CN103960134B - 一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法。本发明采用改良MS基本培养基和温室水培快繁的方法，获得健康和健壮的脱毒种苗，满足蛭石、珍珠岩基质等无土栽培方式的需要，从而进行健康和高效的甘薯原种生产。本发明不仅保持了组培苗原有的无病毒、无菌和无虫的特点，而且创新了传统的育苗技术，大大加快了脱毒种苗的生长速度，缩短了繁殖周期，生产成本大幅降低。水培苗生产操作程序简单，根据生产需要可于4-6月大规模生产水培壮苗，由此解决了传统育苗难以达到低成本、快速、规模化生产脱毒种苗的难题。
Description
技术领域
本发明涉及一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法。
背景技术
甘薯是无性繁殖作物，主要通过茎蔓、薯块和秧苗进行繁殖，在栽培过程中易受病毒侵染。因此利用茎尖分生组织培养脱毒甘薯种苗是目前国际上防治甘薯病毒病、提高甘薯产量和品质唯一有效的方法。脱毒甘薯原原种具有品种纯度高、无病毒，储运性能好、增产效果明显等优点，且薯块大小均匀，表面光洁，商品性能好，市场售价高，经济效益可观。甘薯原原种的生产已成为甘薯种薯快繁的主要措施，通过水培方式对脱毒苗的剪尖扦插，加快脱毒甘薯繁殖速度，提高繁殖系数，提高生产效率，缩短生产周期，降低生产成本，具有重要经济效益，同时水培生产既可减少外界不良条件的影响，又可人为控制植株生长，便于集中管理和研究利用。
目前关于甘薯脱毒试管苗快繁与壮苗技术的主要状况为：将试管苗在温室炼苗5-7d，然后按株距6cm，行距6cm栽植于蛭石与珍珠岩基质中，温度控制在26±2℃左右，保持基质湿润，湿度在80-85％，待苗长到15-20cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗。
此技术是在温室的基质上进行快繁和壮苗。但基质成本高，重复使用很难消毒彻底，感染病虫害的可能性很大。基质栽植密度为400株/平方米，以苗还苗周期为15-20天，繁殖系数较低，生产周期较长。所以基质栽培不能很好的进行快繁和壮苗。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种甘薯试管苗通过水培方式低成本快繁和壮苗的方法，使甘薯脱毒苗经过一段时间的水培后，再进行无土栽培，提高甘薯脱毒苗成活率，能够大大加快脱毒种苗的生长速度，缩短繁殖周期，生产成本大幅降低。同时水培生产可减少外界不良条件的影响，又可人为控制植株生长，便于集中管理和研究利用。由此解决了传统育苗难以达到低成本、快速、规模化生产脱毒种苗的难题。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：将选取的薯块在温室育苗,选取茎顶端长芽段,用自来水冲洗，经消毒处理；b.茎尖分生组织培养：在工作台上剥离茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中培养，茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶MS培养基上继续培养，当幼苗长出时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将无毒苗切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，经腋芽萌发，长成苗；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，先对整个温室进行熏蒸，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，炼苗；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温室中，出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温室中水培苗，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；l.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养，水培苗剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：脱毒苗移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗，经70％酒精浸泡，再用0.1％升汞溶液消毒，5％次氯酸钠溶液消毒处理,无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,才能确认为无毒苗,病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法,先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相,将长势弱,叶片黄化、黄脉和花叶等症状明显的带毒苗淘汰去除,再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上,15d后观察结果,如有明脉、褪绿斑、花叶等症状,即为带毒苗,淘汰去除,一般需要重复嫁接2次,未显症状者,可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30d后长成5-7片叶的成苗，不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；l.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,才能确认为无毒苗,病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法,先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相,将长势弱,叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除,再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上,15天后观察结果,如有明脉、褪绿斑、花叶症状,即为带毒苗,淘汰去除,一般需要重复嫁接2次,未显症状者,可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度833-1111株/平方米，株距3-4cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：甘薯试管苗选为商薯19或徐薯22。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：在步骤b中所述的将剥离的茎尖接种到MS加激素的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LIAA+0.5mg/L GA3的培养基。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：在步骤e中对整个温室熏蒸消毒，产品选用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，每个点用10片A片，加入50ml B剂，示温室大小设点，660平方米的温室可以设15-20个点进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养盘消毒。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于所述的步骤g中的诱导根原始体形成的营养液是：将浓度为95mg/L的KN03，82.5mg/L的NH4N03，18.5mg/L的MgS04·7H20，8.5mg/L的KH2P04，22mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，混合制成营养液用于诱导根原始体的形成；所述的步骤h中的生根营养液是：将浓度为475mg/L的KN03，412.5mg/L的NH4N03，92.5mg/L的MgS04·7H20，42.5mg/L的KH2P04，110mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，6.69mg/L MnS04·4H20，0.249mg/L KI，0.008mg/L CoC12·6H20，2.58mg/L ZnS04·7H20，0.008mg/LCuS04·5H20，1.86mg/L H3B04，0.075mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生根；所述的步骤i中的继代增殖生长营养液是：将浓度为855mg/L的KN03，742.5mg/L的NH4N03，166.5mg/L的MgS04·7H20，76.5mg/L的KH2P04，198mg/L的CaCl2·2H20，22.38mg/L Na2EDTA，16.68mg/L FeS04·7H20，11.25mg/L MnS04·4H20，0.415mg/L KI，0.013mg/L CoC12·6H20，4.3mg/LZnS04·7H20，0.013mg/L CuS04·5H20，3.1mg/L H3B04，0.125mg/LNa2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生长。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于所述的步骤g中的诱导根原始体形成的营养液中可加入0.1mg/LNAA和0.15mg/LIBA混合溶液。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：步骤g中的水培盘可用长1.3m，宽1.0m，高0.05m的塑料盘作为栽培盘，每盘放30-35L营养液，并有定植植株间距为3-4cm，行距为3cm的泡沫塑料板漂浮在营养液上；所述的步骤j中扩繁，1m2的培养盘一次生产833-1111株水培苗，13-15天一个周期，4-6月温室生产水培苗，5-7月为移栽期，每培养盘出苗按5次计算，1m2的培养盘可生产水培苗4165-5555株。
本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：步骤j中扩繁，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗，剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。
本发明的有益效果是：本发明提供一种甘薯试管苗通过水培方式低成本快繁和壮苗的方法对甘薯脱毒试管苗进行快繁和壮苗，利用水培方式高效生产脱毒甘薯种苗。包括脱毒试管苗的炼苗，水培苗根原始体的形成，水培苗生根、水培苗生长以及水培苗苗期的管理等几个方面。实施期间，人为控制温室温度、湿度、光照，达到低成本、快速、规模化生产脱毒甘薯种苗及壮苗的目的。本发明采用改良MS基本培养基和温室水培快繁的方法，获得健康和健壮的脱毒种苗，满足蛭石、珍珠岩基质等无土栽培方式的需要，从而进行健康和高效的甘薯原原种生产。本发明不仅保持了组培苗原有的无病毒、无菌和无虫的特点，而且创新了传统的育苗技术，大大加快了脱毒种苗的生长速度，缩短了繁殖周期，生产成本大幅降低。水培苗生产操作程序简单，解决了传统育苗难以达到低成本、快速、规模化生产脱毒种苗的难题。水培苗生长健壮，移栽至基质等其他无土栽培成活率高。本发明水培条件容易满足和控制，根据甘薯的习性和特征，可以人为的控制水培时间，满足任何时候无土栽培所需要的健壮种苗，从而可以有效的把握好季节，提高甘薯原原种生产的效率，有利于甘薯新品种及脱毒种薯的快速推广，尽早发挥新品种和脱毒种薯的增产效应。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步说明。
实施例1：本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,才能确认为无毒苗,病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法,先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相,将长势弱,叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除,再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上,15天后观察结果,如有明脉、褪绿斑、花叶症状,即为带毒苗,淘汰去除,一般需要重复嫁接2次,未显症状者,可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度833-1111株/平方米，株距3-4cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
实施例2：本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,才能确认为无毒苗,病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法,先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相,将长势弱,叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除,再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上,15天后观察结果,如有明脉、褪绿斑、花叶症状,即为带毒苗,淘汰去除,一般需要重复嫁接2次,未显症状者,可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度833株/平方米，株距3cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。甘薯试管苗选为商薯19。在步骤b中所述的将剥离的茎尖接种到MS加激素的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L GA3的培养基。在步骤e中对整个温室熏蒸消毒，产品选用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，每个点用10片A片，加入50ml B剂，示温室大小设点，660平方米的温室可以设15-20个点进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养盘消毒。步骤g中的诱导根原始体形成的营养液是：将浓度为95mg/L的KN03，82.5mg/L的NH4N03，18.5mg/L的MgS04·7H20，8.5mg/L的KH2P04，22mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/LFeS04·7H20，混合制成营养液用于诱导根原始体的形成；所述的步骤h中的生根营养液是：将浓度为475mg/L的KN03，412.5mg/L的NH4N03，92.5mg/L的MgS04·7H20，42.5mg/L的KH2P04，110mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/LNa2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，6.69mg/L MnS04·4H20，0.249mg/L KI，0.008mg/L CoC12·6H20，2.58mg/L ZnS04·7H20，0.008mg/L CuS04·5H20，1.86mg/L H3B04，0.075mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生根；所述的步骤i中的继代增殖生长营养液是：将浓度为855mg/L的KN03，742.5mg/L的NH4N03，166.5mg/L的MgS04·7H20，76.5mg/L的KH2P04，198mg/L的CaCl2·2H20，22.38mg/L Na2EDTA，16.68mg/L FeS04·7H20，11.25mg/LMnS04·4H20，0.415mg/L KI，0.013mg/L CoC12·6H20，4.3mg/L ZnS04·7H20，0.013mg/L CuS04·5H20，3.1mg/L H3B04，0.125mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生长。步骤g中的水培盘可用长1.3m，宽1.0m，高0.05m的塑料盘作为栽培盘，每盘放30-35L营养液，并有定植植株间距为3-4cm，行距为3cm的泡沫塑料板漂浮在营养液上；所述的步骤j中扩繁，1m2的培养盘一次生产833株水培苗，13-15天一个周期，4-6月温室生产水培苗，5-7月为移栽期，每培养盘出苗按5次计算，1m2的培养盘可生产水培苗4165株。步骤j中扩繁，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗，剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。
实施例3：本发明一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,才能确认为无毒苗,病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法,先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相,将长势弱,叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除,再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上,15天后观察结果,如有明脉、褪绿斑、花叶症状,即为带毒苗,淘汰去除,一般需要重复嫁接2次,未显症状者,可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度1111株/平方米，株距3-4cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。甘薯试管苗选为徐薯22。在步骤b中所述的将剥离的茎尖接种到MS加激素的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L GA3的培养基。在步骤e中对整个温室熏蒸消毒，产品选用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，每个点用10片A片，加入50ml B剂，示温室大小设点，660平方米的温室可以设15-20个点进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养盘消毒。步骤g中的诱导根原始体形成的营养液是：将浓度为95mg/L的KN03，82.5mg/L的NH4N03，18.5mg/L的MgS04·7H20，8.5mg/L的KH2P04，22mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/LNa2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，混合制成营养液用于诱导根原始体的形成；所述的步骤h中的生根营养液是：将浓度为475mg/L的KN03，412.5mg/L的NH4N03，92.5mg/L的MgS04·7H20，42.5mg/L的KH2P04，110mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，6.69mg/L MnS04·4H20，0.249mg/LKI，0.008mg/L CoC12·6H20，2.58mg/L ZnS04·7H20，0.008mg/L CuS04·5H20，1.86mg/L H3B04，0.075mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生根；所述的步骤i中的继代增殖生长营养液是：将浓度为855mg/L的KN03，742.5mg/L的NH4N03，166.5mg/L的MgS04·7H20，76.5mg/L的KH2P04，198mg/L的CaCl2·2H20，22.38mg/L Na2EDTA，16.68mg/L FeS04·7H20，11.25mg/LMnS04·4H20，0.415mg/L KI，0.013mg/L CoC12·6H20，4.3mg/L ZnS04·7H20，0.013mg/L CuS04·5H20，3.1mg/L H3B04，0.125mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生长。步骤g中的水培盘可用长1.3m，宽1.0m，高0.05m的塑料盘作为栽培盘，每盘放30-35L营养液，并有定植植株间距为3-4cm，行距为3cm的泡沫塑料板漂浮在营养液上；所述的步骤j中扩繁，1m2的培养盘一次生产1111株水培苗，13-15天一个周期，4-6月温室生产水培苗，5-7月为移栽期，每培养盘出苗按5次计算，1m2的培养盘可生产水培苗5555株。步骤j中扩繁，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗，剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。在步骤g中的诱导根原始体形成的营养液中可加入0.1mg/LNAA和0.15mg/LIBA混合溶液。
实施例4：本发明选择适宜恩施州大面积推广的高产淀粉优良品种商薯19品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm左右,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍。在超净工作台上体视显微镜下剥离约0.2～0.4mm的茎尖,接种到MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LIAA+0.5mg/L GA3培养基试管中。拨取茎尖100个，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养。25d后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养50-60d，当幼苗长出5-7片叶时，进行继代，每个茎尖材料转三瓶，形成多个株系，建立株系档案，经过用症状学诊断法和指示植物检测法检测的株系未显症状者，可确认为无毒苗。经检测，商薯19有5个株系为无毒苗，其他带有病毒的株系全部不要。在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，生产脱毒组培苗。在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养。经3-5d腋芽萌发，30d后左右长成5-7片叶的成苗。可以不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍。
实施例5：本发明选择适宜恩施州大面积推广的高产淀粉优良品种徐薯22两个品种，将选取的薯块在温室育苗,当苗高20cm左右,选取茎顶端2cm长芽段,剪去肉眼可见叶片,用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min,无菌水冲洗3遍。在超净工作台上体视显微镜下剥离约0.2～0.4mm的茎尖,接种到MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LIAA+0.5mg/L GA3培养基试管中。拨取茎尖100个，在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养。25d后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS无激素培养基上继续培养50-60d，当幼苗长出5-7片叶时，进行继代，每个茎尖材料转三瓶，形成多个株系，建立株系档案，经过用症状学诊断法和指示植物检测法检测的株系未显症状者，可确认为无毒苗。经检测，徐薯22有3个株系为无毒苗，其他带有病毒的株系全部不要。在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，生产脱毒组培苗。在温度28℃,每日光照16h,光照强度1600Lx条件下培养。经3-5d腋芽萌发，30d后左右长成5-7片叶的成苗。可以不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍。
实施例6：本发明选择一间15平方米的温室培养室进行甘薯水培苗生产。先用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂10片A片，加入50ml B剂对整个温室熏蒸消毒。熏蒸一个星期后，再对培养架和培养盘进行消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养架、培养盘消毒。由于是小温室培养室，所以培养盘也是用长33cm，宽25cm，深3.5cm的小培养盘。小温室培养室环境控制在温度28℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间16h/d，筛选生根好、生长健壮的徐薯22脱毒组培苗，揭开瓶盖，炼苗2-3天；将炼苗后的脱毒脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度833株/平方米，株距4cm，行距3cm，每盘栽60株，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液，共扦插10盘；5天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；又过4天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；水培苗在小温室培养13天后，水培苗长到15-18cm时，剪2叶节扦插，以苗繁苗。剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。新扦插的茎段又加入诱导根原始体形成的营养液，继续生产。4-6月共扦插5次，共生产水培苗3000株。
实施例7：本发明选择一间15平方米的温室培养室进行甘薯水培苗生产。先用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂10片A片，加入50ml B剂对整个温室熏蒸消毒。熏蒸一个星期后，再对培养架和培养盘进行消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养架、培养盘消毒。由于是小温室培养室，所以培养盘也是用长33cm，宽25cm，深3.5cm的小培养盘。小温室培养室环境控制在温度28℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间16h/d，筛选生根好、生长健壮的商薯19脱毒组培苗，揭开瓶盖，炼苗2-3天；将炼苗后的脱毒脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度1111株/平方米，株距3cm，行距3cm，每盘栽70株，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液，共扦插24盘；5天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；又过3天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；水培苗在小温室培养12天后，水培苗长到15-18cm时，剪2叶节扦插，以苗繁苗。剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。新扦插的茎段又加入诱导根原始体形成的营养液，继续生产。4-6月共扦插6次，共生产水培苗10080株。
实施例8：本发明选择660平方米的温室培养室进行甘薯水培苗生产。首先对温室进行消毒，产品选用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂。先对整个温室进行熏蒸，每个点用10片A片，加入50ml B剂，设18个点进行熏蒸。熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养盘消毒。用量示使用情况而定，现配现用。水培盘用长1.3m，宽1.0m，高0.05m的塑料盘作为栽培盘，筛选生根好、生长健壮的商薯19和徐薯22脱毒组培苗，揭开瓶盖，放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度972株/平方米，株距3-4cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液，共扦插5盘；温室温度控制在26±2℃左右，自然光散射。将栽好的水培苗置于温室中，6天左右出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；又过3-4天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到16cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗。剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后可以再次剪苗扩繁。新扦插的茎段又加入诱导根原始体形成的营养液，继续生产。4-6月共扦插5次，共生产水培苗48600多株。
实施例9：本发明将水培苗在40目以上防虫网棚内栽植，蛭石或珍珠岩基质经过高温消毒，当脱毒苗长到12-15cm时，按株距5cm，行距5cm移栽到蛭石或珍珠岩基质中，温度控制在26±2℃左右，超过30℃，掀开塑料薄膜降温，保持基质湿润，湿度在80-85％，生产脱毒原原种。
Claims (8)
1.一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：将选取的薯块在温室育苗，选取茎顶端长芽段，用自来水冲洗，经消毒处理；b.茎尖分生组织培养：在工作台上剥离茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中培养，茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养，当幼苗长出时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测，确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将无毒苗切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，经腋芽萌发，长成苗；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，先对整个温室进行熏蒸，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，炼苗；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温室中，出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温室中水培，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养，水培苗剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：脱毒苗移栽到蛭石或珍珠岩基质中；在步骤b中将剥离的茎尖接种到MS加激素的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L GA3的培养基；所述的步骤g中的诱导根原始体形成的营养液是：将浓度为95mg/L的KN03，82.5mg/L的NH4N03，18.5mg/L的MgS04·7H20，8.5mg/L的KH2P04，22mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，混合制成营养液用于诱导根原始体的形成；所述的步骤h中的生根营养液是：将浓度为475mg/L的KN03，412.5mg/L的NH4N03，92.5mg/L的MgS04·7H20，42.5mg/L的KH2P04，110mg/L的CaCl2·2H20，7.46mg/L Na2EDTA，5.56mg/L FeS04·7H20，6.69mg/L MnS04·4H20，0.249mg/L KI，0.008mg/L CoC12·6H20，2.58mg/L ZnS04·7H20，0.008mg/L CuS04·5H20，1.86mg/L H3B04，0.075mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生根；所述的步骤i中的继代增殖生长营养液是：将浓度为855mg/L的KN03，742.5mg/L的NH4N03，166.5mg/L的MgS04·7H20，76.5mg/L的KH2P04，198mg/L的CaCl2·2H20，22.38mg/L Na2EDTA，16.68mg/L FeS04·7H20，11.25mg/L MnS04·4H20，0.415mg/L KI，0.013mg/L CoC12·6H20，4.3mg/L ZnS04·7H20，0.013mg/L CuS04·5H20，3.1mg/L H3B04，0.125mg/L Na2Mo04·2H20，混合制成营养液用于水培苗生长。
2.按照权利要求1所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗，经70％酒精浸泡，再用0.1％升汞溶液消毒，5％次氯酸钠溶液消毒处理，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15d后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30d后长成5-7片叶的成苗，不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
3.按照权利要求1所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗30min，经70％酒精浸泡25s，再用0.1％升汞溶液消毒30s，5％次氯酸钠溶液消毒处理10min，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养：在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28℃，每日光照16h，光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15天后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗1叶1节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28℃，每日光照16h，光照强度1600Lx条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，栽培密度833-1111株/平方米，株距3-4cm，行距3cm，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温度26±2℃温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。
4.根据权利要求1中所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：甘薯试管苗选为商薯19或徐薯22。
5.根据权利要求3中所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：在步骤e中对整个温室熏蒸消毒，产品选用北京产必洁仕牌二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，每个点用10片A片，加入50ml B剂，视温室大小设点，660平方米的温室设15-20个点进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒，方法是10片A剂加入500ml纯净水，待溶解后，再加入B剂50ml，等20min后，再加入4500ml纯净水混匀后开始擦培养盘消毒。
6.根据权利要求5中所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于所述的步骤g中的诱导根原始体形成的营养液中加入0.1mg/L NAA和0.15mg/L IBA混合溶液。
7.根据权利要求3中所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：步骤g中的水培盘用长1.3m，宽1.0m，高0.05m的塑料盘作为栽培盘，每盘放30-35L营养液，并有定植植株间距为3-4cm，行距为3cm的泡沫塑料板漂浮在营养液上；所述的步骤j中扩繁，1m2的培养盘一次生产833-1111株水培苗，13-15天一个周期，4-6月温室生产水培苗，5-7月为移栽期，每培养盘出苗按5次计算，1m2的培养盘生产水培苗4165-5555株。
8.根据权利要求3中所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于：步骤j中扩繁，水培苗长到15-18cm时，剪成2叶节扦插，以苗繁苗，剩余茎段继续培养于生长营养液中，15天以后再次剪苗扩繁。
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