CN103936877A - 一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，本发明属于保健品技术领域。其特征在于包括以下步骤：1）原料处理；2）将乌贼墨囊球磨破壁粉酶解；3）将分离出的酶解液醇沉，得乌贼墨囊粗多糖；4）将乌贼墨囊粗多糖提纯；5）纯化。上述一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，乌贼墨囊采用超微破壁将其制成细粉，降低了加工过程对产品中所含营养物质及功效成分的破坏，极大地保留了原有的生物活性成分及功效成分，其粒度小、均匀度好和溶出率高；采用该提取方法，显著提高了粘多糖得率，制得的产品具有抑癌和增强免疫力的功效。
Description
技术领域
本发明属于保健品技术领域，具体为一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法。
背景技术
乌贼亦称墨乌贼鱼、墨斗鱼，乌贼目海产头足类软体动物，与章鱼和枪乌贼近缘。乌贼分布于世界各大洋，主要生活在热带和温带沿岸浅水中，冬季常迁至较深海域。乌贼可以说全身是宝，不但味感鲜脆爽口，具有较高的营养价值，而且富有药用价值。乌贼每百克肉含蛋白质13克，脂肪仅0.7克，还含有碳水化合物和维生素A、B族维生素及钙、磷、铁等人体所必需的物质，是一种高蛋白低脂肪滋补食品。值得一提，它是女性塑造体型和保养肌肤之理想的保健食品。乌贼壳含碳酸钙、壳角质、粘液质、及少量氯化钠、磷酸钙、镁盐等。墨囊含有一种粘多糖，对治疗溃疡病有一定的作用，对小鼠有一定的抑癌作用。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法的技术方案，乌贼墨囊采用超微破壁将其制成细粉，降低了加工过程对产品中所含营养物质及功效成分的破坏，极大地保留了原有的生物活性成分及功效成分，其粒度小、均匀度好和溶出率高；采用该提取方法，显著提高了粘多糖得率，制得的产品具有抑癌和增强免疫力的功效。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）原料处理：将乌贼墨囊干物用粉碎机粉碎，过30-50目筛，然后经超微粉碎机粉碎至80-100μm，得到破壁细粉；将破壁细粉加入球磨机湿法球磨粉碎，细粉原料与水的重量比为1：3-4，球磨机转速为300-400 rpm，经过1-2小时球磨破壁，得到球磨破壁粉；将球磨破壁细粉在80℃-90℃的高温下短时间灭菌，备用；
2）将乌贼墨囊球磨破壁粉加入重量2-3倍的50-60℃温水，用盐酸调pH至6-6.5，按每克乌贼墨囊球磨破壁粉加入220酶活力单位的中性蛋白酶，充分混匀，保温40-50℃酶解1-2小时，用低速滚筒离心机离心分离，得到酶解液和残渣，残渣直接作为高蛋白饲料；
3）将分离出的酶解液搅拌下加入质量百分数为70-85%的95%乙醇，在室温下自然醇沉6-10小时，上清液进行乙醇回收利用，沉淀物即为乌贼墨囊粗多糖；
4）将乌贼墨囊粗多糖溶解在2-3mol/L的醋酸钾溶液搅匀，将溶液温度冷却至-2℃，静置沉降8-10小时，固液分离，得到上清液和沉淀物；
5）收集沉淀物，用水将其溶解，沉淀物: 水的体积比为1-2:1，加入0.4mol／LKOH将pH至10-11，保持50-55℃滴加H202脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却离心，将上清液冷却至2℃以下，用盐酸调pH至1-2，离心，向上清液中加入固体乙酸钾，使其在溶液中浓度达2-3mol／L，5℃以下冷藏过夜，8℃以下收集沉淀，之后乙醇洗涤，丙酮脱水，低温真空干燥即得乌贼墨囊粘多糖纯品。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：破壁粉碎至85-90μm。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：细粉原料与水的重量比为1：3.5，球磨机转速为350 rpm，球磨破壁时间为1.5小时，高温灭菌温度为85℃。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤2）中：温水温度为55℃，保温温度为45℃，酶解时间为1.5小时。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤3）中：酶解液加乙醇后在室温下自然醇沉8-9小时。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤4）中：静置沉降时间为9小时。
所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤5）中：脱色温度为52-53℃。
上述一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，乌贼墨囊采用超微破壁将其制成细粉，降低了加工过程对产品中所含营养物质及功效成分的破坏，极大地保留了原有的生物活性成分及功效成分，其粒度小、均匀度好和溶出率高；采用该提取方法，显著提高了粘多糖得率，制得的产品具有抑癌和增强免疫力的功效。
本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，均为重量百分含量。
具体实施方式
现结合本发明的实施例和相关试验，对本发明作进一步说明。
实施例1
1）原料处理：将乌贼墨囊干物用粉碎机粉碎，过30-50目筛，然后经超微粉碎机粉碎至90μm，得到破壁细粉；将破壁细粉加入球磨机湿法球磨粉碎，细粉原料与水的重量比为1：3.5，球磨机转速为350 rpm，经过1.5小时球磨破壁，得到球磨破壁粉；将球磨破壁细粉在85℃的高温下短时间灭菌，备用；
2）将乌贼墨囊球磨破壁粉加入重量2倍的55℃温水，用盐酸调pH至6.3，按每克乌贼墨囊球磨破壁粉加入220酶活力单位的中性蛋白酶，充分混匀，保温45℃酶解1.5小时，用低速滚筒离心机离心分离，得到酶解液和残渣，残渣直接作为高蛋白饲料；
3）将分离出的酶解液搅拌下加入质量百分数为80%的95%乙醇，在室温下自然醇沉8小时，上清液进行乙醇回收利用，沉淀物即为乌贼墨囊粗多糖；
4）将乌贼墨囊粗多糖溶解在2mol/L的醋酸钾溶液搅匀，将溶液温度冷却至-2℃，静置沉降9小时，固液分离，得到上清液和沉淀物；
5）收集沉淀物，用水将其溶解，沉淀物: 水的体积比为1.5:1，加入0.4mol／LKOH将pH至10，保持52℃滴加H202脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却离心，将上清液冷却至2℃以下，用盐酸调pH至1，离心，向上清液中加入固体乙酸钾，使其在溶液中浓度达2mol／L，5℃以下冷藏过夜，8℃以下收集沉淀，之后乙醇洗涤，丙酮脱水，低温真空干燥即得乌贼墨囊粘多糖纯品。
上述步骤1）中破壁粉碎至80或100μm，细粉原料与水的重量比为1：3或1：4，球磨机转速为300或400 rpm，经过1或2小时球磨破壁，得到球磨破壁粉；将球磨破壁细粉在80℃或90℃的高温下短时间灭菌；步骤2）中乌贼墨囊球磨破壁粉加入重量2或3倍的50或60℃温水，用盐酸调pH至6或6.5，保温40或50℃酶解1或2小时；步骤3）中在室温下自然醇沉6、7、9或10小时；步骤4）中静置沉降8或10小时；步骤5）中沉淀物: 水的体积比为1或2:1，加入KOH将pH至10或11，保持50或55℃滴加H202脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却离心，将上清液冷却至2℃以下，用盐酸调pH至1或2，离心，其它同实施例1，能取得本发明所述的有益效果。
Claims (7)
1. 一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）原料处理：将乌贼墨囊干物用粉碎机粉碎，过30-50目筛，然后经超微粉碎机粉碎至80-100μm，得到破壁细粉；将破壁细粉加入球磨机湿法球磨粉碎，细粉原料与水的重量比为1：3-4，球磨机转速为300-400 rpm，经过1-2小时球磨破壁，得到球磨破壁粉；将球磨破壁细粉在80℃-90℃的高温下短时间灭菌，备用；
2）将乌贼墨囊球磨破壁粉加入重量2-3倍的50-60℃温水，用盐酸调pH至6-6.5，按每克乌贼墨囊球磨破壁粉加入220酶活力单位的中性蛋白酶，充分混匀，保温40-50℃酶解1-2小时，用低速滚筒离心机离心分离，得到酶解液和残渣，残渣直接作为高蛋白饲料；
3）将分离出的酶解液搅拌下加入质量百分数为70-85%的95%乙醇，在室温下自然醇沉6-10小时，上清液进行乙醇回收利用，沉淀物即为乌贼墨囊粗多糖；
4）将乌贼墨囊粗多糖溶解在2-3mol/L的醋酸钾溶液搅匀，将溶液温度冷却至-2℃，静置沉降8-10小时，固液分离，得到上清液和沉淀物；
5）收集沉淀物，用水将其溶解，沉淀物: 水的体积比为1-2:1，加入0.4mol／LKOH将pH至10-11，保持50-55℃滴加H202脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却离心，将上清液冷却至2℃以下，用盐酸调pH至1-2，离心，向上清液中加入固体乙酸钾，使其在溶液中浓度达2-3mol／L，5℃以下冷藏过夜，8℃以下收集沉淀，之后乙醇洗涤，丙酮脱水，低温真空干燥即得乌贼墨囊粘多糖纯品。
2. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：破壁粉碎至85-90μm。
3. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：细粉原料与水的重量比为1：3.5，球磨机转速为350 rpm，球磨破壁时间为1.5小时，高温灭菌温度为85℃。
4. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤2）中：温水温度为55℃，保温温度为45℃，酶解时间为1.5小时。
5. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤3）中：酶解液加乙醇后在室温下自然醇沉8-9小时。
6. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤4）中：静置沉降时间为9小时。
7. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤5）中：脱色温度为52-53℃。
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