CN103845449A - 含花楸提取物并含有硒和/或锌添加的免疫刺激组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种组合物，其含有至少约10μg/mg花楸提取物以及约0.0001μg/mg至约2.0μg/mg硒。该组合物可以进一步含有作为额外微量营养素的锌。该组合物可以被配制成药物组合物或者营养组合物。

Description

含花楸提取物并含有硒和/或锌添加的免疫刺激组合物

本申请是申请号为201080020195.6、申请日为2010年5月6日、发明名称为“含花楸提取物并含有硒和/或锌添加的免疫刺激组合物”的中国发明专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/EP2010/056190的国家阶段申请，该国际申请要求申请日为2009年5月12日、申请号为09006414.8的欧洲申请的优先权。

本发明涉及免疫刺激试剂，尤其涉及用于刺激免疫系统的含有硒和花楸提取物的组合物，以及含有这些成分的药物组合物和营养组合物。

发明背景

花楸（Aronia）属于蔷薇科落叶灌木。花楸属中的多种花楸品种及杂交种已经为人们所知，例如黑果腺肋花楸（Aronia melanocarpa），红果腺肋花楸（Aronia arbutifolia）以及紫果腺肋花楸（Aronia x prunifolia）。花楸果实为小梨果类型，其果汁具有涩味并富含维生素C以及其他抗氧化剂。

由于它们的果实具有明亮的色彩，所以花楸被用作饮料以及其他食品的着色剂，例如US-P-6703056，WO2005058052和WO2006138419这些专利和专利申请中公开的实例。除此之外，花楸果的抗氧化性也引发了人们的兴趣。例如，黑果腺肋花楸富含酚类化合物，特别是花青素，这些花青素主要位于花楸果表皮，它们使果浆和种子免受UV辐射。这些花青素使黑果腺肋花楸具有卓越的抗氧化能力。氧自由基吸收能力（ORAC）是反映一种化合物或提取物对抗氧化压力的指标。花楸具有很高的ORAC值，因此其也被当作功能性食品或营养品，或作为它们的添加剂使用。例如专利申请US20070020358公开了一种运动型饮料浓缩物，其含有用作营养成分的花楸。专利申请WO2007061900公开了一种功能性甜味剂组合物，其含有花楸提取物作为抗氧化剂，专利申请WO2007076857公开了一种含有花楸成分的咀嚼口香糖，其中花楸被用作抗氧化剂。

进一步来说，此前的研究还发现花楸或其所含化合物可用于制备药物组合物或营养组合物以及食品添加剂。例如，专利申请DE102004029887A1公开了一种以花楸果渣中所含的花楸果皮提取物为原料的膳食补充剂，这样的膳食补充剂被认为具有丰富的抗自由基保护因子。专利申请DE102004052882A1公开了一种以特定选用的果实和豆类浓缩物为原料的膳食补充剂，其除了其它成分外还含有花楸果汁浓缩物。所述膳食补充剂被认为能够增强免疫系统，其中阐明了这些成分的相互组合可以协同影响这些成分的效果。

专利申请WO200101553公开了含花楸果实提取物的食品添加剂可用于抑制环氧合酶介导的炎症反应，也就是说公开了由于花楸提取物能够在COX-2活性和COK-1活性之间优先抑制COX-2的活性，从而具有抗炎症反应的活性。

专利申请DE102005046474A1公开了使用花楸果皮提取物用于预防和治疗细菌、真菌和/或炎症疾病/症状。这种作用归结于该提取物具有抗菌和抗真菌活性。该提取物对于免疫系统的直接作用并未被阐明。

此外，专利申请WO2002005827公开了使用花楸提取物来制备治疗脑癌的药物，并进一步公开了用于治疗癌症的营养组合物，其含有一种或者多种来自花楸的黄酮类化合物以及微量营养素硒和锌。

微量营养素为多种代谢过程所必需，例如可作为酶的辅基参与代谢，因此它们是食品中重要的成分。因此，如此前的研究表明，可以将微量营养素添加到不同种类的食品中例如添加到功能性食品中以取得或者改进特定的生理功能。

对于免疫系统来说，研究表明微量营养素硒和锌除影响其他生理功能外，还影响免疫状态。其中硒是嗜中性粒细胞、巨噬细胞、NK细胞、T淋巴细胞以及一些其他免疫机制维持适当活性所必需的成分，如果人体对其摄入量不足会导致免疫系统能力减弱。而锌元素对于酶、蛋白质以及转录因子来说是一种重要的离子，因此参与了机体多种功能也包括免疫反应。

如上所述，现有技术已提到了花楸抽提物与至少一种微量营养素特别是与硒和/或锌的组合。但是，这通常是“偶然为之”。例如，专利申请WO2005058052和WO2006138419中公开了使用花楸作为着色剂，这些参考文献教导了锌和硒包含在稳定混合物用作食品。在其他一些实例中，现有技术教导的花楸提取物与硒和/或锌元素的组合可以看做仅是产品的必然成分。例如，专利申请US20070020358公开了一种运动型饮料，其使用了花楸因为其具有高的ORAC值，并添加了硒和锌作为微量营养素。因此，现有技术并未教导将这些成分组合在一起以获得特定的效果，这些效果的取得是因为这些成分之间的相互作用而引起。特别地，现有技术并未说明，通过选择性地组合花楸提取物与硒和/或锌可以获得具有更好免疫刺激效果的组合物。

虽然目前已发现了多种不同类型的免疫刺激剂，但是仍然需要一种具有更好效果的免疫刺激剂，特别是在当下，现代生活所带来的环境压力在持续增加，人类的免疫系统持续的暴露于各种各样的压力之下。天然试剂或者生物制剂相比于合成药品通常更具优势，因为它们一方面更容易为病人或者消费者所接受，而另一方面其生产成本也更为低廉和经济有效，特别是在使用植物提取物本身的时候，这种情况下甚至不需要进行任何化学合成和/或对有效化合物进行纯化。

因此，综上可知，具有更好免疫刺激效果的物质或者组合物仍然具有相当的需求。

发明概述

在为本发明所进行的广泛研究中，发明人发现特定的微量营养素，即单独的硒或者其与锌的组合可以提高花楸提取物的效果。意外的发现，与仅含有天然花楸提取物的组合物相比，当向花楸提取物中加入特定含量的硒或者硒和锌组合时可以提高巨噬细胞的活性。因为可以提高巨噬细胞的活性所以本发明的组合物特别适用于治疗具有炎症反应的疾病或症状，细菌感染，真菌感染，病毒感染，寄生虫感染。

因此上述的问题可通过使用含有至少约10μg/mg花楸提取物以及大约0.0001μg/mg至大约2.0μg/mg硒的组合物来得以解决。应当知道这种情况下问题的解决是因为根据本发明向花楸提取物中添加了硒。换句话说，硒的含量或者硒和锌组合的含量高于它们在花楸提取物中的天然含量范围。

本发明的一个实施方式中，该组合物进一步含有额外的锌，其优选的浓度范围是约0.0001mg/mg至约0.5mg/mg。

本发明另一实施方式中，该组合物进一步含有至少一种药学上可接受的或者营养学上可接受的赋形剂或者赋形剂的组合。

本发明另一实施方式中，该组合物被配制成药物组合物，优选被配制成口服剂型例如适于经口、口腔含化、舌下、粘膜或者局部给药的剂型。

本发明另一实施方式中，该组合物被配制成营养组合物或者补充的营养组合物，优选被配制成含有溶解或者悬浮形式的活性成分的溶液或者悬浮液，或者被配制成固体给药形式例如片剂、胶囊、糖丸或者作为食品添加剂添加到日常食品中。

本发明的另一实施方式中，本发明的组合物用于制备药物，优选用于治疗炎症疾病或症状，细菌感染，真菌感染，病毒感染，寄生虫感染以及这些疾病和症状的组合。炎症疾病或症状优选为与以下疾病相关的疾病或症状：自身免疫疾病，炎症性肠病，多发性硬化，硬皮病，以及移植物抗宿主病相关的炎症疾病或症状。

附图说明

图1和2显示，评估花楸提取物对于小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系RAW264.7中巨噬细胞活性的最佳浓度。可以观察到当浓度高于约40μg/ml的时候会降低巨噬细胞的活性。

图3显示，硒对于RAW264.7细胞系中巨噬细胞的免疫刺激活性。可以观察到当浓度高于大约8μg/ml的时候将会降低巨噬细胞的活性。

图4显示，本发明组合物的免疫刺激作用与所添加的硒浓度的关系，该免疫刺激作用通过检测RAW264.7细胞系中巨噬细胞的活性来确定。该组合物所含的花楸提取物的浓度为4.875μg/ml。

发明详述

本发明公开了一种含有花楸提取物与微量营养素硒的组合物。该组合物还可以进一步含有微量营养素锌，该组合物可用于刺激免疫系统。

根据本发明，花楸提取物可以是来自一种药学上和营养学上可接受的花楸种，或者是药学上/营养学上可接受的不同花楸种的混合。可使用的花楸种包括但不限于，黑果腺肋花楸，红果腺肋花楸以及紫果腺肋花楸。本发明的一个优选实施方式中，使用的是黑果腺肋花楸。

花楸提取物可取自整个果实或者果实的某些部分。例如，可以用果渣作为原料来制备。花楸提取物的制备可以使用本领域技术人员所公知的任何适宜方法来进行。该提取物可以通过鲜果、干果或者果汁来制备。如有需要，可以对提取物中的一种或者多种特定活性化合物进行选择性的富集。花楸提取物的制备方法属于本领域技术人员的常规技术。制备花楸提取物的适宜方法可参照例如专利DE102004029887和DE102005046474所公开的内容。但是应当知道的是，理论上每种植物提取物的制备方法都可以根据常规知识进行适当的变化以获取本发明的花楸提取物。分离植物原料的常规提取方法可以参见例如专利FR2892933以及Ljubuncic P.等人的文献(J.Ethnopharmacol.,Oct3,101(1-3)(2005),153-61)中所公开的内容。

花楸提取物可以使用整个果实作为起始原料来制备。果实用温度在30至50℃之间的水进行冲洗，优选40℃，然后使用例如菊粉酶优选果糖酶进行酶解处理，以获得部分裂解的或完全裂解的细胞。适用的酶以及适宜的反应条件为本领域技术人员所公知。挤压获得残留物然后使用亚硫酸钾水溶液（浓度约10-30w/v）在室温条件下（约21-24℃）提取1-3小时。所得的提取物使用果胶降解酶例如果胶酶pectinex或pectinol进行处理，反应的pH值约为3-4，优选pH值为3，处理时间为0.5至2小时。之后通过真空蒸馏处理提取物，蒸馏温度为大约40-58℃，优选为45-50℃，最终得到的花楸提取物中水分残留量为大约30-40w/w。

可选地，花楸提取物也可以通过乙醇萃取的方法来制备或者以干提取物进行制备。

本发明组合物中花楸提取物的浓度范围为至少约10μg/mg至约990μg/mg，优选约20μg/mg至约950μg/mg。更优选约40μg/mg至约900μg/mg。更优选的浓度范围为约50μg/mg至约800μg/mg。进一步优选的浓度范围为约60μg/mg至约800μg/mg。最优选的花楸提取物的浓度范围是约80μg/mg至约800μg/mg。

在一个优选的实施方式中，本发明的液体组合物所含的花楸提取物的浓度范围为约10μg/mg至约200μg/mg，更优选的浓度范围为约60μg/mg至约150μg/mg，最优选的为约80μg/mg。

在另一个优选的实施方式，本发明的固体或者干燥组合物所含的花楸提取物的浓度范围为约100μg/mg至约990μg/mg，更优选为约300μg/mg至约800μg/mg，进一步优选为约400μg/mg至约700μg/mg，最优选为约600μg/mg。

这里所给出的浓度值是指花楸提取物在本发明组合物中的最终浓度，也就是给予病人或者患者的浓度。

本发明组合物中还含有微量营养素硒。本发明的一个实施方式中，该组合物含有花楸提取物和微量营养素硒和锌的组合。含有微量元素在此是指，除花楸提取物中已经存在的微量营养素外，额外添加的所述微量营养素。花楸提取物尤其是来自黑果腺肋花楸的提取物，天然地含有4mg/kg锌元素和大约20μg/kg硒元素。应当知道的是，这些天然含量的数值可以随着所用的果实以及生长条件而变化。

经认证实验室进行的分析表明，这样的花楸提取物中这两种金属元素的含量如下（精确度±20%）：

表1.

微量营养素硒或者硒和锌组合的添加方式可以包括但不限于，例如，以无机盐形式比如氯化物硫酸盐等，以有机盐以及其他生物可利用的形式比如氨基酸螯合物，或者以这些形式的组合。术语“硒”和“锌”在本申请中包括任意相应的含有硒和锌的化合物，包括盐、复合物或者所述微量营养素的其他形式，也包括单体硒或者锌。可使用的硒或锌的形式为本领域技术人员所公知。在给出所述微量营养素的浓度或浓度范围的时候，给出的值表示相应的硒或硒离子的浓度，以及锌或锌离子的浓度。

本发明中所使用硒的形式的非限定性实例包括硒代甲硫氨酸，元素硒，各种硒盐，如氯化硒，以及硒酵母，或者这些形式的混合。本发明的一个优选的实施方式中，硒以硒酵母或亚硒酸钠/硒酸钠的形式提供。

本发明所使用的锌的形式的非限定性实例包括，乙酸锌，抗坏血酸锌，氯化锌，柠檬酸锌，葡萄糖酸锌，乳酸锌，硫酸锌，氨基酸螯合锌，或者这些形式的混合。本发明的一个优选实施方式中，锌以氯化锌的形式提供。

本发明的组合物可以是液体形式或干燥/固体形式，例如，冻干品形式。本发明的一个优选实施方式中，该组合物以无菌形式提供。

在为本发明所进行的广泛研究中，令人意外地发现当组合物含有花楸提取物和额外添加的硒或额外添加的硒和锌时，相比于本发明组合物中的任一单个化合物，其具有更好的免疫刺激效果。不希望受任何理论所限制，这样的结果表明本发明组合物之所以能产生更好的免疫刺激效果是因为花楸提取物所含有的化合物的复杂混合物与额外添加的硒之间发生了协同效应。而当向含有花楸提取物和硒的组合物中进一步添加锌时，其可以实现进一步的协同效应。

特别地，本发明的组合物表现出能够提高巨噬细胞活性的能力。巨噬细胞属于天然免疫系统，其作用是破坏病毒感染的细胞、寄生虫以及肿瘤细胞。巨噬细胞吞噬并消化入侵的微生物，原虫，碎片，外来体以及损伤的、死亡的和衰老的细胞。

相应地，本发明的组合物可用于刺激免疫系统。特别是本发明的组合物可用于制备药物，这些药物可以用来治疗由免疫系统活性下降所引起的各种疾病和症状，或那些可以通过刺激免疫系统来预防和治疗的各种疾病和症状。特别是用来治疗或预防由巨噬细胞活性下降所引起的疾病或症状，或那些可通过增强巨噬细胞活性来预防和治疗的疾病和症状。

治疗在本发明中是指预防性疗法或者治疗性疗法，其中治疗性疗法可以是减轻症状的疗法或者根治性疗法。

因为本发明的组合物具有免疫刺激活性的特点，所以它还可用于制备辅助治疗的药物，用于在疾病治疗过程中通过刺激免疫系统来提高疗效。此外，本发明的组合物还可以用于制备膳食补充剂来支持健康的免疫系统。

本发明的一个实施方式中，该组合物被用于治疗炎症疾病或症状，细菌感染，真菌感染，病毒感染，寄生虫感染以及这些疾病或症状的组合。

特别地，该组合物可用于减轻或改善任何的紊乱或疾病，其包括但不限于，感染性休克，血流动力型休克，脓毒病综合征，缺血再灌注损伤，炎症性肠病，移植物抗宿主病，疟疾，分支杆菌感染，脑膜炎，银屑病，充血性心力衰竭，纤维化疾病，恶病质，移植物排斥，癌症如皮肤T细胞淋巴瘤，血管发生相关疾病，自身免疫疾病，炎症性皮肤病，眼部炎症性疾病，炎症性肠病如克罗恩病和结肠炎，骨关节炎和类风湿关节炎，强直性脊柱炎，银屑病关节炎，成人斯蒂尔病，葡萄膜炎，韦格纳肉芽肿，白塞病，干燥综合征，结节病，结膜炎，多发性肌炎，皮肌炎，多发性硬化，坐骨神经痛，复杂性局部疼痛综合征，放射性损伤，高氧肺损伤，牙周病，艾滋病，非胰岛素依赖性糖尿病，系统性红斑狼疮，青光眼，特发性肺纤维化，支气管发育不全，视网膜疾病，硬皮病，骨质疏松，缺血性肾病，心肌梗死，脑卒中，脑缺血，肾炎，肝炎，肾小球肾炎，隐源性致纤维性肺泡炎，银屑病，移植排斥反应，异位性皮炎，血管炎，过敏性疾病，季节性变应性鼻炎，可逆性气道阻塞，成人呼吸窘迫综合征，哮喘，慢性阻塞性肺病（COPD）和/或支气管炎。此外，还能够促进伤口愈合。

细菌或微生物感染的实例包括任意被革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌感染的疾病。可使用本发明的组合物治疗或防治的微生物感染的病理症状包括但不限于以下症状：例如慢性上呼吸道疾病，伤口感染，骨髓炎，内膜炎，皮肤多微生物感染，支气管气喘，慢性鼻窦炎，囊肿性纤维化或寻常痤疮。

真菌感染的实例包括例如芽生菌病，球孢子菌病，隐球菌病，组织胞浆菌病，孢子丝菌病，着色芽生菌病，洛博芽生菌病，皮肤癣菌病，皮肤霉菌病，甲真菌病，毛结节病，足分支菌病，镰刀菌病，花斑癣，须癣，头癣，体癣，股癣，黄癣，黑癣，足癬，暗色丝孢霉病，鼻抱子虫病，曲霉病，真菌性角膜病，念珠菌病。

可治疗的病毒感染疾病中感染病毒包括但不限于，慢病毒如I型和II型人免疫缺陷型病毒（HIV），嗜人T淋巴细胞病毒I型和II型（HTLV-I和HTLV-II），SIV，EIAV（马传染性贫血症病毒），BIV，FIV，CAEV，VMV，以及MMLV（莫洛尼鼠白血病病毒）。这样的病毒感染还可以是由以下病毒所引起的感染：甲肝病毒，乙肝病毒，丙肝病毒，丁肝病毒，戊肝病毒，庚肝病毒，人泡沫病毒，或者人疱疹病毒（例如I型单纯疱疹病毒，II型单纯疱疹病毒，III型单纯疱疹病毒（也称为带状疱疹病毒），IV型单纯疱疹病毒（也称为艾伯斯坦-巴尔病毒或EBV），V型单纯疱疹病毒，VII型单纯疱疹病毒。这样的病毒感染还可以是由以下病毒所引起的感染：流感病毒（A，B，或C型），人副流感病毒，呼吸道合胞病毒，天花病毒，猴痘病毒，痘苗病毒，人乳头瘤病毒，II型人双埃可病毒，腮腺炎病毒，麻疹病毒，风疹病毒，塞姆利基森林病毒，西尼罗河病毒，科罗拉多蜱媒热病毒，口蹄疫病毒，埃博拉病毒，马尔堡病毒，多瘤病毒，TT病毒，拉沙病毒，淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒，水泡性口膜炎病毒，轮状病毒，水痘病毒，细小病毒，巨细胞病毒，脑炎病毒，腺病毒，埃可病毒，鼻病毒，丝状病毒，寇沙基病毒（如SARS相关的冠状病毒），登革病毒，黄热病毒，汉坦病毒，区域性出血热病毒，软疣病毒，脊髓灰质炎病毒，狂犬病病毒等病毒。

寄生虫感染的疾病包括但不限于疟疾。导致寄生虫感染的生物体包括如寄生原虫，蠕虫，以及皮外寄生虫。

根据本发明，硒作为微量营养素添加到含花楸提取物的组合物中。硒可以以前面所述的一种或者多种适宜的形式添加。

在为本发明所进行的广泛研究中，意外地发现向花楸提取物中添加硒所带来的有益效果即免疫刺激效果依赖于所添加的硒的浓度。

根据本发明，向组合物中添加硒后硒的终浓度范围是约0.0001μg/mg至约2.0μg/mg。优选地，向组合物中添加的硒浓度范围是约0.0005μg/mg至约0.1μg/mg。更优选的范围是约0.001μg/mg至约0.5μg/mg。更优选的浓度范围是约0.001μg/mg至约0.25μg/mg。更优选的浓度范围是约0.001μg/mg至约0.2μg/mg。最优选的浓度范围是约0.0012μg/mg至约0.1μg/mg。

本发明的一个优选的实施方式中，根据本发明的流体组合物中所含硒的浓度范围是约0.0001μg/mg至约0.01μg/mg，更优选的浓度范围是约0.0005μg/mg至约0.005μg/mg，最优选的浓度范围是约0.0008μg/mg至约0.003μg/mg，最优选的浓度是约0.0012μg/mg。

本发明的另一优选的实施方式中，根据本发明的固体或干燥组合物中所含硒的浓度范围为约0.001μg/mg至约0.5μg/mg，更优选的范围是约0.005μg/mg至约0.001μg/mg，进一步优选的浓度范围是0.003μg/mg至大约0.02μg/mg，并且最优选的浓度大约是0.01μg/mg。

这里所给出的浓度值是指所添加的硒在本发明组合物中的最终浓度，也就是给予病人或者患者添加的硒的浓度。

本发明组合物中所添加的硒的终浓度还可以根据日常的硒需求量来确定。相应地，还有很多因素都应考虑在内，例如预期的给药方式，每个患者每天所使用的组合物剂量。这些考虑因素为本领域的技术人员所公知。

本发明的一个优选实施方式中，可以向本发明的含有花楸提取物和硒的组合物中添加锌以配制成本发明的组合物，锌可以以上面所提到的一种或者多种适宜的形式添加。

向本发明组合物中添加锌后锌的终浓度范围是约0.0001mg/mg至约0.5mg/mg。优选地，向组合物中添加的锌的浓度范围是约0.0005mg/mg至约0.1mg/mg。更优选的范围是约0.001mg/mg至约0.08mg/mg。更优选的浓度范围是约0.0015mg/mg至约0.006mg/mg。更优选的浓度范围是约0.002mg/mg至约0.04mg/mg。

这里所给出的值是指所添加的锌在本发明组合物中的最终浓度，也就是给予病人或者患者所添加的锌的浓度。

向本发明的组合物中添加锌的终浓度还可以根据日常的锌需求量的来确定。相应地，很多因素都应考虑在内，例如给药方式，每个患者每天所使用的组合物剂量。这些考虑因素都为本领域技术人员所公知。

对于添加到本发明的组合物中的硒和锌的浓度来说，每种微量营养素的浓度可参照上述的浓度或浓度范围来添加。

本发明的组合物可以单独给药，例如以液体或者固体形式，或者可以配制成药物组合物或者营养组合物来使用。

所述的药物组合物或者营养组合物包含作为活性成分的本发明组合物以及至少一种药学上/营养学上可接受的赋形剂或者这些药学上/营养学上可接受的赋形剂的混合物。适用的赋形剂包括但不限于，稀释剂，载体，崩解剂，粘合剂，助流剂，润滑剂，包衣材料等等或它们的混合物，这些赋形剂为制备最终的剂型所必需。根据本发明得到的药物组合物和营养组合物可以通过本领域技术人员已知的方式混合活性成分以及一种或多种适用的赋形剂来制备，还可以进一步可选的混合其它活性化合物。优选地，这些药物组合物和营养组合物在无菌条件下制备。

根据本发明得到的药物组合物和营养组合物可以含有约1%至约99%质量百分数的所述药学上可接受的赋形剂，优选的范围为约10%至约95%质量百分数，最优选的为约20%至约75%质量百分数。

所述一种或多种适用的赋形剂的选用方法以及相应的使用量都为本领域技术人员所公知。可以根据给药途径来选择相应的赋形剂。

本发明的药物组合物和营养组合物可以使用各种方法来进行配制，从而可以用来给予人和/或动物。本发明的药物组合物和营养组合物可以配制成液体形式，也就是例如溶剂形式、分散剂形式、乳剂形式和凝胶形式，或者配制成固体形式。本发明的药物组合物和营养组合物可以被配制成即时释放和/或持续释放的形式。相应地，本发明组合物的贮库形式也在本发明的保护范围之内。

本发明的一个优选实施方式中，该组合物被配制成药物组合物。所述药物组合物含有治疗有效量的本发明组合物，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。治疗有效量的本发明组合物是指，当给予需要这种治疗的病人或患者这种组合物后能够产生免疫刺激效果的剂量。特别地，所述有效量能够提高巨噬细胞的活性。

作为本发明药物组合物的一个示例性而非限定性的实例，该药物组合物可以配制成口服给药剂型，例如，经口给药，口腔含化给药，舌下给药，粘膜给药，或者局部给药。

在本发明药物组合物的一个优选实施方式中，所述药物组合物被配制成口服给药剂型。这样的药物组合物可以被配制成含有溶解形式或者悬浮形式的活性成分的可消化的溶液或者悬浮液，或者被配制成固体给药剂型，例如片剂，胶囊，糖丸，粉末，颗粒。

在本发明药物组合物的另一个优选实施方式中，所述药物组合物被配制成局部给药剂型。局部给药剂型的非限定性实例例如为软膏，乳膏，洗液，溶液以及酏剂。

此外，因为本发明组合物的作用方式是通过刺激个体自身免疫系统的方式来发挥作用，所以所述组合物还可以用于制备刺激免疫系统的营养组合物，特别是提高巨噬细胞活性的营养组合物。因此，在本发明的另一优选实施方式中，该组合物按照营养组合物来配制。

营养组合物在此是指作为食品或者食品添加剂的组合物，通过使用该组合物能够改善饮食从而使生活质量以及健康受益，并能够通过刺激个体自身免疫系统来预防疾病和感染。

本发明的药物组合物/营养组合物含有有效量的本发明组合物以及一种或多种药学上/营养学上可接受的赋形剂。有效量的本发明组合物是指，当给予需要该组合物的患者后能够产生免疫刺激效果的剂量。

作为一个示例性的而非限定性的实例，本发明的营养组合物可以配制成用于口服，例如经口、口腔含化、舌下或粘膜使用的形式。

在本发明营养组合物的一个优选实施方式中，所述营养组合物被配制成口服使用。这样的营养组合物可以被配制成含有溶解形式或悬浮形式的活性成分的可消化的溶剂或悬浮剂形式，或者配制成固体服用形式，例如片剂，胶囊，糖丸。

本发明的营养组合物可以配制成食品添加剂的形式添加到日常食品中。例如，该营养组合物可添加到饮料、谷物等食品中。

应当知道的是，服用的剂量需要考虑到治疗对象的年龄、体重以及其他个人情况。

本发明将要描述的特定实施例仅用于说明之目的，而不对本发明的保护范围构成任何限制。本领域技术人员在不背离本发明所附权利要求所主张的范围内，可以对此进行各种修饰和变化。

实施例

制备花楸提取物

花楸提取物使用新鲜冻存的花楸果（植物品种：黑果腺肋花楸）进行制备。水相压制的果汁被进一步浓缩直到果实与压制的果汁浓缩液（天然的）比率达到8-10：1。

评估花楸提取物和含有微量营养素的花楸提取物对巨噬细胞活性的影响

细胞：细胞系（RAW264.7，鼠巨噬细胞）购于美国典型培养物保藏中心，并按其推荐条件进行培养。

化学发光分析：将Lucigenine（Sigma Chemicals Co.）溶解在Hank平衡盐溶液（HBSS；Gibco Co.）中，使其浓度达到2x10-3M。该储存液在使用前用HBSS进一步稀释。1ml细胞（5x10⁶cells/ml）分别与0.1ml花楸提取物和含有亚硒酸钠的花楸提取物进行温育（图中记录了每种成分以及组合的动力学曲线）。所有这些成分都在培养箱中（37℃，5%CO₂）培养30分钟，然后在1200U/min条件下离心收集，并重悬于最小必须的培养基中（MEM，GibcoCo.）。

反应混合物含有浓度为5x10⁶/ml的PMNL（多形核白细胞）单核细胞/巨噬细胞悬浮液（0.25mL），50μl酵母聚糖以及0.45ml含有2x10^-6M lucigenine的培养介质。该反应混合物先置于37℃下，然后再根据供应商的说明书（User's Manual1995）使用生化发光检测仪（Luminoskan1255，Labsystems）测量化学发光强度。

Claims (12)

1.一种组合物，其含有至少约10μg/mg花楸提取物以及约0.0001μg/mg至约2.0μg/mg硒。

2.根据权利要求1的组合物，其进一步含有额外的锌。

3.根据权利要求2的组合物，其所含锌的浓度为约0.0001mg/mg至约0.5mg/mg。

4.根据前述任一项权利要求的组合物，其中该组合物进一步含有至少一种药学上或者营养学上可接受的赋形剂或者它们的混合物。

5.根据权利要求4的组合物，其中该组合物被配制成药物组合物。

6.根据权利要求5的组合物，其被配制成用于经口/口服、口腔含服、舌下、粘膜或局部给药的剂型。

7.根据权利要求4的组合物，其中该组合物被配制成营养组合物或者补充的营养组合物。

8.根据权利要求7的组合物，其被配制成含有溶解形式或悬浮形式的活性成分的可消化的溶液或者悬浮液，或者被配制成固体给药形式，例如片剂、胶囊、糖丸或者作为食品添加剂添加到日常食品中。

9.根据权利要求1-5中任一项的组合物用于制备药品。

10.根据权利要求9中任一项的组合物，其用于治疗炎症疾病或症状，细菌感染，真菌感染，病毒感染，寄生虫感染以及它们的组合。

11.根据权利要求10的组合物，其中所述炎症疾病或症状与以下疾病有关：自身免疫疾病，炎症性肠病，眼部炎症性疾病，多发性硬化，硬皮病，移植物抗宿主病。

12.根据权利要求11的组合物，其中所述炎症疾病选自以下组成的组：克罗恩病，结肠炎，骨关节炎和类风湿关节炎，僵直性脊柱炎，银屑病关节炎，成人斯蒂尔病，葡萄膜炎，韦格纳肉芽肿，白塞病，干燥综合征，结节病以及结膜炎。

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