CN103965096A - 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 - Google Patents
一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103965096A CN103965096A CN201410192731.0A CN201410192731A CN103965096A CN 103965096 A CN103965096 A CN 103965096A CN 201410192731 A CN201410192731 A CN 201410192731A CN 103965096 A CN103965096 A CN 103965096A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extraction
- solution
- industrial
- applicable
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- LXBIFEVIBLOUGU-UHFFFAOYSA-N Deoxymannojirimycin Natural products OCC1NCC(O)C(O)C1O LXBIFEVIBLOUGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 21
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 title abstract description 4
- LXBIFEVIBLOUGU-JGWLITMVSA-N duvoglustat Chemical compound OC[C@H]1NC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LXBIFEVIBLOUGU-JGWLITMVSA-N 0.000 title abstract 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 58
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 31
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 claims abstract description 23
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 claims abstract description 20
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 58
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 20
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 9
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 238000010792 warming Methods 0.000 claims description 6
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 4
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 4
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 4
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004760 aramid Substances 0.000 claims description 2
- 229920003235 aromatic polyamide Polymers 0.000 claims description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920002239 polyacrylonitrile Polymers 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000218231 Moraceae Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N [(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-diacetyloxy-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-triacetyloxy-6-(acetyloxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxy-2-(acetyloxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound O([C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O1)OC(C)=O)COC(=O)C)[C@@H]1[C@@H](COC(C)=O)O[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N 0.000 description 1
- LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N ac1ldcw0 Chemical compound Cl.C1CN(C)CCN1C1=C(F)C=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN3CCSC1=C32 LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 229930000732 piperidine alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002893 slag Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
- C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D211/40—Oxygen atoms
- C07D211/44—Oxygen atoms attached in position 4
- C07D211/46—Oxygen atoms attached in position 4 having a hydrogen atom as the second substituent in position 4
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，包括以下步骤：（1）原料前处理：将干燥原料桑叶粉碎；（2）酶解：向粉料中加入水，升温，加入组合酶酶解，过滤；（3）连续组合提取：将滤渣使用3-4个提取装置连续组合提取，合并提取液，过滤；（4）醇沉、离心：减压浓缩至原体积的1/3-1/2，冷却，调节pH，加入醇溶液，搅拌，静置，管式离心；（5）膜滤：在常温压力25-35bar条件下，使用有机超滤膜进行超滤处理，然后在常温压力0.5-1.5MPa条件下，使用纳滤膜进行纳滤处理；（6）浓缩；（7）干燥。利用本发明可实现很大程度地降低溶剂损耗量、降低能耗、提高产品收率，适用于工业生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种1-脱氧野尻霉素的制备方法，尤其涉及一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法。
背景技术
桑叶，别名铁扇子，是桑科植物桑（Morus alba L.）的干燥叶，在我国分布较广并大量种植，长期以来，桑叶主要应用于两个方面，一是桑蚕的饲养，一是入中药，被认为具有疏散风热、清肝明目、凉血止血、清肺润燥等功效。作为一种卫生部批准的药食两用的植物，随着研究的深入，表明桑叶中含有黄酮类、生物碱类、氨基酸、维生素以及矿物质等活性物质，其中一种哌啶类生物碱1-脱氧野尻霉素（DNJ）被广泛关注，被证实具有明显的降血糖功效，现代药理学发现1-脱氧野尻霉素降血糖的机理主要是其能够作为多种α-糖苷酶的抑制剂，可以阻止淀粉等多糖分解成葡萄糖或其他单糖。相对于其他药物，1-脱氧野尻霉素具有安全性高、依赖性小等特点，倍受青睐，将有望取代传统降血糖药物。
目前，关于从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素（DNJ）的方法较多，如申请号为200710067498.3的中国专利申请公开了一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，该方法是将桑叶粉碎后进行提取、无机酸进行酸化，然后过阳离子交换树脂，氨醇洗脱，经浓缩干燥，得含量为10%以上的DNJ产品，其工艺虽简单，但过阳离子交换树脂，损失较大；申请号为201210190238.6中国专利申请公开了一种利用滤膜和树脂制备桑叶1-脱氧野尻霉素提取物的方法，该方法是将桑叶进行提取、浓缩、微孔过滤、经有机超滤膜过滤后，然后过大孔吸附树脂以及阳、阴离子交换树脂，最后浓缩、干燥得产品，产品纯度可达50%以上，该方法的缺陷是工艺繁琐、过程复杂，设备投入大，不利工业生产；申请号为201210411230.8的中国专利申请公开了一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法，该方法是将药材粉碎后进行提取、醇沉过滤，然后依次过大孔树脂、阳离子交换树脂，经浓缩、硅胶吸附、解吸以及干燥可得DNJ纯度70%以上产品，该方法存在工艺复杂，收率低，成本高等缺陷。
就上述方法而言，大多为致力于提高1-脱氧野尻霉素的纯度，对于生产的实际操作与成本控制方面关注不够，所以，现有真正适用于工厂生产的技术较少。
发明内容
本方法所要解决的技术问题是，提供一种以干燥桑叶为原料的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，该方法可实现很大程度地降低溶剂损耗量、降低能耗、提高产品收率，最终制备出低成本的含量12%以上的1-脱氧野尻霉素产品。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，包括以下步骤：
（1）原料前处理：将干燥原料桑叶粉碎至20-40目，得粉料；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入干燥原料重量6-10倍的水，升温至40-50℃，然后加入干燥原料重量的0.05-0.20%的组合酶，酶解3-5h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣使用3-4个提取装置连续组合提取，每个提取装置中的滤渣提取3-4次，每次提取所用溶剂为干燥原料重量6-9倍的亲水溶剂，提取温度为70-90℃，提取时间为1.8-2.2h，提取后，合并提取液，过滤；
所述亲水溶剂为含酸性溶液的亲水溶剂，所述酸性溶液的体积分数为0.2-0.4%；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/2，冷却至20-30℃，用质量分数为1-2%的碱液调节pH至8-9，然后加入相当于调节pH值后浓缩液重量3-4倍的醇溶液，搅拌10-15min后，静置3-4h，管式离心，离心速率为10000-14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液常温下在压力为25-35bar条件下，使用孔径为5-10kDa的有机超滤膜进行超滤处理，得超滤透过液，然后常温下在压力为0.5-1.5MPa条件下，使用孔径为300-800Da（道尔顿）的纳滤膜进行纳滤处理，得纳滤透过液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤透过液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/6，得浓缩液；
（7）干燥：将步骤（6）所得的浓缩液进行干燥后，即得产品。
进一步，步骤（2）中，加入的组合酶为纤维素酶与果胶酶，其中纤维素酶:果胶酶=2-4:1，w/w。
进一步，步骤（3）中，所述亲水溶剂为甲醇或乙醇，所述酸性溶液为质量分数37.5%的盐酸、质量分数98%的硫酸或甲酸。
进一步，步骤（4）中，所述减压浓缩的温度为60-80℃，真空度为-0.08～-0.04MPa。
进一步，步骤（4）中，所述碱液为氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液。
进一步，步骤（4）中，所述醇溶液为体积分数80-95%的乙醇溶液。
进一步，步骤（5）中，所用超滤膜的材质为聚碳酸酯、聚砜或聚丙烯腈；所用纳滤膜的材质为CA（醋酸纤维素）膜、CTA（三醋酸纤维素）膜或芳族聚酰胺复合膜。
进一步，步骤（6）中，所述减压浓缩的温度为70-80℃，真空度为-0.08～-0.06MPa。
进一步，步骤（7）中，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥。
步骤（3）中，所述连续组合提取是一种同时使用几套提取装置，上一提取装置提取液最大限度的应用于下一提取装置的提取溶剂的一种提取方式。
假定连续提取由三个提取装置为一个组合来进行的，三个提取装置编号分别为A、B、C，对每一个提取装置所投入的药材原料均进行3次提取处理，第1次提取使用的溶剂量为原料重量的9倍:
（1）将A的第1次提取液直接送至后续工序；
（2）将A的第2次提取液（加入溶剂为原料重量的7倍）加入B，作为B的第1次提取溶剂，B的第1次提取液送至后续工序；
（3）将A的第3次提取液（加入溶剂为原料重量的9倍）加入B，作为B的第2次提取溶剂，B的第2次提取液加入C，作为C的第1次提取溶剂，C的第1次提取液送至后续工序；
注：此时A中原料已经完成3次提取，出渣，将投入新的原料；B中原料已经完成2次提取，还需加入溶剂提取第3次；C中原料已经完成了1次提取，待B中第3次提取液出来后将进行第2次提取；
接下来向B中加入原料重9倍的溶剂，进行第3次提取，第3次提取液作为C中第2次提取溶剂，而C中第2次提取液出来后，将作为A中新的原料的第1次提取溶剂，A中第1次提取液送至后续工序；如此连续循环，即A、B、C中任何第1次提取得提取液将直接送入后续工序操作，第2次提取将作为下一罐中第3次的提取溶剂，而第3次提取液又作为下一罐中第1次提取的提取溶剂，整个组合中，只有第1次提取液送至下一工序，只在第3次提取时，加入新的提取溶剂。
利用本发明所得到的桑叶提取物产品，经高效液相色谱法检测，产品中DNJ含量达12%以上，得率0.7%以上。
本发明具有以下优点：
（1）利用醇沉以及膜滤技术从桑叶原料中提取分离出纯度达12%以上的DNJ产品，实现1-脱氧野尻霉素的有效分离；
（2）利用酶解方法提高溶剂溶出效率，进而提高产品的得率，产品得率0.7%以上；
（3）使用连续组合提取的提取方式进行提取，可大大节约溶剂的使用和损耗，保证得率的同时，提高了提取效率，很大程度上降低了生产成本；
（4）过程简单、设备要求较低，操作安全，适合工厂生产；
（5）整个过程没有使用任何对人体有害的有机溶剂，环保安全。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例包括以下步骤：
（1）原料前处理：将100kg干燥原料桑叶粉碎，过24目筛，得粉料99.5kg；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入600kg水，升温至50℃，然后加入200g的组合酶（纤维素:果胶酶=4:1，w/w），保持温度酶解5h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣均分4份，分别置于4套提取装置中进行连续组合提取，对每个提取装置中的滤渣提取4次，每次提取溶剂为干燥原料重量9倍的体积分数80%的乙醇（含体积分数为0.4%的盐酸，盐酸的质量分数37.5%），提取温度为85℃，提取时间为2.2h，提取后，合并提取液，过滤；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为65℃，真空度为-0.06MPa，浓缩至原体积的1/3，得595kg浓缩液，向浓缩液中加入质量分数为2%的氢氧化钠溶液，调节pH为8.5，然后加入1800kg体积分数80%的乙醇溶液，搅拌15min后，静置4h，管式离心，速率为14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液过聚碳酸酯超滤膜，压力为25-35bar，孔径为10kDa，得超滤液，然后使用聚酰胺复合膜进行纳滤处理，压力为0.5-1.0MPa，孔径为600～800Da，得纳滤液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为70℃，真空度为-0.08MPa，浓缩至原体积的1/6，得浓缩液297kg；
（7）干燥：将所得的浓缩液进行喷雾干燥，得成品797g，含量12.18%。
实施例2
本实施例包括以下步骤：
（1）原料前处理：将100kg干燥原料桑叶粉碎，过24目筛，得99.5kg粉料；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中入800kg水，升温至50℃，再加入50g的组合酶（纤维素:果胶酶=2:1，w/w），保持温度酶解3h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣均分3份，分别置于3套提取装置中进行连续组合提取，对每个提取装置中的滤渣提取3次，每次提取溶剂为干燥原料重量6倍的体积分数50%的乙醇（含体积分数含0.2%的盐酸，盐酸的质量分数37.5%），提取温度为70℃，提取时间为1.8h，提取后，合并提取液，过滤；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液减压浓缩，减压浓缩的温度为65℃，真空度为-0.06MPa，浓缩至原体积的1/2，得510kg浓缩液，向浓缩液中加入质量分数为2%的碳酸钠溶液，调节pH为8.0，然后加入1600kg体积分数为80%的乙醇溶液，搅拌15min后，静置3h，管式离心，离心速率为14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液过聚砜超滤膜，压力为25-35bar，孔径为5kDa，得超滤液，然后使用CA进行纳滤处理，压力为1.0-1.5MPa，孔径为300-600Da，得纳滤液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为80℃，真空度为-0.08MPa，浓缩至原体积的1/6，得浓缩液324kg；
（7）干燥：将所得的浓缩液进行喷雾干燥，得成品732g，含量13.88%。
实施例3
本实施例包括以下步骤：
（1）原料前处理：将100kg干燥原料桑叶粉碎，过24目筛，得粉料99.6kg；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入600kg水，升温至50℃，然后加入100g的组合酶（纤维素:果胶酶=4:1，w/w），保持温度酶解5h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣均分3份，分别置于3套提取装置中进行连续组合提取，对每个提取装置中的滤渣提取4次，每次提取溶剂为干燥原料重量9倍的体积分数80%的乙醇（含体积分数为0.4%的盐酸，盐酸的质量分数37.5%），提取温度为85℃，提取时间为2.2h，提取后，合并提取液，过滤；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为65℃，真空度为-0.06MPa，浓缩至原体积的1/3，得525kg浓缩液，向浓缩液中加入质量分数为2%的氢氧化钠溶液，调节pH为8.5，然后加入1600kg体积分数80%的乙醇溶液，搅拌15min后，静置4h，管式离心，速率为14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液过聚碳酸酯超滤膜，压力为25-35bar，孔径为10kDa，得超滤液，然后使用聚酰胺复合膜进行纳滤处理，压力为0.5-1.0MPa，孔径为600～800Da，得纳滤液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为70℃，真空度为-0.08MPa，浓缩至约原体积的1/4，得浓缩液497kg；
（7）干燥：将所得的浓缩液进行喷雾干燥，得成品756g，含量12.73%。
实施例4
本实施例包括以下步骤：
（1）原料前处理：将100kg干燥原料桑叶粉碎，过24目筛，得粉料99.7kg；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入800kg水，升温至50℃，再加入50g的组合酶（纤维素:果胶酶=2:1，w/w），保持温度酶解3h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣均分4份，分别置于4套提取装置中进行连续组合提取，对每个提取装置中的原料提取4次，每次提取溶剂为干燥原料重量6倍的体积分数50%的乙醇（含体积分数含0.2%的盐酸，盐酸的质量分数37.5%），提取温度为70℃，提取时间为1.8h，提取后，合并提取液并过滤；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液减压浓缩，减压浓缩的温度为65℃，真空度为-0.06MPa，浓缩至原体积的1/2，得586kg浓缩液，向浓缩液中加入质量分数为2%的碳酸钠溶液，调节pH为8.0，然后加入2300kg体积分数为85%的乙醇溶液，搅拌15min后，静置3h，管式离心，离心速率为14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液过聚砜超滤膜，压力为25-35bar，孔径为5kDa，得超滤液，然后使用CA进行纳滤处理，压力为1.0-1.5MPa，孔径为300-600Da，得纳滤液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤液进行减压浓缩，减压浓缩的温度为80℃，真空度为-0.08MPa，浓缩至原体积的1/6，得浓缩液461kg；
（7）干燥：将所得的浓缩液进行喷雾干燥，得成品771g，含量12.45%。
Claims (9)
1. 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）原料前处理：将干燥原料桑叶粉碎至20-40目，得粉料；
（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入干燥原料重量6-10倍的水，升温至40-50℃，然后加入干燥原料重量的0.05-0.20%的组合酶，酶解3-5h，过滤，得滤渣；
（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣使用3-4个提取装置连续组合提取，每个提取装置中的滤渣提取3-4次，每次提取所用溶剂为干燥原料重量6-9倍的亲水溶剂，提取温度为70-90℃，提取时间为1.8-2.2h，提取后，合并提取液，过滤；
所述亲水溶剂为含酸性溶液的亲水溶剂，所述酸性溶液的体积分数为0.2-0.4%；
（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/2，冷却至20-30℃，用质量分数为1-2%的碱液调节pH至8-9，然后加入相当于调节pH值后浓缩液重量3-4倍的醇溶液，搅拌10-15min后，静置3-4h，管式离心，离心速率为10000-14000r/min，得离心液；
（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液常温下在压力为25-35bar条件下，使用孔径为5-10kDa的有机超滤膜进行超滤处理，得超滤透过液，然后常温下在压力为0.5-1.5MPa条件下，使用孔径为300-800Da的纳滤膜进行纳滤处理，得纳滤透过液；
（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤透过液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/6，得浓缩液；
（7）干燥：将步骤（6）所得的浓缩液进行干燥后，即得产品。
2.根据权利要求1所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，加入的组合酶为纤维素酶与果胶酶，其中纤维素酶:果胶酶=2-4:1，w/w。
3.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述亲水溶剂为甲醇或乙醇，所述酸性溶液为质量分数37.5%的盐酸、质量分数98%的硫酸或甲酸。
4.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述减压浓缩的温度为60-80℃，真空度为-0.08～-0.04MPa。
5.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述碱液为氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液。
6.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述醇溶液为体积分数80-95%的乙醇溶液。
7.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，所用超滤膜的材质为聚碳酸酯、聚砜或聚丙烯腈；所用纳滤膜的材质为CA膜、CTA膜或芳族聚酰胺复合膜。
8.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（6）中，所述减压浓缩的温度为70-80℃，真空度为-0.08～-0.06MPa。
9.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（7）中，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410192731.0A CN103965096B (zh) | 2014-05-09 | 2014-05-09 | 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410192731.0A CN103965096B (zh) | 2014-05-09 | 2014-05-09 | 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103965096A true CN103965096A (zh) | 2014-08-06 |
| CN103965096B CN103965096B (zh) | 2016-08-24 |
Family
ID=51235156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410192731.0A Active CN103965096B (zh) | 2014-05-09 | 2014-05-09 | 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103965096B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105055652A (zh) * | 2015-08-07 | 2015-11-18 | 赵明东 | 防治肝病的复方药物及其制备方法与应用 |
| CN105294542A (zh) * | 2015-10-22 | 2016-02-03 | 白心亮 | 一种含1-脱氧野尻霉素的桑叶提取物的制备方法 |
| CN107162955A (zh) * | 2017-06-30 | 2017-09-15 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种脱氧野尻霉素的提取方法 |
| CN109180564A (zh) * | 2018-09-20 | 2019-01-11 | 丽水绿氟科技有限公司 | 一种哌啶及其衍生物的制备方法 |
| CN114177218A (zh) * | 2021-11-03 | 2022-03-15 | 湖北瑞邦生物科技有限公司 | 一种富含1-脱氧野尻霉素的桑叶提取物及其制备方法 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100603892B1 (ko) * | 2004-12-28 | 2006-07-24 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | 누에로부터 1-데옥시노지리마이신의 정제방법 |
| CN101020655A (zh) * | 2007-03-15 | 2007-08-22 | 浙江大学 | 一种从桑叶中提取1－脱氧野尻霉素的方法 |
| CN102190615A (zh) * | 2011-04-08 | 2011-09-21 | 长沙华诚生物科技有限公司 | 一种从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法 |
| CN102491938A (zh) * | 2011-12-16 | 2012-06-13 | 北京贯虹科技集团有限公司 | 脱氧野尻霉素的一种纯化方法 |
| CN102718697A (zh) * | 2012-06-06 | 2012-10-10 | 浙江工业大学 | 利用滤膜和树脂制备桑叶1-脱氧野尻霉素提取物的方法 |
| CN102731367A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-10-17 | 长沙湘资生物科技有限公司 | 一种从植物中同时提取1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的方法 |
| CN102875450A (zh) * | 2012-10-25 | 2013-01-16 | 上海丝绸集团股份有限公司 | 一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法 |
| CN102964460A (zh) * | 2012-11-16 | 2013-03-13 | 北京石油化工学院 | 从桑叶中连续提取分离多糖及 1-脱氧野尻霉素的方法 |
| CN103204800A (zh) * | 2013-05-14 | 2013-07-17 | 成都科源生物技术有限公司 | 一种高纯度1-脱氧野尻霉素的提取方法 |
| CN103211051A (zh) * | 2013-03-29 | 2013-07-24 | 刘治国 | 一种桑提取物、生产方法及其用途 |
| CN103274992A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-09-04 | 扬州大学 | 一种联合膜分离和柱层析技术制备高纯度1-脱氧野尻霉素的方法 |
| KR20140047982A (ko) * | 2012-10-15 | 2014-04-23 | 한국식품연구원 | 1-데옥시노지리마이신을 생산하는 바실러스 아밀로리쿼파시엔스 140ｎ 및 이를 이용한 항당뇨 활성이 있는 콩발효물의 제조방법 |
| CN103755623A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-30 | 广州军区广州总医院 | 一种响应面法优化的酸性乙醇溶液提取桑叶中1-脱氧野尻霉素的方法 |
-
2014
- 2014-05-09 CN CN201410192731.0A patent/CN103965096B/zh active Active
Patent Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100603892B1 (ko) * | 2004-12-28 | 2006-07-24 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | 누에로부터 1-데옥시노지리마이신의 정제방법 |
| CN101020655A (zh) * | 2007-03-15 | 2007-08-22 | 浙江大学 | 一种从桑叶中提取1－脱氧野尻霉素的方法 |
| CN102190615A (zh) * | 2011-04-08 | 2011-09-21 | 长沙华诚生物科技有限公司 | 一种从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法 |
| CN102491938A (zh) * | 2011-12-16 | 2012-06-13 | 北京贯虹科技集团有限公司 | 脱氧野尻霉素的一种纯化方法 |
| CN102731367A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-10-17 | 长沙湘资生物科技有限公司 | 一种从植物中同时提取1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的方法 |
| CN102718697A (zh) * | 2012-06-06 | 2012-10-10 | 浙江工业大学 | 利用滤膜和树脂制备桑叶1-脱氧野尻霉素提取物的方法 |
| KR20140047982A (ko) * | 2012-10-15 | 2014-04-23 | 한국식품연구원 | 1-데옥시노지리마이신을 생산하는 바실러스 아밀로리쿼파시엔스 140ｎ 및 이를 이용한 항당뇨 활성이 있는 콩발효물의 제조방법 |
| CN102875450A (zh) * | 2012-10-25 | 2013-01-16 | 上海丝绸集团股份有限公司 | 一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法 |
| CN102964460A (zh) * | 2012-11-16 | 2013-03-13 | 北京石油化工学院 | 从桑叶中连续提取分离多糖及 1-脱氧野尻霉素的方法 |
| CN103211051A (zh) * | 2013-03-29 | 2013-07-24 | 刘治国 | 一种桑提取物、生产方法及其用途 |
| CN103204800A (zh) * | 2013-05-14 | 2013-07-17 | 成都科源生物技术有限公司 | 一种高纯度1-脱氧野尻霉素的提取方法 |
| CN103274992A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-09-04 | 扬州大学 | 一种联合膜分离和柱层析技术制备高纯度1-脱氧野尻霉素的方法 |
| CN103755623A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-30 | 广州军区广州总医院 | 一种响应面法优化的酸性乙醇溶液提取桑叶中1-脱氧野尻霉素的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 刘树兴,等: "树脂法纯化1-脱氧野尻霉素(DNJ)的研究", 《食品科技》 * |
| 刘树兴,等: "桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)和多糖提取工艺优化", 《陕西科技大学学报》 * |
| 刘韦鋆,等: "1-脱氧野尻霉素提取精制工艺的研究", 《中华中医药学刊》 * |
| 李宇亮,等: "1-脱氧野尻霉素提取分离方法研究", 《应用化工》 * |
| 蒋小飞,等: "桑叶中生物碱脱氧野尻霉素(DNJ)的最佳提取工艺探讨", 《西昌学院学报(自然科学版)》 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105055652A (zh) * | 2015-08-07 | 2015-11-18 | 赵明东 | 防治肝病的复方药物及其制备方法与应用 |
| CN105294542A (zh) * | 2015-10-22 | 2016-02-03 | 白心亮 | 一种含1-脱氧野尻霉素的桑叶提取物的制备方法 |
| CN105294542B (zh) * | 2015-10-22 | 2018-01-16 | 内蒙古昶辉生物科技股份有限公司 | 一种含1‑脱氧野尻霉素的桑叶提取物的制备方法 |
| CN107162955A (zh) * | 2017-06-30 | 2017-09-15 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种脱氧野尻霉素的提取方法 |
| CN107162955B (zh) * | 2017-06-30 | 2020-02-18 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种脱氧野尻霉素的提取方法 |
| CN109180564A (zh) * | 2018-09-20 | 2019-01-11 | 丽水绿氟科技有限公司 | 一种哌啶及其衍生物的制备方法 |
| CN109180564B (zh) * | 2018-09-20 | 2021-08-27 | 丽水绿氟科技有限公司 | 一种哌啶及其衍生物的制备方法 |
| CN114177218A (zh) * | 2021-11-03 | 2022-03-15 | 湖北瑞邦生物科技有限公司 | 一种富含1-脱氧野尻霉素的桑叶提取物及其制备方法 |
| CN114177218B (zh) * | 2021-11-03 | 2023-01-10 | 湖北瑞邦生物科技有限公司 | 一种富含1-脱氧野尻霉素的桑叶提取物及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103965096B (zh) | 2016-08-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101912480B (zh) | 一种黑果枸杞原花青素提取物的制备方法 | |
| CN100564373C (zh) | 从茶树花中提取茶多酚的加工工艺 | |
| CN104086614B (zh) | 一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法 | |
| CN103965096B (zh) | 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法 | |
| CN102190615B (zh) | 一种从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素的方法 | |
| CN101973976A (zh) | 从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法 | |
| CN109645304B (zh) | 一种桑叶健康食品基料的制备方法 | |
| CN102942550B (zh) | 一种从黑豆皮中提取花青素的方法 | |
| CN107898868B (zh) | 从枸杞中同步分离制备枸杞红素、枸杞多糖和枸杞黄酮的方法 | |
| CN106243172A (zh) | 一种提取高纯度黑果枸杞花色苷的方法 | |
| CN102690251A (zh) | 一种蓝莓花青素的提取方法 | |
| CN102349951A (zh) | 山楂叶提取物的制备方法 | |
| CN111269171B (zh) | 一种高纯度1-脱氧野尻霉素的制备方法 | |
| CN105053952B (zh) | 一种无苦涩味的陈皮提取物的加工工艺 | |
| CN104610417B (zh) | 一种从山楂中提取熊果酸和齐墩果酸的方法 | |
| CN102060856B (zh) | 一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法 | |
| CN109369733B (zh) | 一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法 | |
| CN104098633B (zh) | 一种从越橘中提取花色苷的方法 | |
| CN105399795B (zh) | 一种从黄芪中提取黄芪甲苷的方法 | |
| CN101759731B (zh) | 亚麻籽胶和开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的提取方法 | |
| CN104558224B (zh) | 从黄芪废渣中制备黄芪多糖和保水凝胶的方法 | |
| CN103483302A (zh) | 一种分离纯化低聚原花青素的方法 | |
| CN101696381B (zh) | 青稞黄酮提取物的制备工艺及其在保健酒中的应用 | |
| CN106565422A (zh) | 一种橄榄叶羟基酪醇的提取工艺 | |
| CN102329350A (zh) | 一种从桑白皮中提取桑皮苷a的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: Tongzi high tech Zone of Hunan province Changsha Po Road 410205 No. 188 Gold code (Lugu High-tech Park) building two floor West Applicant after: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. Address before: 410205 Yuelu District, Changsha, Tongzi, west slope road, No. 188, No. Applicant before: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. |
|
| COR | Change of bibliographic data | ||
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20160628 Address after: 336400 Jiangxi province Yichun County Industrial Park Applicant after: Jiangxi Haifu Bioengineering Co.,Ltd. Address before: Tongzi high tech Zone of Hunan province Changsha Po Road 410205 No. 188 Gold code (Lugu High-tech Park) building two floor West Applicant before: HUNAN HUACHENG BIOTECH, INC. |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20180824 Address after: 410205 Hunan Changsha high tech Development Zone, Donghong street, 8 Xing Kang Nan Road. Patentee after: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. Address before: 336400 Shanggao County Industrial Park, Yichun, Jiangxi Patentee before: Jiangxi Haifu Bioengineering Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: 1-deoxynojirimycin preparing method suitable for industrial production Effective date of registration: 20190828 Granted publication date: 20160824 Pledgee: Bank of Communications Co.,Ltd. Hunan Branch Pledgor: HUNAN HUACHENG BIOTECH, INC. Registration number: Y2019430000006 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20210326 Granted publication date: 20160824 Pledgee: Bank of Communications Co.,Ltd. Hunan Branch Pledgor: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. Registration number: Y2019430000006 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A preparation method of 1-deoxynojirimycin for industrial production Effective date of registration: 20210422 Granted publication date: 20160824 Pledgee: CITIC Bank Changsha branch Pledgor: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. Registration number: Y2021980002898 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20231127 Granted publication date: 20160824 Pledgee: CITIC Bank Changsha branch Pledgor: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc. Registration number: Y2021980002898 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |