CN103922905A - 一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，属于生物医药技术领域，包括以下步骤：1)取啤酒花渣，用丙酮提取，过滤后花渣用丙酮再洗涤一次，合并两次得到滤液；2)将滤液浓缩，加入二氯甲烷，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中，过滤得到黄棕色粉末，即为黄腐酚粗品；4)将粗品用重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚。本发明工艺精简，成本低廉，提取制备过程环境友好。该方法使用啤酒花提取alpha酸后的废料为原料，制备高纯度的黄腐酚。

Description

一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法。

背景技术

啤酒花(Humulus lupulus L)又名忽布(英语俗名hop)、蛇麻花、酒花，属于桑科葎草属多年生草本植物，是酿造啤酒的主要原料之一。它能提供给啤酒独特的香气和苦味以及防腐作用，与麦汁共沸时能促进蛋白质凝固，有利于麦汁的澄清，增强啤酒的非生物稳定性和泡持性等。啤酒花也是一种使用历史悠久的药食同源植物，酒花中含有树脂、酒花油、多酚、黄酮等多种药理成分，具有抗菌，镇静，治疗结核、神经衰弱、麻风等药理功能。

黄腐酚为啤酒花中所特有的,主要的异戊二烯基黄酮类物质,其含量仅占啤酒花干重的0.1％一1％"，其分子式如下：

黄腐酚具有较强的药理活性,能够阻止导致癌细胞生长的酶发挥作用,并且能够帮助人体消除其他致癌物质,尤其在癌症初期,这种物质的抗癌效果更好。黄腐酚还具有抗氧化作用,植物雌激素作用,同时,还有一定的抗病毒作用,并能有效预防和治疗糖尿病的发生。鉴于黄腐酚的上述众多生理活性作用，开发酒花中黄腐酚在医药、食品、化妆品、保健品等方面的新用途，就应当成为当今对酒花中黄腐酚研究的热点与重点。鉴于黄腐酚在自然界中的稀有性，研究黄腐酚的化学合成与降解、开发含有黄腐酚的植物新资源、研究有效提取黄腐酚的新技术也必将成为对黄腐酚研究的重点。

黄腐酚是于1913年首次在酒花中被发现的，1950年开始对其分子结构进行研究。黄腐酚是一种结构简单的含异戊二烯基的查耳酮。在树脂中至少存在13种相关的查耳酮，其含量比黄腐酚低得多。所有的查耳酮都有一个自由的2′-羟基，可以异构成相应的黄烷酮。在自然界，黄腐酚是酒花(Humulus lupulusL.)中的特有成分，是酒花中主要的含异戊二烯基类黄酮，属于酒花硬树脂的一部分，其含量仅占啤酒花干重的0.1％～1％。且酒花是目前发现的天然含异戊二烯基类黄酮的唯一真正来源。所以在酒花中提取黄腐酚的技术显得尤为重要。例如夏娜等采用的第一种方法是石油醚和乙酸乙酯固定比例(2:1)洗脱2次，第1次洗脱后合并含有黄腐酚的洗脱液，浓缩成浸膏，进行第2次洗脱；方法二是以石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂梯度洗脱2次，第1次梯度洗脱后合并含有黄腐酚的洗脱液，浓缩成浸膏，进行第2次梯度洗脱。结果表明，方法一的分离效率高、速度快，黄腐酚得率较高，但黄腐酚的纯度低；方法二的黄腐酚的纯度较高但得率较低。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，本方法原料来源广泛，成本低廉，操作简便，适合工业化大规模的生产需求。

本发明是通过以下技术方案来实现：

种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取啤酒花渣，用丙酮提取，过滤后花渣用丙酮再洗涤一次，合并两次得到滤液；

2)将滤液浓缩，加入二氯甲烷，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中，过滤得到黄棕色粉末，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚。

步骤1)所述的用丙酮提取时，温度为50—60度。

步骤1)所述的提取时间为2小时。

步骤2)所述的需将滤液浓缩至黄绿色粘稠液体。

步骤3)所述的洗脱液为三氯甲烷。

步骤3)所述的需将浓缩液置于冰箱中10小时。

步骤4)所述的重结晶时用到的试剂为甲醇。

本发明啤酒花中分离黄腐酚，以丙酮作为提取液反复洗涤，滤液浓缩后将其完全溶于二氯甲烷，然后进行硅胶柱层析，用三氯甲烷进行洗脱，浓缩后置于冰箱中，而后过滤，得到黄棕色粉末，再用甲醇重结晶即得到橙色结晶粉末黄腐酚。

本发明工艺精简，成本低廉，提取制备过程环境友好。通常啤酒花颗粒经过超临界萃取提取alpha酸后，废渣中的黄腐酚不能被有效提取，就按照废料处理了，该方法使用啤酒花提取alpha酸后的废料为原料，制备高纯度的黄腐酚。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取50Kg的啤酒花渣，用40L丙酮提取，温度为50—60℃，时间为2小时，过滤后花渣用30L丙酮再洗涤一次，合并两次得到的滤液；

2)将滤液浓缩黄绿色粘稠液体567g，加入5L二氯甲烷，均匀搅拌，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中10小时，过滤得到黄棕色粉末16g，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用甲醇重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚9.3g。

实施例2

从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取25Kg的啤酒花渣，用20L丙酮提取，温度为50—60℃，时间为2小时，过滤后花渣用10L丙酮再洗涤一次，合并两次得到的滤液；

2)将滤液浓缩黄绿色粘稠液体250g，加入3L二氯甲烷，均匀搅拌，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中10小时，过滤得到黄棕色粉末8g，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用甲醇重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚5g。

实施例3

从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取10Kg的啤酒花渣，用8L丙酮提取，温度为50—60℃，时间为2小时，过滤后花渣用6L丙酮再洗涤一次，合并两次得到的滤液；

2)将滤液浓缩黄绿色粘稠液体100g，加入1L二氯甲烷，均匀搅拌，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中10小时，过滤得到黄棕色粉末5g，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用甲醇重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚2g。

实施例4

从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取50Kg的啤酒花渣，用40L丙酮提取，温度为30—40℃，时间为2小时，过滤后花渣用30L丙酮再洗涤一次，合并两次得到的滤液；

2)将滤液浓缩黄绿色粘稠液体400g，加入5L二氯甲烷，均匀搅拌，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中10小时，过滤得到黄棕色粉末10g，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用甲醇重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚5g。

实施例5

从啤酒花中分离黄腐酚的方法，包括以下步骤：

1)取50Kg的啤酒花渣，用50L丙酮提取，温度为30—40℃，时间为4小时，过滤后花渣用40L丙酮再洗涤一次，合并两次得到的滤液；

2)将滤液浓缩黄绿色粘稠液体600g，加入5L二氯甲烷，均匀搅拌，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中10小时，过滤得到黄棕色粉末20g，即为黄腐酚粗品；4)将粗品用甲醇重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚11g。

Claims (7)

1.一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取啤酒花渣，用丙酮提取，过滤后花渣用丙酮再洗涤一次，合并两次得到滤液；

2)将滤液浓缩，加入二氯甲烷，过滤，除去不溶于二氯甲烷的杂质，浓缩，得到浓缩液；

3)将浓缩液上硅胶柱层析，洗脱，收集含有黄腐酚的部分，浓缩后置于冰箱中，过滤得到黄棕色粉末，即为黄腐酚粗品；

4)将粗品用重结晶得橙色结晶粉末黄腐酚。

2.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤1)所述的用丙酮提取时，温度为50—60度。

3.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤1)所述的提取时间为2小时。

4.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤2)所述的需将滤液浓缩至黄绿色粘稠液体。

5.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤3)所述的洗脱液为三氯甲烷。

6.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤3)所述的需将浓缩液置于冰箱中10小时。

7.根据权利要求1所述的一种从啤酒花中分离黄腐酚的方法，其特征在于：步骤4)所述的重结晶时用到的试剂为甲醇。