CN101933967B

CN101933967B - 一种金银花提取物的制备方法

Info

Publication number: CN101933967B
Application number: CN 201010274232
Authority: CN
Inventors: 陈文明; 汪洪湖
Original assignee: Anhui BBCA Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Anhui BBCA Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-08-31
Filing date: 2010-08-31
Publication date: 2012-06-13
Anticipated expiration: 2030-08-31
Also published as: CN101933967A

Abstract

本发明提供一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：1)超高压提取：在金银花中加入烷醇类溶剂，加压到100～400MPa，保持15～30min后泄压，过滤；将滤液浓缩后冷藏，然后离心分离；2)纯化：将离心后得到的上清液回收溶剂至流浸膏状；然后加水溶解，上大孔吸附树脂柱，先用5～10倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用6～10倍树脂柱体积的20～30％烷醇类溶剂洗脱，将醇洗脱液回收溶剂至无醇味，冷冻干燥，得到金银花提取物。本发明方法运用超高压提取和大孔吸附树脂分离技术提取纯化金银花的活性成分，操作简便、溶剂用量少、提取时间短、成本低；且提取的活性成分得率高，重复性和稳定性好；能够充分利用原料资源，非常适合工业化生产。

Description

一种金银花提取物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药活性成分的提取纯化方法，具体地说，涉及一种金银花提取物的制备方法。属中药制备技术领域。

背景技术

金银花首载于梁·陶弘景《名医别录》，名忍冬。《中国药典》(1963版)将忍冬作为金银花的唯一来源，1977年后各版《中国药典》综合考虑根据临床疗效、地区习惯用等因素，选定忍冬科的植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山银花Lonicera confusa DC.、或毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd.的干花蕾或带初开的花为金银花，其中正品为忍冬的干燥花蕾，我国大部分地区均产，以山东产量最大，河南产的质量较佳。金银花为常用中药，性寒，味甘，具有显著清热解毒、抗菌消炎和抗病毒作用，用于痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、湿病发热。

金银花所含的有机酸类成分是其主要活性成分，目前从金银花中提取有机酸类成分的方法通常采用湿浸法、水煮法、稀醇提取和酸醇提取等。但是上述这些传统方法，其溶剂的加入量至少是金银花的10倍量以上，且至少需要提取2～5小时，消耗的溶剂多且提取时间长；并且由于金银花药材的成分复杂，含有很多有机酸以外的成分，所以传统方法得到的提取物，其活性成分(如有机酸类成分)纯度较低。例如，中国专利公开号CN101269107公开了一种金银花叶药用提取物的提取方法，该方法取金银花叶切段或粉碎，按质量份加蒸馏水煮提，过滤合并滤液，滤液浓缩，用盐酸调pH，离心，上清液上大孔吸附树脂柱吸附，乙醇洗脱，回收乙醇，干燥，得金银花叶药用提取物，该方法制得的提取物中总有机酸含量仅为50％～60％。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金银花提取物的制备方法，该方法溶剂的用量少、提取时间短，并且能够提高活性成分(主要为有机酸)的含量。

为了实现上述目的，本发明的金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：

1)超高压提取：在金银花中加入5～8倍金银花重量的60～90％(体积)烷醇类溶剂，加压到100～400MPa，保持该压力15～30min后泄压，过滤；将滤液浓缩后冷藏；然后离心分离，收集上清液；

2)纯化：将步骤1)得到的上清液回收溶剂至流浸膏状；然后加水溶解，上大孔吸附树脂柱，用5～10倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用6～10倍树脂柱体积的20～30％(体积)烷醇类溶剂洗脱，将醇洗脱液回收溶剂至无醇味，冷冻干燥，得到金银花提取物。

其中，所述烷醇类溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇中的一种或几种，优选的是甲醇或乙醇，更优选的是乙醇。

步骤1)中所述浓缩是将滤液浓缩至原体积的20～30％；所述冷藏的时间为12～20h，冷藏温度为0～5℃。所述离心分离的转速为5000r/min，时间为15～20min，通过离心分离能够彻底去除蛋白质、多糖和其他杂质。

步骤2)中所述大孔吸附树脂的型号为HP-20、D-101、D-201、D-301、SP-70、SP-700、SP-825或AB-8。

具体地说，本发明的制备方法包括如下步骤：

1)超高压提取：取一定量的金银花，破碎成长约3～10mm的小段，放入超高压提取罐，加入5～8倍金银花重量的60～90％(体积)烷醇类溶剂；加压到100～400MPa，保持该压力15～30min后，立即泄压；过滤，将滤液浓缩至原体积的20～30％后，冷藏过夜；然后将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离15～20min；

2)纯化：将离心后的上清液减压回收烷醇类溶剂至流浸膏状，然后加水溶解，上大孔吸附树脂柱，依次用5～10倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用6～10倍树脂柱体积的20～30％(体积)烷醇类溶剂洗脱，减压回收醇洗脱液的溶剂至无醇味，冷冻干燥，得到金银花提取物。

本发明方法得到的金银花提取物，可以与药学上可接受的载体一起制成各种药物制剂。所述药物制剂可以是药学领域常用的剂型，例如注射剂或口服制剂等，所述的口服制剂是指片剂、胶囊、口服液或滴丸等。利用本发明的金银花提取物制备所需各种剂型时，可以按照药学领域的常规生产方法制备。

本发明的金银花提取物的制备方法，将中药现代化技术中的超高压提取技术和大孔吸附树脂技术相结合，从而提取并纯化金银花中的活性成分，制备得到以有机酸为主要活性成分的金银花提取物。本发明方法不但提高了提取物中的活性成分的含量，而且去除了大量杂质，从而解决了中成药常有的吸潮性大的问题，且减少了杂质带来的副作用，提高了疗效。

本发明的金银花提取物的制备方法，其是针对现有的水提法、醇提法、水提醇沉等方法的不足，在现有技术的基础上加以改进，将超高压提取和大孔吸附树脂分离技术相结合，用来提取并纯化金银花中的活性成分，取得了良好的效果。本发明方法不但操作简便、溶剂用量少、提取时间短、成本低；而且提取的活性成分得率高，总有机酸含量在70％左右，重复性和稳定性好；能够充分利用原料资源，非常适合工业化生产。

具体实施方式

以下通过具体实施例来进一步说明本发明，但不用来限制本发明的范围。(注：以下实施例中烷醇类溶剂的浓度均为体积分数。)

实施例1

1、超高压提取：取金银花药材500g，破碎成长约3mm的小段，放入超高压提取罐，加入3.5L 75％乙醇；加压到200MPa，保压15min后，立即泄压，过滤，将滤液浓缩至原体积的30％后，冷藏过夜；将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离20min；

2、纯化：将离心后得到的上清液减压回收乙醇至流浸膏状，然后加入500mL水溶解，上大孔吸附树脂柱(型号：D-101)，依次用5倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用8倍树脂柱体积的20％乙醇洗脱，减压回收乙醇洗脱液至无醇味，冷冻干燥，得金银花提取物11.41g，其中活性成分总有机酸的含量为70.3％。

实施例2

1、取金银花药材500g，破碎成长约5mm的小段，放入超高压提取罐，加入4.5L 80％甲醇。加压到100Mpa，保压30min后，立即泄压，过滤，将滤液浓缩至原体积的20％后，冷藏过夜；然后将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离15min。

2、将离心后得到的上清液减压回收甲醇至流浸膏状，然后加入500mL水溶解，上大孔吸附树脂柱(型号：HP-20)，依次用8倍量树脂柱体积的水洗脱，然后再用10倍量树脂柱体积的25％乙醇洗脱，减压回收乙醇洗脱液至无醇味，冷冻干燥，得金银花提取物11.33g，其中活性成分总有机酸的含量为72.1％。

实施例3

1、超高压提取：取金银花药材500g，破碎成长约10mm的小段，放入超高压提取罐，加入4.0L 90％异丙醇；加压到400MPa，保压25min后，立即泄压，过滤，将滤液浓缩至原体积的30％后，冷藏过夜；将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离15min；

2、纯化：将离心后得到的上清液减压回收乙醇至流浸膏状，然后加入500mL水溶解，上大孔吸附树脂柱(型号：SP-70)，依次用8倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用8倍树脂柱体积的30％正丁醇洗脱，减压回收乙醇洗脱液至无醇味，冷冻干燥，得金银花提取物11.51g，其中活性成分总有机酸的含量为69.8％。

实施例4

1、超高压提取：取金银花药材500g，破碎成长约8mm的小段，放入超高压提取罐，加入4.0L 90％正丁醇；加压到300MPa，保压20min后，立即泄压，过滤，将滤液浓缩至原体积的25％后，冷藏过夜；将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离15min；

2、纯化：将离心后得到的上清液减压回收乙醇至流浸膏状，然后加入500mL水溶解，上大孔吸附树脂柱(型号：D-201)，依次用6倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用6倍树脂柱体积的30％甲醇洗脱，减压回收乙醇洗脱液至无醇味，冷冻干燥，得金银花提取物11.18g，其中活性成分总有机酸的含量为73.6％。

实施例5

1、超高压提取：取金银花药材500g，破碎成长约8mm的小段，放入超高压提取罐，加入2.0L 60％乙醇和2.0L 60％甲醇加压到300MPa，保压30min后，立即泄压，过滤，将滤液浓缩至原体积的30％后，冷藏过夜；将冷藏液用离心机以转速5000r/min离心分离15min；

2、纯化：将离心后得到的上清液减压回收乙醇至流浸膏状，然后加入500mL水溶解，上大孔吸附树脂柱(型号：D-201)，依次用10倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用10倍树脂柱体积的30％乙醇洗脱，减压回收乙醇洗脱液至无醇味，冷冻干燥，得金银花提取物11.20g，其中活性成分总有机酸的含量为70.9％。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)超高压提取：在金银花中加入5～8倍金银花重量的体积分数60～90％烷醇类溶剂，加压到100～400MPa，保持该压力15～30min后泄压，过滤；将滤液浓缩后冷藏；然后离心分离，收集上清液；

2)纯化：将步骤1)得到的上清液回收溶剂至流浸膏状；然后加水溶解，上大孔吸附树脂柱，用5～10倍树脂柱体积的水洗脱，然后再用6～10倍树脂柱体积的体积分数20～30％烷醇类溶剂洗脱，将醇洗脱液回收溶剂至无醇味，冷冻干燥，得到金银花提取物；

所述烷醇类溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇中的一种或几种；

所述大孔吸附树脂的型号为HP-20、D-101、D-201或SP-70。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述烷醇类溶剂为甲醇或乙醇。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述烷醇类溶剂为乙醇。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述浓缩是将滤液浓缩至原体积的20～30％。

5.根据权利要求1-3任意一项所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述冷藏的时间为12～20h，冷藏温度为0～5℃。

6.根据权利要求1-3任意一项所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述离心分离的转速为5000r/min，时间为15～20min。