CN103789414A - 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒 - Google Patents

17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN103789414A
CN103789414A CN201410003989.1A CN201410003989A CN103789414A CN 103789414 A CN103789414 A CN 103789414A CN 201410003989 A CN201410003989 A CN 201410003989A CN 103789414 A CN103789414 A CN 103789414A
Authority
CN
China
Prior art keywords
locus
composite amplification
group
str
primer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201410003989.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103789414B (zh
Inventor
张威
张琰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DINGSHENG TECHNOLOGY (BEIJING) Co Ltd
Original Assignee
DINGSHENG TECHNOLOGY (BEIJING) Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DINGSHENG TECHNOLOGY (BEIJING) Co Ltd filed Critical DINGSHENG TECHNOLOGY (BEIJING) Co Ltd
Priority to CN201410003989.1A priority Critical patent/CN103789414B/zh
Publication of CN103789414A publication Critical patent/CN103789414A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103789414B publication Critical patent/CN103789414B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明17个X染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒涉及一种同时分析多个X-STR基因座的复合扩增系统，其特征在于：复合扩增17个基因座：Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。本发明还涉及同时分析DNA样品的方法和试剂盒，以及它们的用途。

Description

17个X染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒
技术领域：
本发明涉及生物技术领域。进一步，本发明涉及检测人类基因组中具有多态性的遗传标记基因。本发明特别涉及用聚合酶链式反应在一个扩增体系中同时扩增多个短串联重复基因座。
背景技术：
短串联重复序列(简称STR)也称为微卫星或简单序列重复(SSR)，是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列，核心序列为2-6个碱基重复单位。STR基因座数量大，分部广泛，约占整个基因组的3％(International Human Genome Sequencing Consortium，2001)，而且多态性高，其多态性主要源自核心序列重复次数在个体间的差异，并且这种差异在遗传过程中遵循孟德尔遗传规律。因此，STR扩增检测技术被广泛用于个体识别、亲缘鉴定和群体遗传学研究。
目前STR复合扩增技术为法医个体识别和亲子鉴定的主要技术手段，在世界各地的DNA实验室得到广泛应用(《Forensic DNA Typing》second edition，John Butler)。
人类X染色体是一个中等大小的亚中着丝粒染色体。女性个体含有2条X染色体，男性个体只有一条X染色体。因此X染色体遗传标记在遗传过程中，因性别不同而存在着遗传方式的差异：母亲可将2条X染色体上的等位基因随机地遗传给她的子女，而父亲X染色体上的等位基因则只能遗传给女儿。
1991年Edwards A等首先报道的HumAR基因座是较早应用于法医学中的X染色体STR基因座，为人类X染色体上的短串联重复序列在人类遗传学及法医学应用开辟了一条新路径。到20世纪末只有HumAR、HPRTB、DXS101等少数几个基因座应用于法医学实践。近年来，随着STR检验水平的提高和一些特殊案件的增加，X-STR逐渐受到重视，用于法医学检案的X-STR基因座越来越多。
由于单个X-STR基因座提供的信息有限，难以满足法医学检验的要求，所以多个STR基因座联合使用可显著提高单次检测信息量和个体识别率。目前国内外陆续建立了一些X-STR符合扩增体系，其中较有代表性的是是Qiagen公司Argus X12试剂盒，台湾GenePhile的X-STR试剂盒。除此之外中国司法部上海司法鉴定科学研究所也研发了两款X-STR(X11和X16)试剂盒，但这几款试剂盒由于价格或无法商品化等各种原因在国内销量很小或没有上市(见表1)。
目前司法鉴定中，特别是在亲缘鉴定及同胞鉴定中对X-STR试剂盒的需求很强烈，并且在鉴定中遇到突变的情况需加测STR基因座时，X-STR试剂盒的特殊性能起到很好识别排除作用，给检测鉴定带来事半功倍的效果。因此一个能检测多个基因座、提供更多信息的X-STR试剂盒具有很好的市场前景。
表1：各主流生产商试剂盒的基因座位信息
Figure BSA0000099890750000021
Figure BSA0000099890750000031
注：+表示被包括的基因座，-表示不包括的基因座
发明内容：
本发明是针对上述需求，首先建立了一次检测16个X-STR基因座及Amelogenin基因座的复合扩增体系，这些基因座包含了目前已知X-STR基因座中具有较高个体识别率的大部分基因座位。
所述的基因座为Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。
本发明的扩增体系包含引物混合物、反应缓冲液和热启动Taq DNA聚合酶等。
首先针对上述17个基因座在其重复序列的侧翼分别设计特异性引物。引物设计采用Primer5软件，每条引物退火温度接近或高于60℃。不能产生引物二聚体、其它相互作用或交叉反应，扩增产物长度在90-350bp之间。对每对引物进行扩增测试并优化，直至得到清晰单一扩增条带。引物序列见表2。
表2复合扩增体系各基因座引物序列
Figure BSA0000099890750000041
根据扩增片段长度等将上述基因座分为4组，第一组包含DXS6795、DXS9902、DXS8378、和HPRTB，第二组包含Amelogenin、GATA165B12、DXS7132、DXS7424和DXS6807，第三组包含DXS6803、GATA172D05、DXS6800和DXS10134，第四组包含GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。每组分别由不同荧光素标记，每组之中各基因座扩增产物根据长度差异分开，两个基因座不能有重叠。分别对每组引物进行复合扩增试验。确定该组没有非特异扩增现象，无交叉反应等情况后，调整每对引物的浓度，使组内各个片段峰值均衡性达到40％以上。
将4组引物分别用蓝色、绿色、黄色和红色荧光素标记。每对引物中只标记一条链，标记在引物的5’端。蓝色标记可选择5-FAM(5-羧基荧光素)，6-FAM(6-羧基荧光素)或相近光谱的荧光素分子，绿色标记可选择HEX(六氯-6-甲基荧光素)，JOE(6-羧基-4，5-二氯-2，7-二甲氧基荧光素琥珀酰亚胺酯)或相近光谱的荧光素分子，黄色标记可选择TMR(4-甲基-6-羧基-罗丹明)或相近光谱的荧光素分子，红色标记可选择ROX(羧基-X-罗丹明)或相近光谱的荧光素分子。将4组17个基因座复合扩增，根据产物峰高情况调整各基因座引物浓度，使各基因座峰值整体均衡性达到30％以上。得到的引物混合物可以用于上述17个基因座复合扩增。
本发明的PCR扩增反应可在一定的缓冲体系中进行。缓冲体系中包括：50mM KCl，10mM Tris-HCl(pH8.3，25℃)，2.0mM MgCl2，0.1mg／mlBSA(牛血清白蛋白)和各0.2mM的dNTP。dNTP是四种脱氧核糖核苷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)等摩尔混合物。
反应所需的Taq DNA聚合酶为热启动DNA聚合酶，抗体封闭修饰或化学修饰的都可以。本发明的每个扩增体系(25μl)需要2U至4U的Taq DNA聚合酶。
扩增体系在各种反应热循环仪上(如ABI9700、ABI9600、ABI2720、Bio-Rad iCycler、Bio-Rad C1000等)采用以下的程序可以得到较好的结果：95℃保温11分钟；94℃保温30秒钟，60℃保温60秒钟，70℃保温60秒钟，该步骤运行30个循环；60℃保温30分钟；4-10℃保温。
本发明中的模板DNA为人类基因组DNA。由各种常规方法，比如磁珠法、酚氯仿法、树脂纯化等方法(《分子克隆实验手册》第三版，冷泉港出版社)提取的模板DNA均可以得到较好的结果。DNA可以由以下组织或细胞制备：血液(血斑)、精液(精斑)、骨骼、毛发、唾液(唾液斑)、汗液、含有胎儿细胞的羊水等。DNA模板量优选在0.5ng至4ng的范围内能够得到较好的扩增结果，模板量太低可能导致某些基因座位检测不出，模板量太高会导致非特异性的扩增产物产生。
在上述反应缓冲体系中按照指定的反应程序扩增模板DNA，可以得到各基因座混合的扩增产物。本发明由于采用了荧光标记的引物，扩增产物也带有荧光标记物，并且标记物可以在激光激发下发出可以通过测序仪(如ABI377、310DNA sequencer)或遗传分析仪(如ABI3130、3100genetic analyzer)识别的光信号，所以扩增产物可以通过测序仪或遗传分析仪等仪器上进行电泳和检测分析。
在测序仪或遗传分析仪上进行检测的时候，扩增产物与分子量内标(marker，intemal lane standard)、甲酰胺按照一定比例混合，进入仪器毛细管或凝胶中电泳分离。分子量内标是由多条已知长度的荧光标记DNA片段组成，用来计算PCR扩增产物片段长度，从而可以判断基因分型以及与等位基因阶梯比对。
电泳后的数据可以在GeneMapper、GeneMarker、GeneScan等数据分析软件上分析，得到STR基因分型图谱和数据。
本发明涉及
(1)一种同时分析多个X-STR基因座的复合扩增系统，其特征在于：复合扩增17个基因座：Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。
(2)根据项1所述的复合扩增系统，其中所述的基因座分为下述组合：第一组为DXS6795、DXS9902、DXS8378、和HPRTB；第二组为Amelogenin、GATA165B12、DXS7132、DXS7424和DXS6807；第三组为DXS6803、GATA172D05、DXS6800和DXS10134；第四组为GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810，其中，扩增的引物第一组为SEQ ID NO：13-14、29-30、27-28、9-10；第二组为SEQ ID NO：1-2、5-6、23-24、25-26、19-20；第三组为SEQ ID NO：17-18、7-8、15-16、31-32；第四组为SEQ IDNO：3-4、33-34、11-12、21-22。
(3)根据项1或2所述的复合扩增系统，其中在一个复合扩增反应体系中同时扩增17个基因座。
(4)根据上述任一项所述的复合扩增系统，其中基因座被位于该基因座两侧的一对引物扩增，其中每对引物中有一个引物的5’端进行荧光素标记。
(5)根据上述任一项所述的复合扩增系统，其中复合扩增多个STR基因座是利用聚合酶链式反应进行的。
(6)根据上述任一项所述的复合扩增系统，其中该系统包含引物混合物。
(7)一种同时分析DNA样品的方法，其特征在于应用上述任一项所述的复合扩增系统检测DNA。
(8)根据项7所述的方法，其中DNA样品来自血液、血斑、精液、精斑、骨骼、毛发、唾液、唾液斑、汗液和羊水中一种或多种。
(9)SEQ ID NO：1-34所示的用于复合扩增体系的引物序列或者所述引物序列的混合物。
(10)一种用于同时分析多个STR基因座的试剂盒，为17个X染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒，所述基因座为Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810，该试剂盒包含SEQ ID NO：1-34所示的引物。
本发明还提供具有选自表2中所述的引物序列，其中一个或多个，优选1-15个，优选1-10，优选1-5个核苷酸被取代、删除和／或添加而得到的经修饰的序列。
本发明还涉及上述的引物序列，试剂盒和／或复合扩增系统用于分析多个STR基因座的用途。
利用本发明可以一次操作得到17个基因座信息，具有很高的个体识别率。
附图说明
图1DNA样本采用本发明扩增后的分析图谱。
图2DNA样本采用基点认知公司Goldeneye20A试剂盒扩增后的分析图谱。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明。下面的实施例仅仅是为了说明的目的，而并非限制本发明的范围。
实施例1复合扩增17个基因座位并分析其基因型
测试血液由志愿者捐献，模板DNA由血液用chelex-100方法提取。以行业内通用的9947A gDNA作为阳性标准品。扩增反应在ABI9700热循环仪上进行，电泳及检测在ABI3100遗传分析仪上进行，数据分析采用GeneMapper ID v3.2软件。样品同时采用基点认知公司的Goldeneye20A试剂盒检测，操作方法按照试剂盒说明书进行，结果作为对照。本发明所用的试剂和材料诸如等位基因阶梯(ladder)均为本领域技术人员常用的常规材料。
1.1.chelex-100方法提取DNA(具体方法参考《Forensic DNAProtocol》，Humana Press，1998)
1)取3μl加抗凝剂的血液于500μl离心管中
2)振荡混匀chelex溶液，使chelex充分悬浮，每管加195μl5％的chelex-100(100-200mesh，购自Bio-Rad公司)，再加入5μl蛋白酶K(20mg／ml，购自天根生化科技有限公司)
3)振荡样品，恒温金属浴上56℃温浴2小时后，取出样品振荡2分钟，
4)煮沸8-10分钟，13000rpm离心3分钟
5)小心吸出约150μl上清，转移至新管中，10μl PCR反应体系取1μl作为模板
1.2.聚合酶链式反应(PCR)扩增
1)取缓冲液、引物混合物、Taq酶，按照下表配成混合液，振荡混匀后分装至PCR反应管中，每管25μl，加入模板DNA。
Figure BSA0000099890750000091
2)按照下面的反应条件设置热循环仪增仪(ABI9700PCR仪)，将PCR反应管放入仪器中开始扩增基因片段。95℃保温11分钟；94℃保温30秒钟，60℃保温60秒钟，70℃保温60秒钟，运行30个循环；60℃保温30分钟；4℃持续保温，直至取出样品。
1.3.扩增反应结束后，取出反应管，用ABI3100遗传分析仪进行电泳和检测。
1)取(0.5μl分子量内标+10μl去离子甲酰胺)×(样品数)配成混合液。
2)混匀后分装，每管10μl，再分别加入1μl扩增产物和等位基因阶梯(ladder)，简短离心将液体收集到离心管管子底部。
3)样品95℃变性4分钟，然后迅速冰上冷却4分钟，使DNA完全变性并且保持变性状态。
4)将样品放入基因分析仪的样品托盘中，设置仪器参数(进样电压3kV，进样时间10秒钟)，开始电泳检测。
5)大约40分钟后，电泳结束，用GeneMapper软件分析实验数据得到图谱和分型结果(见图1，图2及表3)。
表3二种试剂盒扩增同一样本的基因分型结果
本发明 Goldeneye20A
vWA 无 17，18
D21S11 无 30，30
D18S51 无 15，19
D5S818 无 11，11
D7S820 无 10，11
D13S317 无 11，11
D3S1358 无 14，15
D16S539 无 11，12
FGA 无 23，24
D2S1338 无 19，23
D19S433 无 14，15
D6S1043 无 12，18
D12S391 无 18，20
D8S1179 无 13，13
CSF1PO 无 10，12
Penta D 无 12，12
Penta E 无 12，13
THO1 无 8，9.3
TPOX 无 8，8
Amelogenin X，X X，X
GATA31E08 11，11 无
GATA165B12 9，11 无
GATA172D05 10，10 无
HPRTB 12，14 无
DXS6789 21，22 无
DXS6795 12，13 无
DXS6800 18，19 无
DXS6803 11.3，12 无
DXS6807 14，14 无
DXS6810 18，19 无
DXS7132 12，12 无
DXS7424 14，16 无
DXS8378 10，11 无
DXS9902 11，11 无
DXS10134 35，36 无
DXS10159 24，25 无
发明效果：
随着复合基因座数目的增加，由于竞争的影响，各基因座的相对平衡控制难度加大，本发明通过多次的实验，首先建立了一次检测16个X-STR基因座及1个AMEL基因座的复合扩增体系，这些STR基因座目前已知X-STR基因座中具有较高个体识别率的大部分基因座位。利用这个扩增体系可以一次性检测17个X染色体上的基因座，Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。
本发明具有很高的试剂盒效能，本发明采用的基因座在X染色体上呈均匀分布，能够从整体上反映X染色体的遗传信息。利用该体系可以一次操作得到17个基因座信息，因此这一体系具有很高的个体识别率，相当于同时利用2-3个其他同类产品得到的信息总和，无论在PCR扩增和遗传分析仪检测环节，都节省了成本和人力，提高了工作效率。在扩增环节，将以前两种或者3种试剂盒扩增减少为1种试剂盒的扩增，节约了50％以上的试剂成本，时间缩短50％。检测环节，采用2种或3种试剂盒需要分别上样检测，采用本发明只需要一次检测，操作时间、检测时间和检测试剂成本都减少50％或更多。
可以理解的是，上面的描述仅是本发明的示例，因而本发明权利要求所保护的范围并不仅仅以此处公开的特定实施方案来限定。任何等同的实施方案将被认为在本发明的范围之内。事实上，根据前面的描述，对本发明进行有关的修改和变化对于本领域技术人员来讲都将是可能的，因而，这种修改和变化也将落在本发明所附的权利要求的范围之内。
Figure ISA0000099890770000011
Figure ISA0000099890770000031
Figure ISA0000099890770000041
Figure ISA0000099890770000051
Figure ISA0000099890770000061
Figure ISA0000099890770000071

Claims (10)

1.一种同时分析多个X-STR基因座的复合扩增系统，其特征在于：复合扩增17个基因座：Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810。
2.根据权利要求1所述的复合扩增系统，其中所述的基因座分为下述组合：第一组为DXS6795、DXS9902、DXS8378、和HPRTB；第二组为Amelogenin、GATA165B12、DXS7132、DXS7424和DXS6807；第三组为DXS6803、GATA172D05、DXS6800和DXS10134；第四组为GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810，其中，扩增的引物第一组为SEQ ID NO：13-14、29-30、27-28、9-10；第二组为SEQ ID NO：1-2、5-6、23-24、25-26、19-20；第三组为SEQ ID NO：17-18、7-8、15-16、31-32；第四组为SEQ ID NO：3-4、33-34、11-12、21-22。
3.根据权利要求2所述的复合扩增系统，其中在一个复合扩增反应体系中同时扩增17个基因座。
4.根据权利要求2所述的复合扩增系统，其中基因座被位于该基因座两侧的一对引物扩增，其中每对引物中有一个引物的5’端进行荧光素标记。
5.根据权利要求1所述的复合扩增系统，其中复合扩增多个STR基因座是利用聚合酶链式反应进行的。
6.根据权利要求2所述的复合扩增系统，其中该系统包含引物混合物。
7.一种同时分析DNA样品的方法，其特征在于应用权利要求1-6之一所述的复合扩增系统检测DNA。
8.根据权利要求7所述的方法，其中DNA样品来自血液、血斑、精液、精斑、骨骼、毛发、唾液、唾液斑、汗液和羊水中的一种或多种。
9.SEQ ID NO：1-34所示的用于复合扩增体系的引物序列或者所述引物序列的混合物。
10.一种用于同时分析多个STR基因座的试剂盒，为17个X染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒，所述基因座为Amelogenin、DXS6795、DXS9902、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS7132、DXS7424、DXS6807、DXS6803、GATA172D05、DXS6800、DXS10134、GATA31E08、DXS10159、DXS6789和DXS6810，该试剂盒包含SEQ ID NO：1-34所示的引物。
CN201410003989.1A 2014-01-06 2014-01-06 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒 Active CN103789414B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410003989.1A CN103789414B (zh) 2014-01-06 2014-01-06 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410003989.1A CN103789414B (zh) 2014-01-06 2014-01-06 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103789414A true CN103789414A (zh) 2014-05-14
CN103789414B CN103789414B (zh) 2017-01-04

Family

ID=50665466

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410003989.1A Active CN103789414B (zh) 2014-01-06 2014-01-06 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103789414B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105063231A (zh) * 2015-09-15 2015-11-18 北京大学第一医院 一种羊水中胎儿细胞vhl基因突变检测方法及试剂盒
CN108060233A (zh) * 2017-12-13 2018-05-22 苏州阅微基因技术有限公司 30个y染色体str基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及应用
CN108179199A (zh) * 2018-02-28 2018-06-19 公安部物证鉴定中心 基于二代测序技术检测x-str基因座的试剂盒及其专用引物组合
CN110066790A (zh) * 2018-01-24 2019-07-30 深圳华大法医科技有限公司 一种同步检测28个基因位点的六色荧光str分型方法及其专用试剂盒

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KUAN SUN ET AL.: "Development of the 16 X-STR loci typing system and genetic analysis in a Shanghai Han population from China", 《ELECTROPHORESIS》, 30 November 2013 (2013-11-30), pages 3008 - 3010 *
吴微微等: "12个mini-X-STR和Amel基因座荧光标记复合扩增体系的初步研究", 《刑事技术》, 31 August 2010 (2010-08-31), pages 9 - 10 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105063231A (zh) * 2015-09-15 2015-11-18 北京大学第一医院 一种羊水中胎儿细胞vhl基因突变检测方法及试剂盒
CN108060233A (zh) * 2017-12-13 2018-05-22 苏州阅微基因技术有限公司 30个y染色体str基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及应用
CN108060233B (zh) * 2017-12-13 2021-04-30 苏州阅微基因技术有限公司 30个y染色体str基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及应用
CN110066790A (zh) * 2018-01-24 2019-07-30 深圳华大法医科技有限公司 一种同步检测28个基因位点的六色荧光str分型方法及其专用试剂盒
CN108179199A (zh) * 2018-02-28 2018-06-19 公安部物证鉴定中心 基于二代测序技术检测x-str基因座的试剂盒及其专用引物组合
CN108179199B (zh) * 2018-02-28 2020-09-22 公安部物证鉴定中心 基于二代测序技术检测x-str基因座的试剂盒及其专用引物组合

Also Published As

Publication number Publication date
CN103789414B (zh) 2017-01-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109750110B (zh) 47个人类常染色体与y染色体基因座的复合扩增试剂盒及其应用
RU2708337C2 (ru) Способы и композиции для днк-профилирования
CN109468384B (zh) 一种同时检测45个y基因座的复合扩增检测试剂盒
CN110079592B (zh) 用于检测基因突变和已知、未知基因融合类型的高通量测序靶向捕获目标区域的探针和方法
US20140200146A1 (en) Methods of Amplifying Whole Genome of a Single Cell
CN101818192A (zh) 20个短串联重复序列的复合扩增试剂盒
CN104017895A (zh) 26个y染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒
US20080145898A1 (en) Sequencing methods
US11761037B1 (en) Probe and method of enriching target region applicable to high-throughput sequencing using the same
TW201321518A (zh) 微量核酸樣本的庫製備方法及其應用
CA2905410A1 (en) Systems and methods for detection of genomic copy number changes
CN104131072B (zh) 一种对未知检材进行个体识别和亲权鉴定的方法和系统
US20210102246A1 (en) Genetic test for detecting congenital adrenal hyperplasia
CN110863056A (zh) 一种人类dna精准分型的方法、试剂和应用
CN105368958A (zh) 采用兼并引物复合扩增21个短串联重复序列的试剂盒
CN106011229A (zh) 用于人的18个str位点的复合扩增系统、试剂盒及其用途
CN103789414A (zh) 17个x染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒
CN107557475B (zh) 用于人的23个str位点的复合扩增系统、试剂盒及其用途
CN103820564A (zh) 25个短串联重复序列的复合扩增试剂盒
CN110295218B (zh) 量化靶基因的突变型等位基因负担的方法
CN103789413A (zh) 18个短串联重复序列的复合扩增试剂盒
CN100485046C (zh) Abo血型基因与短串联重复基因座复合扩增系统
CN104031983A (zh) 20个y染色体短串联重复序列的复合扩增试剂盒
US20210040540A1 (en) Parallel liquid-phase hybrid capture method for simultaneously capturing sense and antisense double strands of genomic target region
JP6853523B2 (ja) ヘリカーゼを用いたｐｃｒ

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant