意图。

图4B是描述用于从工艺流中回收纯化大豆乳清蛋白的方法中的步骤5、6、14、15、16和17的流程示意图。

图4C是描述用于从工艺流中回收纯化大豆乳清蛋白的方法中的步骤7至13的流程示意图。

图5图示了当以10mL/min、15mL/min、20mL/min和30mL/min(分别是5.7cm/min、8.5cm/min、11.3cm/min、17.0cm/min的线性流量)加载大豆乳清通过SP Gibco阳离子交换树脂床时对空载柱体积作图的穿透曲线。

图6图示了当使大豆乳清以10mL/min、15mL/min、20mL/min和30mL/min(分别是5.7cm/min、8.5cm/min、11.3cm/min、17.0cm/min的线性流量)通过SP Gibco阳离子交换树脂时它的蛋白吸附对空载柱体积的作图。

图7图示了当以15mL/min加载大豆乳清并通过SP Gibco阳离子交换树脂床以3和5的因数浓缩大豆乳清时对空载柱体积作图的穿透曲线。

图8图示了当使大豆乳清和以3和5的因数浓缩的大豆乳清以15mL/min通过SP Gibco阳离子交换树脂床时，SP Gibco阳离子交换树脂的蛋白吸附对空载柱体积的作图。

图9图示了当使大豆乳清和以3和5的因数浓缩的大豆乳清以15mL/min通过SP Gibco阳离子交换树脂床时，SP Gibco阳离子交换树脂的平衡蛋白吸附对在通过流中的平衡蛋白浓度的作图。

图10图示了以不同线性速度随时间解吸的大豆乳清蛋白的洗脱特征。

图11图示了以不同线性速度与柱体积解吸的大豆乳清蛋白的洗脱特征。

图12描述对Mimo6ME级份的十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。

图13描述对Mimo4SE级份的SDS-PAGE分析。

图14描述对Mimo6HE级份的SDS-PAGE分析。

图15描述对Mimo6ZE级份的SDS-PAGE分析。

优选方面的详述

本文描述了用于从在大豆蛋白分离物的制造中产生的多种豆科植物工艺流(包括大豆乳清流和大豆糖浆流)中回收高度纯化靶蛋白和其它产品的新型方法。一般来讲，本公开的方法包括选择并设计用于回收期望蛋白或其它产品、或分离大豆乳清流的多个组分、或上述两者的一个或多个操作(例如膜分离操作)。回收大豆乳清蛋白(例如Bowman-Birk抑制剂(BBI)和Kunitz胰蛋白酶抑制剂(KTI)蛋白)和大豆乳清流的一种或多种其它组分(例如多种糖，包括低聚糖)可利用多种分离技术(例如膜、层析、离心、或过滤)。具体的分离技术将取决于有待通过将其与所述工艺流的其它组分分离而被回收的所期望的组分。

例如，纯化KTI级份通常通过下列步骤制备：移除一种或多种杂质(例如，微生物或矿物)，然后移除包括一种或多种大豆贮藏蛋白(即，大豆球蛋白和β-伴球蛋白)的附加的杂质，然后移除一种或多种大豆乳清蛋白(包括，例如，BBI和其它非KTI的蛋白或钛)，和/或然后从大豆乳清中移除包括糖类的一种或多种附加的杂质。通过稀释除去使纯度降低的乳清流的其它主要组分(例如，贮藏蛋白、矿物和糖类)，同时同样地通过纯化蛋白级份提高纯度，改进了高纯度形式的多种靶组分的回收，其中所述纯化蛋白级份通过除去作为所述蛋白的拮抗物和/或具有有害效应的组分(例如，内毒素)进行。大豆乳清的多种组分的移除通常包括在所述大豆乳清的组分的移除之前和/或过程中对所述大豆乳清的纯化。本发明的方法也将减少加工大量含水垃圾产生的污染。

贮藏蛋白、糖类、矿物和杂质的移除产生富集了单个靶蛋白，并且不含可能是拮抗剂或毒素或者可能在其它方面具有有毒效应的杂质的级份。例如，大豆贮藏蛋白富集的级份通常可以与富集了一种或多种大豆乳清蛋白的级份一起被回收。富集了一种或多种糖类(例如，低聚糖和/或多糖)的级份也通常被制备。因此，本方法提供适合作为用于回收单个靶蛋白的基料的级份，并且还提供能够被用作用于从含水大豆乳清中经济地回收其它有用产品的基料的其它级份。例如，糖类和/或矿物从大豆乳清流中的移除产生了有用的级份，糖类能够从其中被进一步分离，从而产生附加的有用的级份：浓缩的糖和矿物级份(可以包括柠檬酸)，以及可以最低限度的处理(如果存在的话)被处置或作为工艺用水被回收的相对纯的含水级份。如此产生的工艺用水在本方法的实施中可以是尤其有用的。因此，本方法的优点还可以是与常规的分离制备方法相比降低的工艺用水需求。

本公开的方法以至少两种方式提供了高于制造大豆蛋白分离物和浓缩物的常规方法的优点。如所指出的，制造大豆蛋白物质的常规方法通常处理大豆乳清流(例如，含水的大豆乳清或大豆糖浆)。因此，通过本公开的方法回收的产品代表了附加的产品，和目前在与常规的大豆蛋白分离物和大豆蛋白浓缩物制造的关联中未实现的收益来源。此外，对大豆乳清流或大豆糖浆进行的用于回收产品的处理，可取地降低了与对大豆乳清流或大豆糖浆的处理或处置相关的成本。例如，如本文中其它地方所详述的，本发明的多种方法提供了相对纯的大豆工艺流，所述工艺流可以在多种其它方法中被容易地利用或者以最低限度的处理(如果存在的话)被处置，从而降低所述方法对环境的影响。某些成本与本公开的方法相关联地存在，但所分离的附加的产品和废物处理的最小化的益处弥补了任何增加的成本。

A.大豆乳清蛋白

根据本公开方法回收的大豆乳清蛋白代表着本领域中对于其它大豆蛋白和分离物的显著改进。如本文所指出的，从工艺流中回收的本公开大豆乳清蛋白与本领域存在的其它大豆蛋白相比具有独一无二的特性。

大豆蛋白分离物通常在大豆贮藏蛋白的等电点(例如，约4.5的pH)从脱脂大豆粕或大豆粉的水提物中沉淀。因此，大豆蛋白分离物一般包括在酸性液体介质中不可溶的蛋白。类似地，大豆蛋白浓缩物(第二精纯的大豆蛋白物质)的蛋白同样在酸性液体介质中是不可溶的。然而，通过本公开的方法回收的大豆乳清蛋白的区别在于它们一般是酸可溶的，意味着它们在酸性液体介质中是可溶的。

本公开提供了来源于含水大豆乳清的大豆乳清蛋白组合物，所述含水大豆乳清表现出比本领域存在的大豆蛋白有利的特性。例如，根据本发明方法分离的大豆乳清蛋白在环境条件(例如，约25℃的温度)下在跨越相对宽范围pH的含水(通常为酸性的)介质(例如，具有约2至约10、约2至约7、或约2至约6的pH的含水介质)中具有高溶解度(即SSI％大于80)。如表1和图2所示，据本公开的方法分离的大豆乳清蛋白的溶解度在所有测试的pH值下为至少80％，并且除一种情况(即，pH4)外均为至少约90％。这些发现与大豆蛋白分离物进行比较，其在相同酸性pH值下显示不良的溶解度特性。这种独特的特性使本发明的大豆乳清蛋白能够在具有酸性pH水平的应用中使用，这代表对大豆分离物的显著优势。

除溶解度之外，本公开的大豆乳清蛋白还具有比其它大豆乳清蛋白低得多的粘度。如表1和图3所示，本发明的大豆乳清蛋白表现出的粘弹性特性(即，流变学特性)与水的相似度高于与大豆蛋白分离物的相似度。水在20℃的粘度为约1厘泊(cP)。发现本公开的大豆乳清蛋白表现出在约2.0cP至10.0cP，优选地在约3.6cP至7.5cP范围内的粘度。除了它在酸性pH水平的高溶解度之外，这种低粘度也使得本公开的大豆乳清蛋白有用并且较好地适用于经常涉及使用其它蛋白的某些用途(例如在酸性饮料中)，因为它具有比大豆分离物好得多的流动特性。

表1：大豆乳清与其它大豆蛋白相比的溶解度和粘弹性特性

B.含水的乳清流

含水的乳清流和糖浆流是大豆工艺流的类型，它们是从精炼完整豆类或油料种子的方法产生的。完整的豆类或油料种子可以来源于多种适合的植物。以非限制性实例的方式，合适的植物包括豆科植物，包括例如大豆、玉米、豌豆、低芥酸菜子、向日葵、高粱、大米、苋属植物、马铃薯、木薯、竹芋、美人蕉、羽扇豆、油菜、小麦、燕麦、裸麦、大麦、以及它们的混合物。在一个实施方案中，所述豆科植物是大豆，并且从精炼大豆的方法产生的含水的乳清流是含水大豆乳清流。

在大豆蛋白分离物的制造中产生的含水大豆乳清流一般是相对被稀释的并且通常作为废物被丢弃。更具体地讲，所述含水大豆乳清流具有典型小于约10重量％，典型小于约7.5重量％和更典型小于约5重量％的总固体含量。例如，在多个方面，所述含水大豆乳清流的固体含量为约0.5重量％至约10重量％，约1重量％至约4重量％，或约1重量％至约3重量％(例如，约2重量％)。因此，在商业化的大豆蛋白分离物生产过程中，产生了必须被处理或处置的显著体积的废水。

大豆乳清流通常包含大部分起始大豆物质的初始大豆蛋白含量。如本文所用，术语“大豆蛋白”一般是指来源于大豆的任何和全部的蛋白。天然存在的大豆蛋白一般是具有被亲水外壳围绕的疏水核心的球状蛋白。大量的大豆蛋白已被鉴定，包括，例如，贮藏蛋白如大豆球蛋白和β-伴球蛋白。大豆蛋白同样包括蛋白酶抑制剂，如以上提及的BBI和KTI蛋白。大豆蛋白也包括血球凝集素如凝集素、脂氧合酶、β-淀粉酶和露那辛。值得注意的是，大豆植物可以被转化，以产生通常不被大豆植物表达的其它蛋白。应当了解，本文提及“大豆蛋白”时同样设想了如此产生的蛋白。

基于干重，大豆蛋白占大豆乳清流的至少约10重量％，至少约15重量％，或至少约20重量％(基于干重)。通常，大豆蛋白占大豆乳清流的约10重量％至约40重量％，或约20重量％至约30重量％(基于干重)。大豆蛋白分离物通常包含大部分大豆的贮藏蛋白。然而，在分离物沉淀之后剩余的大豆乳清流同样包含一种或多种大豆贮藏蛋白。

除多种大豆蛋白之外，含水大豆乳清流还同样包含一种或多种碳水化合物(即糖类)。一般而言，糖类占大豆乳清流的至少约25重量％、至少约35重量％、或至少约45重量％(基于干重)。通常，糖类占大豆乳清流的约25重量％至约75重量％，更典型约35重量％至约65重量％，更典型约40重量％至约60重量％(基于干重)。

大豆乳清流的糖类一般包括一种或多种单糖、和/或一种或多种低聚糖或多糖。例如，在多个方面，所述大豆乳清流包含选自葡萄糖、果糖、以及它们的组合的单糖。通常，单糖占大豆乳清流的约0.5％至约10重量％，更典型约1％至约5重量％(基于干重)。还根据这些以及多个其它方面，所述大豆乳清流包含选自蔗糖、棉子糖、水苏糖、以及它们的组合的低聚糖。通常，低聚糖占大豆乳清流的约30重量％至约60重量％，更典型约40重量％至约50重量％(基于干重)。

含水大豆乳清流还通常包含包括多种组分的灰分，所述组分包括，例如，多种矿物、异黄酮、植酸、柠檬酸、皂苷和维生素。通常存在于大豆乳清流中的矿物包括钠、钾、钙、磷、镁、氯、铁、锰、锌、铜、以及它们的组合。存在于大豆乳清流中的维生素包括，例如，硫胺素和核黄素。无论其确切的组成如何，通常，灰分占大豆乳清流的约5重量％至约30重量％，更典型约10重量％至约25重量％(基于干重)。

含水大豆乳清流还通常包含脂肪级份，脂肪级份一般占大豆乳清流的约0.15重量％至约55重量％(基于干重)。在本发明的某些方面，脂肪含量通过酸水解测量，并且占大豆乳清流的约3重量％(基于干重)。

除上述组分之外，含水大豆乳清流通常还包含一种或多种微生物，包括，例如，多种细菌、霉菌和酵母。这些组分的比例通常为约100至约1×10⁹菌落形成单位数(CFU)每毫升不等。如本文中其它地方所详述的，在多个方面，在蛋白回收和/或分离之前，含水大豆乳清流被处理，以移除这些组分。

如所指出的，大豆蛋白分离物的常规的生产通常包括处理大豆蛋白分离物的分离之后剩余的含水大豆乳清流。根据本公开，一种或多种蛋白和多种其它组分(例如，糖类和矿物)的回收导致相对纯的含水大豆乳清流。蛋白和一种或多种组分未被移除的常规的大豆乳清流一般要求在处置和/或再利用之前进行处理。根据本公开的多个方面，所述含水的乳清流可以最低限度的(如果存在的话)处理被处置或作为工艺用水被利用。例如，所述含水的乳清流可以在本公开的一个或多个过滤(例如，渗滤)操作中被使用。

除了从大豆蛋白分离物的制造中产生的含水大豆乳清流回收BBI蛋白之外，应当了解，本文所述的方法还同样适合用于回收大豆蛋白分离物的制造中产生的大豆糖浆流的一种或多种组分，因为大豆糖浆流是附加类型的大豆工艺流。

C.用于回收大豆乳清蛋白的方法的概述

下文是组成总体方法的多个步骤的概述。方法的关键是从乳清蛋白预处理步骤开始，该步骤独特地改变了大豆乳清和蛋白的特性。从该步骤起，可使用每个步骤中列出的原材料来源进行其它步骤，这将在下文多个实施方案的讨论中示出。

分离技术领域的技术人员知道，由于分离不会是100％，在每一流中能够存在残余的组分。此外，本领域的技术人员了解，分离技术能够依赖于起始的原材料而变化。

步骤0(如图4A所示)-乳清蛋白预处理能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤1(如图4A所示)-微生物的降低能够以上述乳清蛋白预处理步骤的产物开始，包括但不限于预处理大豆乳清。本步骤涉及预处理大豆乳清的微量过滤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离心、死端过滤、加热灭菌、紫外灭菌、微量过滤、错流膜过滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤1的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自步骤1的产物包括但不限于流1a中的贮藏蛋白、微生物、硅、以及它们的组合和流1b中的纯化预处理大豆乳清。

步骤2(如图4A所示)-水和矿物的移除能够以来自流1b或4a的纯化预处理大豆乳清、或来自流0b的预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

步骤3(如图4A所示)-矿物沉淀步骤能够以来自流2a的纯化预处理大豆乳清或来自流0a或1b的预处理大豆乳清开始。其包括通过pH和/或温度变化沉淀的步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于搅拌的或再循环的反应槽。能够用于矿物沉淀步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、氯化钠、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤3的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。pH保持时间能够介于约0分钟至约60分钟之间，或介于约5分钟和约20分钟之间，或约10分钟变化。流3的产物是纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液。

步骤4(如图4A所示)-矿物移除步骤能够以来自流3的纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液开始。其包括离心步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离心、过滤、死端过滤、错流膜过滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。来自矿物移除步骤的产物包括但不限于流4a中的去矿物化预处理乳清和流4b中的不溶性矿物与一些蛋白矿物复合物。

步骤5(如图4B所示)-蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流4a的纯化预处理乳清或来自流0a、1b、或2a的乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

步骤6(如图4B所示)-蛋白洗涤和纯化步骤能够以来自流4a或5a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白或纯化预处理乳清、或来自流0a、1b、或2a的乳清开始。其包括渗滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于再浆化、错流膜过滤、超滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。能够用于蛋白洗涤和纯化步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。步骤6的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流6a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流6b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。

步骤7(如图4C所示)-水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

步骤8(如图4C所示)-矿物移除步骤能够以来自流5b、6b、7a、和/或12b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。其包括电渗析膜步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离子交换柱、层析、以及它们的组合。能够用于这一矿物移除步骤中的加工助剂包括但不限于水、酶、以及它们的组合。酶包括但不限于蛋白酶、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤8的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约50℃之间，或约40℃。来自流8a的产物包括但不限于具有介于约10毫西门子/厘米(mS/cm)和约0.5mS/cm之间，或约2mS/cm的电导率的去矿物化大豆低聚糖。来自流8b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

步骤9(如图4C所示)-颜色移除步骤能够以来自流8a、5b、6b、12b、和/或7a的去矿物化大豆低聚糖开始。其利用活性炭床。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离子交换。能够用于这一颜色移除步骤中的加工助剂包括但不限于活性炭、离子交换树脂、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约40℃。来自流9a的产物包括但不限于颜色化合物。流9b为脱色的溶液。来自流9b的产物包括但不限于大豆低聚糖、以及它们的组合。

步骤10(如图4C所示)-大豆低聚糖分馏步骤能够以来自流9b、5b、6b、7a、和/或8a的大豆低聚糖、以及它们的组合开始。其包括层析步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于层析、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一大豆低聚糖分馏步骤中的加工助剂包括但不限于酸或碱，以如本领域的技术人员所知地基于所使用的树脂调节pH。来自流10a的产物包括但不限于大豆低聚糖。来自流10b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

步骤11(如图4C所示)-水移除步骤能够以来自流9b、5b、6b、7a、8a和/或10b的大豆低聚糖如棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、以及它们的组合开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一水移除步骤中的加工助剂包括但不限于消泡剂、流、真空、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约60℃。来自流11a的产物包括但不限于水。来自流11b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

步骤12(如图4C所示)-附加的从大豆低聚糖分离蛋白的步骤能够以来自流7a、5b、和/或6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。其包括超滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、孔径介于约50kDa和约1kDa之间的超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。能够用于这一从糖类分离蛋白的步骤的加工助剂包括但不限于酸、碱、蛋白酶、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤12的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流12b的产物包括但不限于大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流12a的产物包括但不限于肽、其它蛋白、以及它们的组合。

步骤13(如图4C所示)-水移除步骤能够以来自流12a的肽和其它蛋白开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、纳滤、喷雾干燥、以及它们的组合。来自流13a的产物包括但不限于水。来自流13b的产物包括但不限于肽、其它蛋白、以及它们的组合。

步骤14(如图4B所示)-蛋白分馏步骤可以通过以来自流6a和/或5a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合开始进行。其包括超滤(具有300kDa至10kDa的孔径)步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤14的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流14a的产物包括但不限于贮藏蛋白。来自流14b的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、其它蛋白、以及它们的组合。

步骤15(如图4B所示)-水移除步骤能够以来自流6a、5a、和/或14b的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。来自流15a的产物包括但不限于水。流15b产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、其它蛋白、以及它们的组合。

步骤16(如图4B所示)-热处理步骤和闪蒸冷却步骤能够以来自流6a、5a、14b、和/或15b的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括超高温步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于加热灭菌、蒸发、以及它们的组合。能够用于这一热处理和闪蒸冷却步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。所述加热步骤的温度能够是介于约129℃和约160℃之间，或约152℃。温度保持时间能够是介于约8秒和约15秒之间，或约9秒。闪蒸冷却后，温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。来自流16的产物包括但不限于大豆乳清蛋白。

步骤17(如图4B所示)-干燥步骤能够以来自流6a、5a、14b、15b、和/或16的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括干燥步骤。液体进料温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。入口温度能够是介于约175℃和约370℃之间，或约290℃。排气温度能够是介于约65℃和约98℃之间，或约88℃。来自流17a的产物包括但不限于水。来自流17b的产物包括但不限于大豆乳清蛋白，其包括BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。

本专利申请的大豆乳清蛋白产品包括生乳清、在步骤17的超滤步骤后的大豆乳清蛋白前体、可通过本领域已知的任何装置干燥的干大豆乳清蛋白、以及它们的组合。所有这些产品可按原样用作大豆乳清蛋白或还可进行加工以纯化受关注的特定组分，例如但不限于BBI、KTI、以及它们的组合。

本专利申请的大豆乳清蛋白产品可具有至少约20重量％的干燥基蛋白，至少约60重量％的干燥基蛋白，至少约75重量％的干燥基蛋白，至少约80重量％的干燥基蛋白，至少约85重量％的干燥基蛋白，至少约90重量％的干燥基蛋白，或至少约95重量％的干燥基蛋白。

D.用于回收大豆乳清蛋白的方法的优选实施方案

实施方案1以步骤0(参见图4A)开始如下：乳清蛋白预处理能够从包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。接下来

完成步骤5(参见图4B)。因此，在这个实施方案中的蛋白分离和浓缩步骤以来自流0a的乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

实施方案2-以步骤0(参见图4A)开始如下：乳清蛋白预处理能够从包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

完成下一步骤5(参见图4B)。因此，在这个实施方案中的蛋白分离和浓缩步骤以来自流0a的乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

最终步骤6(参见图4B)，蛋白洗涤和纯化步骤以来自流5a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白或纯化预处理乳清开始。其包括渗滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于再浆化、错流膜过滤、超滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。能够用于蛋白洗涤和纯化步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。步骤6的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流6a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流6b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。

实施方案3以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤3(参见图4A)矿物沉淀步骤能够以来自流0a的纯化预处理大豆乳清开始。其包括通过pH和/或温度变化沉淀的步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于搅拌的或再循环的反应槽。能够用于矿物沉淀步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、氯化钠、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤3的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。pH保持时间能够介于约0分钟至约60分钟之间，或介于约5分钟和约20分钟之间，或约10分钟变化。流3的产物是纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液。

步骤4(参见图4A)-矿物移除步骤能够以来自流3的纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液开始。其包括离心步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离心、过滤、死端过滤、错流膜过滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。来自矿物移除步骤的产物包括但不限于流4a中的去矿物化预处理乳清和流4b中的不溶性矿物与一些蛋白矿物复合物。

最后，步骤5(参见图4B)蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流4a的纯化预处理乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

实施方案4以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤5(参见图4B)-蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流4a的纯化预处理乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

最后，步骤6(参见图4B)蛋白洗涤和纯化步骤能够以来自流5a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白或纯化预处理乳清开始。其包括渗滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于再浆化、错流膜过滤、超滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。能够用于蛋白洗涤和纯化步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。步骤6的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流6a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流6b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。

实施方案5以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤3(参见图4A)矿物沉淀步骤能够以来自流0a的预处理大豆乳清开始。其包括通过pH和/或温度变化沉淀的步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于搅拌的或再循环的反应槽。能够用于矿物沉淀步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、氯化钠、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤3的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。pH保持时间能够介于约0分钟至约60分钟之间，或介于约5分钟和约20分钟之间，或约10分钟变化。流3的产物是纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液。

步骤5(参见图4B)蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流4a的纯化预处理乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

最后，步骤6(参见图4B)-蛋白洗涤和纯化步骤能够以来自流5a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白或纯化预处理乳清开始。其包括渗滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于再浆化、错流膜过滤、超滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。能够用于蛋白洗涤和纯化步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。步骤6的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流6a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流6b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。

步骤16(参见图4B)-热处理步骤和闪蒸冷却步骤能够以来自流6a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括超高温步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于加热灭菌、蒸发、以及它们的组合。能够用于这一热处理和闪蒸冷却步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。所述加热步骤的温度能够是介于约129℃和约160℃之间，或约152℃。温度保持时间能够是介于约8秒和约15秒之间，或约9秒。闪蒸冷却后，温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。来自流16的产物包括但不限于大豆乳清蛋白。

步骤17(参见图4B)-干燥步骤能够以来自流16的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。它包括干燥步骤。所述液体进料温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。入口温度能够是介于约175℃和约370℃之间，或约290℃。排气温度能够是介于约65℃和约98℃之间，或约88℃。来自流17a的产物包括但不限于水。来自流17b的产物包括但不限于大豆乳清蛋白，其包括BBI、KTI和其它蛋白。

实施方案6以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤15(参见图4B)-水移除步骤能够以来自流6a的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。来自流15a的产物包括但不限于水。流15b产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白。

步骤16(参见图4B)-热处理步骤和闪蒸冷却步骤能够以来自流15b的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括超高温步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于加热灭菌、蒸发、以及它们的组合。能够用于这一热处理和闪蒸冷却步骤中的加工助剂包括但不限于水、流、以及它们的组合。所述加热步骤的温度能够是介于约129℃和约160℃之间，或约152℃。温度保持时间能够是介于约8秒和约15秒之间，或约9秒。闪蒸冷却后，温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。来自流16的产物包括但不限于大豆乳清蛋白。

实施方案7以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤2(参见图4A)水和矿物的移除能够以来自流0b的预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

最后，步骤5(参见图4B)蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流2a的乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

实施方案8以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤5(参见图4B)蛋白分离和浓缩步骤能够以来自流2a的乳清开始。其包括超滤步骤。能够用于超滤步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钙、氢氧化钠、盐酸、以及它们的组合。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、超滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤5的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流5a的产物包括但不限于大豆乳清蛋白、BBI、KTI、贮藏蛋白、其它蛋白、以及它们的组合。来自流5b的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、矿物、以及它们的组合。

实施方案9以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤3(参见图4A)矿物沉淀步骤能够以来自流2a的纯化预处理大豆乳清开始。其包括通过pH和/或温度变化沉淀的步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于搅拌的或再循环的反应槽。能够用于矿物沉淀步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、氯化钠、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤3的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。pH保持时间能够介于约0分钟至约60分钟之间，或介于约5分钟和约20分钟之间，或约10分钟变化。流3的产物是纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液。

实施方案10以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

实施方案11以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤17(参见图4B)-干燥步骤能够以来自流16的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括干燥步骤。液体进料温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。入口温度能够是介于约175℃和约370℃之间，或约290℃。排气温度能够是介于约65℃和约98℃之间，或约88℃。来自流17a的产物包括但不限于水。来自流17b的产物包括但不限于大豆乳清蛋白，其包括BBI、KTI和其它蛋白。

实施方案12以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤2(参见图4A)水和矿物的移除能够以来自流1b或纯化预处理大豆乳清或来自流0b的预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

步骤17(参见图4B)干燥步骤能够以来自流16的大豆乳清蛋白、BBI、KTI和其它蛋白开始。其包括干燥步骤。液体进料温度能够是介于约50℃和约95℃之间，或约82℃。入口温度能够是介于约175℃和约370℃之间，或约290℃。排气温度能够是介于约65℃和约98℃之间，或约88℃。来自流17a的产物包括但不限于水。来自流17b的产物包括但不限于大豆乳清蛋白，其包括BBI、KTI和其它蛋白。

实施方案13以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

实施方案14以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤2(参见图4A)水和矿物的移除能够以来自流4a的纯化预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

实施方案15以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

实施方案16以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

实施方案17以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤1(参见图4A)微生物的降低能够以上述乳清蛋白预处理步骤的产物开始，包括但不限于预处理大豆乳清。本步骤涉及预处理大豆乳清的微量过滤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离心、死端过滤、加热灭菌、紫外灭菌、微量过滤、错流膜过滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤1的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自步骤1的产物包括但不限于流1a中的贮藏蛋白、微生物、硅、以及它们的组合和流1b中的纯化预处理大豆乳清。

步骤3(参见图4A)矿物沉淀步骤能够以来自流1b的预处理大豆乳清开始。其包括通过pH和/或温度变化沉淀的步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于搅拌的或再循环的反应槽。能够用于矿物沉淀步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、氯化钠、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤3的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约8.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。pH保持时间能够介于约0分钟至约60分钟之间，或介于约5分钟和约20分钟之间，或约10分钟变化。流3的产物是纯化预处理大豆乳清和沉淀矿物的悬液。

步骤2(参见图4A)-水和矿物的移除能够以来自流4a的纯化预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

实施方案18以步骤0(参见图4A)开始，该步骤是乳清蛋白预处理，其能够以包括但不限于大豆分离蛋白(ISP)糖浆、ISP乳清、大豆蛋白浓缩物(SPC)糖浆、SPC乳清、功能性大豆蛋白浓缩物(FSPC)乳清、以及它们的组合的进料流开始。能够用于乳清蛋白预处理步骤中的加工助剂包括但不限于酸、碱、氢氧化钠、氢氧化钙、盐酸、水、蒸汽、以及它们的组合。在调节pH之后，步骤0的pH能够是介于约3.0和约6.0之间，或介于约3.5和5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约70℃和约95℃之间，或约85℃。温度保持时间能够在约0分钟至约20分钟之间，或约10分钟变化。在保留时间之后，所述流通过一个离心分离步骤(通常在间歇放电圆盘式净化离心机中)，以使沉淀与所述乳清流分离。来自乳清蛋白预处理产物包括但不限于流0a中的乳清流(预处理大豆乳清)的水相中的可溶性组分(分子量等于或小于约50千道尔顿(kDa))和流0b中的不溶性大分子量蛋白(介于约300kDa和约50kDa之间)，例如预处理大豆乳清、贮藏蛋白、以及它们的组合。

步骤2(参见图4A)水和矿物的移除能够以来自流1b的纯化预处理大豆乳清开始。其包括用于水的移除和部分矿物的移除的纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于错流膜过滤、反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。错流膜过滤包括但不限于螺旋式、板框式、中空纤维、陶瓷、动态或旋转盘、纳米纤维、以及它们的组合。步骤2的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约3.5和约5.5之间，或约5.3。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自这一水移除步骤的产物包括但不限于流2a中的纯化预处理大豆乳清和流2b中的水、一些矿物、一价阳离子、以及它们的组合。

涉及糖回收的实施方案：

实施方案19包括步骤7(参见图4C)水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

实施方案20以步骤7(参见图4C)水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

最后，步骤11(参见图4C)水移除步骤能够以来自流7a的大豆低聚糖如棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、以及它们的组合开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一水移除步骤中的加工助剂包括但不限于消泡剂、流、真空、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约60℃。来自流11a的产物包括但不限于水。来自流11b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

实施方案21以步骤7(参见图4C)水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

最后，步骤8(参见图4C)-矿物移除步骤能够以来自流7a的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。其包括电渗析膜步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离子交换柱、层析、以及它们的组合。能够用于这一矿物移除步骤中的加工助剂包括但不限于水、酶、以及它们的组合。酶包括但不限于蛋白酶、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤8的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约50℃之间，或约40℃。来自流8a的产物包括但不限于具有介于约10毫西门子/厘米(mS/cm)和约0.5mS/cm之间，或约2mS/cm的电导率的去矿物化大豆低聚糖。来自流8b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

实施方案22以步骤7(参见图4C)水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

步骤8(参见图4C)-矿物移除步骤能够以来自流7a的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。其包括电渗析膜步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离子交换柱、层析、以及它们的组合。能够用于这一矿物移除步骤中的加工助剂包括但不限于水、酶、以及它们的组合。酶包括但不限于蛋白酶、肌醇六磷酸酶、以及它们的组合。步骤8的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约50℃之间，或约40℃。来自流8a的产物包括但不限于具有介于约10毫西门子/厘米(mS/cm)和约0.5mS/cm之间，或约2mS/cm的电导率的去矿物化大豆低聚糖。来自流8b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

最后，步骤11(参见图4C)水移除步骤能够以来自流8a的大豆低聚糖如棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、以及它们的组合开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一水移除步骤中的加工助剂包括但不限于消泡剂、流、真空、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约60℃。来自流11a的产物包括但不限于水。来自流11b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

实施方案23以步骤7(参见图4C)水移除步骤能够以来自流5b和/或流6b的钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合开始。大豆低聚糖包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。其包括纳滤步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、水渗滤、缓冲液渗滤、以及它们的组合。步骤7的pH能够是介于约2.0和约12.0之间，或介于约6.0和约9.0之间，或约7.0。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或介于约25℃和约75℃之间，或约50℃。来自流7a的产物包括但不限于钛、大豆低聚糖、水、矿物、以及它们的组合。来自流7b的产物包括但不限于水、矿物、以及它们的组合。

步骤9(参见图4C)颜色移除步骤能够以来自流8a的去矿物化大豆低聚糖开始。其利用活性炭床。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于离子交换。能够用于这一颜色移除步骤中的加工助剂包括但不限于活性炭、离子交换树脂、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约40℃。来自流9a的产物包括但不限于颜色化合物。流9b为脱色的溶液。来自流9b的产物包括但不限于大豆低聚糖、以及它们的组合。

步骤10(参见图4C)-大豆低聚糖分馏步骤能够以来自流9b的大豆低聚糖、以及它们的组合开始。其包括层析步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于层析、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一大豆低聚糖分馏步骤中的加工助剂包括但不限于酸或碱，以如本领域的技术人员所知地基于所使用的树脂调节pH。来自流10a的产物包括但不限于大豆低聚糖。来自流10b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

最后，步骤11(参见图4C)水移除步骤能够以来自流10a的大豆低聚糖如棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、以及它们的组合开始。其包括蒸发步骤。在这一步骤中，方法的变量和供选择的替代方案包括但不限于反向渗透、蒸发、纳滤、以及它们的组合。能够用于这一水移除步骤中的加工助剂包括但不限于消泡剂、流、真空、以及它们的组合。温度能够是介于约5℃和约90℃之间，或约60℃。来自流11a的产物包括但不限于水。来自流11b的产物包括但不限于大豆低聚糖。

定义

为了更好的理解本发明，下文定义了几个术语。

如本文所用，术语“酸可溶的”是指物质在具有约2至约7的pH的含水介质中以10克每升(g/L)的浓度具有至少约80％的溶解度。

如本文所用，术语“分离大豆蛋白”(SPI)或“大豆分离蛋白”(ISP)是指具有基于不含水分至少约90％的大豆蛋白的蛋白含量的大豆物质。

如本文所用，在整个专利申请中提及的术语“其它蛋白”被定义为包括但不限于：露那辛、凝集素、脱水蛋白、脂氧合酶、以及它们的组合。

将术语“大豆低聚糖”定义为包括但不限于糖。糖被定义为包括但不限于蔗糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖、单糖、以及它们的组合。

如本文所用，将术语“大豆乳清蛋白”定义为包括在其中大豆贮藏蛋白通常不溶解的那些pH下可溶的蛋白，包括但不限于BBI、KTI、露那辛、脂氧合酶、脱水蛋白、凝集素、肽、以及它们的组合。大豆乳清蛋白还可包括贮藏蛋白。

如本文所用，术语“对象”是指需要对病理状态进行处理的哺乳动物(优选人类)、鸟、鱼、爬行动物、两栖动物，所述病理状态包括但不限于与肌肉相关的疾病、非受控的细胞生长、自身免疫疾病和癌症。

如本文所用，术语“工艺流”是指来源于精炼完整的豆类或油料种子的方法的次级或附带的产物，包括含水的或溶剂流，其包括，例如，含水大豆提取物流、含水的豆浆提取物流、含水大豆乳清流、含水大豆糖浆流、含水大豆蛋白浓缩物大豆糖浆流、含水大豆透过物流和含水的豆腐乳清流，并且附加地包括例如液体和干粉形式的大豆乳清蛋白，其能够根据本文所公开的方法被回收作为中间产物。

当介绍本发明或其优选实施方案的要素时，冠词“一个”和“所述”旨在表示有一个或多个要素。术语“包含”、“包括”和“具有”旨在表示包容性并且表示除列出要素外还可以有其它要素。

在不脱离本发明范围的条件下，可对以上化合物、产品和方法进行各种更改，这意味着可将上文描述和下文实施例中包含的所有内容理解为例证性的而非限定性的。

实施例

实施例1：使用新型膜方法从含水大豆乳清中回收并分馏大豆乳清蛋白

145升含水生大豆乳清(未进行预处理)具有3.7％的总固体含量和19.8％的干燥基蛋白含量，其使用两种不同的膜在由SmartFlowTechnologies制造的7000模块中进行微量过滤。第一个膜是BTS-25，该膜具有0.5um孔径的聚砜构造，由Pall制造。含水大豆乳清以1.6x的因数浓缩，平均流量为30升/平方米/小时(LMH)。然后使浓缩的含水大豆乳清通过改性的聚砜微量过滤膜MPS0.45，该膜由Pall制造。含水大豆乳清从1.6x浓缩成11x，平均流量为28LMH。

来自微量过滤方法的透过物总计132升，随后将其导入具有超滤膜RC100的7000模块中，该膜是100kDa的再生纤维素膜，由Microdyn-Nadir制造。为了最小化所述体系的保留体积，使用20L的槽装置以30LMH的平均流量将微量过滤的含水大豆乳清浓缩至约20x，随后将其转移到5L的槽装置。在较小的槽中，以9LMH的平均流量将含水大豆乳清从20x浓缩至66x，最终保留物体积为2升。最终保留物为24.0％的总固体和83.0％的干燥基蛋白含量。

然后将128升富含糖和矿物的RC100透过物导入7000模块中，该模块具有聚砜纳滤薄膜NF20，该膜具有35％的脱氯化钠率，由Sepro制造。以4.7LMH的平均流量将所述进料浓缩至18x。来自这一工序的9升保留物富集了多种糖物质。来自NF20分离方法的121升透过物流包含矿物和水。

然后将NF20方法的透过物导入3000模块中，该模块具有反向渗透薄膜SG，该膜具有98.2％的脱氯化钠率，由GE制造。以8LMH的平均流量将所述进料浓缩至12x。9.2升SG膜的透过物主要由水组成，适于在具有最少再处理步骤的方法中再利用。0.8升SG方法的保留物主要由浓缩的矿物级份组成。

实施例2：使用新型膜方法从大豆糖浆中回收并分馏大豆乳清蛋白

61.7升大豆糖浆具有62.7％的总固体含量和18.5％的干燥基蛋白含量，其在进行微量过滤之前用61.7升水稀释。然后使用由SmartFlowTechnologies制造的7000模块微量过滤稀释的大豆糖浆。使稀释的大豆糖浆通过改性的聚砜微量过滤膜MPS0.45，该膜由Pall制造。稀释的大豆糖浆以1.3x的因数浓缩，平均流量为6升/平方米/小时(LMH)。

来自微量过滤方法的透过物总计25升，随后将其导入具有超滤膜RC100的7000模块中，该膜是100kDa的再生纤维素膜，由Microdyn-Nadir制造。微量过滤的稀释的大豆糖浆用2体积的水渗滤，随后以20LMH的平均流量浓缩至7.6x，最终保留物体积为2升。最终保留物为17.5％的总固体和22.0％的干燥基蛋白含量。

然后将72升富含糖和矿物的RC100透过物导入7000模块中，该模块具有聚砜纳滤薄膜NF20，该膜具有35％的脱氯化钠率，由Sepro制造。以4.0LMH的平均流量将所述进料浓缩至3x。来自这一工序的23升保留物富集了多种糖物质。来自NF20分离方法的48升透过物流包含矿物和水。

然后将一部分NF20方法的透过物(10升)导入3000模块中，该模块具有反向渗透薄膜SG，该膜具有98.2％的脱氯化钠率，由GE制造。以7.9LMH的平均流量将所述进料浓缩至6.7x。8.5升SG膜的透过物主要由水组成，适于在具有最少再处理步骤的方法中再利用。1.5升SG方法的保留物主要由浓缩的矿物级份组成。

实施例3：从脱脂大豆粉提取物中捕集大量大豆乳清蛋白

通过加入pH7.8的15:1的水与脱脂大豆粉(DSF)的比率的溶液来提取DSF，并且在过滤前搅拌20分钟。使用由SmartFlow Technologies制造的800模块微量过滤提取物。所述微量过滤膜MMM-0.8是聚砜和聚乙烯丙烯构造，具有0.8um的孔径，由Pall制造。含水大豆提取物以2.0x的因数浓缩，平均流量为29升/平方米/小时(LMH)。然后将来自微量过滤方法的透过物导入具有超滤膜RC100的800模块中，该膜是100kDa的再生纤维素膜，由Microdyn-Nadir制造。以50LMH的平均流量将微量过滤的含水大豆提取物浓缩至约6.3x。测得最终保留物有84.7％的干燥基蛋白含量。

实施例4：使用离子交换层析捕集大量大豆乳清蛋白(以确定在连续分离技术CSEP(模拟移动床层析)中使用的条件)

CSEP实验通过使进料(大豆乳清)通过装载SP GibcoCel树脂的柱(ID1.55cm，长度9.5cm，体积18mL)进行。所述柱连接正位移泵并在柱出口处收集通过流样品和洗脱液。使用不同的实验条件测定进料浓度、进料流量和洗脱流量对树脂结合能力的效应。

进料浓度

从脱脂大豆粕中制备大豆乳清。简而言之，一份脱脂粕与15份水在32℃混合。使用2M NaOH将所述溶液的pH调节至7.0，并且通过搅拌所述溶液15分钟将蛋白提取到水相中。通过以3000×g离心10分钟使蛋白提取物与不溶解物质分离。使用1M的HCl将所收集的上清液的pH调节至4.5并搅拌所述溶液15分钟，随后加热至温度57℃。这种处理导致贮藏蛋白沉淀，而乳清蛋白保持可溶解状态。通过以3000×g离心10分钟分离沉淀蛋白和乳清。

在一些情况下，使用实验室规模的Amicon DC-10LA超滤单位和Amicon3K膜浓缩大豆乳清。在超滤之前，用2M NaOH将大豆乳清的pH调节至5.5以避免在酸性条件下的膜污染。以～100mL/min的流量加工10L乳清。一旦保留物达到5的浓缩因数，收集保留物流和透过物流。通过混合已知量的透过物和5X的乳清浓缩物制备2.5X、3X和4X的大豆乳清浓缩物。如果需要的话，将所有大豆浓缩物的pH再调节至4.5。

进料流量

在动态吸附期间，作为流经树脂床的流体，树脂吸附所述蛋白并且蛋白与液相达到平衡。当将乳清加载到柱顶时，结合的蛋白谱带向下流经所述柱并与液相达到平衡。当吸附的蛋白使树脂饱和时，流出所述柱的液相中的蛋白浓度将类似于进料中的蛋白浓度。描述进料浓度与通过流浓度相比较的通过流浓度改变的曲线是穿透曲线。在固相中的蛋白浓度的提高与穿透曲线的生长同时进行，并且所述吸附波通过所述床移动。当较多的流体通过所述床时，通过流的浓度提高渐近于进入的流体物流并且同时固相出现了相似的现象。

三个不同线速度的通过流蛋白浓度数据对大豆乳清蛋白的柱体积作图(参见图5)。这些数据指示以因数3提高的载入线性流量在加载6倍柱体积的大豆乳清后导致通过流中未吸附蛋白约10％的增加。因此，线性流量不显著影响SP Gibco树脂对大豆乳清蛋白的吸附特性。平衡吸附数据(参见图6)显示树脂吸附的大豆乳清蛋白(使用系统蛋白进料的质量平衡和与液体流中的蛋白平衡的通过流中的蛋白浓度进行计算，并且对通过树脂床的柱体积作图)在测试流量下与进料流量相比变化不大。

其中将大豆乳清和以因数3和5浓缩的大豆乳清以15mL/min(8.5cm/min线性流量)施用于SP Gibco树脂床的穿透曲线的特征图类似于所有三个浓度的特征图(参见图7)。这个结果指示当进料蛋白浓度提高时，树脂通过尽力达到最大容量与液体流中的蛋白浓度达到平衡。在图8中示出了这种提高的吸附，其中在与液相平衡的固相中的蛋白浓度已经对通过所述床的大豆乳清的柱体积作图。这些数据显示树脂吸附的蛋白显著地随着大豆乳清浓缩因数提高，并且因此大豆乳清中的蛋白浓度也提高(参见图8)。图9示出了树脂和通过流的平衡特性。这个图表示出依照通过所述床的柱体积数，在树脂相中的吸附蛋白渐近地提高，但是在通过流中的蛋白含量也提高。可使用浓缩乳清和高柱体积的载量提高吸附容量，但是这导致通过流中相对高的蛋白含量。然而，通过使用2-塔板吸附方法的逆流操作最小化通过流中的高蛋白含量。

基于动态吸附数据(参见图9)，以因数5浓缩以达到11mg/mL的蛋白浓度的加载乳清和约3.5倍柱体积的载量导致每mL树脂吸附约35mg蛋白，并且在通过流中的平衡蛋白浓度为约6.8mg/mL。将这个初级通过流提供给第二次通过的另一个树脂床(加载约3.5倍柱体积)导致在通过流中的蛋白浓度为约1.3mg/mL。因此，使用两次通过的吸附和以逆流模式运行层析导致吸附约90％的有用大豆蛋白，它们可从pH4.5的大豆乳清中吸附得到。

洗脱流量

以三个不同的流量研究洗脱流量的效应，并且回收数据在表3中示出。在平行实验中以低流量回收蛋白导致超过164％和200％的回收。所述数据指示以20mL/min和30mL/min(分别为11.3cm/min和17.0cm/min)洗脱不显著影响回收。此外，在较高流量下运行获得快得多的洗脱(参见图10)，然而在这些较高流量下需要较大柱体积的洗脱液以完成洗脱(参见图11)。对较大柱体积的洗脱液的需求通过回收利用所述洗脱液来解决，所述洗脱液也减少了洗脱所需的总体积并且还提供了较浓缩的蛋白流给下游超滤单位，减少了浓缩蛋白所需的膜面积。

表3：以三个不同的流量洗脱并回收结合的大豆乳清蛋白。

通过质量平衡将蛋白吸附计算为进料和通过流中的蛋白含量差值。

实施例5：从预处理乳清方法(PT)中捕集大量大豆乳清蛋白

所述方法的进料流是预处理乳清蛋白(也称为PT乳清)，它具有大约1.4％-2.0％的固体。它包含大约18％的矿物，18％的蛋白和74％的糖以及其它矿物。实施纳滤(NF)方法允许在水移除的同时保留方法中的大多数糖和蛋白以及其它固体物质以在下游回收。试验的NF膜(Alfa LavalNF998038/48)是在聚酯膜上的聚酰胺型薄膜复合材料，其具有2kDa的截留分子量(MWCO)，允许水、一价阳离子和非常少量的糖与蛋白通过孔。所述膜的外壳支持3个膜元件。每个元件的直径为8英寸并具有26.4平方米的膜表面积。所述方法的总膜表面积为79.2平方米。这些膜是稳定的，跨越每个膜元件的压降为至多1巴。对于包含3个膜元件的完整模块，最多可允许3巴的压降。PT乳清的NF进料速率为大约2,500升/小时。这个进料的温度为大约45-50℃，并且使用冷却水将NF运行温度调节至这一范围内。初始产物流量为大约16-22升每平方米每小时(LMH)。在模块入口的进料压力为大约6巴。在整个6小时的运行期间，因为污染导致流量下降。进料压力是递增的以保持较高的流量，但是因为发生污染，将压力提到最高后，流量从该点缓慢下降。体积浓缩因数为介于2X和大约4X之间。

执行沉淀步骤以使例如磷酸盐和钙盐以及络合物与PT乳清分离。沉淀条件为pH9，同时保持45℃的温度，停留时间为大约15分钟。沉淀过程涉及1000升。这个槽具有多个入口和出口，其中可将物质排入和排出。小型离心泵将产品泵送出槽并返回槽侧面进行循环，从而促进搅拌和加到所述体系中的35％NaOH的有效混合以保持目标pH。当连接到这一再循环环流上的其中一个T-阀门打开时，这个泵也将产品送入离心机。来自NF的浓缩PT乳清直接进料到槽顶部。将35％NaOH送到NF的进料管中以控制在目标值的pH。将PT乳清以大约2,500升/小时的速度进料到这个混合槽中并以相同速度排出。

在接下来的工序中，使用具有间歇式固体排出系统的Alfa Laval Disc离心机(Clara80)使沉淀固体(包括不溶解的大豆纤维、不溶解的大豆蛋白)与剩余的包含糖和蛋白的乳清流分离。在这个方法中，将来自沉淀槽的浓缩PT乳清泵入盘式离心机，其中通过离心力旋转并加速这个悬浮液。较重的级份(沉淀固体)停留在旋转离心管壁上，较轻的级份(可溶解液体)使用光盘栈澄清并持续排出，用于所述方法的下一步骤。以规则的间隔(通常介于1分钟和10分钟之间)排出分离的沉淀固体。基于体积，澄清的乳清流有少于0.2％的固体。连续的进料流量为大约2.5m³/hr，pH为9.0，并且温度为45℃。不溶性级份达到灰分＝30-60％；Na＝0.5-1.5％干燥基，K＝1.5-3％干燥基，Ca＝6-9％干燥基，Mg＝3-6％干燥基，P＝10-15％干燥基，Cl＝1-2％干燥基，Fe、Mn、Zn、Cu<0.15％干燥基。可溶性级份的改变如下：植酸为大约0.3％干燥基(85％减少)，P＝0.2-0.3％干燥基(85-90％减少)，Ca＝0.35-0.45％干燥基(80-85％减少)，Mg＝0.75-0.85％干燥基(15-20％减少)。

下一个步骤为超滤(UF)膜过滤。通过膜保留下来的蛋白得到浓缩，而其它较小的溶质进入透过物流。将来自离心机的包含蛋白、矿物和糖的稀释物流进料于UF。UF设备和膜由Alfa Laval供应，而CIP化学制品来自Ecolab，Inc。测试的膜GR70PP/80来自Alfa-Laval，该膜具有10kDa的MWCO，由在聚丙烯聚合物背衬上的聚醚砜(PES)构成。进料压力在试验中发生1-7巴的变化，这取决于膜的污染程度。将温度控制在大约65℃。所述体系是一个进料和出料装置，其中保留物返回进料槽以进行再利用，而透过物进入方法的下一个步骤中。运行所述体系直至达到30x的体积浓缩因数。UF的进料速率为大约1,600升/小时。所述装置能够覆盖3个管，相当于6.3"的膜元件。然而，仅使用三个管中的其中一个管。所述膜装置具有自动控制系统，其控制方法期间的温度、运行压力(入口、出口和差动)和体积浓缩因数。一旦所述方法达到目标体积浓缩因数，通常在运行6-8小时后，保留物用一立方米水渗滤(DF)(大约5份渗滤水每份浓缩保留物)以产生高蛋白的保留物。在加工循环后，用典型的CIP规程清洁所述体系，该规程在大多数蛋白纯化方法中使用。保留物在渗滤后包含约80％的干燥基蛋白。

UF/DF步骤的透过物包含糖并且还在反向渗透膜体系(RO)中浓缩。将UF透过物转移到RO体系中以将进料流从大约2％的总固体(TS)浓缩至20％的TS。RO单元操作的方法设备和膜(RO98pHt)由Alfa-Laval供应。提高进料压力以保持恒定流量，在50℃温度下所述压力至多为45巴。通常，每批以2-3％Brix开始并以20-25％Brix结束(Brix＝糖浓度)。

在RO步骤后将浓缩的糖流进料于电透析膜(ED)。来自EurodiaIndustrieSA的电透析从糖溶液中移除矿物。电透析方法具有两个产品流。一个是所述产品流或稀释物流，它进行进一步加工以浓缩物并巴氏消毒所述SOS浓缩溶液。来自电透析方法的另一个流是盐水溶液，其包含从所述进料流中移除的矿物。所述试验使电导率降低>80％，导致产品流测得<3mS/cm的电导率。批进料体积在40℃和pH7下为大约40升。ED单元在18V运行并具有至多50个单元的堆叠。

在蒸发步骤中进一步加工来自ED的去矿物化糖流。SOS流的蒸发在Anhydro'sLabE真空蒸发器上进行。用大约50-55℃的温度和5-20℃的ΔT将SOS产品蒸发至40-75％的干物质。

使用喷雾烘干机干燥UF/DF保留物悬浮液。在槽中一直搅拌具有大约8％的固含量的UF渗滤保留物。然后将悬浮液直接进料到喷雾烘干机中，其中它与热空气在压力下混合，然后通过喷嘴喷雾。所述烘干机从悬浮液中移除水并产生干粉，在使干粉与空气流在气旋分离器中分离后将其收集到桶中。在所述进料悬浮液进入喷雾烘干机之前在150℃热处理9秒以杀灭微生物。所述喷雾烘干机是Production Minor，其来自Niro/GEA公司。所述烘干机进行顺流设置并有两个流体喷嘴。在试验期间略改变干燥条件。进料温度为约80℃，喷嘴压力为约4巴，并且入口空气温度为约250℃。

实施例6：用乳清预处理方法和错流过滤膜捕集大量大豆乳清蛋白

在110℉和pH4.57下来自大豆分离蛋白提取物和等电沉淀连续方法的大约8000lbs含水大豆乳清(也称为生乳清)进料于反应容器，其中通过加入50％氢氧化钠将pH提高到5.3。然后将调节了pH的生乳清进料于第二反应容器中，在连续方法中平均停留时间为10分钟，其中通过直接注入蒸汽将温度提高到190℉。然后将加热并调节pH的生乳清通过板框式换热器冷却至90℉，该换热器以冷水作为冷却介质。然后将冷却的生乳清进料到Alfa Laval VNPX510澄清离心机中，其中悬浮固体，主要是不溶解大分子量蛋白，被分离并排放到废物流中，并且澄清的浓缩物继续在下一个反应容器中进行加工。澄清浓缩物或预处理乳清蛋白的pH用12.5％的氢氧化钠调节至8.0并保持10分钟，然后将其进料到Alfa Laval VNPX510澄清离心机中，其中所述悬浮固体，主要是不溶解矿物，被分离并排放到废物流中。澄清浓缩物在超滤之前被送至缓冲槽中。澄清浓缩物的超滤在90℉使用3.8"直径的聚醚砜卷式膜PW3838C以进料和出料模式进行，所述膜由GE Osmonics制造，具有10kDa的截留分子量。继续超滤直至达到初始进料体积的60x浓度，这需要约4.5小时。将114lbs4.5％总固体和pH8.2的保留物转移到反应容器中，其中使用35％盐酸调节至pH7.4。然后通过直接注入蒸汽将保留物加热到305℉9秒钟，随后在真空室中闪蒸冷却至140℉。然后在6000psi的入口压力和2500的出口压力下泵送所述物质通过均化阀门进行均化，随后通过喷嘴和孔口的组合进入喷雾干燥机以雾化所述溶液。喷雾干燥机在538℉的入口温度和197℉的出口温度下运行，并且由干燥室、气旋分离器和袋滤室组成。从气旋分离器底部排放液中收集总计4lbs的喷雾干燥的大豆乳清蛋白。

实施例7：使用膨胀床吸附(EBA)层析捕集大量大豆乳清蛋白

用乙酸将200mL具有1.92％的总固体含量的含水生大豆乳清(未进行预处理)调节至pH4.5，并且应用于在pH4.5的10mM柠檬酸钠中平衡的1×25cm Mimo6ME树脂柱(UpFront Chromatography，CopenhagenDenmark)。物质在20-25℃使用7.5cm/min的线性流量从下向上加载至柱上。每隔一定间隔收集柱的穿流样品用于后期的分析。用10倍柱体积的平衡缓冲液将未结合的物质洗出柱，然后通过用50mM氢氧化钠洗脱回收结合的物质。在4-12％SDS-PAGE凝胶上分离了含水大豆乳清的EBA层析过程中回收的每一级份10μl，并且用考马斯亮蓝R250染料染色。柱的载样、穿流、洗涤和氢氧化钠洗脱样品的SDS-PAGE分析描述于图12中。如图12中所用，RM：原材料(柱的载样)；RT1-4：载样过程中以相等间隔收集的柱穿流物(穿流)；总计：总穿流级份；W：柱的洗涤液；E：柱的洗脱液。结合是相当有效的，因为在初始通过级份中看到非常少的蛋白，它们仅在后来的级份中出现。在洗脱液中回收总共662mg的蛋白，收率为3.3mg/mL原料。在这些条件下，这种树脂的容量显示为33.1mg蛋白每mL吸附剂。

实施例8：使用膨胀床吸附(EBA)层析从喷雾干燥的SWP中捕集大量大豆乳清蛋白

喷雾干燥的大豆乳清粉末在水中形成浓度为10mg/mL的浆液并用乙酸调节至pH4.0。然后将400mL浆液直接施用于1×25cm的Mimo-4SE树脂柱底部(UpFront Chromatography，Copenhagen Denmark)，该树脂柱已经在pH4.0的10mM柠檬酸钠中达到平衡。物质在20-25℃使用7.5cm/min的线性流量加载。每隔一定间隔收集柱的穿流样品用于后期的分析。使用10倍柱体积的平衡缓冲液将未结合的物质洗涤出所述柱。结合的物质用30mM NaOH洗脱。在4-12％SDS-PAGE凝胶上分离了大豆乳清粉末悬浮液的EBA层析过程中回收的每一级份10μl，并且用考马斯亮蓝R250染料染色。柱的载量、穿流、洗涤和洗脱液的SDS-PAGE分析描述于图13中。如图13中所用，RM：原材料(柱的载样)；RT1-4：载样过程中以相等间隔收集的柱穿流物(穿流)；总计：总穿流级份；W：柱的洗涤液；E：柱的洗脱液。结合效率与使用Mimo6ME树脂时观察到的效率不一样，因为在通过级份中看到多个蛋白谱带。在洗脱液中回收总共2070mg的蛋白，收率为5.2mg/mL原料。在这些条件下，这种树脂的容量显示为104mg蛋白每mL吸附剂。

实施例9：使用膨胀床吸附(EBA)层析从大量大豆乳清蛋白中移除 KTI

使用两个方法，通过EBA层析从大量大豆乳清蛋白中移除主要的污染KTI蛋白。首先，用氢氧化钠将200mL具有1.92％的总固体含量的含水生大豆乳清(未进行预处理)调节至pH6.0，并且应用于在pH6.0的10mM柠檬酸钠中平衡的1×25cm Mimo6HE树脂柱(UpFrontChromatography，Copenhagen Denmark)。物质在20-25℃使用7.5cm/min的线性流量从下向上加载至柱上。每隔一定间隔收集柱的穿流样品用于后期的分析。用10倍柱体积的平衡缓冲液将未结合的物质洗出柱，然后通过用30mM氢氧化钠洗脱回收结合的物质。在4-12％SDS-PAGE凝胶上分离了大豆乳清粉末悬浮液的EBA层析过程中回收的每一级份10μl，并且用考马斯亮蓝R250染料染色。柱的载样、穿流、洗涤和氢氧化钠洗脱样品的SDS-PAGE分析描述于图14中。如图14中所用，RM：原材料(柱的载样)；RT1-4：载样过程中以相等间隔收集的穿流物质(穿流)；总计：总穿流级份；W：柱的洗涤液；E：柱的洗脱液。明显地看见大多数加载的蛋白洗脱于穿流中，而大多数的KTI蛋白依然结合在树脂上。在洗脱液中回收总共355mg的蛋白(其大级份为KTI)，收率为1.8mg/mL原料。在这些条件下，这种树脂的容量显示为17.8mg的KTI(加上微量杂质)每mL吸附剂。

在第二个方法中，用乙酸将160mL具有1.92％的总固体含量的含水生大豆乳清(未进行预处理)调节至pH5.1，并且应用于在pH5.0的10mM柠檬酸钠中平衡的1×25cm Mimo6ZE树脂柱(UpFront Chromatography，Copenhagen Denmark)。物质在20-25℃使用7.5cm/min的线性流量从下向上加载至柱上。每隔一定间隔收集柱的穿流样品用于后期的分析。用10倍柱体积的平衡缓冲液将未结合的物质洗出柱，然后通过用30mM氢氧化钠洗脱回收结合的物质。在4-12％SDS-PAGE凝胶上分离了大豆乳清粉末悬浮液的EBA层析过程中回收的每一级份10μl，并且用考马斯亮蓝R250染料染色。柱的载样、穿流、洗涤和氢氧化钠洗脱样品的SDS-PAGE分析描述于图15中。如图15中所用，RM：原材料(柱的载样)；RT1-4：载样过程中以相等间隔收集的穿流物质(穿流)；总计：总穿流级份；W：柱的洗涤液；E：柱的洗脱液。明显地看见大多数KTI洗脱于穿流中，而大多数的剩余蛋白依然结合在树脂上。在洗脱液中回收总共355mg的基本上不含污染KTI的大豆蛋白，收率为2.1mg/mL原料。在这些条件下，这种树脂的容量显示为16.8mg大豆蛋白每mL吸附剂。

本领域的技术人员将容易地了解，本文所述的方法和组合物代表示例性的实施方案，并且不旨在限制本发明的范围。对本领域的技术人员而言将显而易见的是，可以对本文所公开的本公开进行不同的替换和修改，而不会背离本发明的范围和精神。

本说明书中提及的全部专利和出版物指示本公开所属的领域的那些技术人员的水平。全部专利和出版物均以引用方式并入本文，其引用程度如同每一单独的公布被特定和个别地以引用方式并入。

本文适当地例证性地描述的本公开可以在未具体公开于本文中的任何元件或限制的不存在下实施。因此，例如，在本文的每一实例中，术语“包含/包括”、“基本上由……组成”和“由……组成”中的任何一个可以被其它两个术语之一替代。本文所用的术语和表述被用于描述而并非进行限制，使用此类术语和表述并无意排除所示出和描述的特征或其部分的任何等同形式，但公认的是在受权利要求书保护的本公开的范围内可以使用各种修改形式。因此，应当理解，虽然通过优选实施方案和任选特征对本公开进行了具体描述，但是本领域的技术人员可借助本文所公开的概念的修改形式和变型形式，并且应当理解此类修改形式和变型形式在本发明的范围内。

Claims

1.大豆乳清蛋白组合物，包含在跨越约2至约10的含水介质的pH范围的酸性含水介质中以及在约25℃的温度下具有至少约80%的溶解度的大豆蛋白，其中所述组合物具有约2至10cP的粘度。

2. 权利要求1的大豆乳清蛋白组合物，其中所述组合物来源于大豆工艺流。

3. 权利要求1的大豆蛋白组合物，其中所述酸性含水介质的pH是约2至约7。

4.权利要求1的大豆蛋白组合物，其中所述组合物具有约3.6至7.5cP的粘度。

5. 大豆乳清蛋白组合物，包含具有约2至10cP的粘度和在跨越约2至约10的含水介质的pH范围的酸性含水介质中以及在约25℃的温度下具有至少约80%的溶解度的大豆蛋白，其中所述组合物来源于大豆工艺流。